行为实验操作详解版
行为学具体标准操作方法及注意事项
行为学具体标准操作方法及注意事项一、慢性社会挫败应激模型（Chronic social defeated stress）:①选取一定数量的CD1小鼠作为攻击性小鼠，在正式实验前2-3周开始对其攻击性进行蹄选。
具体方法：将CD1雄鼠单独饲养一段时间，让其产生领地意识；也有文献报道采用雌雄CD1同笼喂养来产生领地意识的[1]，但这样做用一个弊端，雌性CD1小鼠会怀孕。
1周以后，随机放入一只陌生C57的小鼠作为领地入侵者，计时，记录CD1雄小鼠第一次对C57小鼠发动攻击的时间，并记录180s 内CD1攻击C57的次数；也有文献以CD1雄性小鼠在1min之内对C57小鼠发动攻击视为攻击性CD1小鼠[1、2]。
②连续筛选三天，以三天均有攻击C57小鼠为准，原则上CD1小鼠在60s 内发起攻击，且在180s内攻击次数大于2次及以上。
③将CD1转移到大的笼子内时，要注意统一将CD1小鼠放至左侧，并保证大笼中的隔板固定，以防止CD1跑到右侧来。
④正式实验前，选取雄性C57小鼠（7周），打耳标，分笼，给予正常饮食饮水一周充分适应环境，根据糖水偏好实验，旷场实验，交互实验和强迫游泳测试等的结果，将C57小鼠分为对照组和挫败组。
⑤当实验幵始时，提前分离CD1雌鼠，取挫败组C57小鼠一只，直接放入陌生CD1雄性小鼠（8-9周）饲养笼中，使C57小鼠遭受雄性CD1小鼠持续性攻击约5-10min。
⑥然后将两只小鼠用带有密集小孔的透明塑料隔板隔开，使两只小鼠彼此仍能互视和闻嗅但是无法接触，运用这种方法持续到下次进行攻击前为止，完成该过程后即为第一天应激。
⑦第二天再将该C57鼠放入另一不同的CD1雄性鼠的笼中，使C57小鼠受到相同程度的应激；第三天再放入到第三只CD1雄性鼠的笼中，同样使C57小鼠受到同样程度的应激。
如此连续应激10天，并保证每天同一只C57小鼠受到不同CD1雄性鼠的攻击。
在此期间，对照组和挫败组C57小鼠均维持正常饮食饮水，而对照组则保持2只一笼，每天相互更换接触不同的小鼠[2]。
行为实验操作详解版
行为实验操作: 行为实验时间：；日程安排：Handling :9:00-12:00,共 4 天，每天每只2-3 min。
Behavioral tests：Dayl旷场实验：无适应，光照30 lux，测试时间10 min ;将小鼠放在旷场实验箱一角，使用Anymaze自动分析小鼠总移动距离、在中心区（中心25*25cm2）的时间、静止的时间等。
Day2明暗箱实验：无适应，暗箱光照10 lux，明箱光照650 lux，测试时间5min ;测试开始时小鼠放在暗箱，使用Anymaze自动分析小鼠进入明箱次数、在明箱时间、在明箱的运动距离。
Day3高架十字无适应，开臂光照40 lux，测试时间5min，将小鼠放在中心区域，并保证小鼠的头朝向开臂。
记录小鼠在开、闭臂移动的总距离、时间、低头次数等。
Day4自发性交替实验：无适应，光照10-30 lux，测试时间8 min ;测试开始时小鼠放在Y迷宫中心区，手动分析交替次数、进入臂的总次数、AAR、SAR、总活动距离5个指标。
在做自发性交替实验时，在操作箱的壁上挂上立体参照物。
Day5适应光照30 lux，在矿场实验箱中间放置一物体，鼓励小鼠探索，测试时间10 min，一小时后重复一次。
Day6新物体识别光照30 lux，在矿场实验箱两对角线对称放置物体A，测试时间10 min，一小时后将其中一物体换另一新物体B，测试时间10 min。
记录两次试验小鼠对各物体的探测次数、时间、移动总距离等。
Day7适应光照30 lux，在矿场实验箱中间放置一物体，鼓励小鼠探索，测试时间10 min，一小时后重复一次。
Day8空间物体识别光照30 lux，在矿场实验箱两对角线对称放置物体A，测试时间10 min，一小时后将其中一物体的位置改变，测试时间10 min。
记录两次试验小鼠对各物体的探测次数、时间、移动总距离等。
在操作箱的壁上挂上立体参照物。
Day8适应光照30 lux，在矿场实验箱中间放置一物体，鼓励小鼠探索，测试时间10 min，重复3次, 每次间隔一小时。
最新DMDX及行为实验简介教学讲义ppt
t2000 ：time out ，即规定被试反应的时间范围（2000毫 秒）。如果被试在这一范围内不做反应，程序将继续进行，并在 结果文件中把该项目的反应时记录为 -2000。
（二）DMDX
用 Browse 浏 览 目 录 ， 找 到 目 标 控 制 文 件 并 打 开 ， 接 着 用 Syntax Check 检查一下该文件是否能够运行，如果中间出错，可以回头检 查原有的控制文件，如果没有错误，则可以运行（Run）。
1、实验材料的编排
挑选、编排实验材料一般在EXCEL表格中完成。 每个实验应该在EXCEL表格头部注明名称及实验方法。 实验一般分为实验材料（critical）、填充材料(filler)和练习
选择 “ Vertical Retrace Sync Thread”，如下 图
点击 “ Do Test” 屏幕出现下图
结果参数中，Certain Errors的数值一般非常低，常常为0， Multiply Timedout和Timedout一般高一些，Timedout和 Millisectime的比率一般是非常低的。如果上述三个主要参数的数 值过高，可以考虑重新选择较低级的显示模式，在重复前面两步。
d200 ：前后两个项目之间的时间间隔（2秒），即前一个项目 结束到下一个项目开始之间的间隔。
<!safemode 1>：一种安全模式，允许实验中途退出（按Esc）。
<mr +g> <mnr +f> <mpr +h>：Map button to Request（g）、Map button to Negative Response （ f ） 、 Map button to Positive Response（h），分别表示启动键（g）、负反应键（f）和正反应键 （h），这三个键可以随便定义。
行为实验方法
2.1 物体识别实验检测实验动物的非空间认知能力。
Object recognition testThe test apparatus was a white, open-field plastic box (60 cm × 50 cm ×40 cm) placed in a sound-proof testing room, which was lit by constant illumination (about 40 lx) to eliminate shadows. The discriminated objects (A, B and C) were identically-sized (5 cm× 5 cm× 5 cm), cuboid, woody blocks. Objects A and B were black, whereas object C had a black and-white pattern. Each of the three objects was sufficiently heavy to prevent the mice from moving it.The ORT consisted of two phases:the sample trial and the test trial (Fig. 2A). In order to acclimate the mice, each was first placed into an empty box for 5 min. Subsequently, during the sample trial the two identical objects (A and B) were placed on opposite sides (at a distance of 8 cm from the walls and 34 cm from each other). To start a 5-minute period of exploration, each animal was placed in the middle of the two objects. After this period, they were returned to their home cages for an interval of 4 h.In the test trial, object B was replaced by object C, which was novel to the mice and different from either object A or B. The mice were then left to explore objects A and C for 5 min. The animals' behavioral performances during the tests were video-taped and the exploration time of the sample and test phases for each of the three objects was recorded by a trained observer.2.2 物体定位实验检测实验动物的空间认知能力。
行为实验操作详解版
行为实验操作：行为实验时间：；日程安排：Handling：9:00-12:00，共4天，每天每只2-3 min。
Behavioral tests：Day1 旷场实验：无适应，光照30 lux，测试时间10 min；将小鼠放在旷场实验箱一角，使用Anymaze自动分析小鼠总移动距离、在中心区（中心25*25cm2）的时间、静止的时间等。
Day2 明暗箱实验：无适应，暗箱光照10 lux，明箱光照650 lux，测试时间5min；测试开始时小鼠放在暗箱，使用Anymaze自动分析小鼠进入明箱次数、在明箱时间、在明箱的运动距离。
Day3 高架十字无适应，开臂光照40 lux，测试时间5min，将小鼠放在中心区域，并保证小鼠的头朝向开臂。
记录小鼠在开、闭臂移动的总距离、时间、低头次数等。
Day4 自发性交替实验：无适应，光照10-30 lux，测试时间8 min；测试开始时小鼠放在Y迷宫中心区，手动分析交替次数、进入臂的总次数、AAR、SAR、总活动距离5个指标。
在做自发性交替实验时，在操作箱的壁上挂上立体参照物。
Day5适应光照30 lux，在矿场实验箱中间放置一物体，鼓励小鼠探索，测试时间10 min，一小时后重复一次。
Day6新物体识别光照30 lux，在矿场实验箱两对角线对称放置物体A，测试时间10 min，一小时后将其中一物体换另一新物体B，测试时间10 min。
记录两次试验小鼠对各物体的探测次数、时间、移动总距离等。
Day7适应光照30 lux，在矿场实验箱中间放置一物体，鼓励小鼠探索，测试时间10 min，一小时后重复一次。
Day8空间物体识别光照30 lux，在矿场实验箱两对角线对称放置物体A，测试时间10 min，一小时后将其中一物体的位置改变，测试时间10 min。
记录两次试验小鼠对各物体的探测次数、时间、移动总距离等。
在操作箱的壁上挂上立体参照物。
Day8适应光照30 lux，在矿场实验箱中间放置一物体，鼓励小鼠探索，测试时间10 min，重复3次，每次间隔一小时。
PD模型行为学实验
行为学实验各组小鼠于实验前5天每日进行2次爬杆、悬挂行为训练。
分别于实验前1天(首次注射MPTP前1天),第7天(注射药物后1小时),第14天和第21天上午10:00(天元冲剂灌胃后1小时)进行爬杆和悬挂行为学观察以检测其肢体运动协调情况。
详细为爬杆实验(pole test)[7]:将一直径为2·5cm的泡沫塑料小球固定于一根长60cm、粗1cm的木杆顶端,木杆上缠2层纱布以防打滑。
将小鼠放到球顶,记录以下3个时间:小鼠爬完杆长的上半部分所需时间; 小鼠爬完杆长的下半部分所需的时间; 小鼠爬完杆长的全长所需时间。
按以下标准打分:3秒内完成上述某一动作记3分;6秒内完成记2分;超过6秒记1分。
悬挂实验(traction test)[8]:将小鼠双前肢悬挂于一水平电线上,如小鼠用双后肢抓住电线记3分;仅用一只后肢抓住电线记2分;两只后肢均抓不住记1分;小鼠跌落记为0分[7]DonnanGA,WillisGL,KaezmarczykSJ,etal·Motorfunetioninth1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahy dmpyridine-treated mouse[J]·J NeuroS-ci,1987,77:185-19·[8]殷盛明,于德钦·MPTP对小鼠空间学习和记忆能力的影响[J]·中国行为医学科学,2005,14(1):18-20·自主活动计数参照Kawai H［1］的测试方法，自制30 cm×30 cm×15 cm的有机玻璃盒，底部刻出6 cm×6 cm的格子，在恬静、光线较暗的环境中检测.小鼠适应环境10 min后，计数5 min内小鼠移动的格子数，连续测5次取平均值. 中央格停留时间、跨格数（一三爪或三爪以上进入一格为准）、直立次数、清洁次数及粪便粒数。
Rotarod检测Rotarod实验需要动物在滚轴上保持平衡并连续运动，是广泛采用的检测运动协调性的实验.滚轴直径6 cm，转速20 r/min，连续测20次取平均值.游泳实验参照Donnan GA［2］的测试方法，将受试小鼠放入一个20 cm×30 cm×20 cm规格的有机玻璃水箱中，水深10 cm，水温为22～25℃.评分标准如下摘要：在1 min内能连续不断游泳者记30分；大部分时间游泳仅偶然漂浮者记25分；漂浮时间占整个受试时间50％以上者记20分；偶然游泳者记15分；偶然用后肢游动并漂浮在水箱一边者记10分.检测5次取平均值.［1］Kawai H, Makino Y, Hirobe M, et al. Novel endogenous 1,2,3,4tetrahydroisoquinoline derivatives摘要: Uptake by dopamine transporter and activity to induce parkinsonism ［J］. Neurochem, 1998;70摘要:745-751.［2］Donnan GA, Willis GL, Kaczmarczyk SJ, et al.Motor function in the 1methyl4pheny1,2,3,6tetrahydropyridinetreated mouse ［J］.J Neurol Sci, 1987;77(2-3)摘要:185-191.依据我们对鱼藤酮PD大鼠模型建立的神经行为学评分体系[5],将大鼠行为变化分6个等级记分:①大鼠出现拒捕行为减弱、竖毛、毛色变黄变脏、弓背、主动活动减少,记1分。
行为学方案,新物体,水迷宫,埋珠实验,重复行为,社交
一．埋珠实验方案：在鼠笼里铺上5cm厚玉米芯垫料，铺平；里面放入20个玻璃珠（直径15mm），分五排，每排4个，规律排布。
将老鼠放入笼中，摄像30min；将垫料铺平后重复利用（文献上说可以重复），统计所埋玻璃珠的数量（被埋体积大于50%）。
二．新物体识别方案：物体识别：开始前，将老鼠放入箱子中适应十分钟，2h后测量物体识别。
在箱子里放入两个相同的物体（1,2），分别置于相对的角落，将老鼠放入箱子中探索10min；30min后将物体（1）换成一个新的物体（3），让老鼠探索10min，测量老鼠接触物体的时间（老鼠接触物体距离应小于1英寸）。
24h后将物体（2）换成一个新的物体（4），将老鼠放入箱子中探索10min。
每测量完一只老鼠，需要用75%的乙醇擦拭箱子。
方位识别：开始前，将老鼠放入箱子中适应十分钟，2h后测量方位识别。
在箱子里放入两个相同的物体，分别置于相对的角落，将老鼠放入箱子中探索10min；20min或者24h后将其中一个物体变换一个位置（分别用不同组老鼠测量），让老鼠探索10min，测量老鼠接触物体的时间（老鼠接触物体距离应小于1英寸）。
每测量完一只老鼠，需要用75%的乙醇擦拭箱子。
三．重复性为方案：将老鼠放入空鼠笼适应10min，笼中不放垫料；之后将老鼠放入笼中，录像10min，记录老鼠理毛以及站立的时间。
每测量完一只老鼠，需要用75%的乙醇擦拭箱子。
四．三箱社交试验方案：1：箱子一边放鼠（1），另一边放入空笼子，实验鼠放入中间箱子，通道隔板打开，录像十分钟。
2：箱子一边放鼠（1），另一边放入鼠（2），实验鼠放入中间箱子，通道隔板打开，录像十分钟。
3: 第2步做完之后，将实验鼠单独与鼠（2）接触45min，24h后箱子一边放入鼠（2），另一边放鼠（3），实验鼠放入中间箱子，通道隔板打开，录像十分钟。
注：开始前将老鼠放入中间箱子适应五分钟，两边的通道关闭。
放入笼中的老鼠为同年龄未与实验鼠接触过的C57雄鼠。
健康行为实际操作项目
健康行为实际操作项目1、身高的测量1）测量方法：被测量者赤脚，“立正”姿势站在身高计的底板上，脚跟、骶骨部及两肩胛间紧靠身高计的立柱上。
测量者站在被测量人的左右均可，将其头部调整到耳屏上缘与眼眶下缘的最低点齐平，再移动身高计的水平板至被测量人的头顶，使其松紧度适当，即可测量出身高。
2）测量要求：每次测量身高均应赤脚，并在同一时间（早晨更准确），用同一身高计，身体姿势前后应一致，身高计应放在地面平坦并靠墙根处。
每次测量身高最好连续测两次，间隔30秒。
两次测量的结果应大致相同。
身高计的误差不得超过0.5厘米。
2、体重的测量体重测量时应先脱去衣裤鞋袜后进行，称重时不可接触物体或摇动，且站立于站板中央一般早晨空腹排便后体重最稳定，因此这是体重最佳的检测时间。
3、脉搏的测量脉搏是由心脏的收缩使血液通过动脉所产生的节律性搏动。
测量脉搏一般是测量手腕拇指侧桡动脉为多（中医常在此诊脉）。
测量脉搏前要保持安静，取坐或卧位。
检查者用食指、中指和无名指并拢按动脉搏动处，以指尖触诊。
除测量每分钟的跳动次数外，还应注意脉搏的节律和有无不规则的搏动、脉搏跳动的强弱等。
4、体温的测量每日早晨睡醒后不要讲话，不活动，不起床，立刻测量口腔(或肛门、腋下)体温3分钟以上。
使用前要先将温度计度数甩到35℃以下。
将体温计置於腋下最顶端，水银端和腋下的皮肤紧密接触并夹紧，以免脱位或掉落。
取出体温计，读取温度数据后，以卫生纸擦拭体温。
5、刷牙的正确方法上牙从上往下刷，下牙从下往上刷，咬合面来回刷。
每次刷牙3-----5分钟。
早晚各刷一次。
6、做眼保健操的正确姿势眼保健操的正确姿势：第一节：揉天应穴.以左右大拇指的罗纹面按左右眉头上下眶角处（天应穴），其他四指弯曲如弓状支持在前额头上，按揉面不需要大（节拍8×8）。
第二节：挤按睛明穴.以左手或右手大拇指与食指挤按鼻根两侧（睛明穴），先向下按，后向上挤，一按一挤共一拍（节拍8×8）。
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行为实验操作：
行为实验时间：；
日程安排：
Handling：
9:00-12:00，共4天，每天每只2-3 min。
Behavioral tests：
Day1 旷场实验：
无适应，光照30 lux，测试时间10 min；将小鼠放在旷场实验箱一角，使用Anymaze自动分析小鼠总移动距离、在中心区（中心25*25cm2）的时间、静止的时间等。
Day2 明暗箱实验：
无适应，暗箱光照10 lux，明箱光照650 lux，测试时间5min；测试开始时小鼠放在暗箱，使用Anymaze自动分析小鼠进入明箱次数、在明箱时间、在明箱的运动距离。
Day3 高架十字
无适应，开臂光照40 lux，测试时间5min，将小鼠放在中心区域，并保证小鼠的头朝向开臂。
记录小鼠在开、闭臂移动的总距离、时间、低头次数等。
Day4 自发性交替实验：
无适应，光照10-30 lux，测试时间8 min；测试开始时小鼠放在Y迷宫中心区，手动分析交替次数、进入臂的总次数、AAR、SAR、总活动距离5个指标。
在做自发性交替实验时，在操作箱的壁上挂上立体参照物。
Day5适应
光照30 lux，在矿场实验箱中间放置一物体，鼓励小鼠探索，测试时间10 min，一小时后重复一次。
Day6新物体识别
光照30 lux，在矿场实验箱两对角线对称放置物体A，测试时间10 min，一小时后将其中一物体换另一新物体B，测试时间10 min。
记录两次试验小鼠对各物体的探测次数、时间、移动总距离等。
Day7适应
光照30 lux，在矿场实验箱中间放置一物体，鼓励小鼠探索，测试时间10 min，一小时后重复一次。
Day8空间物体识别
光照30 lux，在矿场实验箱两对角线对称放置物体A，测试时间10 min，一小时后将其中一物体的位置改变，测试时间10 min。
记录两次试验小鼠对各物体的探测次数、时间、移动总距离等。
在操作箱的壁上挂上立体参照物。
Day8适应
光照30 lux，在矿场实验箱中间放置一物体，鼓励小鼠探索，测试时间10 min，重复3次，每次间隔一小时。
Day9空间物体记忆
光照30 lux，在矿场实验箱两对角线对称放置两物体A，测试时间10 min；一小时后将将物体换成两物体B，测试时间10 min；一小时后将在旷场实验箱两对角线放置物体A和B。
记录两次试验小鼠对各物体的探测次数、时间、移动总距离等。
注：新物体识别、空间物体识别、空间物体记忆要求使用不同物体，即每个实验中使用的物体必须保证小鼠以前没有看到过。
Y迷宫、空间物体识别需要悬挂立体参照物。