一氧二烯五环氧乙烷在尼罗非鲫生物体中的评价

一氧二烯五环氧乙烷在尼罗非鲫生物体中的评价摘要为了研究生物化学反应用五种不同的亚致死剂量的一氧二烯五环氧乙烷的聚合物对尼罗非鲫的影响作为评价因素，用光度测定法。

在超氧化歧化酶，过氧化氢酶和谷光甘肽过氧化物酶的抗氧化酶的活性没有变化。

方法是将生物体放在0.2%，0.4%，0.6%，0.8%和1%的亚致死剂量的聚合物一氧二烯五环氧乙烷天，7天和15天进行检测。

通过对乙酰胆碱酯酶和钠，钾离子转移酶对神经系统影响程度的研究。

供试生物的乙酰胆碱酯酶活性快速降低而钠，钾离子转移酶的活性没有显著的改变。

乙酰胆碱酯酶活性减少达到80%。

因此对谷光甘肽转移酶的活性影响很弱，也没有表现对肝毒素的影响。

最近的研究结果表明埃德蒙二醛含量的增加和乙酰胆碱活性的降低可以作为一氧二烯五环氧乙烷毒性的生物学标志。

关键词鱼杀虫剂一氧二烯五环氧乙烷酶抗氧化剂脂类的过氧化反应1前言一氧二烯五环氧乙烷是Samitomo化学在1998年生产的并在全世界推广的新一代用于柑橘苹果葡萄蔬菜花卉棉花茶上的有机金属粉糖杀螨剂。

一氧二烯五环氧乙烷对于氨基甲酸酯，有机氯和另一些杀螨剂来说具有选择性。

对脱皮有抑制作用。

从1999年在Cukurova,Turkey 两个地方用于棉花上的螨类的防治。

尽管氟化作用是增加亲酯性的，但CF和C-CF由于它们的偶极作用很强所以导致亲脂性降低酶系统与氟化物反应有两种相反的结果；一些是激活，另一些是抑制。

在推荐使用剂量0.95ppm氟化物能抑制61%的血液中的胆碱脂酶而对神经系统则相反。

脂肪酶和磷酸脂酶对氟化物是非常敏感的。

骨骼生长和生物器官中的碱性磷酸脂酶能被吸入的低剂量的氟化物影响。

氟化物能使细胞色素C氧化酶关闭，是一个氧带走呼吸的酶。

不同种类的杀虫剂也许引起象双氧水，超氧化物和羟基的产生。

如果抗氧化剂不能适时的移走这些有效的氧化剂，他们将导致氧化作用的增强。

自由基的产生，脂类过氧化反应和抗氧化状况的改变被认为是氟化物毒性的重要因素。

因此，一氧二烯五环氧乙烷在这些方面来说是有效的。

无氧氟离子促使氧化反应的增强间接地导致酯的过氧化反应水平的提高。

完全影响脂过氧化反应是降低膜的流动性，增强膜的通透性，导致膜的完整性破坏。

以前没有对一氧二烯五环氧乙烷的毒性作出评价。

这个研究以鱼作为供试生物与一氧二烯五环氧乙烷接触来研究乙酰胆碱，钠，钾离子转移酶与超氧化歧化酶，谷光甘肽转移酶，脂类的过氧化反应的结合之间的联系。

GTP活性是生物体损伤的重要因素。

2材料和方法从天然池塘中取长成的3然后放在实验室。

脱去水中的氯碱性CaCo 260ppm ,9.01mg/L的氧化剂使PH= 。

鱼可以在这个条件下2个星期。

试剂的准备[（rs）-5-tert-butyl-2,2-(2,6-difluorophenyl)-4,5-dihydro-1,3-oxazol-4-yl]phenetole,Zoom10SC,Sumitomo,110g/L]。

鱼被分成6个组每组12条。

组一氧二烯五环氧乙烷放在自来水中。

另外5组分别放在0.2%，0.4%，0.6%，0.8%和1%的一氧二烯五环氧乙烷试剂中。

实验在100L的养鱼池中进行。

每两天换一次水适当的补充杀虫剂。

静态的测试被从新化验。

定期的喂鱼鱼饲料。

在实验进行中没有发现死亡。

1,7,15天后把生物体组织解剖。

生物体用0.59%的生理盐水NaCl冲洗，样本贮存在-85℃直到分析。

组织放在0.5MpH=7.4蔗糖缓冲液5分钟然后在超速离心机上离心30分钟。

所有的过程在4℃下进行。

浮在表面的被用做决定抗氧化酶的活性；钠，钾离子转移酶，乙酰胆碱酯酶，谷光甘肽转移酶的活性和埃德蒙二醛的含量用分光光度计检测。

乙酰胆碱酯酶4一氧二烯五环氧乙烷2mn波长30℃时用Ellman et al的方法。

乙酰胆碱碘化物和二硫代氨基甲酸酯硝基苯酸别用于基质。

在37℃从三磷酸腺甘酶提取出来的无机磷酸盐决定乙酰胆碱酯酶活性。

水池提前准备。

抗氧化歧化酶在505nm37℃通过甲型的抑制百分率计算。

T-Buty一氧二烯五环氧乙烷过氧化氢决定GPx的活性。

通过GPx和NADPH使在中间GSSG减少到GSH。

通过计算吸收的NADPH的氧化不同剂量在37℃340mn化验GPx的活性。

一氧二烯五环氧乙烷M Tris-HCl ,5mMEDTA(ph=0.8),10mMH O, H O 230nm测定CAT活性的量。

在230nm H O的消失作为酶活性的计算。

埃德蒙二醛通过在有氧的硫代巴比妥酸(ph=3.4)95℃脂类过氧化反应来测定。

在532nm粉色的产生在分光光度计下测得。

物质以每mg蛋白质为一个单位。

蛋白质以迟钝的血清中的白蛋白作为一个标准。

计算标准误，用ANOV A LSD来分析结果，在p﹤0.05的显著水平下用LSD检验，泊松分析用来检验乙酰胆碱酯酶抑制水平是否与一氧二烯五环氧乙烷试剂和埃德蒙二醛水平相关。

3结果在生物组织中抗氧化酶活性和埃德蒙二醛水平见表1-4。

鱼与试剂接触的1，7和15天中的SOD,GPX和CAT的生物活性没有变化。

埃德蒙二醛在接触7天时有所提高达到0.一氧二烯五环氧乙烷8ppm而1和15天没有显著的变化。

钠，钾离子转移酶和GTP的活性在任何时候都没有变化（见表5，6）。

对乙酰胆碱酯酶抑制除了0.27ppm处理下都很显著（见表7）。

对乙酰胆碱酯酶抑制在任何时候都有（见表8）。

在增加毒性时在生物体中乙酰胆碱酯酶有降低的趋势。

埃德蒙二醛的提高和乙酰胆碱酯酶的减少只有在7天后有明显的联系。

4讨论在鱼体内乙酰胆碱酯酶的活性用于测量神经毒剂的方法。

乙酰胆碱酯酶，丝氨酸和催化剂打破了神经传递质乙酰胆碱酯酶进入醋酸盐和维生素B复合体。

这个过程包括酶基质复杂的形成，接着是盐酸羟胺氨基酸的乙酰化反应，在酯部位表现和最后的脱乙酰化反应。

对乙酰胆碱酯酶的抑制作用可能与杀虫剂本身和接触时间有关系。

对鱼脑中的乙酰胆碱酯酶抑制水平超过70%在很多种类中。

因此，鱼表现出对脑中的乙酰胆碱酯酶抑制的忍受能力高于90%。

在不同种鱼乙酰胆碱酯酶抑制，死亡率不是相同的。

Balint发现杀扑磷对乙酰胆碱酯酶活性的有显著的抑制，在脑，心脏和血液中有90-92%的降低，在生物体和骨骼肌肉中有70-75%的降低。

而溴氰菊酯应用剂量没有使乙酰胆碱酯酶有任何变化。

Pan和Dutta发现使用二嗪农使用后尽管9一氧二烯五环氧乙烷.75%的酶活性被抑制鱼仍然存活。

作者阐述了鱼在死之前能忍受多大的抑制剂量。

Areechon和Plumb认为不同种类的乙酰胆碱酯酶的敏感性是由于水解酶的量不同。

鱼脑中乙酰胆碱酯酶活性是明显的被农药抑制。

当鱼的酶的活性有90%被抑制鱼还能存活。

鱼的死亡也许由于其他的酶被抑制，特别是参加碳水化合物和蛋白质新陈代谢的那些。

乙酰胆碱酯酶活性的降低与接触时间从1天到15天。

Ansari和Kumar有相似的结论。

根据作者，持续加强也许影响乙酰胆碱酯酶的相同部位或者多余的减少乙酰胆碱酯酶。

与乙酰胆碱酯酶抑制相反，酯的过氧化反应在7天后随剂量的增加而明显增加。

最近的结果表明酯的过氧化反应增加与乙酰胆碱酯酶活性的抑制有明显的相关性。

一氧二烯五环氧乙烷也许是引起酶的过氧化反应和抗维生素B酯酶的联系的媒介。

用化学解释酯的过氧化反应增加是这个化合物引起了氧化物的产生，在细胞膜产生了氧化的破坏。

在对一种酵素的抑制剂的研究中已经说明引起二异丙基氟磷酸盐抑制是自由基积累导致酯的过氧化反应它也是细胞损伤的乙酰胆碱酯酶抑制剂的先导物。

报道长期将小白鼠与氟化物接触促使生物体的抗氧化系统的增加和减少并且导致通过埃德蒙二醛水平的提高氧化的加强。

据我们研究在生物体中过氧化的增加与dichlorvos的研究结果是相似的。

尽管酯的过氧化反应导致氧化组织的破坏的结果，但鱼没有任何明显的中毒信号。

Yamano和Morita得出的结论支持这个观点，他们认为酯的过氧化反应是白菌清引起的也许不是完全的与它的急性毒性有联系。

ATPases，有不同的离子形式，是膜的连接酶与能量的快速释放相关。

他们的任务是带离子穿过膜，控制他的新陈代谢和物理活动。

一旦血浆膜的结构和功能的破坏很久以来被认为是组织损伤的主要原因，最近已经集中在氧化代谢对钠，钾离子转移酶和另一些组织膜蛋白质上来。

一氧二烯五环氧乙烷没有使钠，钾离子转移酶活性产生任何改变。

因此，表明这些化合物对离子的穿过细胞膜没有影响。

转氨酶活性的提高表明氨基酸对氧化物和糖质新生是有利的，被用于测定生物体损伤。

许多环境因素对鱼组织中的转氨酶的活性有影响，这也是被用做实验杀虫剂的敏感标志。

转氨酶水平的提高是由于生物体损伤。

自从一氧二烯五环氧乙烷对GPT活性没有发现有影响。

现在的研究表明用一氧二烯五环氧乙烷处理生物体对生物体没有任何损伤和聚集。

结论，乙酰胆碱酯酶抑制是一个重要行为和酯的过氧化反应的发生也许是一氧二烯五环氧乙烷毒性的一个因素。