HIV检测方法
HIV测定(胶体金法)操作规程

邻水县第二人民医院检验科
广州万孚HIV检测试剂(胶体金法)操作方法
检验方法
1.沿铝箔袋切口部位撕开,取出测试卡平方于台面上,并做好标记。
2.用吸管吸取血清、血浆样本然后垂直加入3-4滴(约80ul)于加样孔中,若样本粘稠不易
爬出,可滴加一滴稀释液;若为全血样本,则用吸管吸取全血,垂直加入2滴(约50ul)于加样孔中,同时滴加1-2滴稀释液。
3.10-15分钟观察显示结果;30分钟后显示的结果无临床意义。
结果判定
阳性:测试条/卡在检测区(T)和对照区(C)位置各出现一条红色条带。
如果检测区(T)的红色条带隐约可见,建议对该样本重复试验,并使用其他方法确认。
阴性:测试条/卡只在对照区(C)位置出现一条红色条带。
失效:对照区(C)未出现红色条带,表明不正确的操作过程或试剂盒已变质损坏或者是样本中抗体的含量过高。
在此情况下,应再次仔细阅读说明书,并将待测样本稀释后用新的测试条/卡重新测试。
如果问题仍然存在,应立即停止使用此批号产品,并与试剂供应商联系。
注意事项
●检测线颜色深浅的程度与样品中抗体的滴度没有一定的必然联系。
测试区(T)内的红色条
带可呈现颜色深浅的现象,但是,在规定的观察时间内,无论该色带颜色深浅,即使只有非常弱的色带,也应判定为阳性结果。
●本品检测陽性者,需进一步确证。
●实验环境应保持一定的湿度,避风。
避免在高温下进行实验。
测试条从包装中取出后,应
尽快进行实验,避免放置于空气中过长时间,导致受潮。
如何进行艾滋病的早期筛查

如何进行艾滋病的早期筛查艾滋病是一种由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染引起的严重的免疫系统疾病。
早期筛查是预防和控制艾滋病传播的关键。
本文将介绍如何进行艾滋病的早期筛查,并提供一些相关的注意事项和建议。
一、艾滋病的早期筛查方法1. 血液检测:艾滋病的早期筛查通常通过检测血液中的HIV抗体来进行。
这种方法被称为HIV抗体检测,它可以检测人体对HIV感染产生的免疫反应。
血液检测可以使用快速测试套件或者实验室测试。
2. 唾液检测:唾液检测是一种更为便捷和非侵入性的筛查方法。
它通过检测唾液中的HIV抗体来确定是否感染了HIV。
唾液检测可以在家中进行,但其准确性相对于血液检测略有差异。
3. 尿液检测:尿液检测是一种较为新的筛查方法,通过检测尿液中的HIV抗体来判断是否感染了HIV。
尿液检测相对于血液检测具有一定的便利性,但其准确性和敏感性仍需进一步研究和改进。
二、艾滋病早期筛查的注意事项1. 测试时间:艾滋病的早期筛查通常在感染后约3个月进行,因为人体在感染后的几周到几个月内产生抗体。
如果在感染后不久进行筛查,结果可能为假阴性。
2. 隐私保密:进行艾滋病早期筛查时,隐私和保密性非常重要。
确保在私人环境中进行测试,并选择受信任的医疗机构或实验室进行筛查。
3. 专业咨询:如果您对艾滋病及其早期筛查方法有任何疑问或不确定,建议咨询专业医生或艾滋病咨询机构。
他们可以提供权威的信息和建议。
三、预防艾滋病的传播1. 使用安全套:在性行为中使用安全套是预防艾滋病传播的有效方法。
确保正确使用安全套,并每次都使用。
2. 避免共用注射器:共用注射器是艾滋病传播的重要途径之一。
如果需要注射药物,请确保使用干净的注射器。
3. 定期检测:定期进行艾滋病的早期筛查可以及早发现感染,并采取相应的治疗和预防措施,减少传播风险。
四、艾滋病早期筛查的重要性艾滋病早期筛查的重要性不言而喻。
通过早期筛查,可以尽早发现感染者,采取相应的治疗措施,延缓疾病进展,提高生活质量。
HIV检测流程

HIV检测流程
一、样本采集:抽取静脉血3ml,尽快分离出血清或血浆,吸出备用。
二、样本检测:严格按照试剂说明书操作。
如英科新创HIV抗体检测试剂(胶
体金法)操作如下:
(1)从包装袋中取出试剂板。
(2)用微量加样器吸取60ul标本加入试剂板的加样孔内。
(3)等待紫红色条带的出现,测试结果应在测定开始后30分钟开始观察读取。
30分钟后判定无效。
三、结果判断(报告):
(1)阳性(+):两条紫红色条带出现,一条位于测试区内(T),另一条位于质控区(C)。
阳性结果表明:HIV待复查。
(2)阴性(-):仅质控区(C)出现一条紫红色条带,在测试区(T)内无紫红色条带出现。
阴性结果表明:HIV抗体阴性。
四、无效:质控区(C)未出现紫红色条带,表明不正确的操作过程或试剂已
变质损坏。
在任何情况下,应从新测试。
如果问题任然存在,应立即停止使用此批号产品,并已当地供应商联系。
五、注意:测试区(T)内紫红色条带可显现出颜色深浅的现象。
但是,在规
定观察时间内,不论该色带深浅,即使只有非常弱的色带也应判为阳性结果。
六、样本保存:阴性血清(血浆)-20℃保存二年以上,并详细填写保存记
录;阳性血清附病人资料送呈贡疾控中心确认,并详细填写相关记录(孕产妇还需报告妇幼保健中心)。
七、所有废弃材料按医疗垃圾处理。
个人检测艾滋病方法

个人检测艾滋病方法文章目录*一、个人检测艾滋病方法*二、男性感染艾滋病的早期症状*三、女性感染艾滋病的早期症状个人检测艾滋病方法1、个人检测艾滋病方法艾滋病自助检测是指个人使用HIV专业检测试剂自行操作检测艾滋病毒抗体。
此种检测试剂属于快速诊断试剂,应用了国际先进的免疫层析法快速检测技术,免疫层析法是九十年代兴起的一种基于免疫胶体金技术的快速诊断技术,有着优异的灵敏度和特异性,快速准确可靠,操作简单,个人也可以操作,由于自测更有利于保护个人隐私,所以提高了个人检测艾滋病的积极性,促进了艾滋病预防工作的开展。
艾滋病的个人自测在部分国家发达国家地区,包括中国香港特别行政区已经推广应用,这些地区只需凭医生处方即可自行购买检测试剂进行自我检测HIV。
在我国,自测属于艾滋病家庭检测范畴,在国家艾滋病检测技术规范中有相关的论述。
只要获得专业人士的指导,操作正确,检测结果是可靠的,建议多次检测复查以便让结果更可靠。
如果自测呈现检测阳性者,由于任何医学检测均可能存在假阳性的可能,所以请先别紧张,还需要做艾滋病确诊试验复查,复查结果才是最终确诊结果。
我们有完善的医疗配套服务,可以指导你到专业的医院进行进一步的治疗。
2、艾滋病试纸检查准确吗操作不正确,或影响准确率。
常用的艾滋病检测试纸,灵敏度和特异性均在99%以上,单次检测的准确率均在99%以上,但操作不正确,或影响准确率。
一些经销商或人个,对艾滋病试纸一知半解甚至完全不了解,在销售过程中,并不能提供正确的操作指导,甚至是误导,导致准确率打了折扣。
艾滋病试纸准确吗操作指南,大家对照操作,可使试纸的准确率得到充分的保证。
3、唾液可以检测出艾滋病除了血液检测的艾滋病试纸,目前唾液也可以用于艾滋病检测。
艾滋病唾液试纸的准确率能达到多少呢?以某唾液艾滋病检测试纸为例,经过多家医院的临床试验结论表明:灵敏度达99.3%,特异性达99.9%,准确度达99.7%,足以与传统的血检试剂相媲美。
hiv学发光法

HIV学发光法1. 引言HIV(人类免疫缺陷病毒)是一种引起艾滋病的病毒,世界各地都面临着HIV感染的挑战。
为了准确快速地检测HIV感染,科学家们开发了多种方法。
其中,HIV学发光法是一种广泛应用的检测技术,本文将详细介绍该方法的原理、应用以及优缺点。
2. 原理HIV学发光法是一种基于化学反应产生荧光信号的检测方法。
其原理基于以下步骤:1.样本制备:从患者血液中提取DNA或RNA,并进行适当处理以去除可能干扰的物质。
2.检测试剂盒:购买商用的HIV学发光试剂盒,其中包含了特定的引物和探针。
3.扩增反应:将样本与检测试剂盒中的引物和探针混合,在恒温条件下进行PCR(聚合酶链式反应),扩增目标序列。
4.荧光信号生成:在PCR过程中,如果样本中存在目标序列,则引物和探针会与目标序列结合。
当PCR反应进行到荧光信号检测阶段时,荧光信号会被产生。
5.信号检测:使用专门的设备(如荧光分析仪)来检测荧光信号的强度。
荧光信号的强度与样本中目标序列的数量成正比。
6.结果解读:根据荧光信号的强度,可以判断样本是否存在HIV感染。
通常,试剂盒厂商会提供参考值范围,用于结果判定。
3. 应用HIV学发光法在HIV感染的早期诊断、疾病监测以及筛查等方面具有广泛应用:3.1 早期诊断HIV学发光法可以在感染后的早期阶段检测到病毒存在,比传统方法(如ELISA)更敏感。
早期诊断对于及时采取治疗和预防传播至关重要。
3.2 疾病监测患者接受抗逆转录病毒治疗后,通过定期监测HIV RNA水平可以评估治疗效果。
HIV学发光法可以准确测量HIV RNA水平的变化,并帮助医生调整治疗方案。
3.3 筛查HIV学发光法可以用于大规模人群的筛查,例如在血液供应中心、孕妇产前筛查等场所。
其高灵敏度和快速检测时间使其成为广泛应用的筛查方法。
4. 优缺点4.1 优点•高灵敏度:HIV学发光法可以检测到非常低浓度的病毒,尤其是在感染早期。
•快速结果:相比传统方法,HIV学发光法通常更快获得结果,有助于及时采取治疗和预防措施。
医院检测艾滋病方法

医院检测艾滋病方法
1. HIV抗体检测:通过检测人体血清中的HIV抗体来判断是否感染艾滋病病毒。
2. 病毒核酸检测:通过检测人体血液中的RNA或DNA来检测病毒核酸是否存在,并确定是否感染了艾滋病病毒。
3. 混合凝集试验:将试验者的血清与检测用的病毒蛋白混合,通过观察凝集反应来判断是否感染艾滋病病毒。
4. 免疫荧光法:将人体血清和荧光标记的抗体混合,通过观察荧光反应来判断是否感染艾滋病病毒。
5. 口腔快速检测:通过采集唾液样本,使用快速检测试剂盒来检测唾液中是否存在HIV抗体。
6. 有条件的医院可采用核酸检测,用于确认快速检测的结果,特别是在体液中检测病毒核酸。
hiv诊断的金标准

hiv诊断的金标准HIV诊断的金标准指的是特异性和敏感性较高的检测方法,在临床上被广泛接受,并被专业组织和政府机构用作HIV感染的确诊依据。
以下是关于HIV诊断金标准的相关参考内容。
一、血清免疫学诊断方法血清免疫学诊断方法是HIV感染的金标准,在这一方法中,可以通过检测血液中的特定抗体或抗原来确定HIV感染的存在。
常用的血清免疫学诊断方法有ELISA(酶联免疫吸附试验)和Western blot(蛋白印迹法)。
ELISA是一种简单且经济的方法,可用于初步筛选HIV感染。
它检测血液中的HIV特异性抗体,如果结果呈阳性,需要进一步进行确证。
Western blot是一种高度特异性的检测方法,通过检测多个HIV蛋白的抗体反应,可以较准确地识别HIV感染。
根据世界卫生组织(WHO)的建议,ELISA和Western blot应该结合使用来确诊HIV感染,只有在两种方法都呈阳性或者无法获取第二次检测时,才能够确诊HIV感染。
二、核酸检测方法核酸检测是一种高度敏感的HIV诊断方法,可以直接检测病毒的核酸(RNA或DNA)。
Polymerase Chain Reaction(PCR)是目前最常用的核酸检测方法之一,它可以通过扩增病毒核酸的数量,以使其在实验室中能够检测到。
PCR可以在感染初期就进行检测,并且能够提供较准确的结果。
不过,由于PCR技术复杂且费用较高,因此在一些资源匮乏的地区并不常用。
三、病毒抗原检测方法病毒抗原检测方法是一种利用ELISA或荧光免疫测定来检测血液中的病毒抗原的方法。
这些抗原是病毒在感染人体后产生的,检测它们可以提供较早期的HIV感染诊断。
病毒抗原检测方法通常结合ELISA和Western blot使用,以提高准确性。
四、第四代HIV检测方法第四代HIV检测方法结合了抗体和抗原的检测,可以同时检测病毒抗原和抗体。
这种方法可以提供更准确和敏感的HIV感染诊断,且在感染后更早期就能被检测出来。
艾滋病最简单检测方法试纸

艾滋病最简单检测方法试纸引言艾滋病是一种由人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的疾病,其传播非常广泛。
根据世界卫生组织的统计数据,截至2020年,全球有3800万人感染了HIV。
艾滋病的早期检测和早期治疗对于控制疾病的传播和提供及时治疗非常重要。
而艾滋病最简单的检测方法之一就是试纸检测。
什么是艾滋病试纸检测?艾滋病试纸检测是一种便捷、快速、简单且相对准确的艾滋病检测方法,通常被用于居民区、草根组织、学校、社区卫生中心等地方进行初步检测。
该检测方法所使用的试纸含有抗HIV抗体的化学试剂,通过检测人体血液或唾液中是否含有HIV抗体来判断是否感染了HIV。
艾滋病试纸检测的步骤1. 购买合格的艾滋病试纸:艾滋病试纸可以在药店或者在线购买。
确保购买的试纸符合相关的认证标准,并检查过期日期。
2. 准备工作:将工作台或桌面清洁干净,并确保手部卫生。
3. 提取样本:根据试纸说明书的指示,提取血液或唾液样本。
一般来说,可以用一个小刺破仪在手指处抽取几滴血液,或采集唾液样本。
4. 操作试纸:将提取的血液或唾液滴在试纸上,然后根据试纸上的指示等待一定的时间。
通常来说,等待时间为10-20分钟。
确保按照说明书上的时间要求来进行操作。
5. 读取结果:根据试纸上的指示,查看试纸上的检测结果。
试纸通常分为两个区域,一个是测试区(T线),另一个是参考区(C线)。
如果在T线上出现了一个红色线条,代表对应指标呈阳性,即感染了HIV。
如果只有C线出现了红色线条,代表对应指标呈阴性,即未感染HIV。
6. 结果解读:根据试纸上的说明书,对读取的结果进行解读。
如果阳性,请务必到正规医疗机构进行进一步检测和咨询。
优缺点以及注意事项优点:- 简单易行:不需要专业的培训,每个人都可以进行试纸检测。
- 快速结果:通常在10-20分钟内就可以获得初步结果。
- 便携:试纸小巧轻便,可以随身携带,方便在任何地点进行检测。
缺点:- 准确性有限:与正式实验室检测相比,艾滋病试纸的准确性较低。
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HIV实验室诊断人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)及其相关标志的检测是预防HIV 感染和艾滋病临床治疗中重要的环节,在艾滋病的防治工作中具有重要作用,如艾滋病的诊断、HIV感染的诊断、血源及器官供体的筛选、流行病学调查、艾滋病病人及HIV感染者的病情动态观察、临床治疗疗效考核以及HIV疫苗的安全性和效果鉴定等。
HIV感染标志分为病毒标志、免疫标志和相关标志三大类。
病毒标志是指直接从HIV 感染者体内分离出病毒或检出HIV组成成分(抗原或核酸)。
免疫标志是指HIV感染所产生的HIV抗原、抗体等免疫物质。
相关标志是指HIV感染后与艾滋病病情进展有密切关系的某些标志,如CD4细胞、CD8细胞,β2微球蛋白、有关细胞因子等。
这些标志的测定可为HIV感染及临床疗效的考核提供极为重要的诊断、治疗和预后指征。
目前HIV抗体的检测是艾滋病实验室检测中最常用的方法,因为HIV抗体是患者感染HIV后最容易检出并且持续时间最长的免疫学标志,而且抗体的检测方法大多简便、经济,易于推广应用。
在介绍各种HIV实验室诊断方法之前,为了使实验室工作人员能够有效地确保结果准确、可靠、优质,我们必须对作为一种感染因子的HIV以及由它所导致的致命性危害有基本的认识。
实验室工作人员应特别注意病毒的结构、抗原组成,人体的免疫反应,诊断试验的基本原理、试验结果的解释,以及为了准确而有效地提供实验诊断所必需的质量保证措施。
如果由于缺乏技术专长或基本知识而造成不正确的试验结果是不可原谅的。
现将有关内容扼要介绍如下:一、人类免疫缺陷病毒(HIV)概述(一)艾滋病病原体的发现和命名年份事由命名1981 美国首先在洛杉矶男性同性恋中发现5例以往很罕见的卡氏肺囊虫肺炎和26例卡波济氏肉瘤患者,这些病人均表现有严重的免疫缺陷,但原因不明。
1982年将这种新的疾病命名为“获得性免疫缺陷综合征”Acquired Immuno Deficiency Syndrome,AIDS,即艾滋病1983 从艾滋病流行学资料分析很可能是由病毒引起的。
法国巴斯德研究所Montagnier等首先从多发性淋巴结病综合症病人分离到一种新的逆转录病毒淋巴结病相关病毒Lym phadenopathy Associated Virus,LA V1984 美国国立癌症研究所Robert Gallo等报道从艾滋病病人活检组织分离到一种新的逆转录病毒与其以前发现的HTLV-1和HTLV-Ⅱ不同。
人类嗜T淋巴细胞Ⅲ型病毒Human T-cell Lymphatropic Virus typeⅢ,HTLV-Ⅲ1984 美国加州大学分离出艾滋病相关病毒AIDS Related Virus,ARV年份事由命名1986 国际病毒分类委员会将上述病毒统一命名为人类免疫缺陷病毒Human Immunodeficiency Virus,HIV1986 Montagnier等又从西非病人体内分离出一种具有相似生物学特性,而致病性、抗原性及分子生物学特征有明显差别的新病毒。
新发现的病毒命名为HIV-2,原来发现且已广泛流行的HIV称HIV-1。
(二)HIV病毒的形态结构、分类和分型HIV病毒是带有包膜的RNA逆转录病毒,在分类上属于逆转录病毒科中的慢病毒亚科。
目前发现有HIV-1和HIV-2两型。
现已将HIV-1分为M组,共10个亚型(A-J)和O组,HIV-2也至少有6个亚型(A-F)。
在我国流行的是HIV-1,检测到的亚型有8种之多,其中B亚型几乎见于我国各个地区,而C亚型主要见于我国西南和西北地区,E亚型则多见于东南沿海和西南边境地区。
HIV病毒呈球形或卵圆形颗粒,直径100-140mm,具有包膜。
包膜是在病毒出芽释放过程中获得的。
从脂质膜上延伸出来的刺和园头是糖蛋白(gp)。
病毒颗粒内部为核心,具有蛋白质衣壳,里面有两个相同拷贝的核酸(RNA)和病毒的三种酶:逆转录酶(RT)、整合酶和蛋白酶。
HIV基因组(RNA)含有9个基因,可分为结构基因和调节基因。
结构基因包括gag、pol 和env3个,皆为调节基因。
(三)与诊断技术密切相关的HIV抗原由三个结构基因编码的HIV-1抗原如下:1、gag蛋白:位于病毒颗粒内核心部位,主要有分子量为55000道尔顿的蛋白质(P),称P55。
P55抗原是前体蛋白,在感染过程的早期产生,尔后裂解成其他核蛋白,包括P24、P17和P15等。
2、env(包膜)糖蛋白:包膜抗原皆为糖蛋白(gp),根据分子量分别称为gp160、gp120和gp41。
gp160是前体蛋白,是在感染过程中产生的一种成份,随后裂解成gp120和gp41。
gp120是外膜蛋白,组成外膜的72个刺突和园头。
gp41为跨膜蛋白。
二者共同参与病毒与突主细胞CD4分子的粘附。
3、pol(聚合酶)蛋白质:包括P66(RT)、P51和P31(整合酶或核酸内切酶)。
尽管HIV-1和HIV-2抗原之间有交叉,但它们也有各自的特异性抗原。
大多数交叉反应是由抗核心抗原的抗体所致,因为这二种不同病毒的gag抗原是非常保守的。
各自的这些特异性抗原在HIV-1和HIV-2是相似的,但分子量可略有不同。
例如,HIV-2的跨膜蛋白抗原称为gp36,而某些人则称之为gp41,又如主要的核心抗原为P24,但在HIV-2又称P26。
(四)HIV感染的生物学和免疫应答机体感染HIV后,HIV能够侵袭许多带有CD4表面抗原的细胞(称CD4+细胞),主要有T4淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞、树状细胞和胶质脑神经细胞等。
CD4是gp120的受体。
由于感染HIV,细胞表面表达大量包膜糖蛋白,可以与周围细胞发生细胞膜融合,形成多核巨细胞。
通过这种方式在细胞间播散病毒,可免受抗体的作用。
HIV感染引起T4细胞明显减少的机理主要由于:1、HIV直接杀伤T4细胞;2、细胞融合间接地损伤T4细胞;3、HIV感染T4细胞,发生抗原性变化,引起自身免疫,通过调理吞噬作用损作T4细胞,T4细胞表面表达gp120位点处吸着特异性抗体,通过抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC)损伤T4细胞。
另外,由于T4细胞免疫功能损伤,B细胞对各种抗原产生抗体的功能也受到影响,使整个机体免疫功能严重破坏,导致各种机会性感染性疾病的发生。
T4细胞计数是反映临床症状的敏感信息,因此T4淋巴细胞总数<200/mm3是诊断AIDS的重要指标。
人体能对HIV的侵入产生抗体应答,通常是在HIV感染2-10周内机体产生抗体。
但也有极少数人感染数月乃至数年后仍测不出抗体,故阴性结果并不说明受检者绝无感染。
绝大多数人在感染过程中都会对各种病毒抗原成份产生免疫应答,抗体滴度可高达1:50000,但也可以很低。
感染早期(血清阳转时)及病程后期(免疫缺陷)时,抗体滴度均较低。
低滴度抗体血清学反应较弱,如果测定方法不够灵敏,可能导致假阴性结果。
值得注意的是,并非每个HIV感染者对其所产生的免疫应答都完全相同。
如某些人可能对P24有较强的应答。
如果检测试剂主要是测定抗gp41的抗体,它就不太可能对仅有抗P24和gp120抗体的血清得出阳性结果。
抗gag蛋白(P55、P24)抗体通常在感染早期即出现,抗env和pol产物的抗体同时或稍后产生。
感染后至抗体出现前有段间歇期(2-6周,可长至3个月)称“窗口期”。
大多数病毒感染者都有IgM抗体产生,但HIV感染者中似乎不完全有IgM应答。
对于有IgM抗体应答者,在窗口期检出IgM抗体是有益的。
HIV基因组可整合到宿主细胞DNA上使机体终身带有病毒,但机体可能很多年不出现症状,成为HIV无症状感染者,只是查血时发现抗—HIV阳性。
尔后,在某些因素作用下,病毒被激活后并开始大量复制出现症状和各种合并症,则发展成艾滋病病人,HIV病毒很容易发生变异这是研制有效疫苗的主要困难之一。
二、HIV实验室诊断人体感染HIV后,血液中最先出现HIV抗原,然后很快消失直到疾病后期才重新出现。
几周后出现IgM抗体并很快消失,此后,IgG抗体出现并一直存在。
因此,HIV感染的实验室诊断以抗体检测为主,病毒及相关抗原的检测为辅。
抗体检测分为初筛试验和确证试验两种,初筛试验为阳性的血清必须进一步确证,确证为阳性的方可报告为HIV感染阳性。
多聚酶链式反应(PCR)主要用于检测血浆中HIV的RNA含量,目前主要用于预测母亲将HIV传染给胎儿的可能性以及新生儿的HIV感染状况。
此外,尚可用于判断病人的预后及监测抗病毒治疗的效果。
(一)标本收集HIV感染者血清标本的收集按常规方法进行,静脉抽血,不加抗凝剂。
标本在室温或4℃冰箱静置24小时,待血清析出后作抗体检测。
污染标本可短时间离心后取上清液作检测,但解释结果时应慎重。
用于检测HIV抗原的血液样本与检测抗体的样本的处理有所不同,根据需要,血液样本需进行核酸处理。
采用定量PCR方法检测病毒含量时,加入肝素的血浆,检测的RNA 含量较未加肝素的血浆样本高。
检验人员应注意自身的防护,在未证实之前,所有的标本均应当作“阳性”标本看待。
(二)HIV抗体的初筛检测初筛试验的要求是敏感性高,理论上要求达到100%,尽可能避免漏掉可能阳性的对象,相对来说,对特异性要求不是太严,允许有少量假阳性,这些假阳性可以通过重复试验和确证试验排除。
HIV抗体初筛检测的方法很多,如酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)、明胶颗粒凝集实验(gelatine particle agglutination assay, PA)、乳胶凝集实验(latex agglutination assay, LA)、各种快速检测实验(rapid tests)、放射免疫实验(radio immunoassay)等。
这些实验使用的抗原早期是完整病毒的裂解产物,称为第一代试剂,这种抗原常常由于含有宿主细胞的成分而出现假阳性反应,为了获得可接受的特异性而稀释标本使试剂的敏感性也有所下降,同时这种抗原制备和纯化都比较困难,危险性大。
第二代试剂使用重组或合成多肽HIV抗原,选择与免疫反应相关的抗原决定簇,敏感性和特异性均有所提高,这类抗原制备也更为安全、容易、重复性好。
应该注意的是重组抗原有时由于含有载体的组分而出现假阳性结果,多肽抗原由于缺乏合适的立体构象有可能使敏感性下降从而导致假阴性。
使用重组或合成多肽抗原制备的双抗原夹心法试剂盒常常被称为第三代试剂,这种试剂可以检测针对HIV抗原的所有抗体亚类,包括IgG、IgA、IgM、IgE、IgD,同时不需要将标本过度稀释来保证特异性,因而具有较高的敏感性。
第四代试剂除使用重组或合成多肽抗原外还包被了P24抗体,可同时检测抗原和抗体。