精子形态学染色液(巴氏法)
13.巴氏染色液
巴氏染色液说明书【产品名称】巴氏染色液【产品名称】巴氏染色液PAP Staining Solutions【产品编号】PAP-500ml,PAP-1000ml,PAP-2500ml【包装规格】苏木素染色液500ml、1000ml 2500ml；橘黄G6染色液500ml、1000ml 2500ml；EA50染色液500ml、1000ml 2500ml。
【预期用途】主要用于对脱落细胞的组织细胞学染色。
【检验原理】巴氏染色液由3部分组成：苏木素染色液、橘红G6染色液和EA50染色液。
苏木素染色液，是一种针对正常以及变态细胞学涂片染料，对核膜、核质、核仁染色效果非常清晰。
涂片标本可是妇科或非妇科的，如痰液，尿液及细胞学穿刺样本。
为获得优质的染色效果，苏木素染液技术完全按照帕氏染色法，以及OG-6染液；EA 31染液；同时供应选择性多色复染染料，如EA50试剂；EA65试剂，满足细胞学染色需求。
橘黄G6染色液，是橘黄G (Orange G) 染料添加磷酸（PMA）后的酒精溶液。
Papanicolaou染色，首先用苏木素将细胞核染色，之后用OG-6 试剂和EA试剂继续染色。
橘黄G染料对细胞质染色，并保持在成熟细胞和角质化细胞。
之后的EA试剂对未染色的细胞组分染色，如鳞状细胞，核仁，纤毛，红细胞。
测试样本可为妇科细胞样本和非妇科细胞样本，如痰液，尿液，细胞穿刺等。
为获得优质的染色效果，OG-6试剂特性与其他用于Papanicolaou染色法中染色试剂-苏木素试剂，EA 31试剂，及对比染色试剂EA50试剂，EA65试剂相符。
EA50染色液,为伊红Y和亮绿SF酸（加入了磷钨酸，PTA）染液的酒精溶液。
Papanicolaou染色，首先用苏木素将细胞核染色，之后用OG-6 试剂和EA试剂继续染色。
橘黄G染料对细胞质染色，并保持在成熟细胞和角质化细胞。
之后的EA试剂对未染色的细胞组分染色，如鳞状细胞，核仁，纤毛，红细胞。
巴氏染色技术要点
巴氏染色巴氏（Papanicolaou）染色法是脱落细胞染色中最好的染色方法。
其适用于上皮细胞及间皮组织的标本。
是阴道脱落细胞检查中最常用的染色方法。
该染色法不但具有显示细胞核结构清晰，分色明显，透明度好，胞浆受色鲜艳等特点，而且所染标本不易脱色，可长久保存。
对如何染好巴氏染色，笔者有以下几点体会，报告如下。
1 EA 36染液pH值的测试EA 36染液的酸碱度对巴氏染色的成功起着关键性作用，EA 36染液由伊红、亮绿、桔黄及俾麦棕等染料配成。
伊红、亮绿、桔黄及俾麦棕等属于酸性染料。
在溶媒中其发色团是负离子部分。
发色团可与蛋白质中带正电的氨基结合，从而使胞浆显蓝色、绿色、桔黄色或红色。
但蛋白质所带正负电荷的多少是随溶液的pH值而改变的。
在偏碱环境中，蛋白质的羧基游离增多（带负电）。
在偏酸环境中蛋白质氨基游离增多（带正电）。
所以必须把染液pH值调至5.2为宜［1］。
EA 36染液pH的调节，可用石蕊试纸法，也可用酸度计测试。
当然用酸度计法最为准确。
但以上方法均比较麻烦，同时还要受到仪器设备的限制，不方便。
本文采用一种简单方便的方法。
即用10%磷钨酸及饱和碳酸锂溶液直接测试。
具体做法是，拿一张滤纸先滴少量染液于纸上，若滴染液处呈紫色，说明染液偏碱，则滴加少量10%磷钨酸。
若显绿色，说明染液偏酸，则滴加少量饱和碳酸锂。
并充分混匀。
直至染液滴在纸上既显绿色又有红色，颜色鲜艳为宜。
用此法测试染液pH同用石蕊试纸法测试一样，同样可获得满意的染色效果。
磷钨酸在染色过程中，不但作为媒染剂可增加染料的着色力。
同时磷钨酸与碳酸锂还是一对弱酸弱碱，实际上是一对缓冲剂。
可中和分色及蓝化时可能留下的少量酸或碱。
保证染色达到理想效果。
2 分色分色或酸化，对染色效果也很重要。
分色目的是去掉胞浆中染上的多余的苏木素，使胞核着色显示特异性。
因此，经分色后的胞浆在镜下观察应无色为佳。
若胞浆中还残留有苏木素染料，会影响EA 36染液的着色。
精子DNA检测系列简介
包装规格：10人份/盒、20人份/盒 、 40人份/盒
存储条件及有效期： 试剂盒于2-8℃避光保存，有效期为12个月。
（三）
精子活体染色试剂盒 （拒染法）
检测原理：
利用荧光络黄染料（吖啶橙）具有高度的异 染性的特性，以插入的方式与双螺旋的DNA分子
结合，染色后断裂的单DNA精子呈绿色荧光。
医生可通过计算红色和黄色荧光精子即单链DNA
精子的百分率评估精子受精几率。
3、检测操作过程
检测样本：液化后的新鲜精液标本 精子洗涤 涂片 固定
三明市和众生物技术有限公司内部培训资料
生殖医学检测试剂盒系列
精子五联检
1、精子DNA检测试剂盒 2、精子DNA碎片检测试剂盒 3、精子活性检测试剂盒 4、精子形态学检测试剂盒 5、精子核蛋白检测试剂盒
影响精子受精或男性不育的因素
精子死亡率过高 精子畸形率过高 精子成熟率过低 精子染色体异常 精子数量过少 精子活动力过低 精子液化能力过低
完
正常参考值：核蛋白不成熟精子≤30%
结果： 核蛋白不成熟的精子（IM）染紫蓝色或紫色 核蛋白成熟的精子（M）染红色。
操作方法
精子液化 精子洗涤 精子洗涤
涂片
复染 洗脱 染色 固定
镜检
染色效果
不成熟精子
成熟精子
正常参考值：核蛋白不成熟精子≤30%
产品基本信息
产品注册证号：闽明食药监械（准）字2013第1400022号 执行标准号：YZB/闽明0033-2013 生产许可证号：闽食药管械生产许第20110297号
精子形态检验报告
精子形态检验报告1. 引言精子形态检验是男性生育力评估的重要指标之一，它描述了精子的外形和结构，对于评估男性生育能力和诊断不孕症起着至关重要的作用。
本文将对精子形态检验的方法、结果和临床意义进行详细介绍。
2. 检验方法精子形态检验通常采用经典的巴斯氏涂片染色法。
具体的操作步骤如下：1.取新鲜精液标本，约1-2毫升；2.将精液样本放置于离心管中，离心速度为3000转/分钟，离心时间约10分钟；3.倒掉上清液，留下沉淀；4.加入一定量的称量无毒巴斯氏染色溶液，用酸性醇溶液或碘胶清洗染色后，将沉淀再次离心；5.倒掉上清液，将染色后的精液沉淀挤入载玻片上，加入一滴背景液；6.覆盖玻片，使用显微镜进行观察；7.根据预定标准，对于所检测的100个精子，计算形态正常的精子比例。
3. 检验结果根据我们的检测结果，您的精子形态正常的比例为XX%，属于正常范围。
正常形态的精子应当具备头部和尾巴的完整结构，并且比例应在40%以上。
4. 临床意义精子形态异常可能意味着存在生殖系统疾病或其他不孕症原因。
常见的精子形态异常包括头部畸形、尾巴畸形、双头精子、无尾精子等。
精子形态异常对受精过程的影响多种多样，可能导致受精能力下降，从而影响夫妻受孕。
对于形态异常的发现，建议尽早咨询专业医师进行评估和治疗。
医生可能会根据具体情况建议辅助生殖技术，如体外受精或微孵化等，提高受孕成功率。
5. 注意事项•精子形态检验结果需要结合其他指标综合分析，不能单独作为判断不孕原因的唯一依据；•精子形态检验结果可能受多种因素影响，如抽烟、饮酒、药物使用等，请在检验前向医生咨询；•精子形态检验需要在专业的实验室进行，确保操作的准确性和结果的可靠性。
6. 结论精子形态检验是男性生育力评估的重要指标之一，正常形态比例对于受孕能力具有重要意义。
通过精子形态检验，可以提供辅助诊断和治疗不孕症的依据，判断男性生育能力，并为临床医生选择合适的治疗方法提供参考。
请用户一定要密切配合医生的建议，定期进行生育力的评估和检查，以提高受孕成功的机会。
巴氏染色液EA50染色液使用说明书
剂染色
8.
95 % 乙醇（Histanol 95）冲洗
上下跌落 6-8 次
9.
100 %乙醇（Histanol 100）脱水
上下跌落 6-8 次
10.
100 %乙醇（Histanol 100）脱水
3-5 min
11.
二甲苯（BioClear）或其替代物（BioClear New）
上下跌落 6-8 次
上下跌落 6-8 次
13.
100 %乙醇（Histanol 100）脱水
3-5 min
14.
二甲苯（BioClear）或其替代物（BioClear New）
上下跌落 6-8 次
透明处理
15.
二甲苯（BioClear）或其替代物（BioClear New）
3-5 min
透明处理
透明化处理后应立即用合适的封片剂进行封片 。如果使用二甲苯（BioClear ）透明化，对
上海科汇生物技术有限公司
EA50 染色液使用说明书 【产品名称】 EA50 染色液
【产品编号】 EA50-OT-100 ，EA50-OT-500 ，EA50-OT-1L，EA50-OT-2.5L
【包装规格】 100 ml 500 ml 1000 ml 2500 mL
【预期用途】细胞质染色试剂，用于 Papanicolaou 染色法细胞学上使用的对比
次
馏水或去离子水冲洗
2.
苏木素 HP，Pap 1A 染色
6 min
3.
蒸馏水或去离子水冲洗
上下跌落 6-8 次
4.
HCL Pap 溶液或 0.1 % HCl 溶液分化处理
5-10s
注：此步骤可去除细胞核和细胞质上过多的苏
巴氏染液SOP
1.目的用于测定人类精子形态。
2.范围适用于男性精子畸形率测定。
3.原理细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料的亲和力较强；而细胞浆则相反，它含有碱性物质和酸性染料的亲和力较大。
巴氏染色液利用这一特性对细胞进行多色性染色，细胞经染色后能清晰地显示细胞的结构，胞质透亮鲜丽，各种颗粒分明，细胞核染色质非常清楚，从而较容易发现异常细胞。
通过巴氏染色可反映出细胞在炎症刺激下和癌变后的形态学变化，对早期发现和诊断一些病变和肿瘤具有较重要意义。
4.试剂4.1本试剂由珠海贝索生物技术有限公司提供【医疗器械生产企业许可证编号】粤食药监械生产许20010407号【医疗器械注册证书编号】粤珠食药监械（准）字2013第1400001号【产品标准编号】YZB/粤珠0010-2013【说明书批准日期】2013年1月23日4.2试剂盒组成应避免不同批次试剂盒中的各组分混用（型号EA36、EA50） 试剂组成规格 主要成分 苏木素（Harris ）染液1vial ×250ml 苏木素 橘黄G 染液1vial ×250ml 橘黄G EA36染液或EA50染液1vial ×250ml 亮绿、曙红 4.3试剂储存及效期：4.3.1有效期：未开封试剂有效期为18个月，其中EA36染液，EA50染液最佳使用时间为启用后5个月内。
4.3.2储存条件：本试剂盒应贮存于相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体和通风良好的5O C-30O C 室温环境。
题目：精子形态学巴氏染色标准操作规程 编号：JY-3-GC- 文件检审： 页数：3附件：0 发布部门：质量管理科首次发布日期：2015-08-01 版本号：02本版发布日期：2015-08-01拟定部门：检验科审核：分管院长批准：院长5.实验设备及材料5.1奥林巴斯CX31显微镜5.2精密移液器规格：5-50μl和200-1000μl5.3载玻片5.4生理盐水、盐酸5.5移液器吸头5.6酒精5.7染缸6.样本6.1采集方法：以手淫法采集禁欲2-7天精液于采样杯,注意收集完全。
巴氏染色原理
巴氏染色原理
巴氏染色液的染色原理：
核酸等电点为PH1.5-2.0,当PH＞2.0时，能结合带正电荷的苏木素。
染料中的伊红、亮绿、橙黄等为酸性染料，俾士麦棕为盐基性染料，能与细胞浆中相反电荷的蛋白质结合，从而染出鲜艳的结构。
细胞学常规染色普遍使用巴氏（Papanicolaou）法，橘黄G与EA36或EA50联合使用可将胞浆染成颜色鲜明的绿色、蓝色和粉色，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料的亲和力较强；而细胞浆则相反，它含有碱性物质和酸性染料的亲和力较大。
巴氏染色液正是利用这一特性对细胞进行多色性染色，细胞经染色后能清晰地显示细胞的结构，胞质透亮鲜丽，各种颗粒分明，细胞核染色质非常清楚，从而较容易发现异常细胞。
HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查中应用价值
HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查中应用价值1. 引言1.1 背景介绍宫颈液基细胞检查是一种常见的癌症筛查方法，通过对宫颈细胞进行染色和观察，可以及早发现潜在异常细胞的存在，从而帮助医生及时进行治疗和干预。
而在宫颈液基细胞检查中，HE染色和巴氏染色是两种常用的染色方法。
HE染色是指用苏木精红染色液对细胞组织进行染色，然后通过镜检查细胞结构和形态的变化，从而判断细胞是否正常。
HE染色在宫颈液基细胞检查中具有较高的分辨率和清晰度，可以清晰显示细胞的核质比和细胞核的形态，有利于医生进行细胞学分析和诊断。
巴氏染色是一种特殊的染色方法，可以通过染色剂对细胞核进行染色，使异常细胞核在显微镜下呈现出特殊的形态和颜色。
巴氏染色在宫颈液基细胞检查中常用于检测细胞的DNA含量和核型，可以帮助医生判断细胞的恶性程度和预后。
HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中发挥着重要的作用，它们可以相互补充，提高检测的准确性和灵敏度，为患者提供更准确的诊断和治疗方案。
1.2 研究目的研究目的是通过比较分析HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查中的应用价值，探讨它们在临床实践中的优劣势和适用范围。
具体来说，我们的研究目的包括以下几个方面：1. 比较HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中的染色效果和细胞形态学分析的准确性，评估它们对细胞结构和形态的显现能力。
2. 探讨HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中的操作流程和技术难易度，比较它们的操作成本和时间消耗。
3. 调查HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中的临床应用情况和效果评价，探讨它们在筛查、诊断和预后评估等方面的作用及价值。
通过深入研究HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中的不同应用价值，我们旨在为临床医生提供更具参考意义的细胞学诊断方法，促进宫颈疾病的早期发现和治疗，提高宫颈液基细胞检查的准确性和可靠性。
1.3 意义宫颈液基细胞检查是一种重要的筛查方法，可用于早期发现宫颈病变及癌变，对于提高宫颈癌的早期发现率和治疗效果具有重要意义。
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精子形态学染色液(巴氏法)
简介：
细胞学常规染色普遍使用巴氏(Papanicolaou)法，Papanicolaou Stain 最初仅用于检测阴道上皮雌激素水平以及生殖道念珠菌、滴虫等病原体。
橘黄G6与EA36或EA50联合使用，可将胞浆染成颜色鲜明的绿色、蓝色和粉色。
目前大多数实验室采用成品染液，所以每种染液应注意其改良后的最佳条件。
最终胞浆染色应透明可见，核染色质应很容易辨别出来。
目前改良的巴氏染色液含有多种离子，具有多色性染色效能。
染色后胞质鲜艳、透明性好以及核膜、核仁、染色质结构清晰。
Leagene 精子形态学染色液(巴氏法) 因精子及细胞内不同等电点的蛋白质在相同的酸度下带不同的电荷，能选择性地结合相应的染料而着色。
胞核由酸性物质组成，它与碱性染料的亲和力较强；而胞浆则相反，它含有碱性物质和酸性染料的亲和力较大细胞质染色特别采用针对于精子染色的改良EA50染色液，细胞核染色采用Leagene 自主研发的无毒改良型苏木素染色液，特别适用于精子的染色，亦可用于胸水、腹水、痰液等细胞样本的染色。
组成：
自备材料：
1、 固定液(如95%乙醇-乙醚固定液)
2、 系列乙醇
3、 0.5%盐酸乙醇分化液
操作步骤(仅供参考)：
1、 细胞涂片用等量95%乙醇-冰乙酸固定液固。
2、 80%的乙醇浸泡1min 。
3、 70%的乙醇浸泡1min 。
4、 50%的乙醇浸泡1min 。
编号 名称
DA0191 4×20ml DA0191 4×100ml Storage 试剂(A): Lea 苏木素染色液 20ml 100ml RT 避光 试剂(B): 蓝化液
20ml 100ml RT 试剂(C): 橘黄G6染色液 20ml
100ml RT 避光
使用说明书
1份
5、 蒸馏水或自来水浸泡或冲洗。
6、Lea 苏木素染色液染色。
7、自来水冲洗。
8、盐酸乙醇分化液分化或盐酸水溶液分化。
9、自来水冲洗。
10、蓝化液中蓝化4min 。
11、自来水冲洗2min 。
12、50%的乙醇脱水2min 。
13、70%的乙醇脱水2min 。
14、80%的乙醇脱水2min 。
15、90%的乙醇脱水2min 。
16、橘黄G6染色液染色。
17、95%的乙醇(Ⅰ)、(Ⅱ)冲洗。
18、改良EA50染色液染色。
19、95%的乙醇(Ⅰ)、(Ⅱ)脱水各1min 。
20、无水乙醇(Ⅰ)、(Ⅱ)脱水各1min 。
21、二甲苯透明，中性树脂封片。
染色结果：
注意事项：
1、 所有染
液均需
过滤，需经常更换染液。
2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 12个月有效。
相关：
细胞核 蓝紫色或黑色 非角化细胞的胞质 淡蓝色或淡绿色 角化细胞的胞质
粉红或橘红色
编号
名称
CC0130 胰蛋白酶-EDTA 溶液(0.25%:0.02%)
DG0005 糖原PAS 染色液
TC0713
葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。