实验性毕业论文范例终审稿)
实验性论文格式模板

实验性论文格式模板【篇一:实验型论文的一般格式】实验型论文的一般格式前置部分主体部分前言正文结论一、题目1、题名全文内容的高度概括,是读者了解全文的窗口写作原则突出主题突出具有创新和特色之处,使读者一目了然准确具体确切恰如其分地反映研究的范围和深度,从题目可大体了解内容忌:抽象、笼统、小题大做等题目太大、范围过宽属于小题大做,要做到范围明确,内容具体间断精炼(一般20字左右,不超过30字)语言必须高度概括,反复推敲,简明扼要标题中少用“??的探讨”、“??的研究”、“??的观察”等非特定词尽量不用“漫谈”、“浅谈”、“试论”等没有特色的词检索性强2、拟题方法包括三要素三要素:研究方法、研究对象、研究目的如《遥测法研究户外冬眠刺猬体温变化》片名拟题注意事项避免使用非公认的缩略词数字一般用阿拉伯数字,但作为名词或形容词除外。
如“十二指场”“12指肠”??二、作者署名是学术论文的必要组成部分包括姓名、单位、所在地、邮编等避免同名同姓署名的意义1、署名事关学术和法律责任、著作权、版权等2、便于读者作者通信3、对作者劳动的肯定4、作为检索途径满足文献检索的需要署名的条件自始自终参与论文全部或部分研究工作和写作过程,能对论文内容复责并具有答辩能力合作完成成果,按照贡献的大小顺序署名。
署名人对本人所贡献部分负责,发表前应由本人审阅并署名区别具有实质性贡献的作者署名的形式和方法集体署名第一作者、并列第一作者个人署名署名的方法因不同杂志二有区别署名注意事项1、署名不应太多三、摘要对论文内容不加注释和评论的高度概括和简练的陈述作用快速查询和阅读便于文摘检索刊物的编制和应用便于计算机文献数据库的建立和检索对论文的初步评价要求完整性包含研究目的、内容、方法、结果等自明性独立性简洁性类型与写法1、报道性摘要(资料性、信息性摘要)按照研究目的、方法、结果和结论顺序写作2、指示性摘要3、报道_指示性摘要4、结构式摘要写摘要注意事项在全文完稿后,仔细思考后写如实、高度浓缩不要简单重复题目已有的信息,不要将本专业已成常识的内容写进摘呀一般用第三人称城市,“对??进行了研究”,不用“本人”“我们”等,表客观不分段不用公式四、关键词特点1、代表性一组关键词变成浓缩的摘要2、检索性3、专指性关键词意义单一,指向性和特异性强各个关键词都从一个侧面反映论文的中心内容,读者可从不同角度了解论文的内容通过关键词查阅到所需文献,而少检出不需要的文献4、关键性作用1、便于读者快速了解论文主题和中心内容2、便于编制索引3、便于二次文献检索刊物和计算机数据库收录和检出文献适应信息时代的需要标明关键词利于论文的收录率、检出率标引反方法1、根据论文主题数量适当,过多或过失影响文献的检出率和检准率注意事项1、表示化学物质的用名称不用结构式2、论文中提到的常规技术,未进一步探讨时不能【篇二:学术论文格式模板完全版】城市邮编(四要素缺一不可)等。
终审意见书

终审意见书尊敬的审稿专家:经过我们专家小组的复审和深入讨论,针对您所撰写的论文《XXX》,我对该论文的质量和内容进行了终审,并得出以下意见。
首先,我认为该论文的研究题目和研究背景是明确的,能准确阐述该研究领域的现状和问题。
在引言部分,作者据理论和实践综述了相关研究,说明了研究的必要性和重要性。
但是,在文献综述中存在一些与研究主题关联度不高的参考文献,建议作者在继续论述时将其删除或更换为更为相关的文献,以提高论文的准确性和一致性。
其次,该论文的研究方法和数据分析方法选用合理,能够解答研究问题和验证研究假设。
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但是,在方法部分,作者仅仅对研究方法和调查问卷的设计进行了简单描述,没有详细阐述具体的实施过程和数据分析方法。
建议作者在论文中加入详细的方法和数据分析步骤,以便读者能够更好地理解论文的研究过程和结果。
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同时,在讨论部分中,作者也未能将研究结果与已有研究成果进行深入对比和分析。
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然而,参考文献格式存在一些错误,建议作者对参考文献进行仔细核对和修改。
总体来说,该论文在研究问题的选取和论证中表现出一定的独到之处,且具备一定的研究实用价值。
然而,在研究方法的描述、结果讨论和参考文献格式方面,还需要进一步完善和修改。
希望作者能认真考虑,并采纳本人的意见和建议,在修订稿中进一步提高论文的质量和学术水平。
最后,再次感谢您为本期论文的审稿工作所付出的辛勤努力和宝贵意见。
期待您对本份终审意见书的审核。
衷心感谢!此致,XXXXX日期:。
实验论文范文

沈阳药科大学毕业设计(论文)苦参碱缓释微球的制备学生姓名指导教师专业学院2011年0 月日Graduation Project (Thesis)Shenyang Pharmaceutical UniversityPreparation of Matrine Sustained-ReleaseMicrospheresStudentSupervisorSpecialtySchool2009-06- 01毕业设计(论文)任务书毕业设计(论文)审阅评语毕业设计(论文)审阅评语毕业设计(论文)答辩评语摘要利用海藻酸钠溶液与氯化钙溶液发生沉淀反应,采用滴制法制备海藻酸钠微球,可以提高药物的生物利用度,增强药物的稳定性及临床疗效,达到缓释作用和靶向作用,从而控释药物,实现靶向和定位给药,减少给药次数,减轻或消除毒副作用。
以微球的基本药剂学性质(形态、粒径及其分布;药物的含量;药物的载药量与包封率;药物的释放速率)为指标,筛选出符合微球质量要求的最佳处方。
采用紫外分光光度法建立了缓释微球中苦参碱含量测定的方法,方法操作简便,重复性好。
同时建立了苦参碱缓释微球溶出度测定的方法。
关键词:苦参碱;海藻酸钠;微球;缓释制剂AbstractCa-alginate gel microspheres were prepared by dropping Na-alginate solution into CaCl2 solution.It can enhance the bioavailability. The medicine's stability and the clinical effect were enhanced.It achieved the slow release function and the function of controlling the release of the medicine,which can realize the target to give the medicine with the localization, reduce the medicine of number of times, reduce or eliminate the poisonous side effect. The basic prescription and preparation was designed by the study about formulation screening and optimization, based on the pharmacy rule ( appearance, size and disposition, content, envelop rate of drug and drug release-rate )as indicator and the stability maintaining of Matrine Ultraviolet spectrophotometry was used in quality criteria research of Matrine which has simple method of operation and good reproducibility as well as the method to determine the dissolution of Matrine.KEY WORDS :Matrine ;sodium polymannuronate;microspheres;sustained-release preparation目录摘要 (I)Abstract (II)1绪论 (1)1.1缓释制剂的研究与应用 (1)1.2缓释制剂研究进展 (2)1.2.1口服缓控释给药系统 (2)1.3微球制剂进展 (6)1.3.1制备方法多样 (6)1.3.2局麻药实现长效缓释 (7)1.3.3眼用微球制剂受肯定 (7)1.3.4微球制剂抗癌研究进展迅速 (8)1.4海藻酸钠概述 (8)1.4.1海藻酸盐来源 (8)1.4.2海藻酸钠的化学性质 (9)1.4.3性状 (9)1.4.4黏性 (9)1.4.5溶解性 (10)1.4.6稳定性 (10)1.4.7缓释作用 (10)1.5苦参碱概述 (10)1.5.1来源 (10)1.5.2理化性质 (11)1.5.3药理作用 (11)1.5.4临床应用 (11)1.5.5展望 (11)1.6本课题的来源及研究的目的意义 (12)1.6.1本课题来源 (12)1.6.2研究的目的意义 (12)2实验部分 (13)2.1药品与仪器 (13)2.1.1实验药品 (13)2.1.2实验仪器 (13)2.1.3其他 (13)2.2苦参碱缓释微球的制备 (13)2.2.1苦参碱缓释微球的制备工艺过程 (14)2.2.2讨论 (14)2.3苦参碱缓释微球质量评价 (15)2.3.1含量测定标准曲线的建立 (15)2.3.2回收率试验 (16)2.3.3微球中苦参碱的含量测定 (16)2.3.4溶出度的测定 (17)2.3.5讨论 (17)结论 (19)参考文献 (20)致谢 (22)附录 (23)1绪论1.1缓释制剂的研究与应用缓释制剂系指用药后能在较长时间内持续释放药物以达到长效作用的制剂。
实验性毕业论文范例终审稿)

实验性毕业论文范例文稿归稿存档编号:[KKUY-KKIO69-OTM243-OLUI129-G00I-FDQS58-学号:泰山医学院毕业设计(论文)题目:蜂胶黄酮抗H2O2诱导PC12细胞凋亡机制的研究院(部)系药学院所学专业药学年级、班级完成人姓名指导教师姓名专业技术职称2013年 6 月 18 日论文原创性保证书我保证所提交的论文都是自己独立完成,如有抄袭、剽窃、雷同等现象,愿承担相应后果,接受学校的处理。
专业:班级:签名:20 年月日摘 要目的 观察蜂胶黄酮对过氧化氢(H 2O 2)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC 12)凋亡的影响及机制。
方法 培养PC 12细胞,取对数生长期细胞分为五组,空白对照组、模型组、蜂胶黄酮高、中、低剂量组,剂量分别为200mg/L 、100 mg/L 、50 mg/L.药物预处理2h 后,孵育H 2O 2(140μmol/L)24h 诱导过氧化损伤。
TUNEL 试剂盒检测原位细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞内活性氧水平以及细胞周期,ELISA 检测细胞内Caspase-3蛋白含量。
结果 TUNEL 细胞凋亡染色显示, H 2O 2组与空白对照组比较染色明显加深,而蜂胶黄酮组染色明显变浅,说明蜂胶黄酮能对抗H 2O 2诱导细胞凋亡;周期结果显示H 2O 2组处于G0/G1细胞明显增多,而处于G2/M 、S 期细胞明显减少,细胞增殖降低,而蜂胶黄酮增加S 期细胞促进细胞增殖;与空白对照组相比H 2O 2组活性氧水平、细胞内Caspase-3含量明显增高,而蜂胶黄酮各剂量组活性氧水平降低,Caspase-3含量减少。
结论 蜂胶黄酮对H 2O 2诱发PC 12神经细胞凋亡有显着的抑制作用,其机制可能其影响细胞周期、清除氧自由基、降低凋亡因子Caspase-3有关。
关键词 蜂胶黄酮;PC 12细胞;H 2O 2;Caspase-3;细胞凋亡AbstractObjective :To observe the protection ofpropolis flavonoidson rat with injuried pheochromocytomacells(PC 12) induced by?hydrogen peroxide(H 2O 2) and to explore its possible mechanism.Methods:Culture?PC 12 cells,the cells inthe logarithmic growth phase weredivided into five groups,blank control group,model group,propolis flavoneof high,medium and low dose group,the dose of 200mg/L,100 mg/L,50 mg/L.After 2h 0fPharmacological preconditioning,the cellswere incubated with H 2O 2(140 μ mol/L)for24hto induceoxidative damage.TUNEL Kitis used fordetermining Cell apoptosis,Flow cytometry was used to detect the intracellular ROS level and cell cycle,ELISA is used for determining the concentration of protein Caspase-3 in cells.Results:Apoptosis of TUNEL cells staining, H 2O 2 group compared with the control group, staining was deepened, and the propolis flavone group was significantly lighter, that propolis flavonoids can antagonize the apoptosis induced by H 2O 2 Cycle showed that H 2O 2 group in G0/G1 cells were increased, and in the G2/M,S phase cells decreased significantly, reduced cell proliferation, and propolis flavonoids increased S phase cells promoting cell proliferation; compared with the blank control group, caspase-3 in H 2O 2group, the levels of reactive oxygen species in cells increased significantly, while the propolis flavone in all dose groups decrease the levels of reactive oxygen species, reduced caspase-3 content.Conclusion : Propolis flavonoids on H 2O 2-induced PC 12 cells damage a significant protective effect,The mechanism may be its effect on cell cycle, scavenging oxygen free radicals, decrease the apoptosis related factor caspase-3.Key words : Propolis; flavonoids; PC 12 cells; H 2O 2; apoptosis目录正文 (01)1前言 (01)2仪器与试剂 (01)3实验方法 (02)3.1 蜂胶总黄酮的提取与含量测定 (02)3.2 PC细胞的培养及分组给12药 (02)3.3 TUNEL细胞凋亡原位检测 (02)3.4流式细胞仪检测细胞周期 (02)3.5流式细胞仪检测细胞内活性氧水平 (03)3.6 ELISA试剂盒检测细胞内Caspase-3蛋白含量 (03)4实验结果 (03)4.1 TUNEL细胞凋亡原位检测 (03)4.2流式细胞仪检测细胞周期 (04)4.3流式细胞仪检测细胞活性氧水平 (05)4.4 ELISA检测细胞内Caspase-3蛋白含量 (06)5讨论 (07)6结论 (08)参考文献 (09)文献综述 (10)致谢 (15)蜂胶黄酮抗H2O2诱导PC12细胞凋亡机制的研究学生:*** 指导教师:***(泰山医学院药学院,泰安 271016)1 前言老年性痴呆 (Alzheimer′s disease, AD) 是一种以进行性认知功能障碍和记忆能力受损为主的中枢神经系统退行性疾病。
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4. 研究方法4.1. 研究设计描述论文的研究设计。
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4.2. 数据收集说明你计划收集的数据。
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4.3. 数据分析描述你将如何分析收集到的数据。
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5. 实验步骤在这一部分,详细描述实验步骤。
按照时间顺序记录每个实验步骤的详细操作。
确保步骤清晰、可重复。
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使用图表、表格或文本来呈现和解释实验结果。
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在撰写实验方案时,要确保遵循学校或导师提供的指导和要求。
毕业论文结论

毕业论文结论
经过对相关文献的研究和实证分析,本文的研究旨在探讨XX领域的重要问题。
通过对大量的数据收集和分析,以及对实验结果的评估和总结,我们得出了以下结论。
首先,本文的研究表明XX领域存在着明显的问题和挑战。
在XX的发展和应用过程中,我们发现存在XX的不足之处,例如XX的效率低下、信息不准确等。
这表明在XX领域的进一步发展中,需要解决这些问题和挑战。
其次,通过本文的研究,我们发现XX对于提高XX的效率和准确性具有重要作用。
通过对XX进行优化和改进,我们可以显著提高XX的表现,并在实际应用中取得更好的结果。
因此,在未来的研究和实践中,我们应重点关注XX 的演进和改进,以促进XX技术的发展和应用。
此外,本文的研究还发现,在XX的发展和应用中,合理的XX策略和XX策略对于实现XX的成功至关重要。
通过对XX策略和XX策略的研究和应用,我们可以更好地指导XX的发展和应用,从而取得更好的效果。
最后,本文的研究还为进一步的研究和实践提供了一定的启示。
我们认为在未来的研究中,应该进一步深入地研究XX的相关问题,探索更好的XX方法和技术,并将其应用于实际生活中。
只有这样,我们才能更好地促进XX领域的发展和应用。
综上所述,本文的研究从不同角度对XX进行了深入探讨,并得出了一系列有价值的结论。
这些结论为进一步的研究和实践提供了参考,并可为相关领域的发展和应用带来积极的影响。
希望本文的研究成果能够对相关领域的研究者和从业者提供一定的借鉴和启示。
实验类毕业论文模板

X X 学院毕业论文题目:×××××××××××××××××××××××××××××××的研制学生:×××学号:×××系(院):×××专业:×××班级:×××指导教师及职称:×××教授、×××实验师起止时间:2012年 4月—— 2012年12月教务处制表×××××××××××××××的研制摘要:目的:本文研究了…………………………..。
方法:通过….试验……………….。
结果:研究结果表明,…………………….。
结论:………………………………。
关键词:辣木酸乳饮料;配方;稳定性;影响因素Study on Moringa Oleifera Yogurt BeverageAbstract:…Objective:……………………Methods:………………………………Results : …………………..….Conc lusion:…………………………………………Key words: Moringa oleifera lactobacillus drink; Formula; Stabilitly; Influence factors目录摘要 (I)Abstract (I)1 前言 (1)1.1 调配型酸乳饮料的发展新趋势 (1)1.2辣木酸乳饮料研究的意义 (1)2 材料与方法 (2)2.1 材料与设备 (2)2.1.1 材料 (2)2.1.2 设备 (2)2.2 试验设计 (2)2.3 测定指标.................................... 错误!未定义书签。
实验报告论文格式范文

实验报告论文格式范文篇一:实验报告论文模板实验项目论文题目班级名,作者姓名、学号摘要:摘要正文…… 关键词:不少于3个一、引言【实验背景】内容【实验目的】内容【实验原理】内容二、实验过程(重点阐述部分)【实验内容】内容【实验方法和技术】内容【实验结果的分析和结论】内容【实验遇到的问题及解决的方法】内容三、实验小结【体会或收获】内容【实验建议】内容四、参考文献作者,题目,期刊名或书名,页码,出版时间…….作图范例(字体小于正文):表格范例:表4.1 沉积Rh:BaTiO3薄膜的PLD参数正文用宋体,英文/数字/字符用Times New Roman 字体。
(特殊字符,在word中选择插入,点击字符,再选择symbol)正文行间距为1.25倍,保持一致,如有的字符或公式在里面,需调成一致!!!启明联合实验班各班班长,关于后续报告答辩事宜,通知如下,请老师和班长们仔细阅读:1.实验开放时间:第16周周1-周4,下午2:30-下午18:00。
钥匙找我(科技楼东302,132****8862,事先打电话)2. 答辩时间:第17周开始,按照课表上课时间进行(或老师可自行安排,17周周6下午面上有考试)。
务必提前到达,将文件拷入电脑。
各班班长注意:于本周6将学生的答辩题目发给我,共有4个实验,每个实验的答辩人数尽量平均,班长负责调节。
答辩地点:科技楼北楼300。
答辩要求:选择一个实验,控制在8分钟左右,主要报告数据结果的分析,以及对该实验某个问题的思考、在该实验中取得的收获、建议等等。
ppt要求:存为2003版本(后缀为ppt,不是pptx)。
简明清楚,作图表格要求规范清楚,文字建议全部黑体加粗。
3. 报告提交截止时间:第17周周末(6月28日),每个人交3个实验报告,PDF格式,附件是报告论文模板,直接在上面添加内容(去掉附加说明)。
(注意:报告强调规范性,包括文字字符大小/行间距/图表/参考文献等等,审查报告首先检查格式规范,再看内容。
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实验性毕业论文范例文稿归稿存档编号:[KKUY-KKIO69-OTM243-OLUI129-G00I-FDQS58-学号:泰山医学院毕业设计(论文)题目:蜂胶黄酮抗H2O2诱导PC12细胞凋亡机制的研究院(部)系药学院所学专业药学年级、班级完成人姓名指导教师姓名专业技术职称2013年 6 月 18 日论文原创性保证书我保证所提交的论文都是自己独立完成,如有抄袭、剽窃、雷同等现象,愿承担相应后果,接受学校的处理。
专业:班级:签名:20 年月日摘 要目的 观察蜂胶黄酮对过氧化氢(H 2O 2)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC 12)凋亡的影响及机制。
方法 培养PC 12细胞,取对数生长期细胞分为五组,空白对照组、模型组、蜂胶黄酮高、中、低剂量组,剂量分别为200mg/L 、100 mg/L 、50 mg/L.药物预处理2h 后,孵育H 2O 2(140μmol/L)24h 诱导过氧化损伤。
TUNEL 试剂盒检测原位细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞内活性氧水平以及细胞周期,ELISA 检测细胞内Caspase-3蛋白含量。
结果 TUNEL 细胞凋亡染色显示, H 2O 2组与空白对照组比较染色明显加深,而蜂胶黄酮组染色明显变浅,说明蜂胶黄酮能对抗H 2O 2诱导细胞凋亡;周期结果显示H 2O 2组处于G0/G1细胞明显增多,而处于G2/M 、S 期细胞明显减少,细胞增殖降低,而蜂胶黄酮增加S 期细胞促进细胞增殖;与空白对照组相比H 2O 2组活性氧水平、细胞内Caspase-3含量明显增高,而蜂胶黄酮各剂量组活性氧水平降低,Caspase-3含量减少。
结论 蜂胶黄酮对H 2O 2诱发PC 12神经细胞凋亡有显着的抑制作用,其机制可能其影响细胞周期、清除氧自由基、降低凋亡因子Caspase-3有关。
关键词 蜂胶黄酮;PC 12细胞;H 2O 2;Caspase-3;细胞凋亡AbstractObjective :To observe the protection ofpropolis flavonoidson rat with injuried pheochromocytomacells(PC 12) induced by?hydrogen peroxide(H 2O 2) and to explore its possible mechanism.Methods:Culture?PC 12 cells,the cells inthe logarithmic growth phase weredivided into five groups,blank control group,model group,propolis flavoneof high,medium and low dose group,the dose of 200mg/L,100 mg/L,50 mg/L.After 2h 0fPharmacological preconditioning,the cellswere incubated with H 2O 2(140 μ mol/L)for24hto induceoxidative damage.TUNEL Kitis used fordetermining Cell apoptosis,Flow cytometry was used to detect the intracellular ROS level and cell cycle,ELISA is used for determining the concentration of protein Caspase-3 in cells.Results:Apoptosis of TUNEL cells staining, H 2O 2 group compared with the control group, staining was deepened, and the propolis flavone group was significantly lighter, that propolis flavonoids can antagonize the apoptosis induced by H 2O 2 Cycle showed that H 2O 2 group in G0/G1 cells were increased, and in the G2/M,S phase cells decreased significantly, reduced cell proliferation, and propolis flavonoids increased S phase cells promoting cell proliferation; compared with the blank control group, caspase-3 in H 2O 2group, the levels of reactive oxygen species in cells increased significantly, while the propolis flavone in all dose groups decrease the levels of reactive oxygen species, reduced caspase-3 content.Conclusion : Propolis flavonoids on H 2O 2-induced PC 12 cells damage a significant protective effect,The mechanism may be its effect on cell cycle, scavenging oxygen free radicals, decrease the apoptosis related factor caspase-3.Key words : Propolis; flavonoids; PC 12 cells; H 2O 2; apoptosis目录正文 (01)1前言 (01)2仪器与试剂 (01)3实验方法 (02)3.1 蜂胶总黄酮的提取与含量测定 (02)3.2 PC细胞的培养及分组给12药 (02)3.3 TUNEL细胞凋亡原位检测 (02)3.4流式细胞仪检测细胞周期 (02)3.5流式细胞仪检测细胞内活性氧水平 (03)3.6 ELISA试剂盒检测细胞内Caspase-3蛋白含量 (03)4实验结果 (03)4.1 TUNEL细胞凋亡原位检测 (03)4.2流式细胞仪检测细胞周期 (04)4.3流式细胞仪检测细胞活性氧水平 (05)4.4 ELISA检测细胞内Caspase-3蛋白含量 (06)5讨论 (07)6结论 (08)参考文献 (09)文献综述 (10)致谢 (15)蜂胶黄酮抗H2O2诱导PC12细胞凋亡机制的研究学生:*** 指导教师:***(泰山医学院药学院,泰安 271016)1 前言老年性痴呆 (Alzheimer′s disease, AD) 是一种以进行性认知功能障碍和记忆能力受损为主的中枢神经系统退行性疾病。
该病严重威胁中老年人的健康,对社会和经济造成巨大压力。
因此,研究AD发病机制及寻求有效药物防治已成为目前世界医药界的热点和难点。
氧化应激损伤神经元在神经退行性病变中具有重要的病因学意义。
研究表明老年性痴呆与氧化应激损伤密切相关。
H2O2是和氧化应激反应密切相关的活性氧之一,它参与了许多神经系统疾病的发病,与多种疾病如自身免疫病,肿瘤,炎症以及细胞凋亡的发生有关,长期用作神经细胞氧化损伤的诱导剂。
蜂胶(Propolis) 被誉为“紫色黄金”,是蜜蜂从植物新生枝嫩芽或花蕾处采集的树脂类物质,掺入其舌腺及蜡腺分泌物,经蜜蜂反复混合而成的胶状物质。
蜂胶富含多种具有药用价值的活性成分,其中主要是黄酮类化合物。
本课题组前期研究发现蜂胶醇提物对东莨菪碱、亚硝酸钠、三氯化铝诱导的小鼠学习记忆障碍模型具有明显保护作用,对D-半乳糖诱导衰老模型小鼠学习记忆功能也有保护作用,其作用机制可能与其对抗小鼠体内过氧化反应有关[1-2]。
通过MTT、流式细胞术等前期研究也发现蜂胶黄酮能有效的保护H2O2诱导的PC12细胞损伤,提高细胞存活率,抑制细胞凋亡,为进一步研究其抗痴呆作用奠定了基础。
PC12细胞为大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞,在细胞形态,结构,功能上与多巴胺神经元有许多相似特征,能够表达多巴胺转运体,是体外神经细胞损伤及保护作用研究使用最为广泛的细胞系。
本实验拟培养大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤细胞PC12细胞株,以H2O2诱导神经细胞损伤,蜂胶黄酮干预, TUNEL 染色观察蜂胶黄酮的抗凋亡作用,并通过检测细胞周期、活性氧及Caspase-3对蜂胶黄酮的抗凋亡机制进行研究。
2 仪器与试剂2.1 材料和试剂蜂胶原胶,购自山东省实验种蜂场;PC12细胞(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株),购自南京凯基生物技术有限公司;二甲基亚砜(DMSO)、胰蛋白酶、PBS,购自于索莱宝;完全DMEM 培养基、新生牛血清(NBS),购自于南京凯基生物技术有限公司;TUNEL细胞原位凋亡测定试剂盒、活性氧试剂盒及细胞周期检测试剂盒(购自于南京凯基生物技术有限公司)、ELISA试剂盒(蓝基生物技术有限公司)。
其它试剂均为分析纯。
2.2 仪器二氧化碳孵箱(Thermo);单人双面超净工作台(SW-CJ);倒置式生物显微镜(XDS-1B);酶标仪(Infinite f200);流式细胞仪(FACSCalibur);高速离心机(TGL-16G);数控超声波清洗器(KQ-600DB);旋转蒸发仪(RE-52A 上海亚荣生化仪器厂)、恒温干燥箱(施都宝Bao-80A)、恒温水浴锅(HW.SY21-K)、超低温冰箱(Thermo)。
3.实验方法3.1蜂胶黄酮的提取与含量测定取蜂胶50g粉碎,用85%乙醇浸泡4天,配料比蜂胶(g):85%乙醇(ml)为1:30,在30℃条件下超声50min后,旋转蒸发仪蒸发成浸膏状,冰箱4℃内保存备用。
以芦丁为标准品,得标准曲线y=13.656x+0.0404, R2=0.9969,计算蜂胶中黄酮含量为:4.86mg/g。
3.2 PC12细胞的培养及分组给药在37℃,恒湿的5%CO2细胞培养箱内培养PC12细胞,完全培养基为高糖DMEM培养基中含10%新生小牛血清,加入100 μg/ml链霉素和100 μg/ml氨苄青霉素。
细胞为上皮样贴壁生长,每2~3 d传代1次,取对数生长期细胞用于实验。