液态芯片检测仪——Luminex 100 TM 多功能流式点阵仪 Luminex 200多功能流式荧光点阵仪
生命科学前沿技术知到章节答案智慧树2023年苏州大学
生命科学前沿技术知到章节测试答案智慧树2023年最新苏州大学第一章测试1.样本在鞘液流的环包下形成流体动力学聚焦，使其不会脱离液流的轴线方向，并且保证每个细胞通过（）。
参考答案:激光照射区2.流式细胞仪测定的标本，不论是外周血细胞，还是培养细胞，首先要保证的是（）。
参考答案:单细胞悬液3.流式检测时，前向角散射信号可以检测细胞膜厚度。
（）参考答案:错4.流式细胞仪综合了激光技术、电子技术、流体技术和计算机技术。
（）参考答案:对5.流式细胞术可检测的生物学颗粒包括（）。
参考答案:;细胞;DNA;细菌第二章测试1.以下哪个不是荧光显微镜的用途（）。
参考答案:测量细胞膜电信号变化2.荧光标记的方法有（）。
参考答案:量子点、镧系元素表;荧光蛋白转染标记，GFP等;新型有机染料标记，Alexa Fluo系列;样本自发荧光成像;传染有机染料标记，DAPI，FITC等3.荧光染料不可以用来标记活细胞。
（）参考答案:错4.关于激光扫描共聚焦显微镜与宽场荧光显微镜，描述正确的是（）。
激光扫描共聚焦显微镜都是倒置显微镜，荧光显微镜都正置显微镜5.影响激光扫描共聚焦显微镜成像质量的条件有（）。
参考答案:扫描分辨率;荧光信号强度;激光强度6.激光扫描共聚焦显微镜可以进行高精度的Z轴层扫，有助于提升图像分辨率。
（）参考答案:对7.激光扫描共聚焦显微镜不可以进行以下哪类应用（）。
参考答案:电信号测量8.激光扫描共聚焦显微镜可以进行哪些升级改造（）。
参考答案:FRAP/FLIP成像;FLIM改造;细胞动力学分析;长时间活细胞成像9.共聚焦显微镜不可以进行升级改造（）参考答案:错10.活体微循环系统由最早由哪个公司生产销售（）。
参考答案:3I11.光片显微镜的优势主要有（）。
参考答案:分辨率高;成像速度快;光漂白/光毒性小;信噪比高12.转盘共聚焦分辨率一定高于传统共聚焦显微镜。
（）参考答案:错第三章测试1.对小鼠进行定点基因编辑的技术是（）：参考答案:同源重组2.用CRISPR/Cas9技术做基因敲入的时候，需要对受精卵注射（）：参考答案:CRISPR/Cas9系统+同源重组打靶载体3.对细胞系做基因编辑难度大于小鼠基因编辑难度的原因可能是（）：参考答案:细胞系内染色体倍数不确定;不同细胞系差异太大;细胞系发生自然同源重组的概率低4.同源重组过程中，容易发生随机整合，单用PCR鉴定可以排除随机整合。
供体特异性抗体检测技术的研宄进展
第７卷 第２期２０１６年３月器官移植ＯｒｇａｎＴｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎＶｏｌ ７ Ｎｏ ２Ｍａｒ ２０１６·综述·ＤＯＩ：１０ ３９６９／ｊ ｉｓｓｎ １６７４ ７４４５ ２０１６ ０２ ０１４基金项目：国家高技术研究发展计划（８６３计划）（２０１２ＡＡ０２１００２）作者单位：１０００９１ 北京，解放军第３０９医院器官移植研究室移植免疫室通讯作者：石炳毅，Ｅｍａｉｌ：ｓｈｉｂｉｎｇｙｉ＠ｍｅｄｍａｉｌ ｃｏｍ ｃｎ供体特异性抗体检测技术的研究进展匡国杰 综述 石炳毅 肖漓 审校 【摘要】 抗体介导的排斥反应（ＡＭＲ）是导致移植肾失功的首要原因，而供者特异性抗体（ＤＳＡ）是诊断移植肾体液性排斥反应的必要因素之一。
因此，ＤＳＡ检测方法的选择、技术的灵敏度和特异度对ＡＭＲ的诊断和治疗有着重要的指导意义。
随着器官移植外科手术水平的提高和新型免疫抑制剂的出现，移植免疫学检测技术也在不断发展。
本文对ＤＳＡ的免疫学检测方法，特别是应用Ｌｕｍｉｎｅｘ 单抗原微珠法检测ＤＳＡ的意义、技术优势及不足进行综述。
【关键词】 肾移植；供者特异性抗体；抗体介导的排斥反应；Ｌｕｍｉｎｅｘ 单抗原微珠法 【中图分类号】Ｒ６１７，Ｒ３９２ ４ 【文献标志码】Ａ 【文章编号】１６７４ ７４４５（２０１６）０２ ００１４ ０５ 近年来，研究发现抗体介导的排斥反应（ＡＭＲ）是导致移植肾失功的首要原因。
Ｓｅｌｌａｒéｓ等［１］报道，３１５例肾移植受者平均随访３１ ４个月，发现移植物丢失５６例，其中６４％归因于ＡＭＲ或疑似ＡＭＲ。
根据２０１３年修正的Ｂａｎｆｆ诊断标准［２］，存在供者特异性抗体（ＤＳＡ）是诊断移植肾体液性排斥反应的必要因素之一。
因此，ＤＳＡ检测方法的选择、技术的灵敏度和特异度对ＡＭＲ的诊断和治疗有着重要的指导意义。
为此，本文对ＤＳＡ的免疫学检测技术作一综述。
１ 供体特异性抗体的研究进展在实体器官移植领域，ＤＳＡ主要包括抗人类白细胞抗原（ＨＬＡ）抗体和非ＨＬＡ抗体，如抗ＡＢＯ血型抗体、抗内皮细胞抗原抗体、抗主要组织相容性复合体Ⅰ类相关链（ｍａｊｏｒｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙｃｏｍｐｌｅｘｃｌａｓｓ Ⅰｒｅｌａｔｅｄｃｈａｉｎ，ＭＩＣ）Ａ和ＭＩＣＢ等。
液芯技术应用在肿瘤标志物检测中的应用
液芯技术应用在肿瘤标志物检测中的应用恶性肿瘤会对人体健康造成巨大危害，及早诊断、及早治疗有利于肿瘤的防治。
随着科技的发展，肿瘤标志物的检测方法不断更新，在放射免疫酶联免疫化学发光固态芯片后，现在较常用的是液芯片。
液态芯片液态芯片又称为流式荧光技术液相芯片悬浮阵列，是基于后基因时代而发展起来的，它可以将高速数字信号处理器和计算机运算法则进行有机的整合，具有高通量、高速度、成本低、灵敏度高、线性范围广等优点，可广泛应用于免疫分析核酸研究、酶学分析、受体和配体识别分析等研究，得到了权威机构及医学界共同认可［１］。
1997年，《临床化学》对多功能流式点阵仪及其技术有过专门介绍，并称其为“真正的临床应用型生物芯片”。
随着其研究与应用，许多关于多功能流式点阵仪及其技术的文章，发表在《临床化学》、《临床与免疫诊断学》、《临床微生物》及《癌症》等国际权威的学术杂志上。
2011年7月27日，inova公司的ena系列流点式阵试剂率先通过美国fda严格认证，表明多功能流点式阵仪及其技术得到了美国官方的高度认证。
2005年6月9日，基于xmap技术的论文刊登在《自然》上，这是学术界认可的一项技术所能给予的最高荣誉。
2005年11月，-frost＆sullivan-授予xmap技术“2005年度国际临床诊断技术革新大奖”，表明其在国际临床诊断技术领域已有权威的认证。
液态芯片在肿瘤标志物检测中的应用肿瘤是一个多因素、多阶段及多基因变异的复杂病变过程。
目前临床上常用的肿瘤标志物都是肿瘤相关抗原，一种或几种肿瘤标志物异常可表明同一种肿瘤或不同类型的肿瘤，且不同的肿瘤可能会出现同一种肿瘤标志物，为提高肿瘤标志物辅助肿瘤的诊断，并确定哪种标志物可作为治疗后随访的检测指标。
近年来，越来越多的专家建议选择几种灵敏度且特异性能够互补的肿瘤标志物，组成最佳组合进行联合检测。
液芯出众的高通量检测性能正好契合了临床肿瘤标志物应用的需求。
其基本原理：在不同荧光编码的微球上进行抗原-抗体反应，通过两束激光分别检测荧光信号和微球编码，实现对多种肿瘤标志指标的联合检测。
检验科关于Luminex 200流式荧光点阵仪的考察报告
检验科关于Luminex 200流式荧光仪的考察报告检验科对Luminex 技术、设备及所开展项目进行考察，现将具体情况汇报如下：Luminex技术在国内又称为“多功能流式点阵技术”、“液相芯片分析技术”、“流式荧光检测技术”、“微球悬浮阵列技术”等。
其技术原理为利用100 种不同荧光色的编码微球以共价交联的方式结合针对不同待测物的抗体分子或者基因探针，每个编码微球都对应相应的检测项目，再结合标记荧光素，后依次通过红绿激光分析其荧光编码和荧光强度，从而快速准确的定量检测待测物。
主要应用领域：1、细胞因子的定量检测，2、多重病原体检测，3、肿瘤标志物检测，4、HLA分型检测，5、HPV分型检测等。
目前国内应用比较成熟的，所用试剂有证的项目主要是肿瘤标志物的检测和HPV分型，我们所考察的西安四五一空军的医院主要开展的项目是肿瘤标志物的检测，在核医学科开展，日均标本量50人份，陕西妇幼医院主要开展HPV分型，在分子生物学实验室开展，月均标本量人份。
现有的肿瘤标志物检测的主流试剂属于化学发光免疫分析与电化学发光免疫分析两大类，前者以美国的雅培、贝克曼，德国的拜耳为代表，后者为瑞士罗氏的专利技术。
Luminex 流式荧光技术与化学发光、电化学发光技术一样同属发光类技术之一，具有灵敏度高、重复性好、线性范围广等优点，同时又由于其独特的检测原理，与化学发光/电化学发光比较具有其主要优势如下：1. 单次检测指标数多：流式荧光技术可多指标并行检测，1次最多可测100个指标。
化学发光是单指标检测，1次仅检测1个指标。
2. 联检速度快：300份9联检标本，需2700个tests，流式荧光技术仅需4个小时，而化学发光需12小时以上。
流式荧光技术最快可达10000测试/小时。
化学发光是80～150测试/小时。
3. 试剂成本低：流式荧光技术联合检测试剂用量很少，降低检测成本，比发光法低10%以上（以厂家报价和现罗氏试剂采购价比较,不包括其他耗材）。
液态芯片技术
检测核酸 检测抗原 检测抗体
悬液中的微球与被检测物特异性 地结合，并加上荧光标记。
检测：微球成单列通过两束激光， 一束判定微球的颜色从而决定被 测物的特异性（定性）；另一束 测定微球上的荧光标记强度从而 决定被测物的量（定量）。所得 到的数据经电脑处理后可以直接 用来判断结果。
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液态芯片 机理图
应 用
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液态芯片核心技术及其机理
杂交信号的激光 识别和定量分析
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液态芯片的技术
每个颗粒都 是一个独立 的、特异性 的反应单位。
针对不同临床 指标的颗粒可 以放在一个反 应体系内。
硬件和软件体 系具有区分上 百种检测物的 能力。
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４.
液态芯片优点
液态芯片的独特设计使得它拥有常规的检测方法所不具 备的特点： □高效：因为许多颜色的乳胶颗粒可以放在同一个反应体 系内，所以一次可同时检测多种（100种）生理病理指标。 这与传统逐个检测的方式效率有很大的不同。 □高敏感：每个乳胶微粒上都以共价结合的方式包被上许 多抗原、抗体或核酸分子，因其参与反应的分子多，产生的 信号就强。具Qiagen公司的报道，用该平台检测IL－8时， 其灵敏度为0.01pg，达到了非常惊人的水平。 □快速：因为杂交或免疫反应在悬浮的液相中进行，所以 反应需要时间短，杂交后常不用清洗就可以直接读数，所以 检测效率大大高于固相杂交。所用时间从几小时缩短到十几
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过敏源筛查 自身免疫病
细胞因子 内分泌和激素 感染性疾病检测
肿瘤标志物 自身免疫病
金属蛋白酶类
心血管疾病标志物 组织分型 激酶和磷酸化
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艾芯
精选9指标
肺芯
肺癌 4指标
消芯
消化系统肿瘤5 指标
Luminex多因子分析仪说明书
人类细胞因子/趋化因子磁珠组接收后的储存条件1.套件组件的建议储存温度为2-8℃2.标准品和质控品重新配制后，立即将内容物转移到聚丙烯小瓶中。
请勿将重新定位的标准品或质控品储存在玻璃瓶中。
对于长期储存，在-20℃下冷冻复原的标准品和质控品。
避免多次(> 2次)冻融循环。
3.不要冷冻固定抗体的珠子、检测抗体和链霉亲和素-藻红蛋白。
技术指南不要将试剂与其他批次或来源的试剂混合或替代。
固定抗体的珠子对光敏感，必须始终避光。
在所有培养步骤中，用不透明的板盖或铝箔盖住含有珠子的检测板。
在用于检测之前，让所有试剂升温至室温(20-25℃)非常重要。
不完全洗涤会对检测结果产生不利影响。
所有洗涤必须使用提供的洗涤缓冲液进行。
水合后，所有标准和控制必须转移到聚丙烯管中。
通过连续稀释制备的标准品必须在制备后1小时内使用。
丢弃任何未使用的标准品，标准品库存除外，标准品库存可在≤-20°c下储存1个月，在-80°c下储存超过1个月。
如果样品不在检测的动态范围内，用合适的稀释剂进一步稀释样品，并重复检测。
任何未使用的混合抗体固定化珠粒可在2-8℃下储存在珠粒混合瓶中长达一个月。
在标准曲线的制备过程中，确保在进行下一次稀释之前，将较高的浓度充分混合。
每次稀释时使用新的吸头。
检测完成后，应立即读取平板。
但是，如果不能立即读取该板，密封该板，用铝箔或不透明的盖子覆盖，并将该板在2-8℃下储存24小时。
阅读前，在室温下搅拌平板振荡器上的平板10分钟。
读取板的延迟可能导致某些分析物的灵敏度降低。
滴定板摇动器的速度应设定为提供最大的轨道混合，而不会将液体溅到孔外。
对于推荐的平板振动筛，这将是5-7的设置，大约是500-800转/分。
在Luminex 200上读取检测结果时，根据Luminex推荐的方案，使用3个校准盘将探针高度调整到试剂盒固体板或推荐的EMD Millipore过滤板。
在MAGPIX上读取检测结果时，根据Luminex推荐的方案，使用2个校准盘将探针高度调整到试剂盒固体板或推荐的EMD Millipore过滤板。
luminex液相芯片技术实验流程
Luminex液相芯片技术是一种高通量的生物分子检测平台，可以同时检测多种生物标志物。
实验流程大致如下：
1. 样本准备：根据实验需求，准备好待检测的样本。
样本可以是细胞培养上清液、血清、血浆等。
2. 微球准备：Luminex液相芯片使用的微球内部含有三种免疫荧光染料，通过不同的荧光比例来区分500种不同的微球。
微球上会偶联针对不同待测物的抗体或基因探针。
3. 实验设计：根据需要检测的标志物，选择相应的微球和试剂。
可以设计多重检测，一次实验可以检测多达100种不同的生物学反应。
4. 加样：将样本或PCR产物与微球混合，使所形成的复合物与标记荧光素发生反应。
5. 检测：将混合后的微球放入Luminex液相芯片检测系统。
该系统包括激光系统、光学系统、液流系统、液流控制系统以及先进的数字处理系统和高通量XY平台。
微球在流动鞘液的带动下快速单列通过检测通道，红色激光用于识别微球的荧光编码，绿色激光用于测定微球上结合的报告分子的荧光强度。
6. 数据分析：利用配套的分析软件对检测数据进行分析，得到定性和定量的结果。
7. 结果解读：根据实验设计和数据分析，解读检测结果。
需要注意的是，实验操作过程中应严格遵循实验室规范和操作指南，确保实验的准确性和可靠性。
芯片类检测：Luminex PLEXMAP BIOPLEX 液相芯片检测
sCD30 可溶性CD30
sCD40L可溶性CD40L
sEGFR可溶性表皮生长因子受体
sgp130 可溶性糖蛋白130
sIL-2Rα可溶性白细胞介素-2受体α
sIL-4R可溶性白细胞介素-4受体
sTNF RI 可溶性肿瘤坏死因子受体I
sTNF RII可溶性肿瘤坏死因子受体II
p70 S6 Kinase (Thr412) 磷酸化核糖体S6蛋白激酶β2抗体
STAT1 (Tyr701)磷酸化信号转导与转录激活因子1
STAT1 (Tyr707)磷酸化信号转导与转录激活因子1
STAT3 (Tyr705)磷酸化信号转导与转录激活因子3
STAT5A/B (Tyr694/699) 磷酸化信号转导与转录激活因子
ZAP-70 (pan Tyr)磷酸化zeta相关蛋白70
Syk (pan Tyr)磷酸化非受体型酪氨酸蛋白激酶
Active Caspase 3 活化半胱胺酸蛋白酶 3
Active Cleaved PARP活化切割的多腺苷二磷酸多聚酶
ATF2 (Thr69/71)活化复制因子2
BAD (Ser112)磷酸化相关死亡促进因子
IFNγ干扰素γ
IL-10白介素-10
IL-12 (p70) 白介素-12
IL-13白介素-13
IL-17白介素-17
IL-1ra白介素-1ra
IL-2白介素-2
IL-20 白介素-20
IL-28a 白介素-28a
IL-29 白介素-29
IL-4 白介素-4
IL-5 白介素-5
IL-8 白介素-8
IL-9 白介素-9
sIL-1RII可溶性白细胞介素-1受体II
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液态芯片检测仪——Luminex 100 TM 多功能流式点阵仪
说明
类型液态芯片检测仪
报价$000.00
生产厂商
国别
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液芯简介：
液态芯片，又称悬浮阵列、流式荧光技术，是基于美国Luminex 公司研制的多功能流式点阵仪（Luminex 100™）开发的多功能生物芯片平台，它有机地整和了编码微球（color-codedbeads）、激光技术、应用流体学、最新的高速数字信号处理器和计算机运算法则，造就了其无与伦比的检测特异性和灵敏度，可广泛应用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体和配体识别分析等研究，也是是目前唯一得到权威机构和医学界共同认可用于临床诊断的生物芯片平台。
具有三大核心优势：
∙一次检测，100个指标
∙既能检测蛋白，又能检测核酸
∙既能用于临床，又能用于科研
液芯原理：
液态芯片是一种全新概念的生物芯片。
该技术的核心是把微小的聚苯乙烯小球（5.6um）用荧光染色的方法进行编码（微球的颜色是通过两种荧光染料染色得到的，调节两种荧光染料的比例可以获得100种不同颜色的微球），然后将每种颜色的微球（或称为荧光编码微球）共价交联上针对特定检测物的探针、抗原或抗体。
应用时，先把针
对不同检测物的编码微球混合，再加入微量待检样本，在悬液中靶分子与微球表面交联的分子进行特异性地结合，在一个反应孔内可以同时完成多达100种不同的生物学反应。
最后用Luminex™100进行分析，仪器通过两束激光分别识别编码微球和检测微球上报告分子的荧光强度。
因为分子杂交或免疫反应是在悬浮溶液中进行，检测速度极快，而且可以在一个微量液态反应体系中同时检测多达100个指标。
权威认证：
1997年，《临床化学》杂志刊登专文介绍多功能流式点阵仪及其技术，并将其誉为“真正的临床应用型生物芯片”。
随后，运用多功能流式点阵仪及其技术进行临床诊断和基础研究成为生命科学研究领域的一大热点，相关的研究论文频频刊登在《临床化学》、《临床与诊断免疫学》、《临床微生物》、《基因组研究》、《蛋白质组研究》、《癌症》等国际权威学术杂志上。
2001年7月27日，INOVA公司的ENA系列流式点阵试剂率先通过美国FDA的严格认证，标志着多功能流式点阵仪及其技术得到了美国官方的高度认可，并由此成为首个，也是目前唯一得到美国FDA 许可用于临床诊断的多指标并行检测技术。
2005年6月9日，基于xMAP技术的学术论文刊登在当日出版的《自然》杂志上，这是学术界认可一项技术所能给予的最高荣誉。
2005 年11 月，为了表彰其对临床诊断技术进步做出的革命性贡献，全球科技产业和行业研究的权威机构――Frost & Sullivan――授予xMAP技术“2005年度国际临床诊断技术革新大奖”，标志着xMAP技术在国际临床诊断技术领域的领军地位得到了最具权威的认可。
Luminex 200多功能流式荧光点阵仪
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Luminex 200多功能流式点阵仪
Luminex 200 多功能流式点阵仪 Luminex-流式荧光技术（又称液态芯片）是美国Luminex公司推出的最新一代的标准化高通量检测技术平台。
其最大的特点是一次反应最多可同时检测100种指标，既可以检测蛋白，也可以检测基因。
该技术因其革命性的技术进步获得了全球科技产业和行业研究的权威机构――Frost & Sullivan――授予的"2005年度国际临床诊断技术革新大奖"，是唯一得到美国FDA批准的，也是唯一被纳入美国临床实验室质控网络的高通量诊断技术。
被国际业界专家评价为临床诊断的趋势性技术之一。
透景科技唯一提供有SFDA注册证的流式荧光配套试剂的公司
技术特点：
一次反应，最多可同时检测100个指标
既可以检测蛋白，也可以检测核酸
高通量：1次检测，仅需10µl样本，最多可达100个指标
高速度：最快可达10000测试/小时
低成本：流式荧光技术联检的试剂用量少，能有效降低临床应用的成
本Luminex-流式荧光技术（又称液态芯片）是美国Luminex公司推出的最新一代灵敏度高：检测低限可达10pg/ml 重复性好：每个指标有5000个反应单元，分析100次取均值线性范围广：检测范围达3.5-5个数量级无
需洗涤：减少误差来源，操作简便，省时省力
详情请查看。