HPLC法测定心脑联通分散片中野黄芩苷的含量
高效液相色谱法测定痛舒片中野黄芩苷的含量

高效液相色谱法测定痛舒片中野黄芩苷的含量作者:牛延菲等来源:《云南中医中药杂志》2013年第08期摘要:目的:建立用高效液相色谱法测定痛舒片中野黄芩苷含量的方法。
方法:用waters XTerra C18柱(5μm,4.6×250 mm)色谱柱;流动相:甲醇-四氢呋喃-0.1%磷酸溶液(14:14:72);检测波长335 nm;柱温30℃,流速1.0 mL/min,进样量5 μL。
结果:对照品线性范围为0.1316μg~2.632μg,相关系数0.9997,平均回收率为100.64%,RSD=1.22%(n=9)。
结论:该方法简便可行,重复性好,能有效控制痛舒片的质量。
关键词:痛舒片;野黄芩苷;高效液相色谱法中图分类号:R284.2文献标志码:A文章编号:1007-2349(2013)07-0051-03痛舒片由云南省药物研究所制药厂生产,由七叶莲、三七、灯盏细辛、玉葡萄根等组成,对治疗跌打损伤、风湿性关节痛、肩周炎、痛风性关节痛、乳腺小叶增生等疾病有显著疗效。
灯盏细辛作为其处方中药味之一,具有活血通络止痛,祛风散寒之功效,用于中风偏瘫,胸痹心痛,风湿痹痛[1]。
野黄芩苷为灯盏细辛的有效成分,具有降低脑血管阻力,改善脑血循环、增加脑血流量及抗血小板凝集的作用。
同时,野黄芩苷也是中国药典规定的灯盏细辛药材中的主要检验指标。
在痛舒片药品质量标准中未对野黄芩苷的含量进行控制,本文以灯盏细辛的有效成分野黄芩苷为对照,对HPLC测定痛舒片中野黄芩苷含量的方法进行研究,确定了易控的高效液相色谱方法。
1实验部分1.1仪器与试药美国Agilent1100高效液相色谱仪:包含四元泵、DAD检测器、自动进样器、在线真空脱气机、智能化柱温箱及HP化学工作站;SK3200LH超声波处理器;痛舒片(批号:100831、100929、110211、110315、110627、110719、110808、110826、110923、111012),由云南省药物研究所制药厂提供;野黄芩苷对照品(批号:110842-200403),供含量测定用(纯度97.12℅),由中国药品生物制品检定所提供;所用流动相甲醇、四氢呋喃为色谱纯,磷酸为分析纯,水为超纯水,处理样品的甲醇为分析纯。
HPLC法测定润肺止咳片中黄芩苷的含量

H L 法 又常称为高压 液相色 谱法 ,是 由经典液 相色谱法 发展而 PC
来的一种新型的液相柱色谱。H L 与后者不同之处在于流动相由原 PC
来 的常压 输送改为高压输 送 ,采用小颗粒或 特殊 表面设计的柱填料 代 替原 来的大颗粒 、不规 则多孔填充物 ,从 而使 流动相流速加快 ,分离 效 果大大提 高。H L 并配有各种检 测器 ,能灵敏地检 出柱 中流 出物 PC
的组 分与含 量 ,使分 离与测定 组成一个统 一系统 。在H L 过程 中 , PC 流动相溶剂被泵从 贮液器 中吸入 ,然后 输出 ,经压力和 流量 测量后进 人送 样器 ,被分析 样品 由此处注入 ,并随流动相一起依次通过 保护柱 ( 并非必需部件 )、分离柱后进入检 测器 ,检测信号 由微处理机采集
【 要 】 目的 建 立 润 肺止 咳 片的 黄 芩苷 含 量 测 定标 准 ,更 有 效地控 制 该 产 品质 量 。方 法 含 量 采 用 高效 液相 色谱 ( P C 测 定制 剂 中 摘 HL)
的 黄 芩 苷 。 高效 液 相 色谱 条件 :K o sO 一C 8 rmai DS1 1 ,流 动 相 : 甲 醇 一 03% 磷 酸 (6 :5.) l . 2 4. 9 31。结 果 H L 准确 、可 靠 , 回 收率 为 PC
ofa s he e f r g a i he g o sm o phoog he h m a c m o r d ng t r s r l y oft u n
i ev r b a d c ] p e 9 01 () 1- 1 . n re e rl i [ . i , 9 ,55: 1 5 t t s JS n 1 4 4 【] Ura P o e sSD g n rt no eit v r ba ds [ . 4 b nJ , b r . e e eai f h e e e r l i J R t o t n r t c ] A tr iR s h r 0 3 () 2 —3 . r is e T e, 0 , 3 : 0 10 h t 2 5 1
黄芩提取物黄芩苷高效液相法

黄芩提取物黄芩苷高效液相法概述黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)是一种传统的中药材,广泛用于治疗炎症、感染和肿瘤等疾病。
黄芩提取物中的黄芩苷(baicalin)是其主要活性成分之一,具有抗氧化、抗菌、抗炎和抗肿瘤等多种药理作用。
因此,开发一种高效的液相色谱法用于测定黄芩提取物中的黄芩苷含量具有重要意义。
实验方法仪器设备•高效液相色谱仪(HPLC)•色谱柱:C18色谱柱•注射器:10μL固定体积注射器•色谱检测器:紫外检测器(UV)•称量仪:电子天平色谱条件•流动相:甲醇 - 水(含0.1%三氟乙酸)•流速:1.0 mL/min•柱温:30°C•紫外检测波长:280 nm样品制备将黄芩提取物粉末取约1 g,加入20 mL甲醇中,用超声波溶解10分钟,然后离心10分钟,取上清液并过滤。
取适量上清液进一步稀释。
校准曲线制备准备一系列浓度不同的黄芩苷标准溶液,分别为0.1 mg/mL、0.5 mg/mL、1 mg/mL、2.5 mg/mL、5 mg/mL。
以10 μL为一次注射量进行色谱分析。
色谱分析将样品和标准溶液以10 μL固定体积注射器注入HPLC系统中进行色谱分析。
记录峰面积,并根据标准曲线计算黄芩苷的含量。
结果与讨论校准曲线根据不同浓度的黄芩苷标准溶液进行HPLC分析,并绘制出峰面积与浓度的关系曲线。
通过回归分析得到拟合方程,并计算相关系数(R^2)来评估拟合效果。
方法验证对黄芩提取物样品进行重复性实验和稳定性实验,评估该方法的重复性和稳定性。
另外,还可以比较该方法与传统方法的结果,评估其准确性和精确度。
样品分析将不同来源的黄芩提取物样品进行HPLC分析,测定其中黄芩苷的含量。
对不同样品的结果进行比较和统计分析,评估不同来源黄芩提取物中黄芩苷的差异性。
结论通过该高效液相色谱法,可以准确、快速地测定黄芩提取物中的黄芩苷含量。
该方法具有较好的重复性、稳定性和准确度,适用于黄芩提取物质量控制和药理研究中的应用。
HPLC法测定双黄消炎片中黄芩苷的含量

HPLC法测定双黄消炎片中黄芩苷的含量
莫海涛;刘元;宋志钊
【期刊名称】《中国民族民间医药》
【年(卷),期】2009(018)017
【摘要】目的:建立双黄消炎片中黄芩苷的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,以phenomenx HyperClone柱(C18,4.6mm×250mm,5μm)为分离柱,以甲醇-水-磷酸(46:54:0.2)为流动相,315nm为检测波长,柱温为室温.结果:黄芩苷在10.0~100.0μg范围内,峰面积与其浓度呈良好线性关系(r=0.9993),平均回收率为99.8%,RSD为0.60%(n=5).结论:该方法简便、准确、重复性好,可作为该制剂含量测定方法.
【总页数】2页(P24-25)
【作者】莫海涛;刘元;宋志钊
【作者单位】广西省南宁市冠峰制药有限公司;广西中医药研究院;广西中医药研究院
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
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HPLC法测定双黄消炎片中黄芩苷的含量

HPLC法测定双黄消炎片中黄芩苷的含量
王国凯;刘劲松
【期刊名称】《广州化工》
【年(卷),期】2014(042)004
【摘要】建立高效液相法测定双黄消炎片中黄芩苷含量的方法.色谱柱为汉邦(4.60 mm ×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸=(50∶50),流速1.0 mL·min-1;检测波长为274 nm.黄芩苷在17.6~176.0 μg·mL-1浓度范围与峰面积呈良好的线性关系(R =0.9991),平均回收率为98.14%,RSD=0.99%.本方法简便、准确、专属性强、重现性好,可用于双黄消炎片中黄芩苷的含量测定.
【总页数】3页(P105-107)
【作者】王国凯;刘劲松
【作者单位】安徽中医药大学药学院,现代中药安徽省重点实验室,安徽合肥230031;安徽中医药大学药学院,现代中药安徽省重点实验室,安徽合肥230031【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
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HPLC法测定利胆排石片中黄芩苷的含量

HPLC法测定利胆排石片中黄芩苷的含量
李玉芹
【期刊名称】《中国医药指南》
【年(卷),期】2012(010)022
【摘要】目的建立高效液相色谱法测定利胆排石片中黄芩苷的含量.方法采用色谱柱为Chromanalysis ODS 柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为甲醇- 水- 冰醋酸(48:52:1);检测波长278nm;柱温20℃;流速1.0mL/min.结果黄芩苷在
2.55~20.4μg/mL 的浓度范围内,浓度对峰面积具有良好的线性关系.黄芩苷平均回收率为100.1%,RSD 为1.47%.结论建立的HPLC 法操作简便、灵敏度高、精密度好,可为利胆排石片的质量控制提供依据.
【总页数】2页(P62-63)
【作者】李玉芹
【作者单位】山东临沂市人民医院,山东,临沂,276003
【正文语种】中文
【中图分类】R282.710.3
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实验八高效液相色谱法测定双黄连口服液中黄芩苷的含量
实验八高效液相色谱法测定双黄连口服液中黄芩苷的含量一、目的要求1.练习使用高效液相色谱仪2.学会用外标法定量分析二、实验原理外标法可分为外标一点法、外标二点法及标准曲线法。
当标准曲线截距为零时,可用外标一点法进行定量。
利用高效液相色谱法进行分离双黄连口服液中的黄芩苷,在λmax274nm 处进行检测。
在药物分析中,为了减小实验条件波动对分析结果的影响,采用随行外标一点法定量,即每次测定都同时进对照品与供试品溶液。
三、仪器与试药1.仪器高效液相色谱仪、超声波提取器、分析天平、微量注射器、ODS-C18反相色谱柱、容量瓶(25ml,50ml)2.试药黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所)、双黄连口服液(三精制药)、甲醇(色谱纯)、冰醋酸(A·R)、双蒸水。
四、实验内容与步骤1.色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-水-冰醋酸(50:50:1)为流动相;检测波长为274nm。
理论塔板数按黄芩苷峰计应不低于1500。
2.对照品溶液的制备精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量,加50%甲醇制成每1ml含0.1mg 的溶液,0. 45μm滤膜滤过,即得(浓度为0.1216mg/ml)。
3.供试品溶液的制备精密量取本品1ml,置50ml量瓶中,加50%甲醇适量,超声处理20分钟,放置至室温,加50%甲醇稀释至刻度,摇匀,0. 45μm滤膜滤过,即得。
4.样品测定分别精密吸取对照品溶液10μl与供试品溶液5μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品每1ml含黄芩以黄芩苷计不得少于8mg。
五、思考题1、HPLC中常用的定量方法有几种?外标一点法有何优缺点?2、紫外检测器的优缺点是什么?教你如何用WORD文档(2012-06-27 192246)转载▼标签:杂谈1. 问:WORD 里边怎样设置每页不同的页眉?如何使不同的章节显示的页眉不同?答:分节,每节可以设置不同的页眉。
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HPLC法测定利胆片中黄芩苷含量的方法学研究
HPLC法测定利胆片中黄芩苷含量的方法学研究
刘惠文;安瑜;杨天寿
【期刊名称】《宁夏医学杂志》
【年(卷),期】2014(0)12
【摘要】目的建立一种可测定利胆片中黄芩苷含量的HPLC方法.方法用Kromasil C18(250 mm ×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液(47∶53),流速为1.0 mL·min-1,检测波长为276 nm,柱温为40℃.结果黄芩苷在
0.07~2.80 μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9997),平均回收率为99.1%,RSD为
1.4%.结论本方法简便、快速、准确可靠,适合利胆片的质量控制.
【总页数】2页(P1194-1195)
【作者】刘惠文;安瑜;杨天寿
【作者单位】宁夏人民医院医疗急救中心综合办公室,宁夏银川 750002;宁夏固原市药品检验所,宁夏固原756000;宁夏固原市药品检验所,宁夏固原756000
【正文语种】中文
【中图分类】R286
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液相法测定三黄片中盐酸小檗碱和黄芩苷含量
高效液相法测定三黄片中盐酸小檗碱和黄芩苷的含量摘要:建立测定三黄片中盐酸小檗碱和黄芩苷含量的高效液相色谱方法。
采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4. 6 mm ×150 mm, 5 μm);流动相为0. 1 %磷酸(A) -乙腈(B);梯度洗脱;流速为1.0 mL·min-1;检测波长为333 nm。
小檗碱在0.0061~ 0.0243 mg·mL-1范围内,黄芩苷在0.038 ~ 0.152mg·mL-1范围内线性关系良好。
本文中所建立的色谱方法可以简便、准确同时测定三黄片中盐酸小檗碱和黄芩苷的含量。
关键词: 三黄片;盐酸小檗碱;黄芩苷;高效液相色谱法ABSTRACT: To establish a HPLC method for the simultaneously determination of berberine hydrochloride and baicalin in Sanhuang tablet.The determination was performed on a Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm ×150 mm, 5 μm) with mobile phase(using gradient) consisted acetonitrile-0.1%H3PO4 at flowing rate 1.0 mL•min–1. The detection wavelength was at 333 nm. The method had good linear relationship within the range of 0.0061~ 0.0243 mg·mL-1for berberine hydrochloride and within the range of 0.038 ~ 0.152 mg·mL-1for baicalin.The chromatographic method established can be used simply and accurately to simultaneously determine berberine hydrochloride and baicalin in Sanhuang tablet.KEY WORDS: Sanhuang tablet; berberine hydrochloride;baicalin;HPLC三黄片由大黄、黄芩浸膏和盐酸小檗碱组成,具有清热燥湿、泻火解毒等功效,主治热毒内盛、高热烦躁、湿热黄疸、下痢。
HPLC法测定复方蒲芩片中黄芩苷的含量
HPLC法测定复方蒲芩片中黄芩苷的含量
刘同祥;王慧森
【期刊名称】《中国中医药信息杂志》
【年(卷),期】2004(011)003
【摘要】目的测定复方蒲芩片中黄芩苷的含量.方法样品用7 0%乙醇超声处理,经高效液相色谱仪测定.色谱柱:Hypersil C18(5μm,200mm×4.6mm);流动相:甲醇-水-磷酸(47:5 3:0.2);流速:1.0mL/min;柱温:40℃,检测波长:280nm.结果复方蒲芩片中黄芩苷与其它组分良好分离.线性范围为0.193~0.965 μg,r=0.9998,平均回收率98.28%,RSD为1.75%.结论本方法操作简便、灵敏度高、结果准确,可用于复方蒲芩片中黄芩苷的测定.
【总页数】2页(P225-226)
【作者】刘同祥;王慧森
【作者单位】河南四方药业有限公司,河南,周口,466001;河南省中医药研究院,河南,郑州,450003
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
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HPLC法测定心脑联通分散片中野黄芩苷的含量
严亚锋1,马文龙2
(1.陕西中医学院2009级研究生,陕西,咸阳712046;2.杨凌示范区医院,陕西,杨凌712100)
摘要:目的建立用HPLC法测定心脑联通分散片中野黄芩苷的含量。
方法采用
色谱柱(5μm,4.6×250mm );柱温: 40℃;流动相为甲醇-0.1% HPLC法,Kromasil C
18
磷酸溶液(40:60);检测波长335nm。
以野黄芩苷为对照品,外标法定量。
结果野黄芩苷在21.60~108.00ug/ml范围内线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率为98.25%,RSD=1.04%。
结论本法操作简便、准确,重现性好,可用于该制剂的质量控制。
关键词:心脑联通分散片;野黄芩苷;HPLC;含量测定
心脑联通分散片是由SFDA《国家中成药标准汇编》心系分册“心脑联通胶囊”[WS-10031(ZD-0031)-2002]改变剂型而来,处方由灯盏细辛、虎杖、野山楂等七味中药组成,具有活血化瘀,通络止痛的功效。
用于瘀血闭阻引起的胸痹,眩晕,症见胸闷,胸痛,心悸,头晕,头痛耳鸣等,以及冠心病心绞痛,脑动脉硬化及高脂血症见上述证候者[1]。
本试验采用HPLC法对方中灯盏细辛所含野黄芩苷进行含量测定[2-4],该法分离度良好、定量准确、重现性好,可作为心脑联通分散片的质量控制指标之一。
1仪器与试药
1.1 仪器:LC-10ATvp液相色谱仪(日本岛津);SPD-10Avp紫外检测器(日本岛津);CS-Light中文色谱软件。
1.2 试药:野黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号为110842-200605);甲醇为色谱纯;水为重蒸馏水;心脑联通分散片自制(批号:100201、100202、100203);其他试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1 色谱条件色谱柱:Kromasil C18柱(5μm,4.6×250mm);流动相:甲醇-0.1%磷酸溶液(40:60);检测波长:335nm;流速:1.0ml/min;柱温: 40℃;理论板数按野黄芩苷峰计算应不低于4500。
2.2 供试品溶液的制备取本品10片,研细,取0.5g,精密称定,加三氯甲烷适量,置索氏提取器中提取2小时,弃去三氯甲烷液,药渣挥尽三氯甲烷,连同滤纸筒移入具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50ml,密塞,称重,水浴加热回流1小时,放冷,再称重,
用甲醇补足缺失的重量,蒸干甲醇,残渣加水30ml ,用乙酸乙酯洗涤3次,每次20ml ,弃去乙酸乙酯层,水层用稀盐酸调P H 至1,再用乙酸乙酯提取5次,每次15ml ,合并乙酸乙酯层,蒸干,加甲醇定容至10ml 容量瓶中,用微孔滤膜(0.45μm )滤过,取续滤液,即得。
2.3 对照品溶液的配制 取经五氧化二磷干燥12小时的野黄芩苷对照品适量,精密称定,加甲醇使溶解,制成每1ml 含60μg 的溶液,摇匀,即得。
2.4 标准曲线和线性范围考察 精密称取经五氧化二磷减压干燥24小时的野黄芩苷
2.16 mg ,置于10ml 容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,作为储备液待用。
精密吸取上述储备液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml ,分别置于5ml 容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,在上述色谱条件下测得峰面积。
以峰面积为纵坐标,野黄芩苷浓度为横坐标绘制标准曲线,得线性方程为:Y=0.3899X +0.1945,r=0.9999。
结果表明:野黄芩苷在21.60~108.00μg/ml 浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系。
2.5 干扰试验 照处方比例制备不含灯盏细辛的空白样品,按供试品溶液制备方法制备成阴性对照溶液。
精密吸取阴性对照溶液、对照品溶液及供试品溶液各10μl ,按上述色谱条件测定,结果阴性对照在野黄芩苷峰部位无干扰。
见图1。
A B C
图1 心脑联通分散片HPLC 图
A .对照品
B .样品
C .阴性
2.6 精密度考察 精密吸取同一份供试品(批号:100201)溶液10μl ,重复进样6次,测定峰面积积分值,野黄芩苷含量的RSD=0.58%(n=6)。
结果表明,本法精密度良好。
2.7 稳定性考察 取同一批号的供试品(批号:100201)溶液,分别于0、2、4、8、12h 精密吸取10μl ,按上述色谱条件测定峰面积积分值,野黄芩苷含量的RSD=0.92%(n=5),表明在12h 内具有良好稳定性。
0 5 10 15
0 5 10 15 0 5 10 15
2.8 重复性考察 取同一批号供试品(批号:100201)6份,按2.2项下方法制备供试品溶液,测定野黄芩苷峰面积积分值,并计算得平均含量为 1.1770mg/g ,其含量的RSD=1.44%(n=6)。
2.9 加样回收率考察 精密称取已知含量样品(1.1770mg/g )6份,分别精密加入野黄芩苷对照品溶液(0.106mg/ml )2、2、3、3、4和4ml ,按2.2项下方法制得供试品溶液,并按上述色谱条件测定,计算回收率,结果平均回收率为98.25%,RSD=1.04%(n=6)。
见表1。
表1 加样回收率试验结果(n=6)
取样量(g ) 野黄芩苷量(mg) 加入野黄芩苷量(mg)
测得野黄芩苷量 (mg) 回收率(%) 均值(%) RSD(%)
0.2520
0.2966 0.212 0.5045 98.07 98.25 1.04 0.2513
0.2958 0.212 0.5027 97.59 0.2496
0.2938 0.318 0.6108 99.69 0.2557
0.3009 0.318 0.6136 98.33 0.2543
0.2993 0.424 07191 99.01 0.2536 0.2985 0.424 0.7089 96.79
2.10 样品含量测定 取3批样品,依2.2项下方法制备供试品溶液,分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl ,并按上述色谱条件测定,结果见表2。
表2 样品含量测定结果
批号
含量(mg/片) 100201 0.7083 100202
0.6866 100203 0.7250
根据三批样品测定结果,暂定本品每片含灯盏细辛以野黄芩苷(C 21H 18O 12)计,不得
少于0.60mg 。
3 讨论:
3.1本文曾对供试品溶液制备方法分别直接采用超声提取法和回流提取法,结果杂质均较多,分离难度较大。
后改用本法经多步除杂后,样品分离较好。
3.2 对供试品溶液制备方法中的加甲醇加热回流时间、提取液的pH 值、乙酸乙酯提取次数进行了正交试验考察,结果以加甲醇加热回流1小时、提取液的pH 值调至1、乙酸乙酯提取5次为最佳。
3.3野黄芩苷的含量测定试验中曾以乙腈:水:冰醋酸多种比例为流动相进行试验,结果分离效果均不理想,后改用甲醇-0.1%磷酸溶液多种比例试验,发现甲醇和0.1%磷酸溶液的比例为40∶60时,野黄芩苷分离效果良好,出峰时间较短。
参考文献:
[1] WS-10031(ZD-0031)-2002,国家中成药标准汇编[S].
[2] 孙平川,邓亚利,郭慧琴等. HPLC法测定心脑联通片中野黄芩苷的含量[J].西北药学杂志, 2008, 23(5):290~291.
[3] 栾爽,王冬梅,赵怀清等.HPLC同时测定心脑联通胶囊中葛根素、虎杖苷和野黄芩苷的含量[J]. 中国药学杂志,2008,43(19): 1510~1512.
[4] 程雪梅,罗俊芳,李颜等. HPLC法测定灯盏生脉片中野黄芩苷的含量[J].上海中医药杂志, 2008, 42(7):86~88.。