长链非编码 RNA 在胃癌中的研究进展论文

ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１００９－９１５８．２０１６．０８．００５作者单位：２２６００１南通大学附属医院检验医学中心（罗茜、王峰、鞠少卿），外科综合实验室（申娴娟）通信作者：鞠少卿，电子信箱：ｊｓｑ８１４＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ・专家论坛・长链非编码ＲＮＡ在胃癌中的研究进展罗茜王峰申娴娟鞠少卿【摘要】 长链非编码ＲＮＡ（ｌｎｃＲＮＡ）是一类长度大于２００ｎｔ，不具备蛋白质编码功能的ＲＮＡ分子。

近年来研究显示，ｌｎｃＲＮＡ参与表观遗传修饰，在基因表达调控中起重要作用。

本文就ｌｎｃＲＮＡ与胃癌的发生发展、辅助诊断、化疗耐药产生及预后评估等相关方面的研究做一总结。

（中华检验医学杂志，２０１６，３９：５７８－５８０）【关键词】 胃肿瘤； ＲＮＡ，长链非编码； 生物学标记基金项目：国家自然科学基金（８１２７１９２０、８１３０１４９８）；江苏省“科技兴卫工程”创兴团队项目（ＬＪ２０１１３３）Ｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｎｌｏｎｇｎｏｎ－ｃｏｄｉｎｇＲＮＡｉｎｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒＬｕｏＸｉ*，ＷａｎｇＦｅｎｇ，ＳｈｅｎＸｉａｎｊｕａｎ，ＪｕＳｈａｏｑｉｎｇ．*ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＭｅｄｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，ｔｈｅＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＮａｎｔｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｔｏｎｇ２２６００１，ＣｈｉｎａＣｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＪｕＳｈａｏｑｉｎｇ，Ｅｍａｉｌ：ｊｓｑ８１４＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｌｏｎｇｎｏｎ－ｃｏｄｉｎｇＲＮＡｓａｒｅａｎｏｖｅｌｃｌａｓｓｏｆｎｏｎ－ｐｒｏｔｅｉｎｃｏｄｉｎｇＲＮＡｍｏｌｅｃｕｌｅｓｗｉｔｈｍｏｒｅｔｈａｎ２００ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓｉｎｌｅｎｇｔｈ．Ｒｅｃｅｎｔｌｙ，ｍｏｕｎｔｉｎｇｅｖｉｄｅｎｃｅｈａｓｂｅｅｎｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄｔｈａｔｌｎｃＲＮＡｓｐｌａｙｃｒｕｃｉａｌｒｏｌｅｓｉｎｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ．ＴｈｉｓｒｅｖｉｅｗａｉｍｓｔｏｓｕｍｍａｒｉｚｅｃｕｒｒｅｎｔｋｎｏｗｌｅｄｇｅｏｆｌｎｃＲＮＡｓｉｎｔｈｅｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ，ｃｌｉｎｉｃａｌｄｉａｇｎｏｓｉｓ，ｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅａｎｄｐｒｏｇｎｏｓｉｓｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎｏｆｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒ．（ＣｈｉｎＪＬａｂＭｅｄ，２０１６，３９：５７８－５８０）【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】 Ｓｔｏｍａｃｈｎｅｏｐｌａｓｍｓ； ＲＮＡ，ｌｏｎｇｎｏｎｃｏｄｉｎｇ； ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌｍａｒｋｅｒｓＦｕｎｄｐｒｏｇｒａｍ：ＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ（８１３０１４９８，８１２７１９２０）；ＪｉａｎｇｓｕＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＰｒｏｇｒａｍｆｏｒＭｅｄｉｃａｌＩｎｎｏｖａｔｉｏｎＴｅａｍｓａｎｄＬｅａｄｉｎｇＴａｌｅｎｔｓ（ＬＪ２０１１３３）胃癌是最常见的消化道肿瘤之一，为全球第二大致死性疾病，东亚和拉美是胃癌的高发区［１］。

胃癌的发病机制非常复杂，遗传因素、吸烟等都可能导致胃癌。

尽管胃癌死亡率逐年下降，但多数患者被确诊时已处于晚期，且复发及化疗耐药性的存在，致使患者预后状况较差。

因此，探索胃癌发生发展的分子机制，寻找切实有效的分子标志物作为早期诊断、疗效观察及预后评估的依据，提高胃癌患者的生存质量已迫在眉睫。

随着基因芯片及高通量测序技术的发展，研究者逐渐发现，人类基因组中仅有３％的编码蛋白基因，其余大部分为非编码ＲＮＡ（ｎｃＲＮＡ）［２］。

非编码ＲＮＡ主要包括长链ＲＮＡ以及小ＲＮＡ，长链ＲＮＡ是长度超过２００ｎｔ的非编码ＲＮＡ（ｌｏｎｇｎｏｎ－ｃｏｄｉｎｇＲＮＡｓ，ｌｎｃＲＮＡｓ），小ＲＮＡ以微小ＲＮＡ（ｍｉｃｒｏＲＮＡ，ｍｉＲＮＡ）、小干扰ＲＮＡ（ｓｈｏｒｔｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇＲＮＡ，ｓｉＲＮＡ）等为代表。

ｌｎｃＲＮＡｓ参与许多疾病的病理生理过程，尤其在肿瘤的发生发展中，ｌｎｃＲＮＡｓ通过表观遗传、转录及转录后水平调控相应的靶基因，进而参与肿瘤细胞的侵袭转移及化疗耐药等进程。

虽然还不清楚绝大部分ｌｎｃＲＮＡｓ的致病机制，但现有研究表明，ｌｎｃＲＮＡｓ的异常表达与胃癌的发生发展、辅助诊断及预后评估密切相关，并可能作为诊断标志物和潜在的治疗靶点。

一、ｌｎｃＲＮＡ在胃癌发生发展中的作用胃癌发生发展过程中，常伴有ｌｎｃＲＮＡｓ的表达失调，异常表达的ｌｎｃＲＮＡｓ会影响表观遗传信息，从而导致肿瘤“疯长”。

有效控制细胞生长，对预防及治愈胃癌至关重要。

因此，识别胃癌相关ｌｎｃＲＮＡｓ并确认其生物学功能，可为诊断、治疗胃癌提供新的思路。

（一）具有致癌作用的ｌｎｃＲＮＡｓ分子１．ＨＯＸ基因反义基因间ＲＮＡ（ＨＯＸａｎｔｉｓｅｎｓｅｉｎｔｅｒｇｅｎｉｃＲＮＡ，ＨＯＴＡＩＲ）：因其参与原发性乳腺癌发生及乳腺癌的转移而被众人所知。

ＨＯＴＡＩＲ在胃癌组织中呈高表达，且与淋巴转移、ＴＮＭ分期相关。

Ｌｉｕ等［３］发现，ＨＯＴＡＩＲ可与ｍｉＲ－３３１－３ｐ结合，形成竞争性内源ＲＮＡ（ｃｏｍｐｅｔｉｎｇｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓＲＮＡ，ｃｅＲＮＡ）调控网络，从而激活相应信号通路，促进肿瘤细胞的侵袭转移。

２．鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体Ｂ１激活的非编码ＲＮＡ（ｖ－ｒａｆｍｕｒｉｎｅｓａｒｃｏｍａｖｉｒａｌｏｎｃｏｇｅｎｅｈｏｍｏｌｏｇＢ１－ａｃｔｉｖａｔｅｄｎｏｎ－ｐｒｏｔｅｉｎｃｏｄｉｎｇＲＮＡ，ＢＡＮＣＲ）：Ｆｌｏｃｋｈａｒｔ等［４］发现干扰ＢＡＮＣＲ会导致８８种细胞迁移相关基因的表达异常。

体外沉默ＢＡＮＣＲ会使胃癌细胞活力下降、凋亡增加、ＮＦ－κＢ１表达下降，提示ＢＡＮＣＲ可能通过ＮＦ－κＢ参与胃癌的发生、发展［５］。

（二）具有抑癌作用的ｌｎｃＲＮＡｓ分子１．母系表达基因３（ｍａｔｅｒｎａｌｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄｇｅｎｅ３，ＭＥＧ３）：研究表明，高甲基化导致的启动子区沉默，是造成胃癌细胞中ＭＥＧ３低表达的部分原因。

此外，转染ＭＥＧ３会导致肿瘤细胞中ｐ５３表达的显著上升。

Ｂｅｎｅｔａｔｏｓ等［６］发现，ｐ５３激活需要ＭＥＧ３转录本全长，而非几个转录本的随机聚集。

以上结果提示，ＭＥＧ３转录本全长激活ｐ５３，从而在胃癌中发挥抑癌基因的作用。

２．生长抑制特异性基因５（ｇｒｏｗｔｈａｒｒｅｓｔ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ５，Ｇａｓ５）：Ｓｕｎ等［７］发现Ｇａｓ５在胃癌组织、细胞中表达下调，胃癌细胞中Ｇａｓ５的上调会抑制细胞增殖、促进凋亡；虽然过表达Ｇａｓ５会引起下游细胞周期调控因子ｐ２１上调，但变化仅发生在蛋白水平，ｍＲＮＡ水平并无明显改变，提示Ｇａｓ５可能在转录后水平调节ｐ２１，从而起到抑癌作用。

二、ｌｎｃＲＮＡ在胃癌辅助诊断和预后评估中的作用（一）外周血中的游离ｌｎｃＲＮＡｓ作为诊断标志物血清学标志物因其简便易测且创伤性小，是良好的辅助诊断手段，但ＣＥＡ、ＣＡ１９－９等传统血清学标志物，缺乏足够的灵敏度和特异性，因此，寻找辅助早期诊断的血清标志物十分必要。

研究表明，血清中肿瘤特异性或相关游离核酸的变化能辅助诊断胃癌。

Ｚｈａｎｇ等［８］发现，部分游离ｌｎｃＲＮＡｓ在肿瘤患者外周血中过度或低表达，或许能用来诊断或辅助诊断癌症。

印迹母系表达转录本（ｉｍｐｒｉｎｔｅｄｍａｔｅｒｎａｌｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ，Ｈ１９）是被发现与癌症相关的首个ｌｎｃＲＮＡ。

Ａｒｉｔａ等［９］发现胃癌患者血浆Ｈ１９表达明显高于正常人，ＲＯＣ曲线下面积为０．６４，取０．３２为截断点，敏感度、特异度分别为７４％、５８％。

此外，通过对２０例胃癌患者追踪观察，发现术后患者血浆中Ｈ１９明显下降。

以上均提示Ｈ１９可用于辅助诊断胃癌。

Ｄｏｎｇ等［１０］从３９个癌症相关的ｌｎｃＲＮＡｓ中，选出差异表达明显的１７个，并用３０例胃癌患者及３４名正常人验证，发现ＣＵＤＲ，ＬＳＩＮＣＴ－５及ＰＴＥＮＰ１这３种ｌｎｃＲＮＡｓ联合诊断胃癌的效能最佳，ＲＯＣ曲线下面积０．９２，远优于传统的血清学诊断标志物ＣＥＡ（０．５７４）、ＣＡ１９－９（０．５８０）。

以上研究表明，游离ｌｎｃＲＮＡｓ分子作为新型诊断标志物，具有较好的潜在临床应用价值。

（二）胃癌组织中特异表达的ｌｎｃＲＮＡｓ可作为潜在的预后分子标志物大多数胃癌患者确诊时已处于疾病晚期，虽然扩大根治术及化疗技术改进很多，但是晚期患者预后状况仍不尽如人意。

ｌｎｃＲＮＡｓ在胃癌组织中的差异性表达提示其具有潜在的肿瘤进展、预后评估功能，可能会是疾病监测的一种有效标志物。

１．尿路上皮癌相关抗原１（ｕｒｏｔｈｅｌｉａｌｃａｎｃｅｒａｓｓｏｃｉａｔｅｄ１，ＵＣＡ１）：差异性表达于各种胎儿组织，而大多数成人组织不表达，在肿瘤形成过程中再次表达。

Ｚｈｅｎｇ等［１１］研究发现，ＵＣＡ１在胃癌组织中高表达，且和肿瘤的侵犯深度及术后生存相关。

值得关注的是，在胃癌患者的胃液中也检测到ＵＣＡ１水平的升高，因为胃液的获取相对简单、创伤性小，所以ＵＣＡ１在胃癌的诊断、预后评估等方面具有良好的临床应用潜能。

２．ＦＯＸＦ１毗连非编码发育调控ＲＮＡ（ＦＯＸＦ１ａｄｊａｃｅｎｔｎｏｎ－ｃｏｄｉｎｇｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌｒｅｇｕｌａｔｏｒｙＲＮＡ，ＦＥＮＤＲＲ）：ＢｅｒｎｈａｒｄＨｅｒｒｍａｎｎ团队们将特异性表达在心脏和腹侧体壁祖细胞中的一种ｌｎｃＲＮＡ称为ＦＥＮＤＲＲ。

Ｘｕ等［１２］发现ＦＥＮＤＲＲ在胃癌组织中的表达水平显著低于临近非肿瘤组织。

此外，ＦＥＮＤＲＲ表达也是胃癌患者不良预后的一个独立因素。

以上结果表明ＦＥＮＤＲＲ下调与胃癌进展相关，可能是预测患者预后的潜在分子生物标记。

虽然ｌｎｃＲＮＡｓ在胃癌的辅助诊断方面表现出巨大的临床应用潜力，但是绝大多数循环ｌｎｃＲＮＡｓ的稳定性尚不清楚，检测到的随疾病动态变化的ｌｎｃＲＮＡｓ来源也是未知的，同时也缺乏简单易行的标准化ｌｎｃＲＮＡｓ检测方法，以上问题在一定程度上限制了ｌｎｃＲＮＡｓ在疾病诊断、预后方面的临床应用，还需要大量的研究去探索和验证。

三、ｌｎｃＲＮＡ在胃癌化疗耐药中的作用化疗是不能手术的晚期胃癌患者的主要治疗手段，然而，多药耐药带来的化疗失败已成为治疗胃癌的棘手问题。

多药耐药的复杂机制至今仍未被阐明。

目前已有研究者将目光投向ｌｎｃＲＮＡｓ，研究某些ｌｎｃＲＮＡｓ分子对重要耐药相关基因的影响及机制，这或许能逆转胃癌耐药、并为促进更好治疗甚至治愈胃癌提供新的靶点。

（一）人浆细胞瘤转化迁移基因（ｐｌａｓｍａｃｙｔｏｍａｖａｒｉａｎｔｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ，ＰＶＴ１）Ｚｈａｎｇ等［１３］证实ＰＶＴ１在顺铂耐药的胃癌细胞中表达升高，提示ＰＶＴ１与胃癌顺铂耐药有一定的关系；在耐药细胞中过表达ＰＶＴ１，其耐药性增加，多药耐药相关基因表达明显上升，反之亦然。