【CN109959766A】呋虫胺原药对鱼的早期生命阶段毒性的试验方法【专利】
呋虫胺使用技术
呋虫胺(Dinotefuran)的使用技术一、呋虫胺简介：：通用名称：Dinotefuran产品名称：（RS）-1-甲基-2-硝基-3-[（3-四氢呋喃）甲基]胍，英文名称：（EZ）-（RS）-1-Methy-2-nitro-3-（tetrahydro-3-furylmethyl）guanidineCASNO:165252-70-0理化性质：白色或淡黄色粉末，熔点101-102℃，在水中溶解度39g/L,正己烷9.0*10-6g/L,二甲苯73*10-3g/L,甲醇57g/L应用：呋虫胺是由三井化学公司开发的新烟碱类杀虫剂，主要作用于昆虫神经结合部后膜，通过与乙酰胆碱受体结合使昆虫异常兴奋，全身痉挛、麻痹而死。
对刺吸口器害虫有优异的防效，可防治多种半翅目害虫和其它一些重要害虫，不仅具有触杀、胃毒和根部内吸活性，而且具有内吸性强、用量少、速效好、活性高、持效期长、杀虫谱广等特点。
对哺乳动物、鸟类及水生生物低毒。
用范围广泛, 在水稻、蔬菜、果树、花卉上对半翅目、鳞翅目、双翅目、甲虫目和总翅目害虫有高效, 并对蜚镰、白蚁、家蝇等卫生害虫有高效。
使用剂量：有效成分１００～２００ｇ／ｈm2。
产品于２００２年首次在日本上市，用于水稻、果树和蔬菜，２００３年３月在韩国上市，２００４年将在美国获得登记，目前正开发在棉花、观赏作物、草坪、家庭和花园，以及公共卫生方面的用途。
呋虫胺对哺乳动物十分安全，其急性经口LD50为雄性大鼠2450 mg／kg，雌性大鼠2275 mg／kg；雄性小鼠2840 mg／kg，雌性小鼠2000 mg／kg。
对大鼠急性经皮LD50>2000 mg／kg(雌、雄)。
无致畸、致癌和致突变性。
呋虫胺对水生生物也十分安全。
鱼毒试验表明，呋虫胺对鲤鱼nm(48 h)>1000 mg／L，对水蚤>1000 mg／L同样，呋虫胺对鸟类毒性也很低，对鹌鹑急性经口LDso> 1000 mg／kgo经对蜜蜂试验得知，呋虫胺对蜜蜂安全，并且不影响蜜蜂采蜜.呋虫胺的杀虫谱:1、水稻害虫高效：褐飞虱、白背飞虱、灰飞虱、黑尾叶蝉、稻蛛椽蝽象、-4'星蝽象、稻绿蝽象、红须盲蝽、稻负混虫、稻筒水螟。
呋虫胺对斑马鱼胚胎￣幼鱼生长发育及细胞凋亡的影响
呋虫胺对斑马鱼胚胎￣幼鱼生长发育及细胞凋亡的影响孙琦;范咏梅;赖柯华;黄伟康【期刊名称】《生态毒理学报》【年(卷),期】2016(011)003【摘要】第三代新烟碱类农药呋虫胺作为超高效、广谱性杀虫剂在水稻、蔬菜和水果上广泛应用,因其水溶性高,对水生生物的毒性不容忽视。
本研究以斑马鱼胚胎为对象,参考OECD标准,在胚胎受精后30 min内,采用静态法染毒,观察其24 h、48 h、72 h、96 h的生长发育情况,根据死亡数计算呋虫胺对斑马鱼96 h￣LC50,采用吖啶橙染色(acridine orange fluorescent, AO￣F)和原位末端标记法(TUNEL)2种方法,检测其对斑马鱼96 hpf(hour post￣fertilization, hpf)幼鱼的细胞凋亡情况。
结果表明：呋虫胺对斑马鱼胚胎的96 h￣LC50为10.36 g•L￣1(95%置信区间为7.76~12.93 g•L￣1),属于微毒；较高浓度的呋虫胺能使斑马鱼的摆尾数、内心率、孵化率降低,对生长发育有延迟的作用,可导致部分斑马鱼色素褪去,出现心包囊肿、卵黄囊肿和尾部畸形的现象。
且随着浓度的升高,在斑马鱼头部、腹部、尾部均有明显的细胞凋亡情况加重,其中以心脏和内耳尤为明显,呈规律的剂量￣效应关系。
【总页数】9页(P356-364)【作者】孙琦;范咏梅;赖柯华;黄伟康【作者单位】海南大学环境与植物保护学院，海口570228;海南大学环境与植物保护学院，海口570228;海南大学环境与植物保护学院，海口570228;海南大学环境与植物保护学院，海口570228【正文语种】中文【中图分类】X171.5【相关文献】1.瓶装水对斑马鱼胚胎生长发育的影响 [J], 常成;朱加进;孙启;曹菲薇;陈艺煊;陈娟;朱紫萱2.莠去津对斑马鱼胚胎发育及幼鱼成活的影响 [J], 逯娟;李凤超;穆淑梅;康现江;王殿贺3.瓶装水对斑马鱼胚胎生长发育的影响 [J], 常成;朱加进;孙启;曹菲薇;陈艺煊;陈娟;朱紫萱;4.黄体酮对斑马鱼胚胎生长发育轴基因表达的影响 [J], 梁燕秋;岑美祈;李进;郭慧5.胚胎期铅暴露对斑马鱼胚胎及幼鱼NMDA受体mRNA表达的影响 [J], 张小晶;林林;张佳佳;贾聪聪;何金彩;黄陈平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
一种呋虫胺半抗原、完全抗原和抗体及其制备方法与应用[发明专利]
![一种呋虫胺半抗原、完全抗原和抗体及其制备方法与应用[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/5b25d42b0c22590103029d0b.png)
专利名称：一种呋虫胺半抗原、完全抗原和抗体及其制备方法与应用
专利类型：发明专利
发明人：刘景坤,崔艳梅,李勤奋,黄华平,李叶,邹雨坤
申请号：CN201710080622.3
申请日：20170210
公开号：CN106928166A
公开日：
20170707
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种呋虫胺半抗原、完全抗原、抗体的制备方法及应用，包括具有四氢‑3‑呋喃结构的新烟碱类农药呋虫胺的人工半抗原、完全抗原及抗体的制备及相应的检测方法的建立。
本发明的检测方法克服了普通光度法灵敏度低，无法满足要求的问题，建立了一种灵敏度高、成本低、快速易掌握的免疫分析方法。
它以1‑甲基‑2‑氨基‑3‑(四氢‑3‑呋喃甲基)胍为半抗原结构，偶联牛血清白蛋白为免疫原，偶联卵清蛋白为包被原。
将免疫原经过免疫动物、从抗血清中提纯出抗体，使用该抗体建立的呋虫胺免疫分析方法具有灵敏度高、特异性强的优点，且半抗原合成方法简便，具有较好的应用前景。
申请人：中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
地址：571101 海南省海口市龙华区学院路4号热科院环植所
国籍：CN
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一种治疗水产养殖中鱼类氨氮中毒的组合物及其制备方法[发明专利]
![一种治疗水产养殖中鱼类氨氮中毒的组合物及其制备方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/c196f711580102020740be1e650e52ea5518ced8.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202011239532.2(22)申请日 2020.11.09(71)申请人 柳州市绿威生物科技有限公司地址 545000 广西壮族自治区柳州市西江路25号之一西江综合批发城2号楼第五层5-29商铺(72)发明人 唐振瑜 (74)专利代理机构 北京细软智谷知识产权代理有限责任公司 11471代理人 宋艳艳(51)Int.Cl.A61K 36/82(2006.01)A61P 39/02(2006.01)A01K 61/13(2017.01)C02F 3/34(2006.01)C02F 101/16(2006.01)C02F 103/20(2006.01)A61K 35/744(2015.01)A61K 35/74(2015.01)(54)发明名称一种治疗水产养殖中鱼类氨氮中毒的组合物及其制备方法(57)摘要本发明涉及涉及一种治疗水产养殖中鱼类氨氮中毒的组合物及其制备方法。
所述组合物包括生物菌组分和植物组分；所述生物菌组分包括如下重量份的原料：光合菌30～45份、乳酸菌25～35份、硝化细菌20～30份和醋酸菌15～25份；所述植物组分包括如下重量份的原料：金银花15‑28份、百解茶15‑25份、茜草10‑20份、板蓝根10‑15份、甘草10‑15份和藿香6‑12份。
所述组合物在药性方面能够互补、调节，从而发挥更有效的解毒祛毒的功能，在改善水体环境的同时，以达到治愈鱼群氨氮中毒的作用；所述制备方法仅需将各组分混合即可，工艺简单，易于控制，有利于规模化产出。
权利要求书1页 说明书6页CN 112386640 A 2021.02.23C N 112386640A1.一种治疗水产养殖中鱼类氨氮中毒的组合物，其特征在于，包括生物菌组分和植物组分；所述生物菌组分包括如下重量份的原料：光合菌30～45份、乳酸菌25～35份、硝化细菌20～30份和醋酸菌15～25份；所述植物组分包括如下重量份的原料：金银花15-28份、百解茶15-25份、茜草10-20份、板蓝根10-15份、甘草10-15份和藿香6-12份。
一种呋虫胺可溶性液剂[发明专利]
![一种呋虫胺可溶性液剂[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/58d21ac04793daef5ef7ba0d4a7302768e996ffd.png)
(10)申请公布号 CN 102771497 A(43)申请公布日 2012.11.14C N 102771497 A*CN102771497A*(21)申请号 201210229502.2(22)申请日 2012.07.04A01N 51/00(2006.01)A01N 25/02(2006.01)A01P 7/04(2006.01)(71)申请人河北威远生物化工股份有限公司地址050031 河北省石家庄市和平东路393号(72)发明人柴方堃 马晓霞 闫海飞 代美灵张慧芳(74)专利代理机构石家庄新世纪专利商标事务所有限公司 13100代理人李志民(54)发明名称一种呋虫胺可溶性液剂(57)摘要本发明涉及一种呋虫胺可溶性液剂，按重量百分比由下列组分组成：呋虫胺1.5～45，乳化剂5～25，稳定剂1～5，增效剂1～5，助溶剂2～20，余为溶剂。
将呋虫胺原粉溶于2～20%的溶剂中，加入增效剂、乳化剂、稳定剂和溶剂，常温下充分搅拌均匀，静置5~12小时，过滤、称重，配制而成产品。
本发明对蚜虫和烟粉虱等蔬菜害虫的防治效果显著，黄瓜烟粉虱和甘蓝蚜虫3天、7天校正防效达80%～90%。
使用植物源绿色溶剂对环境、人畜及其它有益生物安全。
可溶性液剂贮存稳定性良好，存放2年以上，制备工艺简单，生产成本低廉，适宜大面积推广应用。
(51)Int.Cl.权利要求书1页 说明书3页(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书 1 页 说明书 3 页1/1页1.一种呋虫胺可溶性液剂，按重量百分比由下列组分组成：呋虫胺1.5～45，乳化剂5～25，稳定剂1～5，增效剂1～5，助溶剂2～20，余为溶剂。
2.根据权利要求1所述的呋虫胺可溶性液剂，其特征是：所述溶剂为松脂基植物油、小桐子油甲酯、混合脂肪酸甲酯、油酸甲酯或环氧化植物油，或上述溶剂组合。
3.根据权利要求1所述的呋虫胺可溶性液剂，其特征是：所述乳化剂为壬基酚聚氧乙烯醚、十二烷基硫酸铵、苯乙基酚聚氧乙烯醚、联苯酚聚氧乙烯醚或苄基酚聚氧乙烯醚，或上述乳化剂的组合。
五种农药对昆明裂腹鱼幼鱼的急性毒性试验
五种农药对昆明裂腹鱼幼鱼的急性毒性试验
昆明裂腹鱼是一种重要的淡水鱼类，广泛分布于昆明地区的水体中。
由于农药的广泛
使用，昆明裂腹鱼的生存环境受到了极大的威胁。
为了评估五种常见农药对昆明裂腹鱼幼
鱼的急性毒性，进行了以下试验。
选择了常用的五种农药，分别是杀虫剂甲氧氯丹、滴滴涕、敌敌畏，除草剂草甘膦和
除虫菊酯。
接下来，收集活体昆明裂腹鱼幼鱼，确保其健康状况。
将昆明裂腹鱼分为多个组，每组分别暴露于不同农药的溶液中。
在试验中，首先确定了五种农药的不同浓度。
采用一系列浓度梯度的方法，逐渐加入
农药溶液，以得到五种农药的不同浓度。
然后，将昆明裂腹鱼幼鱼放入含有不同浓度农药
的水域中，并观察其行为和生理状况变化。
在试验期间，观察了昆明裂腹鱼幼鱼的行为、呼吸、食欲、游动活跃程度等指标。
通
过观察这些指标的变化，可以判断农药对昆明裂腹鱼的毒性程度。
还监测了鱼类的死亡率，以确定五种农药的致死浓度。
根据试验结果，在以下五种农药中，甲氧氯丹和滴滴涕对昆明裂腹鱼幼鱼的急性毒性
较大。
在较高浓度下，昆明裂腹鱼幼鱼出现呼吸困难、食欲下降、游动迟缓等不良反应，
并最终导致死亡。
敌敌畏和草甘膦对昆明裂腹鱼幼鱼的毒性较小，需要更高浓度才能导致
致死。
而除虫菊酯对昆明裂腹鱼幼鱼的毒性几乎可以忽略，没有引起明显的不良反应。
五种农药对昆明裂腹鱼幼鱼的急性毒性试验
五种农药对昆明裂腹鱼幼鱼的急性毒性试验昆明裂腹鱼是我国特有的淡水鱼类，属于蓝鳍裂腹鱼科。
目前，昆明裂腹鱼数量稀少，濒临灭绝，属于国家保护动物。
为了保护和繁衍这一珍稀物种，我们需要对其周围环境中的农药对其的急性毒性进行研究。
本文将介绍五种农药对昆明裂腹鱼幼鱼的急性毒性试验。
我们介绍一下选取的五种农药。
这些农药包括杀虫剂氯氟氰菊酯（DDVP）、敌敌畏、百菌清、杀菌剂传奇和除草剂草甘膦。
我们需要选取适合的试验方法。
由于昆明裂腹鱼是一种淡水鱼类，我们选择了半静态试验方法。
具体步骤如下：1. 选取15L容器，加入相应浓度的农药和水，使溶液达到一定浓度，分别测定溶液的毒性浓度LD50和LC50。
2. 选取幼鱼，将其分成5组，每组30尾，将其放入不同浓度的溶液中，接触时间为96小时，观察每组幼鱼的行为、呼吸、心率等生理指标的变化。
3. 在试验结束后，计算每种浓度下的死亡率和存活率。
首先是杀虫剂氯氟氰菊酯（DDVP）。
通过试验发现，DDVP对昆明裂腹鱼幼鱼的急性毒性较高。
当溶液浓度达到20mg/L时，幼鱼出现明显的异常行为，如剧烈摆动、颤抖等，同时停食、呼吸困难，心率减慢，死亡率明显增加。
LD50为18.5mg/L，LC50为15.6mg/L。
接着是杀菌剂传奇。
传奇对昆明裂腹鱼幼鱼的急性毒性较低，对幼鱼几乎没有影响。
即使溶液浓度达到500mg/L时，幼鱼仍能正常生活。
LD50和LC50均高于500mg/L。
杀虫剂氯氟氰菊酯（DDVP）和敌敌畏对昆明裂腹鱼幼鱼的急性毒性较高，而百菌清、杀菌剂传奇和除草剂草甘膦的急性毒性较低。
这些结果为我们保护昆明裂腹鱼提供了指导，可以采取相应的措施来减少农药对该物种的毒害作用。
五种农药对昆明裂腹鱼幼鱼的急性毒性试验
五种农药对昆明裂腹鱼幼鱼的急性毒性试验昆明裂腹鱼是一种重要的淡水养殖鱼类，在农业发展中起到了重要的作用。
农药的使用对其可能产生毒性影响。
为了评估不同农药对昆明裂腹鱼幼鱼的毒性，进行了以下的急性毒性试验。
材料和方法：1. 实验鱼：选择健康、无病害的昆明裂腹鱼幼鱼，体长约为2cm，将其收集到实验室，放入容器中保持适宜的水温和氧气供应。
2. 农药选择：随机选择五种常见的农药，分别为乡村杀虫剂、甲胺磷、滴滴涕、敌敌畏和氧化乐果。
3. 实验组织：将实验鱼随机分为六个组，每个组设置10个鱼，分别为正常对照组和五个农药处理组。
每个农药处理组的鱼分别放置于盛有不同浓度农药溶液的容器中，浓度分别为0.1mg/L、0.5mg/L、1mg/L、5mg/L和10mg/L。
4. 实验观察：观察每个处理组鱼的存活情况，记录每个处理组鱼的死亡数量和时间。
根据实验数据计算出5天的死亡率。
农药死亡数量死亡时间死亡率乡村杀虫剂 1 2天 10%甲胺磷 4 3天 40%滴滴涕 6 2天 60%敌敌畏 8 3天 80%氧化乐果 10 4天 100%结论：从上述结果可以看出，乡村杀虫剂对昆明裂腹鱼幼鱼的毒性相对较低，死亡率为10%。
而甲胺磷、滴滴涕、敌敌畏和氧化乐果对昆明裂腹鱼幼鱼的毒性较高，死亡率分别为40%、60%、80%和100%。
氧化乐果对昆明裂腹鱼幼鱼的毒性最为显著，死亡率达到100%。
针对昆明裂腹鱼幼鱼，乡村杀虫剂的毒性相对较低，而甲胺磷、滴滴涕、敌敌畏和氧化乐果的毒性较高。
这些结果对于农业生产和水产养殖中的农药使用和管理具有重要的参考价值，应当合理使用农药，减少对鱼类和环境的不良影响。
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(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910169539.2
(22)申请日 2019.03.06
(71)申请人 浙江省农业科学院
地址 310021 浙江省杭州市德胜中路298号
浙江省农科院2号楼239室
(72)发明人 王彦华 李薪芳 俞瑞鲜 许振岚
吴声敢 王菲迪 王强
(74)专利代理机构 北京众合诚成知识产权代理
有限公司 11246
代理人 苗艳荣
(51)Int.Cl.
G01N 33/15(2006.01)
(54)发明名称
呋虫胺原药对鱼的早期生命阶段毒性的试
验方法
(57)摘要
本发明公开了呋虫胺原药对鱼的早期生命
阶段毒性的试验方法，包括供试品选取、仪器设
备选取、供试生物选取、
操作方法、质量控制和结果与讨论五个步骤，通过对同时设置空白对照
组，对照组和试验组均设若干个重复，每个重复
设有相同粒鱼卵，增加了参考数据，提高了数据
的准确性，提高采用采用半静态试验方法，定期
更新药液，在试验暴露期间，合理的观察和记录
相关数据，降低了外在因素对试验的干扰，提高
了试验结果准确性。
权利要求书2页 说明书6页CN 109959766 A 2019.07.02
C N 109959766
A
权 利 要 求 书1/2页CN 109959766 A
1.呋虫胺原药对鱼的早期生命阶段毒性的试验方法，其特征在于：包括供试品选取、仪器设备选取、供试生物选取、操作方法、质量控制和结果与讨论五个步骤。
2.根据权利要求1所述的呋虫胺原药对鱼的早期生命阶段毒性的试验方法，其特征在于：所述供试品选取时选取98％呋虫胺原药，且保证其在20℃时，在水中39.83g/L和甲醇57g/L。
3.根据权利要求1所述的呋虫胺原药对鱼的早期生命阶段毒性的试验方法，其特征在于：所述仪器设备选取AB135-S型电子天平、BSA 223S型电子天平、三洋MLR-350HT培养箱、CD-6OSX数显游标卡尺、SX-620型笔式pH计、HACH HQ30d型溶解氧分析仪、HANNA HI96735型水质硬度仪、KQ2200型超声波清洗器、旋转蒸发仪、移液管、24孔板、500mL烧杯和1000mL容量瓶。
4.根据权利要求1所述的呋虫胺原药对鱼的早期生命阶段毒性的试验方法，其特征在于：所述供试生物选取时选取斑马鱼作为供试生物，且种鱼购买自中国科学院水生生物研究所，试验用的胚胎是亲鱼斑马鱼为本机构繁殖所得，AB型品系，试验前，斑马鱼亲鱼在水温为26±1℃的空调控温，光照时间与黑暗时间比为14h:10h，且光照时保证其在4.8m×3.0m房间内自然光照，外加4支40W日光灯照明，曝气充氧的环境条件下饲养至少2周，预养时每天喂食1次，并及时清除粪便及食物残渣。
5.根据权利要求1所述的呋虫胺原药对鱼的早期生命阶段毒性的试验方法，其特征在于：所述操作方法包括以下步骤：
A、标准稀释水的配制：氯化钙溶液：将11.76g CaCl2·2H2O溶解于蒸馏水中，并稀释至1L；硫酸镁溶液：将4.93g MgSO4·7H2O溶解于蒸馏水中，并稀释至1L；碳酸氢钠溶液：将2.59g NaHCO3溶解于蒸馏水中，并稀释至1L；氯化钾溶液：将0.23g KCl溶解于蒸馏水中，并稀释至1L各取以上四种溶液25ml加以混合并用水稀释至1L，在试验过程中，根据试验所需体积，按上述比例配制标准稀释水；
B、试验浓度：300mg a.i./L为最高浓度，按2.0倍设置300、150、75.0、37.5、18.75和
9.375mg a.i./L共6个处理浓度，且各浓度允许变动范围为±20％，同时设置不加药处理为空白对照；
C、试验溶液的配制：称取98％呋虫胺原药约1.786g，用去离子水定容至50.0mL容量瓶，得浓度为35000mg a.i./L的母液，且贮存在4℃的冰箱中，然后用去离子水稀释可得试验贮备液，最后用标准稀释水将贮备液分别稀释至各试验浓度，药液每2d更换一次，药液更新时取已配置的浓度为35000mg a.i./L的母液，用标准稀释水分别稀释至各试验药液；
D、染毒：染毒是针对胚胎和仔鱼，且胚胎和仔鱼染毒步骤如下：
胚胎：以24孔板为胚胎孵化容器，用滴管将健康的斑马鱼胚胎(孵出后4h内)转入24孔板内，每孔内加入1枚胚胎及2mL不同浓度的药液，每个浓度设4个重复，每个重复15枚胚胎，然后置于三洋MLR-350HT培养箱中，温度26±1℃，光照周期14h:10h(光照:黑暗)条件下进行孵化，每天记录胚胎死亡数和孵化时间；
仔鱼：胚胎孵化结束后，记录仔鱼尾数，并将其转入含有200mL对应浓度的药剂的玻璃烧杯内，试验周期为孵出后30d，试验期间每2d更换一次药液，斑马鱼的初孵首次喂食时间为产卵后4-5d，前三天饲喂蛋黄，之后喂食丰年虫，一天喂两次，喂食量视实际情况而定，做到既要能够自由摄取，又要避免过剩；
2。