温度预处理对不同品种马铃薯花药愈伤组织诱导率的影响

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马铃薯茎段愈伤组织诱导及再生

学士学位毕业设计（论文）马铃薯茎段愈伤组织诱导及再生学生姓名：指导教师：所在学院：农学院专业：农学学号：20094011302中国·大庆2013 年 5马铃薯茎段愈伤组织诱导及再生摘要：马铃薯茎段愈伤组织的诱导和再生试验于2012在农学院马铃薯实验室进行。

以克新13号、早大白两个品种的马铃薯茎段为材料，研究愈伤组织的诱导及植株再生。

试验试剂：MS培养基为基本培养基，可调节的植物激素有6-BA和2,4-D。

选择苗龄合适的马铃薯无菌试管苗，切成0.5厘米长，不带腋芽茎段，接种于含不同浓度细胞分裂素6-BA和生长素2,4-D的愈伤组织诱导培养基，进行诱导培养。

愈伤组织每2周继代1次。

选择生长良好的愈伤组织，接种苗在含有不同浓度6-BA，NAA和GA的培养基中进行茎段愈伤组织分化培养。

结果表明：克新13号的最佳愈伤组织诱导培养基为MS+2mg/L 6-BA +2 mg/L 2,4-D；早大白的最佳愈伤组织诱导培养基为MS+1 mg/L 6-BA+2mg/L 2,4-D。

在上述最佳诱导培养基中培养，俩种愈伤组织诱导率分别为62.22%和60.37%，在上述最佳分化培养基中培养，所得的分化率分别为53.81%和57.42%，早大白的分化率高于克新13号的分化率。

关键词：马铃薯；愈伤诱导；再生33Potato Stem Section Callus Induction and RegenerationStudent :Guo Yongfeng Supervising: J iang liliAbstract: Potato stem section callus induction and regeneration of this test in 2012 in agronomy courtyard potato laboratory. To g new 13, the early two potato stem section as materials, all kinds of callus induction and regeneration. Test using reagents: MS med ium as the basic medium, the movement of the adjustable plant hormones have 6 - BA, 2, 4-d. Select age of seedling and d potato sterile tube seedlings, cut into 0.5 cm long, don't take lateral bud stem section, vaccination to contain different concentration cytokinins 6 - BA and auxin 2, 4-d of callus induction medium, induction training. Callus every 2 weeks successive transfer 1 time. Select growth good callus, vaccination to contain different degrees of cytokinins 6 - BA and NAA and callus induction of GA3 in medium culture. The results showed that: g new number 13 optimum callus induction medium for MS + 1 mg/L 6 - BA + 2 mg/L 2, 4-d; The early for MS + 2 mg/L 6 - BA + 2 mg/L 2, 4-d. With the above optimum induction medium culture, all kinds of callus induction rate were 62.22% and 60.37% respectively g new, with the optimum induction medium culture, all kinds of differentiation rate were53.81%and 57.42% respectively.Key words: Potato; Callus induction; regeneration目录摘要 (II)ABSTRACT (II)前言 (IV)1 材料与方法 (1)1.1 材料 (1)1.2 试验设计 (1)1.2.1 基础苗培养 (1)1.2.2 培养基配制 (1)1.2.2.1 MS培养基 (1)1.2.2.2 茎段愈伤组织诱导培养基 (1)1.2.2.3 茎段愈伤组织分化培养基 (2)1.2.3茎段愈伤组织诱导 (2)1.2.4 愈伤组织分化 (2)2 结果与分析 (3)2.1 不同激素配比对马铃薯愈伤组织诱导率的影响 (3)2.2 不同激素配比对愈伤组织分化率的影响 (4)2.3 不同基因型对茎段外植体再生的影响 (5)3 讨论 (6)4 结论 (6)参考文献 (7)致谢 (8)前言现代科学指出，植物的生长发育，器官的建成，形状的表现都受激素所调控并且马铃薯品种繁多[4]，MS培养基不能满足所有试管苗生长的需要，而要保证马铃薯组培苗的外植体成活率，需要有尽可能多的须根和腋芽数以吸收养分和进行光合作用[5]，因此选择合适的生长调节剂及其浓度以尽可能多的生成须根和腋芽，就成为保证组培苗的外植体成活率和栽植产量的关键[6]。

甘露醇预处理对马铃薯花药愈伤诱导率的影响

花药进行预处理。本试验研究了ｔｊ．露醇预处理对马铃薯花药愈伤组织形成的影响，旨在提高马铃薯花药愈
伤组织诱导率，为马铃薯单倍体育种提供理论根据和基础材料。
ｌ试验材料与方法
１．１试验材料
最大值。甘露醇浓度４０ｇ／Ｉ效果好。
关键词：马铃薯；花药培养；甘露醇；愈伤诱导率
花药培养已成为生物学科中研究的重要内容之一，并且广泛应用于植物遗传育种。马铃薯花药培养研
究始于２０世纪８０年代，早在】９７３年，Ｄｕｎｗｅｌｌ就从马铃薯四倍体栽培种花药培养中获得了一株双倍体。我国的儿个育种单位在２０世纪８Ｏ～９０年代对此研究较多，甘肃农大戴朝曦以马铃薯四倍．配成甘露醇预处理溶液。选用２个基因型克新１３和讷ｌ６，在无菌条件下取花药存放于甘露醇预处
理溶液中２、４、６、８ｄ，以不经甘露醇处理为对照。预处理后转人愈伤组织诱导培养基，３０ｄ后统计产生愈伤组
织的诱导率。
Ｃ．愈伤组织诱导率统计。接种后３０ｄ统计形成的愈伤组织数，计算愈伤组织诱导率。愈伤组织诱导率（）一（形成愈伤组织的花药数／接种花药数） ×１００。

高温胁迫对马铃薯幼苗生长和部分生理指标的影响

高温胁迫对马铃薯幼苗生长和部分生理指标的影响作者：戴鸣凯，张志忠，刘爽，樊佳茹，王革伏来源：《农学学报》 2018年第9期摘要：高温逆境会严重抑制马铃薯生长发育，导致产量下降，造成严重经济损失，笔者通过分析高温胁迫对马铃薯幼苗生长情况和部分生理指标的影响，为马铃薯抗热性机制研究提供参考。

试验以‘闽薯1号’为材料，高温胁迫处理马铃薯植株，观测胁迫条件下植株生长情况变化，超氧阴离子(O2-)、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)和脯氨酸(Pro）含量变化，及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)等保护酶活性变化。

结果表明：高温对植株的株型，叶片大小，长势都造成了一定的影响；生理指标SOD呈现先上升后下降的趋势，POD与CAT则先下降后上升；MDA、O2-、H2O2、Pro 含量都出现持续上升的趋势。

幼苗体内活性氧的积累，膜质氧化加剧可能是导致马铃薯高温伤害的原因之一。

关键词：马铃薯；高温胁迫；活性氧代谢；保护酶中图分类号：S532 文献标志码：A 论文编号：cjas180300180 引言高温是农业生产中面临的重要问题，随着全球气候变暖，温度逆境对农作物生产影响越来越大。

马铃薯属茄科多年生草本植物，为粮菜兼用型作物，目前已成为继小麦、水稻和玉米之后的第四大作物，中国是马铃薯第一生产大国，在粮食安全方面马铃薯扮演着重要角色。

高温会严重抑制马铃薯生长发育、产量形成和品质，严重时可导致大幅减产，造成经济损失[1-3]。

进行高温胁迫对马铃薯的影响研究具有较为重要价值。

高温胁迫可对植物多方面产生不良影响，模拟大气增温田间试验表明高温胁迫可使马铃薯生理生态和产量形成过程发生了显著变化[4]，高温会减少马铃薯块茎数目及大小[5]，块茎形成过程受到高温抑制可能是影响其生物量及产量的原因[6-7]。

采用数学和计算机建模分析表明随着气候变暖，气温升高，2080—2100 年期间南亚区域印度的马铃薯产量将降低10%~40%[8]。

预处理及解冻方法对马铃薯冻融品质的影响

第44卷第17期包装工程2023年9月PACKAGING ENGINEERING·41·预处理及解冻方法对马铃薯冻融品质的影响杜慧慧1，李可兴2，刘采云1*，李黛妍1，周彬1，阿布都·沙拉穆1，玉米提·依沙克1，李保国1（1.上海理工大学健康科学与工程学院，上海200082；2.上海大学生命科学学院，上海200901）摘要：目的提高马铃薯冻融后的品质，为PEF预处理在蔬菜冷冻领域的应用提供理论依据。

方法探讨预处理方法（脉冲电场、热处理）和解冻方法（常温解冻、水里解冻、冰箱解冻）对马铃薯冷冻–解冻过程及品质的影响，分析冰晶成核温度、融化温度、汁液损失比、色泽、硬度等理化指标，并通过低场核磁共振仪分析冻融后样品不同状态下水分间的迁移情况。

结果热烫和高压脉冲电场（Pulsed Electric Field，简称PEF）预处理均可显著降低冷冻时间、提高冰晶成核温度。

PEF预处理样品在最大冰晶体形成带的滞留时间相较于对照组样品降低了26.3%。

在不同解冻方式下，PEF预处理和热烫预处理均可降低马铃薯冻融后的汁液损失。

在常温下解冻，对照组、热烫组、PEF预处理组的汁液损失率分别为24.12%、17.39%、15.53%。

PEF预处理和热烫预处理可减缓食品在冻融过程中的颜色和硬度的变化进程。

结论PEF预处理可以改善冻融后马铃薯的品质，可为PEF在果蔬冷冻领域的应用提供理论参考。

关键词：马铃薯；脉冲电场；热烫；冷冻；解冻中图分类号：TS255.36 文献标识码：A 文章编号：1001-3563(2023)17-0041-09DOI：10.19554/ki.1001-3563.2023.17.006Effect of Pretreatment and Thawing Method on Freezing and ThawingQuality of PotatoDU Hui-hui1, LI Ke-xing2, LIU Cai-yun1*, LI Dai-yan1, ZHOU Bin1,SHALAMU·Abdu1, YISHAKE·Yumiti1, LI Bao-guo1(1. School of Health Science and Engineering, University of Shanghai for Science and Technology, Shanghai 200082,China; 2. School of Life Sciences, Shanghai University, Shanghai 200901, China)ABSTRACT: The work aims to improve the quality of potato after freezing and thawing and provide theoretical basis for the application of PEF pretreatment in vegetable freezing. The effect of pretreatment methods (pulse electric field and blanching) and thawing methods (room temperature thawing, water thawing and refrigerator thawing) on potato freezing-thawing process and quality was discussed, the physicochemical indicators such as ice crystal nucleation tem-perature, melting temperature, water loss ratio, color, hardness, etc. were analyzed and the migration of water at different states of samples after freezing and thawing was analyzed by low field nuclear magnetic resonance analyzer. Blanching and PEF (Pulsed Electric Field) pretreatment could significantly reduce the freezing time and increase the ice crystal nucleation temperature. Moreover, the retention time of PEF pretreated samples in the maximum ice crystal formation zone was 26.3% lower than that of the control group. PEF pretreatment and blanching pretreatment could both reduce the water loss of potato after different thawing methods. For room temperature thawing, the water loss ratio of收稿日期：2023-02-13基金项目：国家自然科学基金（32001816）·42·包装工程2023年9月treated, blanching pretreated and PEF pretreated samples were 24.12%, 17.39% and 15.53% respectively. At the same time, PEF pretreatment and blanching pretreatment could also reduce the color change and hardness change of food during freezing and thawing. PEF pretreatment can improve the quality of potato after freezing and thawing, which provides theoretical reference for the application of PEF in the field of vegetable freezing.KEY WORDS: potato; pulsed electric field; blanching; freezing; thawing马铃薯属于茄科，又称洋芋、土豆等。

不同组分培养基及培养温度对安祖花叶片愈伤组织诱导率的影响

ｏｌｕｓｏｔｒｕｆＣａｌｆＡｎｈｕｉｍＬｅｆａ
ＹＮｉ —ｉｇＨＯｈｎ —ａｇ，ＩｊｇＡＧＸａｌ，ＵＺｅｇｆｎ３Ｊｉ，ＣＩＳａ—ｉ，ＮａｇｏｎｎＵｈｏｊ．ｅＷＡＧＧｎｍ
中图分类号：６２１￥８．４文献标识码：Ａ文章编号：ｌ０一７０２０）ｌ０ｌ — ４００ｌ０（０８０－０５０
ＥｆｅｔｏｌｕｅＭｅｉｍｎｍｐｒｔｒｎｔｅＲａｉｆｃｆＣｕｔｒｄｕａｄＴｅｅａｕｅｏｈｔｏ
ｆ１．ＣｅｓｙＥｇｎｅｉｇＣｌｇ，ｂｇｉｕｔｒｌＢｏｅｇｎｅｉｇＣｌｇ，Ｔａｊｎｖｒｉ，Ｔａｊ００２ｈｎ；ｈｍｉｒｎｉｅｒｏｌｅ．Ａｒｌａｉ－ｎｉｅｒｏｌｅｉｎｉＵｉｅｓｙｉｎｉ３０７，Ｃｉａｔｎｅｃｕｎｅｎｔｎ
Ａｂｔａｔｎｈｕｉｍｙｕｇｌａｓｓｄｓｓｒｃ：ＡｔｒｕｏｎｅｆｗａｕｅａｍａｅｉｌｔｆｄｕｈｅｔｒｉｇｅｉｎｆｃｌｒｍｅｉｍｎｔｅｐｒｐｉｔｔｒａｏｉｏｔｔｅｂｔｎｒｄｅｔｏｕｔｅｎｅｕｄｕａｄｈａｐｏｒｅａｔｍｐｒｔｒｏｔｃｌｓｉｄｃｎＴｅｆｅｕｎｙｏｅｆｃｌｓｗａｉｆｅｃｄｂｈａｉｔｆＡｎｈｒｍ．ｔｅｃｎｅｔｏ一ｅｅａｕｅｆｒｉａｌｎｕｉｇｈｒｑｅｃｆＬａａｌｓｎｕｎｅｙｔｅｖｒｙｏｔｕｉｓｕｕｌｅｕｈｏｔｎｓｆ６ＢＡ．ＮＨ４ＣＣ１ｎｔｅｃｌｒ — ｄｕａｄｔｅｃｌｒ — ｅｅａｕｅｈｅｕｔｈｗｅｔａｔｅｖｒｔａｈｓｍｐｒＮＯａ，ｉｈｕｔｅｍｅｉｍｎｈｕｔｅｔｍｐｒｔｒ．Ｔｅｒｓｌｓｏｄｈｔｈａｉｙｗｓｔｅｍｏｔｕｕｓｅｉｏ — ｔｎｆｃｏｏｅｆｃｌｓｉｄｃｎＷｈｎｈｃｎｅｔｏ一Ａａ０５ａｔａｔｒｔｌａａｌｎｕｉｇｕｅｔｅｏｔｎｆ６Ｂｗｓ．ｍｇ・～ｔｅｙｕｇｌａａｂｔｒａｉｔｏｏｒｃｌｓＬ．ｈｏｎｅｆｈｄｅｔｂｌｙｔｆｍａｌｅｉｕＷｈｌｏｌｔｅｏｔｎｆＮＨ４ｒｄｃｄｏａｆｉｈＭＳｉｅｎｙｈｃｎｅｔｏＮ０ｅｕｅｔｈｌｎｔｅｍｅｉｍ．ｎｈｎｅｄｕｏｃａｇｗａｆｕｄｓｏｎ．ＢｕｂｔｏｏｔｎｏＨ４ｔｏｈｆｃｎｅｔｆＮＮ０ａｄＣａ１ｅｅｒｄｃｄｔｈｌｉｈｍｅｉｍ．ｔｅｆｅｕｎｙｆｌａａｌｓｗｓｒｉｅＡｉｌｈｎｅｆｔｍｐｒｔｒｕ－ｎＣ，ｗｒｅｕｅｏａｆｎｔｅＭＳｄｕｈｒｑｅｃｏｅｒｃｌａａｓｄｌｔｃａｇｏｅｅａｕｅｄｒｕｔｅ

马铃薯花药培养再生植株的诱导与鉴定

收稿日期：２０ — ４ｌ０６０一３
植株及其亲本植株及其亲本的株型、生长势、茎色、叶色、叶形、花色等性状。收获块茎后观察记录薯型，薯皮颜色。
基金项目：黑龙江省科技厅资助碰口（Ｂ５１３ＧＯＢ０）作者简介：王梓全（９０）９。黑龙江人，硕士研究生，研究１８－，
文章编号１０ — ３９（０８０ — ００００５９６２０）８０１— ５
马铃薯花药培养再生植株的诱导与鉴定
王梓全，卢翠华，邸宏，石瑛，陈伊里，张丽莉，姜丽静，刘辉
（东北农业大学农学院，哈尔滨１０３５００）
以讷１、克新１、克新１、克新１、花５５６３７８２和波Ｃ６个马铃薯品种为试验材料，由东北农业大学农学院马铃薯研究室和黑龙江省农科院克山马
撕取马铃薯叶片下表皮，在显微镜下观察，每片叶随机选取５个气孔计数，若叶绿体重叠、粘连
摘要：文章采用讷１、克新１、克新１、克新１、花５５６３７８２和波ｃ共６个童掺薯品种为试验材料，研究了不同
的基因型、不同浓度的植物生长调节荆和蔗糖对马铃薯花药培养的影响，并对马钤萼花药再生植株进行了细胞学、形
态学和农艺性状的观察与鉴定。结果表明，基因型中波ｃ和讷１６具有较强的再生馕力；ＭＳＮＡ０・＋ — ５＋Ａ．ｍｇＺ４ＤＯ５
２结果与分析
２１不同基因型对愈伤组织诱导的影响．在相同的培养条件下不同基因型材料的愈伤组

马铃薯茎尖脱毒、愈伤组织诱导及分化技术优化研究的开题报告

马铃薯茎尖脱毒、愈伤组织诱导及分化技术优化研究的开题报告一、研究背景和意义马铃薯是我国重要的食用和工业原料作物之一，也是世界上最重要的食用作物之一。

但是，马铃薯叶片、茎尖等组织中常常携带多种病毒，如果不进行脱毒处理，就会对马铃薯的生产和质量造成很大影响。

另外，马铃薯茎尖是愈伤组织诱导和分化的重要材料之一，开展马铃薯愈伤组织的研究对马铃薯的育种和繁殖有着重要的意义。

现有的马铃薯茎尖脱毒及愈伤组织诱导和分化技术存在着一些问题，如操作复杂、效率低下、成本高等问题。

因此，本研究旨在优化马铃薯茎尖脱毒、愈伤组织诱导及分化技术，提高脱毒效率和愈伤组织诱导率，降低成本，并进一步探讨其应用前景和发展方向。

二、研究内容和方法1. 马铃薯茎尖脱毒技术优化研究通过对传统马铃薯茎尖脱毒方法的改进和优化，探索更为高效、稳定的脱毒技术，主要包括以下方面：（1）不同消毒和灭菌方法对茎尖脱毒效果的影响研究；（2）不同处理条件对茎尖脱毒效果的影响研究；（3）茎尖脱毒后的存放条件和时间对其真实性的影响研究。

2. 马铃薯茎尖愈伤组织诱导和分化技术优化研究通过对马铃薯茎尖愈伤组织诱导和分化技术的优化，提高愈伤组织诱导率和分化效率，主要包括以下方面：（1）不同物种、不同品种马铃薯茎尖的愈伤组织诱导率研究；（2）不同植物生长调节剂浓度对愈伤组织诱导和分化的影响研究；（3）外源DNA导入对马铃薯愈伤组织形成的影响研究。

3. 研究方法本研究将采用实验室培养和相关分析方法，包括细胞培养、组织培养、酶活性测定、PCR检测等方法，对马铃薯茎尖脱毒、愈伤组织诱导和分化技术进行优化研究，同时通过对比实验和数据分析，探索更为高效、稳定的脱毒和愈伤组织诱导技术，并对其应用前景做出初步预测。

三、研究预期成果本研究预计通过优化马铃薯茎尖脱毒、愈伤组织诱导和分化技术，取得以下预期成果：（1）探索出更为高效、稳定的马铃薯茎尖脱毒技术，并提高脱毒效率和真实性；（2）提高马铃薯愈伤组织诱导率和分化效率，探索出更为稳定的愈伤组织诱导和分化技术；（3）通过实验数据分析，预测优化技术将应用到实际生产中，并对其发展前景进行初步分析和探讨。

马铃薯种薯播前温度处理对苗期抗旱能力的影响

马铃薯种薯播前温度处理对苗期抗旱能力的影响龚静1，郑顺林1，2*，熊湖1，黄强1，马海艳1（1.四川农业大学作物生理生态及栽培四川省重点实验室，成都611130；2.农业农村部薯类作物遗传育种重点实验室，成都久森农业科技有限公司，成都610500）摘要:【目的】为明确播种前储藏库种薯短期温度处理后对马铃薯苗期耐旱性以及产量的影响。

【方法】采用盆栽试验，播种前不同温度（5℃、20℃、35℃）处理马铃薯种薯，出苗后使用不同浓度PEG-6000（0、10%、20%和30%）溶液模拟干旱胁迫，探讨不同程度干旱胁迫温度下处理对马铃薯苗期生长发育及产量的影响。

【结果】①干旱胁迫对马铃薯茎粗、株高、整株干物质抑制作用明显，马铃薯叶片抗逆性酶活性随着干旱胁迫程度的不断增加而不断升高，MDA 含量、细胞膜透性和可溶性糖含量较对照分别升高，产量下降。

②播种前20℃处理，缓解了干旱胁迫对马铃薯茎粗、株高和整株干物质不利影响，降低SOD 、POD 活性，抑制了MDA 含量的增加，细胞膜透性下降，使可溶性糖含量增加。

③20℃处理后缓解了干旱胁迫对产量产生的不利影响，产量显著高于其他温度下各水分处理。

【结论】播种前对储藏库的种薯20℃预热处理可以缓解苗期干旱胁迫对马铃薯产生的不利影响，增强其苗期耐旱性，达到提高后期产量的目的。

关键词:马铃薯；温度处理；生长发育；干旱胁迫；抗旱能力中图分类号:S3-33文献标志码:Ａ文章编号:1000-2650（2020）03-0251-06Effects of Temperature Treatment before Sowing on Drought Resistance of Potato SeedlingsGONG Jing 1，ZHENG Shunlin 1，2*，XIONG Hu 1，HUANG Qiang 1，MA Haiyan 1（1.Sichuan Agricultural University ，Crop Ecophysiology and Cultivation Key Laboratory of Sichuan Province ，Chengdu611130，China ；2.Ministry of Agriculture Key Laboratory of Tuber Crop Genetics and Breeding ，Chengdu JiusenAgricultural Technology Company ，Chengdu 610500，China ）Abstract:【Objective 】To explore the effects of different drought stress treatments on the growth and de -velopment of potato seedlings and their yields.【Method 】A pot experiment was conducted to determine theeffects of short -term temperature treatment of seed potatoes on drought tolerance and yield of potato seedling stage before sowing.Seed potatoes were treated at different temperatures (5℃，20℃，35℃)before sowing ，and different concentrations of PEG-6000(0，10%，20%，30%)solution were used tosimulate drought stress after emergence.【Result 】The results showed that drought stress significantly in -hibited stem diameter ，plant height and whole plant dry matter of potato.Moreover ，the activities ofstress-resistant enzymes in potato leaves increased with the increasing degree of drought stress ，and theMDA content ，cell membrane permeability and soluble sugar content increased ，while potato productioncontinues to pared with other temperature treatments ，the effect of drought stress on potato stem diameter ，plant height and whole plant dry matter were reduced at 20℃.Additionally ，SOD activ -第38卷第3期2020年6月收稿日期:2019-09-25基金项目:国家重点研发计划（2018YFD0200808）；四川省育种攻关及配套项目（2016NYZ0051-5、2016NYZ0032）；国家现代农业产业技术体系四川薯类创新团队（川财教[2019]59号）。

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一
３２一
江苏农业科学２０１３年第４１卷第９期
贺苗苗．温度预处理对不同品种马铃薯花药愈伤组织诱导率的影响［Ｊ］．江苏农业科学，２０１３，４１（９）：３２— ３３
温度预处理对不同品种马铃薯花药愈伤组织诱导率的影响
贺苗苗
（青海省农林科学院／教育部青藏高原生物技术重点实验室，青海西宁８１００１６）
２２℃的光照培养箱中培养；处理 Ⅲ：将花蕾置于４ｏＣ下低温
预处理３６ｈ，接种后置于３５℃ 黑暗条件下预培养３６ｈ，然后转入光强为２５００ｌｘ、光照时间为１６ｈ／ｄ、温度为２２℃ 的光照培养箱中培养。
１．０ｍｇ／Ｌ２，４一Ｄ＋０．５ｍ＃ＬＫＴ），每皿接种２５— ３Ｏ枚花药，放于光强为２５００ｌｘ、光照时问为１６ｈ／ｄ、温度为２２℃ 的光照培养箱中培养。
１．２．２高温热激处理将消毒过的花蕾（消毒方法同 “ １．２．１ ” ）接种到诱导培养基上，置于３５℃黑暗条件下分别预培养０、２４、４８、７２ｈ，然后转入光强为２５００ｌｘ、光照时间为１６ｈ／ｄ、温度为２２℃的光照培养箱中培养。１．２．３高温与低温预处理组合本研究设计３个处理，处理Ｉ：将花蕾置于４℃下低温预处理２４ｈ，接种后置于３５℃黑
中图分类号：￥５３２．０４３文献标志码：Ａ文章编号：１００２—１３０２（２０１３）０９— ００３２— ０２
马铃薯是世界第三大粮食作物，我国现有的马铃薯品种・于单核靠边期或双核初期的花蕾备用。
遗传基础狭窄，亲缘关系近，后代遗传变异停留在近交水平，
２０１０年４月中旬将青薯２号、高原４号、下寨６５等３个马铃薯品种分别种植于青海省海东市乐都区、海东市平安县、
西宁市湟源县３个试验点。
摘要：以青海省马铃薯主栽品种青薯２号、高原４号、下寨６５为材料，探讨低温和高温热激对马铃薯花药愈伤组
织和胚状体诱导率的影响，结果表明：单独低温预处理４８ｈ下寨６５诱导率最高，３５℃热激处理４８ｈ下青薯号和高
－
原４号诱导率较高，低温预处理４８ｈ和热激处理４８Байду номын сангаас ｈ相配合下的马铃薯愈伤诱导率高于单独低温和高温热激处理。关键词：马铃薯；温度；愈伤组织；诱导率
１材料与方法
１．１材料
１６ｈ／ｄ、温度为２２℃ 的光照培养箱中培养；处理 Ⅱ：将花蕾置于４℃下低温预处理４８ｈ，接种后置于３５℃黑暗条件下预培
养４８ｈ，然后转入光强为２５００ｌｘ、光照时间为１６ｈ／ｄ、温度为
倍体种间杂交不亲和或杂交后产生不育的三倍体，很难产生
后代，这就限制了马铃薯野生种优良基因在育种中的应用。利用组织培养技术进行马铃薯花药培养，普通马铃薯通过诱导获得的双单倍体可直接与野生种二倍体杂交，将优良基因
转移到栽培种中，充分利用野生资源，丰富遗传基础。花
暗条件下预培养２４ｈ，然后转人光强为２５００ｌｘ、光照时问为
薯花药培养对基因型依赖性很大。本研究对马铃薯花药
进行温度预处理，探讨低温和高温热激对马铃薯愈伤组织和
胚状体诱导率的影响，旨在为开发利用马铃薯提供依据。
四倍体常规杂交育种很难有较大突破。自然界中具有抗病、抗线虫、抗霜冻、早熟、高干物质、低还原糖含量等特性的马铃薯野生种和近缘栽培种中７５％左右为二倍体 … ，四倍体与二
１．２．１低温预处理
采用低温（４℃）预处理方法，将花蕾包
于双层湿纱布中，放人４℃冰箱中分别预处理０、２４、４８、７２ｈ，用流水冲洗花蕾３０ｍｉｎ，再用蒸馏水冲洗３次，转入超净工作台用无菌水冲洗３次，再用７５％乙醇灭菌３０ｓ，用０．１％ＨｇＣ１：浸泡１０—１５ｍｉｎ，用无菌水冲洗３～５次，置于已灭菌的培养皿上，用镊子剥开花蕾，取出花药，去除花丝，接种到愈伤组织诱导培养基上（ＭＳ基本培养基＋０．５ｍｇ／ＬＮＡＡ＋
药培养被广泛应用于植物遗传育种。我国马铃薯花药培养研究始于２０世纪８０年代初，戴朝曦以四倍体普通栽培种为材料，成功诱导了再生植株。Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ对马铃薯品种Ｍａｒｉａ进行不同天数低温预处理，发现预处理３ｄ效果最好。冉毅东等对马铃薯双单倍体花药采用３种不同温度进行前处理，也成功获得了再生植株。梁彦涛等认为，马铃