酶联免疫吸附技术分析及其在食品安全检测中的应用

１ 酶联免疫吸附技术简介
ｉ ． １酶联 免 疫吸 附技 术原 理 酶联 免疫 吸 附技术 是基 于 酶促 反应 和抗 体 、 抗 原
的免 疫反 应 的一种 检 测技 术 ， 由于每 种抗 体 、 抗 原 的 免疫 反应 具有 特异 性 ， 同时 酶 的催化 作 用效率 较 高 ， 因此 用 酶标记 相 应 的抗 体 并使 其 与 固相 载体 吸 附 的 抗体（ 抗原） 、 待测抗体（ 抗原） 发生具有 特异性 的免疫反 应， 生成 中间物质 ， 然后使 这一 物质 与酶 的底 物 发生 反应生成 有色 物质 ， 这 个有 色物质 的产量 在客观 上反 ２酶 联免 疫 吸附 技术在 食 品安 全检 测 中 的应 用 ２ ． ｉ食 品 农 药残 留检 测 映 了待测抗 体（ 抗原 ） 的量 ， 因此可作 为定性 分析 的依 据， 同时可用分 光 光度计 测 出物 质 的吸光 度值 ， 然后 蔬菜、 水果 等 的农药 残 留对 人们 的健 康产 生不 利 通过 吸光度值 可定量计 算 出抗体（ 抗原 ） 的量 。 影响， 用于 检测食 品农药 残 留的传统方 法为 高效液 相 １ ． ２酶联 免 疫吸 附技 术 分类 色谱法 ， 具有数据 可靠性 高 、 利 于定量分 析等 优点 ， 但 １ ． ２． １间接 法测抗 体 同时高 效液相 色谱 法相 应 的仪 器设备 造价 较为 昂贵 ， 实验周 期 长 ， 并且 操作 程序 繁琐 ， 对操 作人 员 的要求 固相 载体吸 附特 异性抗 原 ， 然后加入 待测物 质（ 含 抗体） ， 使二者 发生 反应形成 抗体一抗原 复合物 ， 冲洗 ， 较高 。 而酶 联免 疫 吸 附技术 的仪 器设 备 较为 简单 ， 投 然后再加入 用酶标 记的抗 抗体使之 与上述 的抗体 一 抗 资低 ， 并且 操作简 单 ， 可快速得 出结果 ， 可根据需要 进 原复合 物结合 生成抗 原～待 测抗体 一酶标记 抗体 复合 行定量 或定性分 析 ， 较为灵 活 ， 目前在 市场 上 的所有 技术 物， 再冲洗 ， 最后加入 酶的底 物 ， 如果待 测物 中含 有相 农药种 类都可 通过酶 联免 疫吸 附技术检 测 出来 ， 实 践证 应的抗 体 ， 则 通过底 物被复合 物 内的酶催 化发生 显色 开发 出 了更加 方便 快捷 的农药残 留测试 试 纸 ， 反应 ， 定为 阳性 ， 若待 测物 中不含 有 相应抗 体 则 由于 明准确 率 可 以得 到 保证 。 酶无处 附着 而被 冲洗 掉 ， 因而 无法 发生 显 色反应 ， 表 ２ ． ２食 品 中病 原微 生物检 测 中外食 品工 业 ５ １ Ｄ — ｆ Ｄ ｒ 巳 ｝ Ｆ ０ 口 ｄ Ｉ ｎ ｃ ｌ ｕ ｓ ｔ ｒ ｒ ３ ５ ７
测中。
现 为 阴性 。
１ ． ２ ． ２双 抗 体 夹 心 法测 抗 原
用 固相 载体吸附具 有 已知特异 性 的抗 体组成 固相 抗体 ， 然后 加入 待测样 品（ 含 抗 原） ， 二者 结 合生成 抗 体一抗原 复合 物 ， 然后再 加入 酶标抗体 ， 形成抗 体一抗 原一酶标 抗体 的双抗 体 夹抗原 的复 合物 ， 然 后通过 加 入底 物 ， 与上 述方 法类 似 ， 如果 待 测物 中含 有相 应抗 原则底 物 会被 酶催 化显 色 ， 否 则底 物不 显色 ， 以此 作 为是否 存在抗 原 的定性分 析依据 ， 同时还可通 过显 色 反应颜 色 的深 浅定性 分析 抗原多 少 ， 并通过 吸光度值 可定量 计 算 出抗原 的量 。 １ ． ２ ． ３竞 争６ ｉ 测抗原 将 已知 特异 性 抗 体 与 固相 载体 结 合形 成 固相 抗 体， 加入待测样 品（ 含 抗原） 和酶 标抗原 ， 使酶 标抗原与 待测抗 原与 固相抗 体之 间的结合 形成竞 争 的局 面 ， 因 此 当待测样 品 中相 应抗 原含量越 高 ， 则其与 抗体结 合 的几率 就越高 ， 同时酶标抗 原与 固相抗 体结合 的几率 就越低 ， 表 现为加入 底物 后酶催 化显 色反应 越不易 发 生， 无 色或 浅色 定义 为 阳性 ， 反之 酶催 化 显色颜 色 越 深就 定义 为 阴性 。
关键 词 ： 酶 联 免 疫吸 附 食 品 安 全 检 测 应 用 中图分 类号 ： ＴＳ ２ ０ ７ 文献标识码 ： Ａ 文章编号： １ ６ ７ ２ ． ５ ３ ３ ６ （ ２ ０ １ ４） ０ ８ — ０ ０ ５ ７ — ０ ２
近年 来食 品安全 问题 出现的频率越 来越高 ， 如“ 苏 丹红 ” 、 “ 瘦 肉精 ” 等事件 的出现 ， 不但对 人们 的身体健 康带 来 了危害 ， 而 且还 影 响社 会 的安定 ， 随着 人们 对 食 品安 全的重视 程度 不断提 高 ， 食 品安 全检测 已经成 为 当前研 究最 热 门的领域之 一 ， 对 食 品安全检 测技术 运用 是 否得 当 关系 到食 品 的安 全 是否 能够 得 到 最大 程 度 的保 障 ， 无论 是 内销 还 是 出 口食 品 ， 都需 要做 好 食 品安 全检测 。 酶联免 疫吸 附技术（ ｅ ｎ ｚ ｙ ｍｅ －ｌ ｉ ｎ ｋ ｅ ｄ ｉ ｍｍｕ ｎ ｏ ｓ ｏ ｒ ｂ ｅ ｎ ｔ ａ ｓ ｓ ａ ｙ ， Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ） 是一种十分重要 的食 品 安全 检测 技术 ， 可广 泛用 于对 食 品农 药残 留、 病 原微 生物 、 生 物 毒素 、 添加剂 以及 是否 为转 基 因食 品 的检
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１ 中 外 食 品
分 析 检 测
酶联免疫吸附技术分析 及其在食品安全庆市质量技术监督检验检测 中Ｉ 心 黑龙江大庆 １ ６ ３ ３ １ １ ）
摘要： 本文介绍 了作为食品安全检测 主要 方法之一的酶联免疫吸 附技术 的原理及 其分类， 并讨论其在农 药残留检 测、 病原 微 生物检 测、 毒素检 测 、 肉制食 品违 法添加 剂检 测 以及 转基 因检测等 几个 方 面的实 际应 用。