体外“心肌样”环境下5-氮胞苷诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化

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丹酚酸B体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的实验研究

诱导分化为心肌样细胞。但５一ａａ作为抗肿瘤药物具有一定的２方法ｚ毒副作用，寻找安全、故有效的诱导剂应是目前的重要课题。我２１ＭＳｓ．Ｃ的分离培养将大鼠脱颈处死，无菌条件下取双侧股
们前期的研究结果表明ＳｌａＢ可以减小心肌梗塞的面积，并能骨、骨，胫适量Ｄ—Ｈｎ￣液冲洗骨髓，０ａｋ１０目筛网过滤，密度为将有效地促进梗塞灶内成纤维细胞的增生，速心脏的修复过程。１０３／ｌＰｒｌ预先置于试管的底部，后按照１１的比加．７ｇｍ的ｅｃｌｏ然：
分化为心肌样细胞的研究。现将研究结果报道如下ｎ后接种于完全培养液（１％胎牛血清、０／／ｉ，ｉ）ａ含０１０ｍｇＬ青霉素、０／１０ｍｇＬ链霉素的Ｌ—ＤＭ培养液）置于３５ＭＥ，７Ｃ、％９
那么，对有心肌分化潜能的ＭＳｓ什么作用呢？为进一步研例沿管壁缓慢滴加骨髓悬液，它Ｃ起・离心（０／ｉ，０ｍｎ，１８０ｒｍｎ２ｉ）收获位究其机制，我们进行了中药单体丹酚酸ＢＳｌ体外诱导ＭＳｓ于界面层灰白色的单个核细胞，Ｌ—ＤＥ（ａＢ）Ｃ用ＭＭ离心洗涤２次（０８０
向心肌细胞分化的能力。
关键词：丹酚酸Ｂ骨髓间充质干细胞；体外诱导；免疫细胞化学；实时荧光定量Ｒ — Ｃ；ＴＰＲ
中图分类号：９２Ｒ７
文献标识码：Ａ
文章编号：０８００（０８０－５４０１０ —８５２０）３０７－３

微小RNA-1慢病毒载体介导大鼠骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的研究

ＣＤ４５．ＴｈｅｍｉｃｒｏＲＮＡ一１ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌｖｅｃｔｏｒｗａｓｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄｗｉｔｈａｔｉｔｅｒｏｆ３× １０ＴＵ／ｕ１．
ＭＳＣ向心肌细胞分化的影响。方挂采用全骨髓贴壁培养法分离培养大鼠ＭＳＣ并进行流式细胞学鉴定；构建表达ｍｉＲ＿１慢病毒载体；将ｍｉＲ－１慢病毒载体转柒大鼠ＭＳＣ（ＭＳＣ）连续培养１５ｄ，光镜下观察转染后细胞形态，
ＴｈｅＭＳＣｉｈｉｇｈｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄｔｈｅＧＡＴＡ一４，ｃＴｎＩ，０【一ａｃｔｉｎ，ａｎｄｃＴｎＩａｆｔｅｒｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ，ｗｈｉｃｈｉｎ— ｃｒｅａｓｅｄｗｉｔｈｔｈｅｐｒｏｌｏｎｇａｔｉｏｎｏｆｔｉｍｅａｎｄｒｅａｃｈｅｄｔｈｅｉｒｐｅａｋｏｉｌｄａｙ１５．Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｆｕｒｔｈｅｒｃｏｎ—
厅科技计划（２０１１１０２１）
３３０００６南昌Ｘ￣ｇ－－ＩＮＮ医院心血管内科（邓海燕，魏云峰，王梦洪，郑泽琪，彭景添，文通）；江西省高血压病研究所（曾俊义，张婉，作者单位

5氮杂胞苷对大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化的研究孙思

Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１２．Ｖｏｌ．１９，Ｎｏ．６中国临床医学　２０１２年１２月　第１９卷　第６期 ·论著·　５－氮杂胞苷对大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化的研究孙思１　杜小文２　徐剑炜１ａ（１．复旦大学附属中山医院急诊科，ａ整形外科，上海　２０００３２；２．浙江省金华市人民医院泌尿外科，浙江金华　３２１００１）摘要　目的：探讨应用５－氮杂胞苷诱导大鼠骨髓间充质干细胞（ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｄｅｒｉｖｅｄ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ，ＢＭＳＣｓ）向肌样细胞分化的可能性。

方法：从１周龄ＳＤ大鼠骨髓提取分离ＢＭＳＣｓ，在体外培养增殖，并采用流式细胞仪鉴定。

以５－氮杂胞苷作用于ＢＭＳＣｓ，诱导其向肌样细胞分化，继续培养３周后，采用苏木精－伊红、结蛋白、α－横纹肌动蛋白（α－ｓａｒｃｏｍｅｒｉｃ　ａｃｔｉｎ，α－ＳＭＡ）免疫组织化学染色观察ＢＭＳＣｓ的分化情况。

结果：从１周龄大鼠四肢长骨中提取骨髓，经贴壁法分离，传代后用流式细胞仪检测细胞表面抗体，结果显示ＣＤ２９、ＣＤ１０５呈阳性，ＣＤ３４、ＣＤ４５呈阴性反应，Ｐ２、Ｐ３代ＢＭＳＣｓ的比例明显提高。

经诱导的细胞结蛋白、α－ＳＭＡ染色呈强阳性。

结论：在体外经５－氮杂胞苷诱导的ＢＭＳＣｓ可向肌样细胞分化。

关键词　骨髓间充质干细胞；　５－氮杂胞苷；　肌样细胞中图分类号　Ｒ３２９文献标识码　ＡＭｙｏｇｅｎｉｃ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｒａｔ　Ｂｏｎｅ　Ｍａｒｒｏｗ　Ｄｅｒｉｖｅｄ　Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　Ｓｔｅｍ　Ｃｅｌｌｓ　Ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　５－Ａｚａｃｙｔｉｄｉｎｅ　ｉｎＶｉｔｒｏ　ＳＵＮ　Ｓｉ１　ＤＵ　Ｘｉａｏｗｅｎ２　ＸＵ　Ｊｉａｎｗｅｉ１ａ　１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｅｍｅｒｇｅｎｃｙ，ａＤｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｌａｓｔｉｃａｎｄ　Ｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｖｅ　Ｓｕｒｇｅｒｙ，Ｚｈｏｎｇｓｈａｎ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｆｕｄａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　２０００３２，Ｃｈｉｎａ；２．Ｄｅ－ｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｕｒｏｌｏｇｙ，Ｊｉｎｈｕａ　Ｐｅｏｐｌｅ′ｓ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｊｉｎｈｕａ　３２１００１，ＣｈｉｎａＡｂｓｔｒａｃｔ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｅｘｐｌｏｒｅ　ｔｈｅ　ｐｏｓｓｉｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｉｎｄｕｃｉｎｇ　ｍｙｏｇｅｎｉｃ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒａｔ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｄｅｒｉｖｅｄ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ（ＢＭＳＣｓ）ｂｙ　５－ａｚａｃｙｔｉｄｉｎｅ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＢＭＳＣｓ　ｗｅｒｅ　ｈａｒｖｅｓｔｅｄ　ｆｒｏｍ１－ｗｅｅｋ　ｒａｔｓ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｓｕｒｆａｃｅ　ａｎｔｉｇｅｎｓ　ｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ｂｙ　ｆｌｏｗ　ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ．Ｔｈｅ　ＢＭＳＣｓ　ｗｅｒｅ　ｔｈｅｎ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ５－ａｚａｃｙｔｉｄｉｎｅ　ｔｏ　ａｃｈｉｅｖｅ　ｔｈｅ　ｍｙｏｇｅｎｉｃ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆ　ｄｅｓｍｉｎ　ａｎｄα－ｓａｒｃｏｍｅｒｉｃ　ａｃｔｉｎ（α－ＳＭＡ）ｏｆ　ｔｈｅ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ＢＭＳＣｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｓｔａｉｎｉｎｇ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：ＢＭＳＣｓ　ｆｒｏｍｒａｔ　ｌｏｎｇ　ｂｏｎｅｓ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｐｕｒｉｆｉｅｄ　ａｆｔｅｒ　３　ｐａｓｓａｇｅｓ．ＣＤ２９　ａｎｄ　ＣＤ１０５　ｗｅｒｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ，ｗｈｉｌｅ　ＣＤ３４　ａｎｄ　ＣＤ４５　ｗｅｒｅ　ｎｅｇａｔｉｖｅ．Ｔｈｅ　ｉｍｍｕｎｏ－ｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｓｔａｉｎｉｎｇ　ｒｅｖｅａｌｅｄ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｄｅｓｍｉｎ　ａｎｄα－ＳＭＡ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｉｎｄｕｃｔｅｄ　ＢＭＳＣｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ：Ｔｈｅ　ｍｙｏｇｅｎｉｃ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆ　ＢＭＳＣｓ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　５－ａｚａｃｙｔｉｄｉｎｅ．Ｋｅｙ　Ｗｏｒｄｓ　Ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｄｅｒｉｖｅｄ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ；　５－ａｚａｃｙｔｉｄｉｎｅ；　Ｍｙｏｇｅｎｉｃ　ｃｅｌｌｓ基金项目：浙江省科技厅面上项目资助（编号：２００８Ｃ３３０２２）通讯作者　徐剑炜，Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｕ．ｊｉａｎｗｅｉ＠ｚｓ－ｈｏｓｐｉｔａｌ．ｓｈ．ｃｎ骨髓基质中的多能细胞能够分化成为多种中胚层来源的间质细胞，故被称为骨髓间充质干细胞（ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｄｅｒｉｖｅｄ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ，ＢＭＳＣｓ）。

骨髓间充质干细胞移植在心脏再生医学中的分子机制

结目前关于ＢＣ在心脏再生医学中应用的相关分子机制的假说，ＭＳｓ并探讨对各种假说的挑战。
关键词：骨髓间充质干细胞；心脏再生医学；细胞移植；分子机制中图分类号：Ｒ４文献标识码：Ａ文章编号：１０ —３９２０）９０３－５１０４２６（０８０－５１５０
维普资讯
国际内科学杂志２００８年９月第３第９期５卷
・
５３ｌ・
骨髓问充质干细胞移植在心脏再生医学中的分子机制
黄裕立干细胞（ＭＳｓ移植治疗心血管疾病已经在不少基础研究和临床试验中证实了其ＢＣ）有效性。但是，改善心功能的机制仍有较多争议，作用除与ＢＣ向心肌样细胞分化有关外，可其该ＭＳｓ还能与其促血管生成、制心肌细胞凋亡、善心脏重构、泌大量有益细胞因子有关。本综述将重点总抑改分
ｒｇｎｒｔｎｈｓｅｌｃｎｉｒｖａｄａｕｃｉｎｓｇｉｃｎｌｆｅｅｎｒｎｐａｔｄｉｔｈａｇｄｅｅｅａｉ．Ｔｅｅｃｌａｍｐｏｅｃｒｉｃｆｎｔｉｎｆａｔａｔｒｂｉｇｔｓｌｎｅｎｏｔｅｄｍａｅｏｓｏｉｙａｈａｔｔｍａｅｉｖｌｅｈｏｅｅｉ，ａｇｏｅｅｉ，ｉｈｂｔｇａｏｔｓｓｏａｄａｏｙｅ，ｉｒｖｎｅｒ．Ｉｙｂｏｖｄｉｔｅｍｙｇｎｓｓｎｉｇｎｓｓｎｉｉｎｐｐｏｉｆｒｉｃｍｙｃｔｓｍｐｏｉｇｎｎｉｃ

脂肪组织干细胞的研究进展

脂肪组织干细胞的研究进展杨立业;黄天华【摘要】脂肪组织中存在多能的干细胞,在体外可以长期增殖,在一定的条件下能够分化为脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、成肌细胞、内皮细胞、神经细胞、心肌细胞和平滑肌细胞,是一种新的组织工程和细胞移植的干细胞来源.本文综述了脂肪组织干细胞的培养、向多种方向分化和动物实验的研究进展.【期刊名称】《癌变·畸变·突变》【年(卷),期】2007(019)002【总页数】3页(P162-164)【关键词】干细胞;脂肪;分化【作者】杨立业;黄天华【作者单位】汕头大学医学院生物学教研室,广东,汕头,515041;汕头大学医学院生物学教研室,广东,汕头,515041【正文语种】中文【中图分类】R338.1组织工程的一个研究重点是种子细胞的来源问题，自体的多能干细胞应用到临床能够治疗疾病，造血干细胞是最早应用到临床的干细胞。

组织工程的一种细胞来源是骨髓基质，骨髓腔中含有几种细胞成分，包括间充质干细胞（mesenchyml stem cells，MSCs），它能分化为脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞和成肌细胞，是目前骨和软骨组织工程的主要细胞来源[1]。

然而它的自体获得也受到一些条件的限制，并且一次骨穿获得的细胞数量有限。

另外一种潜在的自体干细胞来源是脂肪组织，它的获取可在局麻下进行，对病人的损伤较小。

脂肪来源的干细胞目前可称为脂肪来源的基质细胞（adipose tissue-derived stromal cells，ADSCs），能分化为脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、成肌细胞、内皮细胞、神经细胞和平滑肌细胞[2-6]。

人类、大鼠和小鼠的ADSCs细胞培养方法相同[1，4，6]。

首先，获取的脂肪组织用缓冲液反复冲洗，剪刀剪碎，0.075%的胶原酶37℃消化30～50 min，800 g离心10 min，沉淀成分为基质血管层（stromal vascular fraction，SVF），DMEM培养基重悬细胞，筛网过滤离心，弃上清。

细胞代数与5-氮胞苷浓度对体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞定向分化的影响

取孔内上清液弃去。每孔加入１０Ｉ二甲亚砜，５置摇床上低速振荡１ｉ，紫色结品充分溶解。在酶联免疫检测仪上０ｒｎ使ａ
４０ｎ波长下测量各孔的吸光值（））值）记录结果。选取第９ｍ（Ｉ，
中图分类号：２Ｒ３９
文献标识码：Ａ
文章编号：６２一ｌ４（Ｏ０）０一ｌ２１７３９２１１２０—０３孵箱内培养７２ｈ换液，６～７融合状态，代培养。达Ｏ０传
问充质干细胞（ｓｎｈｍａＮｎｃｌ，Ｃ）一群巾胚ｍｅｅｃｙｌｌｌｅｓＭＳ是ｅｌ
１３各代＿．人鼠骨髓问亢质十细胞增殖率测定及体外诱导取第２代ＭＳｓ消化后调整细胞悬液浓度至３０／，种于Ｃ， ×１ｍＬ接
７个９６孔板，孔加入２０Ｉ，调零孔５个。５ＣＯ。，７℃孵每０设３育４ｈ待细胞贴壁。于贴壁后每天各取一板，孑加入２Ｌ每ＬＯ“ ＭＴＴ溶液（５ｍｇ／，即０ｊＭＴＴ）３Ｃ继续孵育４ｈ后吸ｍＩ。．，７
全培养液连续培养５ｄ。通过ＭＴＴ法测取各代细胞诱导组与对照纽第ｌ、３天、ｊ的（），算三代细胞经不同浓度５氮天第第天）值计Ｉ一胞苷诱导后及对照组的增殖率。用免疫细胞化学法检测各代ＭＳｓ不同浓度５氮胞苷诱导培养４后心肌特异蛋白ｃｎ采ｃ经一周ＴＴ、 Ⅱ ｃｎ的表达。结果正常对照组第２与第６代细胞增殖率无统计学意义（＞００）与第１代细胞均有统计学意义（＜００）一Ａｔｉ代Ｐ．５，０Ｐ．５。相同浓度药物诱导的三代细胞，２细胞与第６代、ｌ细胞增殖率有统计学意义（＜００）第６代、１代细胞增殖率无第代第０代Ｐ．５，第０

心肌组织工程种子细胞的研究进展

心肌组织工程种子细胞的研究进展（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）【摘要】目的综述组织工程心肌种子细胞来源的研究现状与存在的问题，并展望其前景。

方法广泛查阅近十年来有关组织工程心肌种子细胞的文献，并进行综述。

结果心肌组织工程的替代治疗具有极其诱人的前景，但还处于起步阶段，仍然需要通过大量的实验找到最佳的细胞来源。

结论组织工程心肌有广阔潜在的临床应用前景，其细胞来源值得进一步研究。

【关键词】心肌组织工程；种子细胞。

组织工程是应用生命科学与工程学的原理与技术，在正确认识哺乳动物的正常及病理两种状态下的组织结构与功能关系的基础上，研究开发用于修复、维护、促进人体各种组织或器官损伤后的功能和形态的生物替代物的一门新兴学科。

其核心是模拟体内组织发生的环境，在体外培养细胞，构建由细胞和生物材料组成的、具有特定功能的三维工程化组织。

组织工程心肌主要涉及种子细胞来源，支架以及体外构建方式和移植。

下面我们主要讨论重点是心肌组织工程种子细胞。

1心肌组织工程的细胞来源构建工程化心肌组织的最佳细胞，应该是容易获得的、能增殖的、无免疫原性的、具有分化为成熟的有功能的心肌细胞的能力的细胞。

遗憾的是，目前还没有发现这样的细胞。

供体(异源的)细胞相对容易获得，但是具有免疫排斥反应的风险；而自体细胞虽然很难获得和扩增，但是没有免疫排斥的困扰。

目前，已报道的应用于心肌组织构建的细胞包括胎儿心肌细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞、骨骼成肌细胞、天然骨髓细胞、间充质千细胞和胚胎干细胞等。

1.1心肌细胞胎儿心肌细胞是研究的最早最广泛，被认为是目前干细胞研究领域的一个重要方面。

Soonpa等［1］最早将胎儿心肌细胞移植到鼠的心肌。

Scorsin等［2］将胎儿心肌细胞注射到心肌梗死模型鼠的左心室心肌，研究表明有50％的鼠的梗死边缘区有被注射的心肌细胞。

胎儿心肌细胞移植能改善左心室功能，提高射血分数和心输出量。

碱性成纤维细胞生长因子与丹酚酸B体外诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞

ＣＨＩＮＥＳＥ பைடு நூலகம் ＯＵＲＮＡＬＯＦＡＮＡＴＯＭＹＶｏ１．３６Ｎｏ．６２０１３
解剖学杂志
２０１３年第３６卷第６期
碱性成纤维细胞生长因子与丹酚酸Ｂ体外诱导
骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞
各组培养４周后，应用免疫细胞化学检测结蛋白（ｄｅｓｍｉｎ）、一横纹肌肌动蛋白（ａ－ｓａｒｅｏｍｅｒｉｃａｃｔｉｎ）、原肌球蛋白
（ｔｒｏｐｏｍｙｏｓｉｎ）及肌钙蛋白Ｔ（ｃＴｎＴ）的表达情况；透射电镜观察分化细胞的超微结构变化。结果：对照组细胞结蛋白、ａ一横纹肌肌动蛋白、原肌球蛋白及肌钙蛋白Ｔ均为弱阳性或阴性表达。与对照组相比，ｂＦＧＦ组、丹酚酸Ｂ组及两者联合诱导组ＢＭＳＣｓ以上各标记物的阳性表达均明显升高，差异具有统计学意义。其中，两者联合诱导组各标记物的阳性率均显著高于ｂＦ（或丹酚酸Ｂ单独诱导组。透射电镜结果显示，ｂＦＧＦ组、丹酚酸Ｂ组及两者联合诱导组分化的细胞多呈杆状，胞核卵圆形，位于细胞中央，胞质中可见平行排列的肌丝、大量粗面内质网和线粒体，并富含糖原和核糖体。结论．ｂＦＧＦ、丹酚酸Ｂ均可分别及联合诱导ＢＭＳＣｓ获得心肌分化表型，且两者联合诱导效果优于单一诱导效果。
ＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｅｘｐｌｏｒｅｉｎｖｉｔｒｏｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｒａｔｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ（ＢＭＳＣｓ）ｉｎｔｏ

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ＭＨｃｎ阳性率显著增加，５Ａａ次诱导组较单次诱导组Ｍ、ＴＩＣ、ＩＴ且一ｚ双ＨＣｃｎ阳性率显著增加。论（）外 ‘ 样 ” 境下５结１体 ‘肌Ｊ１环一Ａａ够促进ＢＳｓ向心肌样细胞分化。（）一ｚ次诱导较单次诱导效果更好。ｚ能ＭＣ２５Ａａ双关键词骨髓问充质干细胞；培养；共心肌细胞；一胞苷５氮．
Ｌｎｉｎ，ｈｎＳｅｇｉＬｏＷａｊｎ，ｔｌ（ｅａｔｅｔｆｃｒｉｔｏａｉｓｒｅ，ｅｒ￣ｌｔｄｈｓｉｌＮｎｈｎｎｉｇＸａｇＣｅｈｎｘ，ｕｎａｅａＤｐｒｎａｄｏｒｃｕｇｒｔｓｆｉｅｏｐｔａＣａｇｕｉｍｏｈｃｙｈｆｔｉａｉａｏｆ —
摘要目的探讨在体外 “ 肌样 ” 心环境下５氮胞苷（一ｚ）导能否促进骨髓问充质干细胞（ＭＳｓ向心肌样细胞分化方法一５Ａａ诱ＢＣ）
（）离、化大鼠ＢＳｓ分组后用５Ａａ导部分ＢＣ。（）ＭＳｓ记后与乳鼠心肌细胞共培养。（）疫荧光法鉴定１分纯ＭＣ，一ｚ诱ＭＳｓ２ＢＣ标３免ＢＣ的肌球蛋白重链（Ｃ）心肌特异性肌钙蛋白Ｉｃｎ）ＭＳｓＭＨ和（ＴＩ。结果免疫荧光结果显示５Ａａ单次诱导组与未诱导组比较一ｚ
汀西医药２００８年
第４３卷第１２期
・
实验研究・
体外 “ 心肌样＂境下５环一氮胞苷诱导大鼠骨髓间充质
干细胞向心肌样细胞分化
凌翔陈胜喜罗万俊陈日１昌大学第一附南南３００；科，长沙，１０８４００）
中图分类号：一３Ｒ３２
５－ａｚｙｉｎｅｃｎｈａｎｃｈｅｃｄｉｍｙｅｃｄｆｅｅｉｔｏｎｏｆｂｏｎｅｍａｒｏｍｅｅｈｙａｌｓｅｅｌｉａｃｄｉｉｉａｒａｃｔｄｉａｎｅｃｅｔａｒｏｏｇｎｉｉｒｎｔａｉｒｗｓｎｃｍｔｍｃｌｎａｒａｃｓｍｌｃｒｕｍｆｒｃｎｖｉｒｉｃｅｅｎｅｉｔｏ
ＢＭＳｓａｄｃｎ－ｏｉｖＣｎＴＩｐｓｉｅＢＭＳｎｔｅｓｎｌ－ａｔｅｔｇｇｏｐｗｓｍｕｈｈｇｅａｈｔｉｏ５ＡａｔａｉｇｇｏｐｌｔｗｓｔＣｓｉｈｉｇｅ５Ａｚａｉｒｕａｃｉｈｒｔｎｔａｎｎ－ｚｅｔｒｕ，ｉａｒｎｈｒｎｎｓｇｉｃｎｌｏｅｈｎｔｅｐｒｅｔｇｎｔｅｄｕｌ５ＡｚｒａｉｇｇｏｐＣｎｌｓｏ－ａｃｎｅｃａｃｈａｄｏｏｅｉｄｆｉｎｆａｔｌｗｒｔａｈｅｃｎａｅｉｈｏｂｅ－ａｔｔｒｕ．ｏｃｕｉｎ５Ａｚａｎｈｎｅｔｅｃｒｉｍｙｇｎｃｉｉｙｅｎ－ｆｒｎｉｔｎｏＭＳａｄａｉｌｒｃｒｕｅｅｃｉｏ５ＡｚｏｂｅｔａｉｇｉｂｔｒｔａｈｉｇｅｔｅｔｇｅｅｔｉｆＢＣｓｉａｃｒｉｃｓｍｉｉｃｍｆｒｎｅｉｖｔ．－ａｄｕｌｒｔｅｔｎｔｅｓｌｒａｉ．ａｏｎａｎｒｅｎｓｅｈｎｎＫｅｒｓＢｙｗｏｄＭＳｓｅｅｈｒ；ａｄｏｏｙｅ５ａａｙｉｉｅＣ；ｏｕｕｅｃｒｉｍｙｃｔ；－ｚｃｔｎｄ
ｖｒｔＮｎｈｎ，３０６ＣｉａｅｓｙａＣａｇ３００，ｈｎ）ｉ，
ＡｂｔｃＯｊｃｉｏｉｖｓｇｔｗｅｅ５ａａｙｉｉ（－ｚ）ｔａｎｏｌｅｃａｃｅｃｒｉｙｇｎｉｅｅｔｔｎｏｂｎｓａｔｂｅｔｅＴｅｔａｅｈｔｒ－ｚｃｔｎ５Ａａｒｔｇｃｕｄｎｈｎｅｔａｄｏｏｅｉｄｆｒｎｉｉｆｏｅｒｖｎｉｈｄｅｅｉｈｍｃｆａｏｍｒｗｍｅｅｃｙａｓｍｃｌ（ＭＳｓｉａｃｒｉｉｉｒｉｕｆｅｃｉｏｔｏｓＴｅＢＣｅｅｓｌｔｎｕｉｅａｒｓｎｈｍｌｔｅＢＣ）ｎａｄａｓｌｒｍｅｎｅｉｖｒ．ｈｄｈＭＳｓｒｉａｄａｄｐｒｄｏｅｌｃｍａｃｃｒｎｔＭｅｗｏｅｉｆｆｍｍａｐａｕ－ａｌＳ）ａ．ｈＭＳｓｅｅｒｎｏｌｄｖｅｎｒｕｓｎｏｅｗｒｔａｅｉ－ｚ．ｈＭ— ｒｌＳｒｇｅＤｗｅＤｒｔＴｅＢＣｒａｄｍｙｉｉｄｉｔ４ｇｏｐｄｓｍｅｅｒｔｗｔ５ＡａＴｅＢｏｅｙ（ｓｗｄｏａｅｄｈ
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ａｔｏｉｇｉｔａｄａｙｓｅｖｈｉＭＨ）ｎａｄａ— ｐｃｃｔｐｎ（ｎ）ｅｕｔｈｅｃｎａｅｏＣｐｓｉｎｉｄｅａａｓｃｒｉｍｏｉｈａｙｃａｂｓｎｃｎｎ（ＣａｄｃｒｉｓｅｆｏｏｉＩｃＩＲｓｌＴｅｐｒｅｔｆｃｉｒｎＴ．ｓｇＭＨ — ｏｉｖｔｅ