4种自体神经移植方法修复周围神经缺损比较
组织工程在周围神经缺损修复中的应用
【 ｅ ｒｓ Ｎｅ ｅ ｒ ｅ ｉ ； ｒａ ｉ ｔ ｎ ｒ ｅ ｔ ｒ ｅ ｕ ｉｏ ｃ ｒ Ｓ ｈ ｎ ｅ ｓＥ ｔ ｃｌ ｌ ｔｘ Ｋ ｙＷｏｄ】 ｖ ｄｖ ｐ ｅ ｒ ｉ ｐ Ｏ ｇ ｎｚ ｉ ｏ ｃ； ｖ ｔ ｔ ｎ ａ ｔ ； ｃ ｗａ ｎ ｌ ； ｘｒ ｅｌ ａ ｍａ ｉ ａ ｏ ｐ ｊ Ｎｅ ｎ ｒ ｉ ｆ ｏ Ｃ ｌ ａ ｕ ｒ ｒ
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因此 ， 围神 经缺 损 的修 复 研 究 在 临床 上 具 有 很 现 实 的意 周 义。 现今 的研 究 重 点 多数 集 中 在 周 围神 经 缺 损 的 修 复 上 。
这 里 只 对 周 围神 经 缺 损 的 修 复 研 究 进 展 作 一 个 介 绍 。
周 围神 经缺 损 的修 复 ， 目前 临床 上 常 用 的方 法 主 要 是 自体神 经 移 植 或 者 移 植 翻 转 的静 脉 管 。 由于 这 些 方 法 供 但 体有限， 而且 会 影 响供 体 区 的功 能， 异 体移 植 又 会 引起 较 而
组织工程试题解答
D fd1、组织工程的三要素是什么?基本原理是什么?三要素:a)种子细胞; b)支架材料; c)生长因子基本原理:a) 由人体取出细胞;b) 在体外将细胞培养到足够的数量;c) 将这些细胞填入、养在人工支架里;d) 有时需要再加一些化学物或生长因子促进细胞的分化;e) 将此人工组织移植到患者身上。
2、组织工程的生长因子有哪些分泌方式?为什么生长因子需要控制性释放?根据生长因子产生细胞与接受生长因子作用的细胞相互之间的关系,可概括为以下三种模式:(1)内分泌(endocrine),生长因子从细胞分泌出来后,通过血液运输作用于远隔靶细胞。
如:血小板源生长因子(PDGF)源于血小板,作用于结缔组织细胞。
(2)旁分泌(paracrine),细胞分泌的生长因子作用于邻近的其他类型细胞,对合成、分泌该生长因子的自身细胞不发生作用,因为它缺乏相应受体。
(3)自分泌(autocrine),生长因子作用于合成及分泌该生长因子的细胞本身。
生长因子以后两种作用方式为主。
生长因子优点诸多,但是也存在很多问题,主要是高扩散性和半衰期短,生物学活性难以长期保存。
局部直接应用生长因子可在较短的时间内发挥作用,但在生理环境下很容易使之迅速失活,不产生预期的生理效应。
因此,采用控制性释放技术,对生长因子进行保护,使之在有水环境下即能保持活性,又能持续释放或控制释放,是使生长因子得到有效应用的关键。
3、组织工程用支架材料的基本要求是什么?为什么需要多孔结构?良好的生物相容性良好的生物降解性具有三维多孔立体结构可加工性和有一定的机械强度良好的材料-细胞界面良好的消毒性能合适的孔尺寸、高的孔隙率和相连通的孔形态,以利于大量细胞的种植、细胞和组织的生长、细胞外基质的形成、氧气和营养的传输、代谢物的排泄以及血管和神经的内长入。
A4、组织工程种子细胞的基本要求是什么?5、组织工程皮肤和骨骼等器官构建路线是什么?所构建的人工器官优缺点各是什么?采用动物实验检测所构建的器官的大概步骤是什么?6、与组织工程密切相关的两项医学生理学奖的获得者的姓名,时间,发现内容是什么呢?1986年美国生物化学家斯坦利·科恩(Stanley Co-hen) 和意大利生物学家丽塔·莱维-蒙塔尔奇尼(Rita Levi-Mont.alcini)共同获得诺贝尔生理学或医学奖。
神经吻合法
神经吻合法时间：2009年06月11日15:03 来源：好医生网站在临床上，修复神经的手术方法主要包括：端端吻合法、端侧吻合法及侧侧吻合法。
一、端端吻合法：对于无缺损的周围神经损伤，通常采用端端吻合法。
端端吻合法是最常用，也是最有效的方法。
在有侧枝发芽的再生神经纤维支配的基础上，经端端吻合口再生的数量多、质量好的神经纤维进一步长入，提高远端胫神经的质量，改善最终肌肉功能恢复。
端端吻合法可以尽量恢复神经结构的解剖连续性；可以发挥远端神经的接触性引导作用。
利用近端神经再生时具有特异性与选择性的特点，使再生神经纤维较准确地生长达到靶器官，最大程度地恢复其支配功能。
但是，高位神经损伤行端端吻合后，因为距离长、神经再生速度慢，导致神经再生时间长；且因时间过长肌肉萎缩变性，运动终板退变、消失，导致再生的神经纤维长入靶器官后并不能恢复原有的功能。
端端吻合法二、端侧吻合法：神经端侧吻合法由Balance1903年提出，并用于面神经与副神经端侧吻合治疗面神经瘫，取得较好效果。
此后Ham和Low等将臂丛神经上干植入颈7神经根治疗臂丛上干损伤，取得一定疗效。
端侧吻合法的优点：1、对有缺损的周围神经损伤，应用此方法可避免神经移植；2、此方法可通过将吻合口尽量的靠近靶器官，使其得到较早的神经再支配；3、对供体神经不造成明显的损害。
但是关于端侧吻合法的恢复效果仍存在分歧。
大多数学者发现，端侧吻合无论是在数量、质量和时间上均不如端端吻合法；且端侧吻合后再生神经的质量仅为端端吻合的2/3，约为正常的一半；韦兆祥等通过HRP逆行追踪的方法，证实端侧吻合后神经可以再生，但其再生速度及再生神经数量均较对端端吻合法差。
【HRP（horse radish peroxidase），辣根过氧化物酶，是一种含亚铁血红素的蛋白质，广泛分布于植物界，它是由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉结合而成的糖蛋白，糖含量18％。
因为HRP的辅基和酶蛋白最大吸收光谱分别为403nm和275nm，所以它是一种很好的酶原标记物。
人去细胞异体神经一期移植重建手指神经缺损
人去细胞异体神经一期移植重建手指神经缺损尽管周围神经损伤伴缺损的治疗金标准仍然是自体神经移植修复，但是近些年来各种各样的人工生物套管以及同种异体神经在神经缺损修复当中扮演着越来越重要的角色，其中最具潜力替代自体神经的移植物是人脱细胞神经。
与传统方法相比，人去细胞神经不存在任何供体受区的损伤，且来源广泛。
化学去细胞处理后的异体神经既保留了原有的结构又降低了免疫源性，且术后无需服药。
尽管同种异体神经临床的使用还处于初期阶段，但修复指神经缺损的临床效果都较为确定。
在既往的研究当中，神经移植重建都在损伤后1周或数周以后进行，主要考虑到伤口稳定以及减少术后炎症的发生比率。
缺点就是患者需要进行2次手术，增加了住院和康复时间。
来自中国宁波市第六医院的李学渊所在团队首次将人体去细胞异体神经应用于手外伤急诊手术修复。
针对急诊15例患者的18指神经损伤伴缺损，彻底清创后，以人体去细胞神经移植重建指神经。
重建后随访6-24个月。
静态两点辨别觉结果优良率为89%；轻触觉明显改善率为78%。
提示人体去细胞神经移植一期重建手外伤指神经缺损临床操作可行，为缺损周围神经的重建提供了新趋向。
相关文献发表于《中国神经再生研究（英文版）》杂志2015年1月第1期。
以人体去细胞神经移植重建指神经损伤伴缺损Article: " One-stage human acellular nerve allograft reconstruction for digital nerve defects," by Xue-yuan Li1, Hao-liang Hu1, Jian-rong Fei1, Xin Wang1, Tian-bing Wang2, Pei-xun Zhang2, Hong Chen1 (1 Department of Hand Surgery, Ningbo No.6 Hospital, Ningbo, Zhejiang Province, China; 2 Department of Trauma and Orthopedics, Peking University People’s Hospital, Beijing, China)Li XY, Hu HL, Fei JR, Wang X, Wang TB, Zhang PX, Chen H (2015) One-stage human acellular nerve allograft reconstruction for digital nerve defects. Neural Regen Res 10(1):95-98.欲获更多资讯：Neural Regen ResOne-stage human acellular nerve allograft reconstruction for digital nerve defectsAutologous nerve graft repair has become a gold standard for the treatment of peripheral nerve injury combined with defects. However, a variety of biological conduits and nerve allografts have played increasingly important roles in the repair of nerve defects. Human acellular nerves have become the most promising substitute for autologous nerve grafts.Compared with traditional methods, human acellular nerves do not induce damage to affected areas of the donor, and there is a wide variety of sources. With developments in medical technology, nerve allografts after acellular treatment have been shown to retain the original structure and reduce immunogenicity. Moreover, patients do not have to take medicine following surgery. The clinical use of nerve allografts is still in the early stages, but studies have shown positive clincial repair outcomes of digital nerve defects.In previous studies, nerve graft reconstruction was conducted at 1 week or several weeks after injury, resulting in wound stability and reduced incidence rate of postoperative inflammation. The disadvantage of this method is that patients require two surgeries, which increased hospitalization and recovery time.Xue-yuan Li, Ningbo No.6 Hospital, China and his colleagues first used human acellular nerve allograft to reconstruct < 5-cm digital nerve defects in 18 digits of 15 patients with nerve injury from the emergency department. The patients were followed up for 6–24 months after reconstruction. Mackinnon-Dellon static two-point discrimination results showed excellent and good rates of 89%. Semmes-Weinstein monofilament test demonstrated that light touch was normal, with an obvious improvement rate of 78%. These findings confirmed that human acellular nerve allograft for one-stage reconstruction of digital nerve defect after hand injury is feasible, which provides a novel trend for peripheral nerve reconstruction. The relevant article was published in the Neural Regeneration Research (Vol. 10, No. 1, 2015).Reconstruction of nerve injury accompanied by defects using human accellular nerve allograft.Article: " One-stage human acellular nerve allograft reconstruction for digital nerve defects," by Xue-yuan Li1, Hao-liang Hu1, Jian-rong Fei1, Xin Wang1, Tian-bing Wang2, Pei-xun Zhang2, Hong Chen1 (1 Department of Hand Surgery, Ningbo No.6 Hospital, Ningbo, Zhejiang Province, China; 2 Department of Trauma and Orthopedics, Peking University People’s Hospital, Beijing, China)Li XY, Hu HL, Fei JR, Wang X, Wang TB, Zhang PX, Chen H (2015) One-stage human acellular nerve allograft reconstruction for digital nerve defects. Neural Regen Res 10(1):95-98.。
周围神经损伤再生与修复的研究进展
周围神经损伤再生与修复的研究进展陈焱肖志宏邢廾谋周围神经损伤后神经轴突连续性中断，神经纤维传导障码．导致感觉退化和自主功能丧失。
神经元表型从传送者转换为再生状态，激活负责神经元存活和轴突再生的相关基因表达。
临床上周围神经应尽叮能采取端-端吻合修复，如直接吻合张力过大，神经移植是最常用的方法，但对供区损害却无法避免。
随着分子生物学及材料工程技术的进步，神经导管和生物治疗在周围神经损伤修复巾变得越来越取要。
本文主要对周围神经损伤基础研究及临床应用的最新进展进行综述。
一．神经再生的细胞分子生物学1神经再生的分子机制：神经损伤后，病变部位从轴突远端与神经细胞断开连接。
周围神经切断后神经元胞体经历的一系列变化，称为神经元反应，通过W豇leh曲变性在损伤平面以远创建一个利于神经元轴突再生的傲环境G损伤导致的逆向运输信号障碍癣内流以及受损端暴露于变性与炎性环境等协同作用均刺激近端神经再生，但神经再生起始的信号仍未被阐明m。
周围神经损伤能激话神经元自身生长，并克服髓鞘再生相关抑制因素的影响圆。
周围神经系统中．在神经元自身生长能力激活捉再生微环境、轴突导向因子和细胞黏附分子的共同作用下，损伤的神经能成功再生。
周围神经轴突的再生是复杂的，在神经损伤远侧残端和生长相关的基因表达上调，这些基閃在再生的行为中很重要。
出人意料的是，几个基因都存在抑制再生活动。
一个例子是mN．一个抑止细胞生长的候选基因：通过siRNA来抑制Ⅳ瞓和UNC5H或运用药理学激活剂和抑制剂．多个通路可影响轴突再生。
许多对神经恢复的干预途径经过研究同样存在有待解决的问题，我们归纳成表1。
2．离子通道在周围神经修复中的作用：周围神经损伤后去髓鞘的神经便暴露出离子通道。
现在认为神经传导功能受损导致诱发痛觉过敏、感觉倒错等功能异常的病理现象与钾离子通道受损引发的电位异常密不可分㈤。
Rasband 等㈤研究证实有髓鞘神经纤维中对4-AP敏感的掣亚单位Kv1．1、KvI．2以及胞浆B亚单位Kv2位于j此tap。
组织工程试题解答
D fd1、组织工程的三要素是什么？基本原理是什么？三要素：a)种子细胞; b)支架材料; c)生长因子基本原理：a) 由人体取出细胞；b) 在体外将细胞培养到足够的数量；c) 将这些细胞填入、养在人工支架里；d) 有时需要再加一些化学物或生长因子促进细胞的分化；e) 将此人工组织移植到患者身上。
2、组织工程的生长因子有哪些分泌方式？为什么生长因子需要控制性释放？根据生长因子产生细胞与接受生长因子作用的细胞相互之间的关系，可概括为以下三种模式：（1）内分泌（endocrine），生长因子从细胞分泌出来后，通过血液运输作用于远隔靶细胞。
如：血小板源生长因子（PDGF）源于血小板，作用于结缔组织细胞。
（2）旁分泌（paracrine），细胞分泌的生长因子作用于邻近的其他类型细胞，对合成、分泌该生长因子的自身细胞不发生作用，因为它缺乏相应受体。
（3）自分泌（autocrine），生长因子作用于合成及分泌该生长因子的细胞本身。
生长因子以后两种作用方式为主。
生长因子优点诸多，但是也存在很多问题，主要是高扩散性和半衰期短，生物学活性难以长期保存。
局部直接应用生长因子可在较短的时间内发挥作用，但在生理环境下很容易使之迅速失活，不产生预期的生理效应。
因此，采用控制性释放技术，对生长因子进行保护，使之在有水环境下即能保持活性，又能持续释放或控制释放，是使生长因子得到有效应用的关键。
3、组织工程用支架材料的基本要求是什么？为什么需要多孔结构？•良好的生物相容性•良好的生物降解性•具有三维多孔立体结构•可加工性和有一定的机械强度•良好的材料-细胞界面•良好的消毒性能合适的孔尺寸、高的孔隙率和相连通的孔形态，以利于大量细胞的种植、细胞和组织的生长、细胞外基质的形成、氧气和营养的传输、代谢物的排泄以及血管和神经的内长入。
A4、组织工程种子细胞的基本要求是什么？5、组织工程皮肤和骨骼等器官构建路线是什么？所构建的人工器官优缺点各是什么？采用动物实验检测所构建的器官的大概步骤是什么？6、与组织工程密切相关的两项医学生理学奖的获得者的姓名，时间，发现内容是什么呢？1986年美国生物化学家斯坦利·科恩(Stanley Co-hen) 和意大利生物学家丽塔·莱维-蒙塔尔奇尼(Rita Levi-Mont.alcini)共同获得诺贝尔生理学或医学奖。
神经修复与再生的策略与方法
神经修复与再生的策略与方法神经系统是人体最为复杂的系统之一，它负责人体各种感觉的传递、身体各部位的控制以及对外部环境的适应。
细胞、分子和电化学活动的复杂互动构成了神经系统的神秘之处。
然而，由于一些因素的影响，人们可能会面临一些神经系统上的障碍。
如何修复和再生这些受伤的神经系统，从而恢复其正常功能仍是一个巨大的挑战。
本文将介绍一些神经修复与再生的策略和方法。
神经再生的细胞治疗方法神经再生的最有效策略之一是使用细胞治疗方法。
这是利用干细胞和神经前体细胞来修复或替代有损神经组织的方法。
在干细胞移植中，一些未分化的细胞植入到患者的组织或器官中。
这些细胞可以分化为各种类型的细胞并且具有自我更新的能力，因此被广泛应用于诸如脊髓损伤、帕金森病等神经退行性疾病的治疗中。
神经再生的基因疗法方法基因疗法也可以促进神经再生。
它是利用重组DNA技术将改变细胞功能的基因序列注入患者的细胞中。
例如，启动神经细胞的再生就可以通过将神经生长因子基因注入神经细胞中来实现。
这种方法已经被用于治疗阿尔茨海默病等一些神经退行性疾病的患者。
神经再生的光学神经调节方法不仅可以使用细胞治疗和基因疗法来进行神经再生，现在还可以运用光学神经调节技术。
在这种方法中，光发射器通过吸收外界光，能激发神经组织，使其发挥有效的作用。
这种技术可以进行光纤仿真和光遗传学模拟，让神经系统对光做出反应，从而可以刺激神经再生。
神经再生的物理疗法方法物理疗法还是另一种有效的神经再生策略。
近年来，神经突触形成和修复方面的物理疗法获得了越来越广泛的关注。
其中包括利用外部磁场刺激神经末梢、电刺激-居里磁流体疗法等等。
结论总的来说，神经修复和再生是一项具有挑战性的工作，需要各种各样的策略和方法来实现。
随着科技的不断发展，细胞治疗和基因疗法、光学神经调节技术、以及物理疗法技术都已能够为神经再生做出贡献。
这些方法远未到达同样且一致的程度，但是它们可以探索新途径为神经退行性疾病和神经外伤带来希望和改善。
组织工程神经修复周围神经缺损研究及其展望
移植 属 于 “ 东 墙 补 西 墙 ” 的修 复 方 法 ， 在 供 体 神 拆 式 存 经支 配 区永 久性 失 神经 功 能 障碍 及供 移 植 神 经来 源 局 限等 缺 点 。 因此 ， 床 期 盼 一 种 能替 代 自体 神 经 移 植 临
的有 效 治疗 方 法 ， 组 织 工 程 技 术 的 发 展 促 进 了构 建 而
丝 素蛋 白制 成 管 壁 类 似 鸡 蛋 壳 结 构 的 多 微 孔 神 经 导 管， 具有 良好 的力 学 和渗 透等 性 能 ， 导 管 内嵌 丝 素 蛋 该 白纤 维 构 成 的丝 素 人 工 神经 移 植 物 ， 大 鼠 １ 坐 对 ０ｍｍ
骨神 经缺 损具 有 较好 的桥 接修 复 作 用Ｅ］ 目前该 丝 素 。 人 工 神 经 移 植 物 已获 中 国 发 明 专 利 ， 在 申请 国 际 正
肢 功能恢 复 良好 ； 犬 体 内经 过 为 期 １ 的血 常 规 、 在 年 血 生化 、 疫学 等检 查 以 及重 要 脏 器 病 理组 织 学 观 察 ， 免 均
聚 乙醇 酸纤 维支 架 ， 建 成壳 聚糖 ／ 乙醇 酸人 工 神 经 构 聚
移植 物 ， 中 国发 明专 利 授 权 。用 该 移 植 物 桥 接 修 复 获
人 工神 经移 植 物 中 引入 骨髓 间 充 质 干 细 胞 后 ， 大 鼠 对
聚合 物生 物材 料进 行 人 工 构建 。文 献 报道 用 于 制 备 组 织 工 程神 经支 架 的聚 合 物 材 料 主 要 有 胶 原 、 聚糖 、 壳 丝 素 、 乙醇 酸 、 聚 聚丙交酯一 乙交酯 共聚物 、 已内酯 等Ｅ ］ 聚 。 研 究 表 明 ， 降解 天 然 多 糖 壳 聚糖 与 神 经 组 织 细 可
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1.1 材料
1.1.1 实验动物选用4～5个月龄新西兰兔78只，体重2～
2.5kg，随机分组，以6只作为正常对照组，其余72只等分为A、B、C、D四组，每组18只，每只白兔双下肢均做同一种处理随后组间进行对比。
A组：带血管蒂的顺行放置吻合；B组：带血管蒂的逆行放置吻合；C组：不带血管蒂的顺行放置吻合；D组：不带血管蒂的逆行放置吻合。
1.1.2 实验设备①双人双目显微镜：XTS-6A，镇江光学仪器厂生产。
②显微手术器械：宁波医疗器械厂生产。
③常规手术器械。
④日本OLYM-PUS光学显微镜。
⑤日本NikonMicropphot-fax显微照相机。
⑥高精度电子天平。
⑦石蜡切片机：德国REICHERT-JUNG1165型回转式切片机。
⑧DISA-1500型肌电图仪（Dantes，Denark）。
⑨加拿大Matrox-Ip8伪彩色图像分析系统。
⑩日立H-300透射电镜。
1.2 手术方法采用25%乌拉坦（4ml/kg）静脉麻醉，手术区剪毛后常规消毒铺单，做大腿后部正中切口，于股二头肌和半腱肌、半膜肌的肌间隙分离显露坐骨神经。
A组：避开供养坐骨神经的血管，在梨状肌出口下缘1cm处切断坐骨神经，在双人双目显微镜下用9-0无创缝合线原位施行神经外膜缝合，接着在其远侧距近侧吻合口1cm处再切断坐骨神经，亦缝合神经外膜。
B组：根据该段坐骨神经滋养血管的情况，游离出一段包含滋养血管在内的组织蒂，切除1cm坐骨神经作为移植段，将移植段神经逆行放置，缝合神经外膜。
C组：将移植段坐骨神经与周围组织完全游离顺行放置，缝合神经外膜。
D组：将移植段坐骨神经与周围组织完全游离，逆行放置，缝合神经外膜。
逐层缝合深筋膜及皮肤，无菌纱布包扎，石膏外固定。
放回笼中喂养，定期取材。
1.3 观察指标
1.3.1 显微解剖观察于术后4，医|学教育网搜集整理8，12周在手术显微镜下观察移植神经外观，吻合口粘连程度，有无神经瘤及瘢痕形成，神经远端有无变性及钳夹神经干后肢体的反应情况。
1.3.2 胫前肌称重完整切除双侧胫前肌，高精度天平称重。
1.3.3 组织学观察对神经进行取材，在近端、远端吻合口以远3mm，分别切取坐骨神经，做HE染色及锇酸髓鞘染色，光镜下观察，并进行轴突图像分析，每张切片拍4张不同视野、放大40倍的彩照，置于加拿大MATROX-Ip8伪彩色图像分析系统下进行分析。
计算神经移植段及神经远端横截面轴突的数目及再生轴突的恢复率，恢复率计算方法是以对照组正常神经横切面轴突数为基数，与各时间组再生神经远端横断面轴突数目比较，得出各自的再生轴突恢复率，并对各组结果进行统计学分析。
1.3.4 电生理检查术后12周测定神经传导速度、诱发电位波幅、潜伏期，使用DISA-1500型肌电诱发仪（DANTES，DENMARK），进行双侧动作电位（CMAP）检查，将刺激电极插到神经移植段以上，同心针记录电极插入胫前肌，刺激电极距离记录电极60.0mm，将地电极插入二者之间的肌肉中，给予电刺激，频率1Hz，时程0.1ms.当CMAP图形稳定，伪迹和动作电位起点清楚后，测量记录潜伏期（LAT）、波幅（AMP）及神经传导速度（CV）。
打印图形及有关数据。