再生障碍性贫血小鼠造模方法_邢海燕
自制海鹿复方治疗实验小鼠再生障碍性贫血的药效学研究

自制海鹿复方治疗实验小鼠再生障碍性贫血的药效学研究王利群;文金全;刘延河;孙武霞;张宝娟;李飞;罗燕【期刊名称】《当代医药论丛》【年(卷),期】2023(21)3【摘要】目的:探讨自制海鹿复方治疗实验小鼠再生障碍性贫血(AA)的作用机制及药效学。
方法:将BALB/c小鼠随机分为8组,即:空白对照组、模型组、海鹿复方小剂量组、海鹿复方大剂量组、黄芪当归组、司坦唑醇+左旋咪唑组、海鹿复方+司坦唑醇+左旋咪唑组、环孢素A+司坦唑醇+左旋咪唑组,每组各10只活小鼠。
建立小鼠AA模型:苯剂以2 mL/kg注射于小鼠尾根皮下,每周4次,共20次。
小鼠AA模型建立成功后,给予空白对照组生理盐水灌胃,其余各组使用相应药物灌胃。
观察治疗后各组小鼠AA模型的体重、血常规指标、网织红细胞计数及白细胞介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)、辅助性T细胞1(Th1)、辅助性T细胞2(Th2)的检测结果,并对实验结果进行统计学分析。
结果:1)各治疗组(除环孢素A+司坦唑醇+左旋咪唑组)体重与模型组比较,均明显增加,P<0.01。
2)各治疗组与模型组比较白细胞计数均显著增加,P<0.01;各治疗组与模型组比较血小板计数均显著增加,P<0.01;各治疗组与模型组比较网织红细胞计数均显著增加,P<0.01(仅黄芪当归组P<0.05)。
3)各治疗组INF-γ、Th1均低于模型组,IL-4、Th2均高于模型组,P<0.05。
结论:海鹿复方能增加AA小鼠的体重,改善其生存质量;海鹿复方能增加AA小鼠白细胞、血小板、网织红细胞的数量;海鹿复方能增加AA小鼠外周血中Th2及IL-4的含量,降低外周血中Th1及IFN-γ的含量。
海鹿复方可作为AA的一种新的治疗药物。
【总页数】4页(P4-7)【作者】王利群;文金全;刘延河;孙武霞;张宝娟;李飞;罗燕【作者单位】咸阳彩虹医院(咸阳市儿童医院)中医儿科;咸阳彩虹医院(咸阳市儿童医院)小儿血液科【正文语种】中文【中图分类】R556.5【相关文献】1.自制益气补肾中药复方辨证治疗阿尔兹海默病患者的MMSE、ADL、HDS评分及效果探讨研究2.中药复方“再障Ⅰ号”治疗再生障碍性贫血临床和实验研究3.复方补益中药治疗再生障碍性贫血的实验研究4.复方米蒿籽软膏剂治疗烧烫伤的药效学实验研究5.复方参鹿颗粒通过WNT信号通路治疗再生障碍性贫血的分子机制研究因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
骨髓衰竭小鼠动物模型的建立及碱性成纤维细胞生长因子表达

骨髓衰竭小鼠动物模型的建立及碱性成纤维细胞生长因子表达曹萍;蒋莎义;乔晓红;谢晓恬;李福兴【期刊名称】《临床儿科杂志》【年(卷),期】2014(000)008【摘要】Objective Previous study found that ifbroblast growth factor-2(FGF2) expression was at a low level in bone marrow of children with aplastic anemia. In this study, we established a bone marrow failure animal model to investigate whether FGF2 is involved in bone marrow failure. Methods BALB/c mice were irradiated by 5.0 Gy ray, and then infused with 1×106 lymphocytes from allogeneic mice lymph node. Peripheral blood cells and bone marrow mononuclear cells counting and bone marrow pathology were done. FGF2 protein in bone marrow mononuclear cells was measured by ELISA. Results Compared with the control group, the counting of hemoglobin, white blood cell, platelet and bone marrow mononuclear cell in aplastic anemia mouse model were signiifcantly deceased (P<0.05). Moreover, FGF2 expression in aplastic anemia mouse model were signiifcantly reduced (P<0.05). Conclusions 5.0 Gy ray irradiation and then 1×106 lymphocyte infusion in mice can induce bone marrow failure similar to the features of aplastic anemia. The low expression of FGF2 in bone marrow of aplastic anemia patients may play an important role in the pathogenesis of aplastic anemia.%目的:建立再生障碍性贫血动物模型,检测其碱性成纤维细胞生长因子2(FGF2)的表达。
小鼠气血双虚模型的复制

小鼠气血双虚模型的复制作者:方晓艳程再兴苗明三来源:《中国医药导报》2008年第35期[摘要] 目的:复制小鼠气血双虚动物模型。
方法:采用失血法和环磷酰胺并用法复制气血双虚动物模型,通过观察小鼠的一般体征、外周血血象、胸腺及脾脏组织形态改变来观察模型的复制情况,并用当归补血口服液进行反证。
结果:与空白对照组小鼠比较,模型组小鼠外周血象显著降低,胸腺脾脏均发生严重萎缩、皮质明显变薄、脾小结明显缩小、淋巴细胞数明显减少,当归补血口服液可明显对抗上述变化。
结论:失血法和环磷酰胺并用法可成功复制出气血双虚动物模型。
[关键词] 小鼠;气血双虚;失血;环磷酰胺[中图分类号] R-332[文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2008)12(b)-009-02The establishment of mouse model of deficiency of both qi and bloodFANG Xiao-yan1, CHENG Zai-xing2, MIAO Ming-san1(1.Henan College of Traditional Chinese Medicine, Zhengzhou450008, China; 2.Fujian College of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou350108, China)[Abstract] Objective: To establish the mouse model of deficiency of both qi and blood. Methods: Mouse model of deficiency of both qi and blood was established by releasing blood and injecting Cyclophosphamide, and the general physical signs, peripheral blood hemogram, and morphologic changes of thymus and spleen were observed to detect the establishment of the mouse model, and then Dangguibuxue Oral Solution was employed as the disproof. Results: Compared with the mice in blank control group, the level of peripheral blood hemogram of mice in model group was markedly decreased, and the thymus and spleen were severely depauperated, the thymus cortex was significantly thin, and the number of splenic corpuscle and thymus lymphocyte were obviously decreased. Dangguibuxue Oral Solution could considerably oppose the above changes. Conclution: The combination of releasing blood and injecting Cyclophosphamide can successfully establish the mouse model of deficiency of both qi and blood.[Key words] Mouse; Deficiency of both qi and blood; Releasing blood; Cyclophosphamide现代研究认为,气虚与机体免疫功能下降和能量代谢障碍密切相关,而血虚与现代医学中的“贫血”非常相似,表现为骨髓造血功能减退,血细胞生成减少。
苯与环磷酰胺联合建立小鼠再障模型的实验研究

k )oc a r ek h aa ee s dw r a l w :gnrl odt n e p e l lo m a ,bn ar mer g neadyf w e.T eprm t t t e sf l s eea cn io ,p r hr ods er oem r w s a, oa s r ee e oo i i ab o
Cy l ph s h c o o p ami n M ie de i c
Y A i —l ,L i jn U N Xa e o i I Me — a
( i nn dcl nvrt, i hu110 hn ) La igMeia U i sy J zo 2 0 1C ia o ei n
苑 晓磊 ,李梅 君
( 辽宁医学院 ,辽宁 锦州 1 10 ) 20 1
【 摘要】 目的 探讨苯和环磷酰胺联合建立小鼠再生障碍性贫血模型的方法。方法 按 20 Lk .m /g于昆明种雄性小
鼠皮下注射苯油混合液 ,每天 1次,隔 日给 药;并 以环磷 酰胺 溶液 (0 gk )腹腔 注射 ,每 日 1次共 7次。于给 药前及后 5 m/g
o s K n n a c eei et i ezn +cr ol 20 lk )oc vr tod y adwt ccohshmi 5 mg d u mi m l mi w r n c dwt bne e on i (. m/ g neeey w as n i lpopa d 0 / g e e j e h hy e(
再生障碍性贫血的动物模型实验研究

再生障碍性贫血的动物模型实验研究
孙纪元;王四旺;谢艳华;施新猷
【期刊名称】《中国比较医学杂志》
【年(卷),期】2000(010)004
【摘要】采用 60Co-γ射线3.0 Gy照射后第4 d开始给予环磷酰胺50.0 mg·kg-1及氯霉素62.5 mg·kg-1,共3 d,获得了AA模型. 外周血象示三系细胞均有显著减低(P<0.05或P<0.01),骨髓增生明显低下,造血细胞容量<20%,脂肪细胞明显增多,各项指标均符合再生障碍性贫血.此方法简便、周期短、成功率高.
【总页数】3页(P210-212)
【作者】孙纪元;王四旺;谢艳华;施新猷
【作者单位】第四军医大学药物研究所,西安,710032;第四军医大学药物研究所,西安,710032;第四军医大学药物研究所,西安,710032;第四军医大学实验动物中心【正文语种】中文
【中图分类】Q95;R-332
【相关文献】
1.再生障碍性贫血动物模型研究进展 [J], 林庚庭;魏克民;张俊杰
2.免疫介导再生障碍性贫血动物模型的建立 [J], 卢玮;陈国安
3.参附注射液治疗再生障碍性贫血模型小鼠的实验研究 [J], 任美华;翟声平
4.再生障碍性贫血大鼠模型骨髓微血管密度表达的实验研究 [J], 高清平;周健苗;姚春
5.当归多糖干预调节再生障碍性贫血小鼠骨髓单个核细胞线粒体自噬稳态的实验研究 [J], 张静;崔兴;陈维达;陈泽涛
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小鼠失血性贫血模型造模方法

小鼠失血性贫血模型造模方法
常用的小鼠造模法主要有眼眶后静脉丛放血法和剪尾尖或切开尾动脉法。
①眼眶后静脉丛放血法:用左手固定小鼠并轻轻对颈部施加压力,使头部静脉淤血,在突出的眼球旁分辨出后眼眶静脉,然后用少量10%可卡因滴入动物眼内,使眼部局部麻醉;右手持消毒过的毛细吸管从内侧眼角由鼻侧眼眶平行地向喉头方向轻压至后眼眶静脉丛,血液自然吸入管内,放血6~8滴(约0.5ml)。
毛细吸管内径0.5~1.0mm,可用聚氯乙烯管或玻璃毛细管制成,采血时毛细管与鼠面成45°角,在泪腺区域内,由眼内角在眼睑和眼球之间向喉头方向刺入。
若为针头,其斜面先向眼球,刺入后再转l80°角使斜面对着眼眶后界刺入深度为2~3mm,当达到蝶骨感到有阻力时,再稍后退0.1~0.5mm,边退边抽。
把取血管保持水平位,稍加旋转并后退吸引。
由于血压关系,血液即自动流入吸血管中,得到所需血管后,即除去加于颈部的压力,同时拔出采血管,以防止术后穿刺孔出血.并用消毒纱布或棉球压迫眼球止血30s。
一般20g左右体重小鼠每鼠从眼眶静脉丛抽血0.5ml。
如隔日放血1次,连续5次可形成慢性失血性贫血模型。
失血后24h 形成急性失血性贫血模型。
②剪尾尖或切开尾动脉法:小鼠剪尾放血:用手揉擦或用温水(45~50℃)加温鼠尾,使之充分充血后,用剪刀剪去尾尖约2mm,用手轻轻从尾根部向尾尖部挤压,使失血量达0.5ml左右。
再生障碍性贫血小鼠造模方法的实验研究

再生障碍性贫血小鼠造模方法的实验研究[ 08-12-08 10:05:00 ] 编辑:studa20作者:刘啸,祝彼得,徐浩,芦殿荣,冯雪梅【关键词】 ,再生障碍性贫血摘要: 目的: 改进原有的再生障碍性贫血动物模型的制备方法并进行比较。
方法: 将Balb/c小鼠分为4组,按文献以 60 Co-γ射线(Co)、环磷酰胺(CY)、乙酰苯肼(APH)、氯霉素(CH)等不同方法造模获得3种再生障碍性贫血(AA)模型。
检查外周血象、骨髓有核细胞(BMC)数量,细胞培养比较粒、红、巨核系集落产率。
结果: 3种方法均可导致外周血象降低(P<0.01或P<0.05),BMC数量减少,细胞集落产率降低,但改良以后的制法在外周血象协同性下降水平、骨髓抑制持续时间方面与其他两种有显著性差异。
结论: Co/CY/APH复合造模方法简单,周期较短,结果稳定可靠,可作为一种较好的AA模型。
关键词: 再生障碍性贫血;动物模型; 60 Co-γ射线;环磷酰胺;乙酰苯肼再生障碍性贫血(Aplastic anemia,AA)是由于造血干/祖细胞增生,分化障碍或造血微环境异常而导致的一类以造血组织功能衰竭为特征的疾病。
其病因复杂,常与化学药物、放射线、自身免疫性疾病相关。
实验血液学技术的发展,使其致病机理进一步被阐明。
而研究的深入有赖于良好的AA动物模型的建立。
目前,AA动物模型的造模方法种类较多,但存在再障期不稳定、各血系降低水平不一致、方法繁琐、周期较长等缺点。
本实验室在综合几种常见造模方式的优点基础上,建立新的造模方式,并与其他常见的方法作比较,以期提供一种简单、有效、稳定的模型制备方法。
1 材料与方法1.1 试剂环磷酰胺(Cyclophosphamide,CY)由上海华联制药有限公司提供,批号:国药准字H31021703;氯霉素注射液(Chloramphenicol,CH)由天津药业焦作有限公司提供,批号:国药准字H41020098;乙酰苯肼(Acetylphenylhydrazine,APH)由上海试剂三厂提供,批号:S3*******。
免疫介导再生障碍性贫血小鼠模型外周血干扰素-γ与蛋白激酶-θ的表达及其意义

1 6 -1 7 . 5 7 5 1
化则都是 由更深一层的分子机制所 决定 的。研究证明 , r R 仅_ A
( < . ) 而两 同期 对照组病变输 尿管平滑肌 叶 一 R的平 P 00 , 5 1 A
均 灰 度 值 差 异无 统计 学 意 义 ( > .5 。也 就 是 说 , 实 验 组 P0 ) 0 8周
验组输尿管平 滑肌 d一 R的平均灰度值低 于同期 对照组 ( A
0 5 8周 实 验 组 高 于 1 实 验 组 ( O0 )8周 对 照 组 L . ) 0 6周 . , 5 j - l 对 照组 差异 无 统 汁学 意 义 (> .5 。 6周 尸 00 )
的进展 , 但大都集中在受 累器 官肾脏 J 。而本研究小组 则把 二
痫 变 输 尿 管 作 为 研 究 对 象 , 已 证 实 P U 模 型 中病 变 输 并 U O 尿管肌 条的收缩力 和收缩 频率 分别在 不同梗 阻时期 的相应 变 化 f。 此 , 实 验 通 过 对 P U 因 本 U O在 分 予水 平 上 探 讨 O _ R tA r
尿 路 梗 阻 是 泌 尿 外 科 临 床 } 常 见 病 变 , 种 泌 尿 系 的 多
统疾 病 ( 如输尿 管狭窄 、 结石 、 肿瘤 等 ) 在其 发生 发展过 程 中
均 能 出现 尿路 梗 阻 性 病 变 。而 泌尿 系 统 作 为 转 运 、 俘 和 排 储 泄 尿 液 的 功 能 整 体 , 完 整 、 调 、 一 的 连 续 性 管 道 , 而 是 协 统 因 任 何 部 位 、 何 忡 质 的 尿 路 梗 阻 , 会 引 起 梗 阻 部 位 近 端 的 任 均 尿路 m现 尿 流 储 延 异 常 , 终 不 同 程 度 地 影 响 肾 脏 功 能 最 1 近 年 来 , 然 对 f 七尿 路 梗 阻 性 疾 病 的 研 究 取 得 了 一定 虽
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邢海燕等 再生障碍性贫血小鼠造模方法 第 23 期
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批号: 990406。 1. 2. 3 AA 模型建立 20 只小鼠一次全身 3. 0 Gy60 Co γ 射线 照射( 剂量 率 1. 353 1 Gy / min,距 离 170 cm,照 射 时 间 2 min 13 s) 。照射后第 4、5、6 天时腹腔注射环磷酰胺 50. 0 mg / kg 及 氯霉素 62. 5 mg / kg。 1. 3 方法三 1. 3. 1 实验动物 ICR 小鼠 50 只,全雄,体重( 18 ± 2) g,由上 海斯莱克实验动物有限公司,合格证号: SCXK( 沪) 2007-0005。 1. 3. 2 AA 模型建立 50 只小鼠分为对照组 10 只: 玉米油, 2 ml / kg。背部皮下注射,3 次 / w( 周一,周三,周五) ,总共注射 35 d。腹腔注射同体积生理盐水,1 次 / d,共 7 次。造模组 40 只: 苯 + 玉米油( 1∶ 1配制) ,2 ml / kg( 1 ml 苯 + 1 ml 玉米油) ,背 部皮下注射,3 次 / w( 周一,周三,周五) ,总共注射 15 次。同时 腹腔注射环磷酰胺溶液 50 mg / kg( 产品批号: 11061421,江苏恒 瑞医药股份有限公司) 。1 次 / d,共 7 次。造模持续 35 d。
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中国老年学杂志 2013 年 12 月第 33 卷
4 参考文献
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5 Carswell EA,Old LJ,Kassel RL,et al. An endotoxin-induced serum factor that causes necrosis of tumors〔J〕. Proc Nat Acad Sci,1975; 72 ( 9 ) : 3666-70.
基金项目: 江苏省中医药科技项目立项计划( LB09060) 第一作者: 邢海燕( 1971-) ,女,硕士,副主任医师,主要从事中西医结合
治疗肿瘤、血液病研究。
1. 1. 2 胸腺淋巴结细胞悬液制备 将两只 DBA /2 小鼠断颈 处死,95% 酒精浸泡消毒 5 min 后,无菌取出胸腺及颈、腋下、腹 股沟等处的淋巴结,加磷酸盐( PBS) 缓冲液,除去表面血污及 黏附的结缔组织。再次清洗后,用手术刀、剪刀反复剪切组织, 研磨直到成糊状,再经尼龙滤血网过滤,使之成为单细胞悬液。 计数后配成 1 × 106 / ml 浓度备用。 1. 1. 3 AA 模型建立 取正常 BALB / C 小鼠 45 只,随机取其 中 5 只作 为 正 常 对 照 组,其 余 40 只 参 照 姚 军 等〔1〕方 法: 将 Balb / c 小鼠 40 只经 6. 0 Gy60 Co γ 射线亚致死量全身 3 min 照 射后,4 h 内由尾静脉输入 DBA /2 小鼠的胸腺、淋巴结混合细 胞悬液 0. 2 ml,输注细胞数为 1 × 106 /0. 2 ml / 只。 1. 2 方法二: 1. 2. 1 实验动物 ICR 小鼠 20 只,全雄,体重( 18 ± 2) g,购于 上海斯莱 克 实 验 动 物 有 限 公 司,合 格 证 号: SCXK ( 沪) 20070005。
2结果 2. 1 方法一造模结果 给药 4 d 后,造模组小鼠逐渐出现精 神萎糜、大汗、皮毛稀疏、枯槁、体重明显下降,在造模后的 15 d 内除 1 只小鼠外全部死亡。这与文献报道的相吻合〔1〕。 2. 2 方法二造模结果 造模结束后 2 d,处死小鼠后,取小鼠 股骨的长骨干及干骺端,甲醛溶液浸泡固定后,脱钙,切片,然 后 HE 染色后观察骨髓切片病理,低倍镜观察组织结构: 骨髓 造血组织增生活跃,干骺端造血组织约占 60% ,骨干处增生度 约为 90% ,可见三系各阶段造血细胞,分布未见明显异常。 2. 3 方法三造模结果 造模结束后 2 d,取小鼠眶静脉血,用 全自动血细胞分析仪计数做血常规计数,了解各组小鼠血常规 变化。模型小鼠外周血及骨髓液流式细胞仪检测结果,较正常 组有明显变化,显示造模成功,且模型维持时间长。
man adipose tissue regulation by obesity,weightloss and relationship to lipoprotein lipase〔J〕. J Clin Invest,1995; 95( 5) : 2111-9. 8 Winkler G,Lakatos P,Salamon F,et al. Elevated serum TNF-alpha level as a link between endothelial dysfunction and insulin resistance in normotensive obese patients〔J〕. Diabet Med,1999; 16( 3) : 207-11. 9 Demirbas B,Guler S,Cakir B,et al. Plasma tumor necrosis factor alpha levels and insulin resistance in nondiabetic hypertensive subjects〔J〕. Horm Res,2002; 58( 6) : 283-6. 10 Cesari M,Penninx BW,Newman AB,et al. Inflammatory markers and
onset of cardiovascular events: results from the health ABC study〔J〕. Circulation,2003; 108( 19) : 2317-22. 11 谢 军,邹洁宁,刘良培,等 . 高脂诱导性肥胖大鼠的胰岛素敏感 性与 TNF-α 及 FFAs 水平〔J〕. 实用医药杂志,2004; 21( 4) : 334-6. 12 Argiles JM,Lopez-Soriano J,Busquets S,et al. Journey from cachexia to obesity by TNF〔J〕. FASEB J,1997; 11( 10) : 743-51.
〔关键词〕 免疫介导; 混合方法; 化学方法; 再生障碍性贫血 〔中图分类号〕 R55 〔文献标识码〕 A 〔文章编号〕 1005-9202( 2013) 23-5888-03; doi: 10. 3969 / j. issn. 1005-9202. 2013. 23. 051
再生障碍性贫血( AA) 患者多为青壮年,急性病例预后极 差,仅慢性轻型病例有望获得缓解或治愈。近年来人们为了探 讨 AA 的发病机制及筛选有效的治疗药物,做了很多的研究和 探讨,而研究的深入有赖于良好的 AA 动物模型的建立。为 此,笔者曾经在研究 AA 的药物治疗中,曾先后三次建立 AA 小 鼠模型,本文拟探讨一种方法简便、成功率高、维持时间较长, 与人类病理改变相似的 AA 小鼠模型的建立方法。
6 Plata-Salaman CR. Anorexia during acute and chroni disease〔J〕. Nutrition,1996; 12( 2) : 67-78.
7 Kern PA,Saghizadeh M,Ong JM,et al. The expression of TNF-α in hu-
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3讨论 AA 小鼠的造模方法有很多种,包括物理,化学,免疫介导
及混合方法等,各种方法各有其特点。物理方法多以 γ 射线、x 射线等以致死量或亚致死量照射; 化学方法中常用的药物有白 消安( 马利兰) 、环磷酰胺、氯霉素、苯剂等。Muir 等〔2〕发现单 纯采用放射线造模各系细胞下降较为明显,维持周期较长,但 其射线还会损伤全身各器官,毒副作用大,照射剂量亦不容易 掌握。陈俊等〔3〕研究发现,单纯照射后第 5 天骨髓干细胞数处 于极低水平,但第 9 天起造血干细胞开始明显增加。似乎结论 有相互矛盾之处。化学药物中,有研究发现利用白消安制造的 AA 动物模型,易使骨髓出现永久性损伤,而不符合造模的要 求; 张擎等〔4〕以环磷酰胺大剂量冲击建立免疫紊乱动物模型, 实验动物虽有外周血常规一过性减低,但停药后迅速回升; Lezama〔5〕单纯用苯( 加玉米油) 诱发的小鼠再障模型,方法简单, 维持时间长,但诱导时间长达 45 d。目前应用较多的模型是免 疫介导的模型,即将 DBA /2 小鼠的胸腺淋巴结细胞( 供体) 输 注给受亚致死量照射的 Balb / c 小鼠( 受体) 体内,建立免疫介 导 AA 模型。但免疫介导模型的建立实验操作复杂,要求条件 高,往往需要专业人员进行,且动物模型死亡快,有报道造模后
3 Palin SL,McTernan PG,Anderson LA,et al. 17Beta-estradiol and anti-estrogen ICI: compound 182,780 regulate expression of lipoprotein lipase and hormone-sensitive lipase in isolated subcutaneous abdominal adipocytes〔J〕. Metabolism,2003; 52( 4) : 383-8.