爱滋检测方法和步骤
检验艾滋病的流程
检验艾滋病的流程
艾滋病检验的流程一般分为以下步骤：
1. 咨询与测试申请：在医生的建议下，患者可以接受艾滋病测试。
医生需要询问患者有关健康史、生活方式以及是否有艾滋病的风险因素等信息。
如果医生认为需要测试，他们会发出测试申请，并告知患者测试可能需要什么时间和结果。
2. 给定样本：艾滋病检验需要一些体液样本，包括口液、尿液、血液或唾液等。
在患者和医生协商后，选择最适合的样本供应方式。
3. 实验室测试：样本送到实验室进行测试。
实验室将样本与特定的抗体或病毒抗原混合，以寻找艾滋病毒。
4. 等待结果：测试通常需要数天到数周的时间。
这取决于您的地理位置和实验室可能有的测试量。
在等待过程中，患者可能会感到有些焦虑和担心。
在这种情况下，患者应与家庭医生或医疗保健专业人员联系，寻求支持和帮助。
5. 验证结果：测试结果可以通过电子邮件、电话或面对面交流等方式向受检者反馈。
如果测试结果呈现艾滋病毒阳性，则需要进一步确诊和治疗。
如果测试结果呈现阴性，则意味着未检测到临床上有意义的艾滋病毒抗体或核酸，但若近期进行无保护的性行为，推荐复测再次确认。
HIV抗体检测标准操作程序(SOP)
HIV抗体检测标准操作程序（SOP）——微生物科一、样本的采集和处理二、检测方法和步骤三、质控品的应用方法四、仪器的使用和维护五、结果的记录、解释与报告六、保密程序七、实验室的清理、消毒八、艾滋病检测实验室安全防护九、附表样品的采集和处理1.1血清样品采集：用注射器抽出一定量静脉血，室温下自然放置1-2小时，待血清凝固和血块收缩后在用3000rmp离心15min，吸出血清备用。
1.2抗凝血样品采集：用加有抗凝剂的真空管或用消毒注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管，反复轻摇，分离血浆和血细胞备用。
1.3采样注意事项：1.3.1采集样品应按临床采血技术规范及试剂盒说明书要求进行。
1.3.2采集标本时应注意安全，直接接触HIV感染者或艾滋病病人血液和体液的操作应戴双层手套。
2、样品的保存：2.1用于抗体检测的血清或血浆样品应存放与-20摄食度以下，短期（1周）内进行检测的样品可存放于2-8摄食度。
3.样品的运送：3.1实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送全血。
样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者姓名、种类、、采样时间。
3.2将试管放入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒。
在试管的周围垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。
3.3特殊情况下如需对个别样品进行复测，可以用特快专递形式投寄，但必须将盛有样品的试管包扎好，保证不会破碎和遗漏。
4.1含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的工作人员打开，用后的包裹应进行消毒。
4.2核对标本与送检单，检查样品管有无破损及遗漏。
如发现遗漏应立即将尚存留的样品移出、对样品管和盛器消毒，同时还要报告有关领导和专家。
检验方法和步骤1.检验方法：酶联免疫吸附试验（ELISA）2.检验步骤：严格按照试剂说明书操作。
3.注意事项：3.1禁止肉眼判读！3.2保证酶标仪，洗板机正常运转，保证加样器准确，选择高质量的与加样器配套的TIP头3.3使用有效期内的试剂3.4保证样品质量质控品的应用方法1.质控品按临床样本对待，操作应依照实验室安全管理条例执行。
我国HIV常用检测方法和流程
我国HIV常用检测方法和流程初筛抗体+WB法确认目前国内实验室多采用「初筛抗体+WB 法确认」等两步法进行HIV检测及确诊。
初筛实验室初筛阳性，不能出具阳性报告，必须进入复检试验。
对初筛有反应的样品，用原有试剂双份或双孔进行复检试验（或者两种试剂复检），如均无反应，报告「HIV 抗体阴性」；如均有反应或一个有反应一个无反应，需要送检做确证实验，报告HIV 感染待确定。
目前大部分临床实验室为艾滋病初筛实验室，开展常规初筛实验，发现阳性结果初步复检后送省市CDC 或当地其他确认实验室做确认实验。
1、条带条带是HIV确认实验——免疫印迹试验（WB）实验所呈现出的结果，如上图。
原理是WB 采用间接法检测样品中的抗HIV-1/HIV-2 特异性抗体。
采用聚丙烯酰胺凝胶电泳把分子量大小不等的HIV 蛋白分离开来，经过一系列处理后，硝酸纤维素膜显示与特异抗原的结合的抗体条带，从而确诊抗体的存在。
HIV-1抗体特异带包括env带：gp160/gp120、gp41；gag带：p55、p24、p17（或p18）；pol带：p66（或p65）、p51、p31。
HIV-2抗体特异条带包括env带：gp140/gp105、gp36；gag带：p56、p26、p16；pol带：p68、p53、p34。
（由于使用的毒株不同，HIV-2 env带也可为gp125/gp80、gp36）。
2、根据条带判断是否感染HIVHIV-1抗体阳性同时符合以下2条标准可判为HIV-1抗体阳性：①至少有2条env带（gp41和gp160/gp120）出现，或至少1条env带和p24带同时出现；②符合试剂盒提供的阳性判定标准。
（目前实验室判定阳性一般是gp41和gp160/gp120+p24）HIV-2抗体阳性出现HIV-2型特异性指示带的样品：如果同时呈HIV-1抗体阳性反应，报告HIV-1抗体阳性，不推荐进一步做HIV-2抗体确证试验；如果同时呈HIV-1抗体不确定或阴性反应，需用HIV-2型确证试剂再做HIV-2的抗体确证试验。
艾滋病的实验室检测流程
艾滋病的实验室检测流程艾滋病的实验室检测流程中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心继发布《全国艾滋病检测技术规范(2009 年版)》后，近日即将发布2015 年版《全国艾滋病检测技术规范》，此规范堪称艾滋病检测实验室的「红宝书」，适用于疾病控制中心艾滋病确认实验室和医疗机构的艾滋病初筛实验室的HIV 检测技术操作。
下面是yjbys店铺为大家带来的艾滋病的实验室检测流程的知识，欢迎阅读。
检测项目的样品种类1 HIV 抗体检测：全血、血清、血浆、口腔黏膜渗出液、尿液以及干血斑样品。
2 HIV 抗原检测：全血、血清、血浆、病毒培养上清液。
3 T 淋巴细胞亚群测定：EDTA 或肝素抗凝全血。
4 HIV-1 病毒载量、基因型、耐药检测：血浆、滤纸干血斑(DBS)。
5 HIV 核酸定性与定量、基因型检测和 HIV-1 分离培养：淋巴细胞富集液、外周血单核淋巴细胞(PBMC)及全血。
当然，实验室最常用的仍然是血液标本，其他只作为补充样本。
HIV 抗体检测HIV 抗体检测是艾滋病实验室检测的优先选择项目，在国内绝大多数初筛实验室应用最广泛。
1 初筛方法(1)酶联免疫吸附试验(ELISA)ELISA 法检测 HIV 抗体是 HIV 初筛实验室最常用最普遍的方法，目前检测试剂已经发展到第四代，即同时检测血液中HIV-1P24 抗原和HIV-1/2 抗体，秉承「宁可错杀一千，不可漏网一个」的革命精神，其灵敏度远高于特异性，直叫 HIV 抗体无处遁形。
(2)化学发光或免疫荧光试验(CIA/IFA)这个试验方法是近 10 年迅猛发展的一种新型检测方法，其采用发光或荧光底物，既可检测抗体，也可联合检测抗原抗体，用发光或荧光仪测定结果，其灵敏度较ELISA 有了进一步的提高，同时带来的是检测成本的增加和假阳性率的增高。
(3)快速检测(RT)方法此类方法操作简便快速，适用于应急检测、门诊急诊检测，但灵敏度和特异性远不如ELISA 和发光法，但是经济实惠，也有一定的市场影响力。
艾滋病检测方法
艾滋病检测方法艾滋病（AIDS）是一种由人类免疫缺陷病毒（HIV）感染引起的严重疾病，它会削弱人体的免疫系统，使人体容易受到各种感染和疾病的侵袭。
艾滋病的早期症状可能并不明显，因此艾滋病的检测至关重要。
本文将介绍几种常见的艾滋病检测方法，帮助大家更好地了解艾滋病的检测过程。
第一种方法是血清学检测。
血清学检测是目前最常用的艾滋病检测方法之一，它通过检测血液中的HIV抗体来确定是否感染了艾滋病病毒。
这种检测方法的优点是准确性高，可以在感染后的几周内就能检测出HIV抗体，但也存在着一定的假阳性和假阴性率。
因此，如果初次检测结果呈阳性，需要进行复检以确认结果。
第二种方法是核酸检测。
核酸检测是一种直接检测HIV病毒RNA或DNA的方法，它可以在感染后的几天内就能够检测出病毒的存在。
相比血清学检测，核酸检测的准确性更高，假阳性和假阴性率更低。
但由于成本较高，一般情况下并不作为常规检测方法，通常用于早期感染的筛查和诊断。
第三种方法是快速检测。
快速检测是一种简便、快速的检测方法，可以在30分钟内得出初步结果。
这种方法通常采用唾液或血液样本进行检测，准确性较高，适用于临床诊断、流动人群筛查和个人自测等场合。
但需要注意的是，快速检测结果为初步阳性时，仍需进行血清学检测以确认结果。
除了上述几种常见的检测方法外，还有一些新型的检测技术正在不断发展和完善，如抗原抗体联合检测、免疫荧光检测等。
这些新技术在提高检测准确性的同时，也更加便捷和快速，为艾滋病的早期筛查和诊断提供了更多选择。
总的来说，艾滋病的检测对于个人健康和公共卫生具有重要意义。
在进行检测时，应选择正规的医疗机构或检测机构，遵循专业医生的建议，确保检测结果的准确性和可靠性。
同时，也要加强对艾滋病的预防和宣传教育，减少艾滋病的传播和感染风险，共同维护健康和安全。
HIV实验室检测及规范操作
快速检测试剂的优缺点
硒标记法和金标记法 与ELISA相比 ►优点 所需时间短 操作简便，不需特殊设备。 试剂贮存于室温。 ►缺点 特异性和敏感性与ELISA有差距。 费用较高。
HIV抗体检测程序及流程图
1、筛查试验 标本验收合格后，用筛查试剂进行检测，如 呈阴性反应，报告为HIV抗体阴性；对呈阳性 反应的标本须进行重复检测。 2、重复检测 用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家 的试剂重复检测，如两种试剂复测均呈阴性 反应，则报告HIV抗体阴性；如均呈阳性反应， 或一阴一阳，需送艾滋病确认实验室进行确 认。
HIV抗体确认检测流程
筛查试验阳性反应样品 免疫印迹法（WB，HIV-1/2混合型）
HIV抗体初筛检测
ELISA）
（阿克苏
结果判定 ⑴阴性对照（Negative Control,，NC）的参考标准 NC必须＜0.250，去除≥0.250的各孔； 计算剩余NC的平均值（NCx） 0.6NCx＜NC＜1.4NCX,如果有一个以上超出此范围， 去除后重新计算NCx。 ⑵判定实验有效性： 至少有2个阴性对照OD值有效。 PC1-NCx≥0.400（PC1：HIV-1抗体阳性对照值） PC2-NCx≥0.400（PC2：HIV-2抗体阳性对照值）
HIV抗体初筛检测结果解释
造成检测结果不确定的原因
(1)处于窗口期,血清中还没有形成典型的HIV抗 体。 (2)艾滋病进展到终末期,人体免疫力缺陷,抗体 水平下降。 (3)与其他非病毒蛋白抗体有交叉反应.自身免疫 性疾病、恶性肿瘤、怀孕、输血或器官移殖 等，此时，身体产生的一些抗体与Ｐ２４核 心蛋白抗体相似。 (4)以前接种过HIV疫苗。
HIV抗体检测（明胶颗粒凝集试验）
艾滋病检测方法
艾滋病检测方法艾滋病，这个令人闻之色变的疾病，给人类健康带来了巨大的威胁。
及时、准确的检测对于艾滋病的防控和治疗至关重要。
接下来，咱们就来详细了解一下艾滋病的检测方法。
首先，咱们得说说酶联免疫吸附试验（ELISA）。
这是一种常用的艾滋病筛查方法。
它的原理呢，就是利用抗原和抗体的特异性结合。
简单来说，就是在试剂盒里加入被检测者的血液样本，如果血液中有艾滋病病毒抗体，就会和试剂盒里的特定物质发生反应，产生一些能被检测到的信号。
这个方法操作相对简单，成本也不太高，所以在很多医疗机构都能见到。
还有一种叫做免疫荧光试验（IFA）。
它和 ELISA 有点类似，也是通过检测抗体来判断是否感染艾滋病。
不过，IFA 是用荧光标记的抗体来检测，这样能让结果更直观、更清晰。
但这个方法对设备和技术的要求相对高一些。
快速检测试剂也是常见的检测手段之一。
这种方法的好处就是出结果特别快，一般十几分钟到半小时就能知道结果。
像胶体金法、免疫渗滤法等都属于快速检测试剂。
适合在一些紧急的、现场的检测场景中使用，比如在一些高风险人群的筛查活动中。
核酸检测也是艾滋病检测中的“利器”。
它不是检测抗体，而是直接检测艾滋病病毒的遗传物质——核酸。
这种方法非常灵敏，能在感染后的早期就检测出病毒，比抗体检测能更早发现感染。
不过，核酸检测的成本相对较高，技术要求也更严格。
除了上面说的这些实验室检测方法，还有一些家用检测试剂。
比如唾液检测试剂，使用起来比较方便，自己在家按照说明书操作就行。
但需要注意的是，家用检测试剂的准确性可能不如实验室检测，如果检测结果有疑问，还是得去医疗机构进行进一步的确认。
接下来，咱们说说检测的时间点。
一般来说，艾滋病感染后有一个“窗口期”。
在窗口期内，即使感染了病毒，也可能检测不出来。
不同的检测方法，窗口期的长短也不一样。
抗体检测的窗口期通常在感染后的 3 周左右，核酸检测的窗口期则可以缩短到 1 周左右。
如果怀疑自己可能感染了艾滋病，应该怎么做呢？首先，别慌张，尽快去正规的医疗机构或者疾控中心进行检测。
疾控中心艾滋检测方法
疾控中心艾滋检测方法疾控中心艾滋检测方法主要有两种：抗体检测和核酸检测。
抗体检测是目前广泛使用的艾滋病检测方法之一。
它通过检测人体内是否存在抗人免疫缺陷病毒（HIV）的抗体来判断感染的情况。
一般来说，艾滋病病毒进入人体后，免疫系统会产生特异性的抗体来对抗病毒。
因此，通过检测人体内是否存在这些特定的抗体，可以判断一个人是否感染了艾滋病毒。
抗体检测通常采用酶联免疫吸附实验（ELISA）或免疫荧光法（IFA）等检测方法。
具体操作过程一般包括以下几步：首先，从被检测者体内采集样本，一般选择血液作为样本。
然后，对血液样本进行预处理和稀释处理，以获得合适的测试条件。
接下来，将这些预处理过的样本与特定的艾滋病毒抗原结合，从而形成抗原-抗体复合物。
最后，通过添加染色剂或荧光染料等试剂，可以观察到复合物的形成，进而判断是否存在抗体。
抗体检测具有操作简单、费用低廉等优点。
然而，该方法在感染后的早期阶段可能无法准确检测到抗体，因为人体在感染后需要一段时间才能产生足够的抗体。
此外，由于艾滋病病毒的变异性较高，不同亚型的病毒可能具有不同的抗原性，因此抗体检测方法可能无法准确检测到所有的感染。
核酸检测是另一种艾滋病检测方法。
它可以直接检测人体内是否存在艾滋病病毒的核酸（例如RNA或DNA）。
核酸检测一般采用聚合酶链式反应（PCR）或其衍生方法进行。
具体操作过程一般包括以下几步：首先，从被检测者体内采集样本，一般选择血液、唾液或尿液等作为样本。
然后，对样本进行前处理，以提取目标病毒的核酸。
接下来，使用特定的引物和酶，通过PCR反应扩增感兴趣的DNA片段，或者通过逆转录反应将RNA转录为cDNA，并进行扩增。
最后，通过电泳、荧光探针法或比色法等方法，可以检测到扩增产物的存在与否，进而判断是否存在病毒核酸。
核酸检测具有高度敏感性和特异性的优点，可以在感染后较早期就检测到病毒核酸，减少漏诊率。
但是，核酸检测仪器设备较复杂，操作难度相对较高，且费用较高。
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微孔板1包8* 12T
酶标抗原1瓶14ml
阳性对照1瓶1 ml
阴性对照1瓶1 ml
洗涤液2瓶25 ml
显色剂A 1瓶7 ml
显色剂B 1瓶7 ml
终止液1瓶7 ml
说明书1份
自封袋1个
封板膜3张
样品的采集和保存：
1．采集静脉的血清血浆样本应在无菌条件下保存，并避免样品溶血及反复冻溶。
2．血清和血浆样品收集后如果无法在当天检测，样品须在（2-8℃）保存；如果大于7天则需冷冻保存。
辽宁省丹东市
传染病医院检验科
作业指导书
第十七节人类免疫缺陷病毒标准操作规程
文件编号：SH-SOP-017
版本：2006-07
生效日期：2006-07-01
珠海丽珠试剂（双抗原夹心酶联免疫法）检测HIV抗体
实验原理
本品用钝化基因工程人类免疫缺陷病毒Ⅰ型和Ⅱ型抗原宝贝的微孔板和酶标记的HIV-1/HIV-2抗原及其它试剂组成，应用双抗原夹心法原理检测人血清或血浆中HIV-1/HIV-2抗体，适用于献血员筛查及临床HIV抗体检测。
版本：2006-07
生效日期：2006-07-01
9.显色：每孔加入显色剂A B液各50vl，轻轻震荡混匀。37±1℃避光显色15±1分钟。
10.测定：每孔加终止液50vl，轻轻震荡混匀。设定酶标仪波长于450nm处。测定各孔A值。
结果判定：1.阴性对照的正常范围：正常情况下，阴性对照孔A值≤0.10。
4.加样时必须用加样器加，并经常校对加样器的准确性。
5.洗涤时各空均需加满洗液，防止空口内有游离酶不能洗净。使用洗扳机洗涤应设定30-60秒浸泡时间。
6. HIV抗体检测结果的判定必须以酶标仪读数为准。用双波长检测时，参考波长可用600-650nm。
7.操作应严格按说明书进行。不同批次试剂不得混用。封板膜为一次性用品，不能重复使用。
辽宁省丹东市
传染病医院检验科
作业指导书
第十七节人类免疫缺陷病毒标准操作规程
文件编号：SH-SOP-062
版本：2006-07
生效日期：2006-07-01
5．温育：覆上封板膜，置37℃温育30分钟
6．洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完后拍干（每次应保持30-60秒浸泡时间）。
7．加酶：分别在每孔中加入酶标抗原100ul。
7.显色：每孔加入底物缓冲液50ul，再加入底物液50ul，震荡混匀，置37℃温育30分钟。
8.终止：每孔加入终止液50ul，轻拍混匀。
9.读值：用酶标仪读值，在单波长450nm或双波长450nm/630nm下读取各孔A值。
辽宁省丹东市
传染病医院检验科
作业指导书
第十七节人类免疫缺陷病毒标准操作规程
文件编号：SH-SOP-062
原理：本试剂和应用双抗原夹心酶联免疫法原理（ELISA）检测血清或血浆样品中人类免疫缺陷病HIV(1+2型)抗体。与包被高纯度基因重组HIV(1+2型)抗原，可与样品中抗HIV抗体反应，加入HRP标记HIV(1+2型)抗原，然后用TMB地物作显色。通过酶表仪检测吸光度，从而判定样品中HIV抗体的存在与否。
2.阳性对照的正常范围：正常情况下，阳性对照孔A值≥0.80。
3.临界值（CUTOFF）计算：临界值=阴性对照孔A均值+0.12
4.阴性判定：样品A值<临界值者为HIV抗体阴性
5.阳性判定：样品A值>临界值者为HIV抗体阳性（注意：初试阳性应重新取样双孔复试。复试阳性者应按《全国艾滋病检测技术规范》送HIV确证实验室进行确证试验。）
试剂盒组成：
1．HIV酶标板12孔×8/8孔×12
2．HIV酶标试剂10ml×1瓶
3．HIV-1型抗体阳性对照1ml×1瓶
4．HIV-2型抗体阳性对照1ml×1瓶
5．HIV抗体阴性对照1ml×1瓶
6．浓缩洗液50ml×1瓶
7．显色剂A液6ml×1瓶
8．显色剂B液6ml×1瓶
9．终止液6ml×1瓶
10.封口袋1个
2.温育：置37℃温育30分钟。
3.洗涤：弃去孔内液体，将稀释后的洗液注满各孔，静置30-60秒，弃去孔内洗液。重复洗6次后拍干。
4.加酶：空白对照孔不加酶标记物，其余孔加入酶标记物50ul。
5.温育：置37℃温育30分钟。
6.弃去孔内液体，将稀释后的洗液注满各孔，静置30-60秒，弃去孔内洗液。重复洗6次后拍干。
注意事项：1.本试剂的使用单位必须是经当地卫生行政部门批准的HIV处筛实验室。
2.检测必须符合HIV实验室管理规范和生物安全守则的规定，严格防止交叉污染。操作时必须戴手套，穿工作服，严格健全和执行消毒隔离制度。所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸，使用时必须注意安全。
3.试剂盒从冷藏环境中取出是应置室温平衡15-30分钟后方可使用，未用完的微孔条用自封袋密封2-8℃保存。
5.若20倍浓缩洗液出现结晶，请置于37℃至溶解后在使用。
6.不同批号的试剂组分不可混用。
7.本试剂盒及各种废弃物阴按传染性物品处理。
实验操作
1．试剂使用前应充分摇匀。
2．洗涤时各孔均须加满洗液，以防止孔口有游离酶标记物未被洗净。
3．结果判读请在反应终止后15分钟内完成。
4．测定结果必须以酶标仪读数为准。
11.封板膜3张
12.使用说明书1份
使用仪器：加样器温箱洗板机含波长450nm的酶标仪
实验方法：1.配液：将浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水20倍稀释。
2.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照３孔，阳性对照１型，２型各２孔，空白对照１孔。
3.加样:分别在相应孔中加入待测样品或阴,阳性对照100vl。
结果判定：
1．阳性对照均值应大于阴性对照均值0.60以上且阴性对照均值小于0.10方可认为本次试验有效。
2．临界值计算：cutoff value=0.10+阴性对照均值（若阴性对照均值小于0.05，以0.05计）
3．样品OD值大于或等于临界值为初筛阳性，小于临界值为阴性。初筛阳性者重新取样双孔复试，复试阳性者应按照“全国HIV监测管理规范”送HIV确认实验室进行确认试验。
样品Ａ值<临界值（C.O.）为ＨＩＶ抗体阴性
4.初次试验阳性者应重新取样进行双孔复试，如果复试中任何一孔为阳性则样品视为HIV抗体阳性，对复试结果为阴性的标本请按《全国艾滋病检测技术规范》处理。
注意事项：
样品的收集及保存
1．待测的血清或血浆样品不可用NaN3防腐。
2．短期内进行检测的血清或血浆样品可存放于2-8℃，如需长期保存，应置于-20℃。避免反复冻融。
4.温育：用封板膜封板后置37℃±1℃温育30±2分钟。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，用洗扳机洗涤５遍，最后一次尽量扣干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂100vl。空白孔除外。
7.温育：操作同步骤４。
8.洗涤：操作同步骤5。
辽宁省丹东市
传染病医院检验科
作业指导书
第十七节人类免疫缺陷病毒标准操作规程
文件编号：SH-SOP-062
辽宁省丹东市
传染病医院检验科
作业指导书
第十七节人类免疫缺陷病毒标准操作规程
文件编号：SH-SOP-062
版本：2006-07
生效日期：2006-07-01
英科新创
检测原理：
本试剂盒采用双抗原夹心两步法检测人血清或血浆样本中的（HIV1/2）型抗体。采用多种HIV-1和HIV-2的特异性抗原制作预包被板及酶结合物。当待检样本中存在HIV抗体时，在反应过程中形成“固相HIV抗原-HIV抗体-酶标记HIV抗原”的免疫复合物，加入底物后形成显色反应。
试剂组成
1．HIV抗原包被板12孔×8/8孔×12
2．HIV酶标记物7ml×1瓶
3．HIV阴性对照1ml×1瓶
4．HIV阳性对照1ml×1瓶
5．20倍浓缩洗液50ml×1瓶
6．底物缓冲液7ml×1瓶
7．底物液7ml×1瓶
8．终止液7ml×1瓶
9．封口袋1个
10封板膜3张
10使用说明书1份
操作步骤
1.加样：将所需数量的板条固定于板架，每次试验设空白对照1孔，阳性对照2孔，阴性对照3孔分别加入阳阴性对照各50ul，其余孔加入50ul待测样品。
版本：2006-07
生效日期：2006-07-01
判定结果：
1．要求：阳性对照A值应≥0.8
阴性对照A值应≤0.12
2.临界值（C.O.）计算：
临界值（C.O.）=0.15+阴性对照平均A值
注：阴性对照平均A值小于0.08按0.08计算，大于0.08按实际值计算。
3．结果判断： 样品Ａ值≥临界值（C.O.）为ＨＩＶ抗体阳性
8．温育：覆上封板膜，置37℃温育30分钟
9．洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完后拍干（每次应保持30-60秒浸泡时间）。
10．显色：每孔加底物A B各50ul，轻拍混匀，覆上封板膜，37℃暗置20分钟。
11．终止：每孔加入终止液50ul，混匀。
12．测定：用酶标仪单波长450nm或双波长450/630nm测定各孔OD值（用单波长测定时，需设空白对照一孔，30分钟内完成测定，并记录结果。
4．封板膜为一次性使用，每次使用后请丢弃，重复使用将导致严重污染。
辽宁省丹东市
传染病医院检验科
作业指导书
第十七节人类免疫缺陷病毒标准操作规程
文件编号：SH-SOP-062
版本：2006-07
生效日期：2006-07-01
操作步骤：
1．平衡：将试剂盒各组分从盒中取出，平衡至室温（18-25℃），微孔板开封后按需要取用，余者及时以自封袋封存。
2．配液：浓缩洗涤液配置前充分摇匀，浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1: 19稀释后使用。