HPLC法测定银杏叶口服液中总黄酮的含量
[ 1 ] 李俊义, 成丽. 银杏叶资源开发与应用研究概况[J ]. 华西药学杂 志, 1994, 9 (1) : 39- 40.
[ 2 ] 庄向平, 虞杏英, 杨更生, 等. 银杏叶中黄酮含量测定和提取方法 [J ]. 中草药杂志, 1992, 23 (3) : 122- 124.
1
0. 12
2
0. 24
3
0. 36
4
0. 48
5
0. 60
982803 964715 998430 2111931 2051421 2185493 3312554 3225106 321308 4280675 4440103 4411160 5684127 5502289 5573637
981803 982×103
·158·
3 讨论
3. 1 本实验用 H PL C 测定银杏叶口服液的总黄酮, 流动相选 用 014% 磷酸:M eO H (1∶1) , 流速 1m l m in, 检测波长 370nm , 塔板数在 3000 以上, 黄酮峰与杂质峰的分离非常明显。 3. 2 经过 3 批样品测试, 每单位制剂含量均不低于 9m g, 比 “6911”片 (2m g 片) 高 4～ 5 倍, 预测该制剂有较好的临床效 果。
2116282 2116×103
3249989 3250×103
4377313 4377×103
5596684 5587×103
A = 9. 5591×106m - 1. 7889×105 r= 0. 9998
盐酸 5m l, 水浴回流 2h, 冷却, 定量转移至 50m l 容量瓶中, 分 别用甲醇稀释至刻度, 作为供试品溶液, 进样 10Λl, 3 次, 测得 供试品峰面积, 见表 2 和图 2. b。
1 仪器与试剂
W A T ER S 高效液相色谱仪, 501 泵, R heodyne7725i 进样 器, 484 紫外检测器, Sp 4290 积分仪。 银杏叶口服液供试品 (010723, 规格 10m l 支) 由桂林医学院制药厂提供, 皮素标 准品 081～ 9003 由中检所提供。甲醇均为色谱纯, 磷酸及其他 试剂均为分析纯, 水为重蒸馏水。
对照品溶液的制备、测定[3]: 取中检所提供的 皮素对照 品 (供含量测定用) , 精密称取 010235g 置 25m l 容量瓶中, 用 甲醇溶解, 稀释至刻度, 摇匀, 作对照品溶液, 进样 10Λl, 3 次, 测得对照品平均峰面积为 8412411, 见图 2. a。
供试品溶液处理、测定: 精密量取供试品试液 2010m l 3 份 (A、B、C ) 分别置 50m l 烧瓶中, 各加入 M eO H 20m l, 4m o l L
第 16 卷 第 2 期 2003 年 4 月
华 夏 医 学 A CTA M ED IC INA E S IN ICA
V o l. 16 N o. 2 A p r. 2003
H PL C 法测定银杏叶口服液中总黄酮的含量
冯冬梅Ξ , 辛 懋
(桂林医学院药学院, 广西 桂林 541004)
摘要: 目的: 建立银杏叶口服液中总黄酮含量的测定方法, 为制剂质量控制提供依据。方法: H PL C 法, 流动相: 014% 磷 酸: 甲醇 (1∶1) , 检测波长 370nm。用 皮素为对照品外标法定量。结果: 总黄酮含量在 0112～ 0160Λg m l 范围内线性 关系 r= 019998, 平均加样回收率为 10010%。 结论: 本法快速、准确、重现性好。 关键词: 银杏叶口服液; 黄酮; 高效液相色谱法 中图分类号: R 927. 2 文献标识码: A 文章编号: 100822409 (2003) 0220157202
HPLC D eterm ina tion of Tota l Flavono ids in G inKgo O ra l Solution FENG D ong-m e i, X IN M ao Gu il in M ed ica l College, Gu il in 541004, Ch ina Abstract: O b jective: To estab lish a m ethod fo r determ ina tion of to ta l flavono ids in G inKgo o ra l so lu tion so a s to con tro l the qua lity and to p rovide scien tific ba sis fo r som eth ing in the p rep a ra tion. M ethods: T he H PL C condition s w ere develop ed by D iam on sil[TM ] C18 co lum n u sing p ho sp ho ric acid so lu tion2M eO H ( 1 ∶ 1 ) , and the detective w avelength w a s 370nm w ith Q uercetin a s ex terna l standa rd. R esu lts: T he ca lib ra tion cu rve of flavono ids w a s linea r a t range of 0112～ 0160Λg m l ( r = 019998). T he average recovery w a s 10010%. Conclu sion: T he m ethod is rap id, accu ra te and rep roducib le. Key words: G inKgo o ra l so lu tion; flavono ids; H PL C
银杏叶口服制剂是由银杏叶经科学的工艺提取研制而 成, 内含黄酮有效成份, 具有防治心血管疾病的功能[1]。目前, 国内外测定银杏叶制剂中黄酮含量来控制内在质量[2]。 本法 采用 H PL C 法对银杏叶口服液制剂, 以 皮素为对照品外标 法测定其水解后的主要黄酮甙元的含量, 然后按分子量比换 成黄酮含量。模拟样品平均回收率达 10010%。实验结果表明, 本法快速、准确、重现性好, 可作为银杏叶口服液制剂的定量 依据。
表 2 供试品银杏叶口服液总黄酮含量测定结果
编号
峰面积 (n= 3) 平均峰面积
含量
16412913
010723 (A )
16501929
16538284
9. 99
16700112
16510336
010723 (B )
16635643
16576970
10. 01
16584932
16520598
010723 (C)
精密称取 皮素对照品 01015g 置 50m l 容量瓶中, 加甲 醇定容 50m l, 精密量取 110、210、310、410、510 分别放置 25m l 容量瓶中, 加甲醇至刻度、摇匀, 在拟定条件下分别进样 10Λl, 各 测定 3 次, 以平均峰面积为纵坐标 (y) , 以浓度为横坐标 (x) , 按最小二乘法计算回归方程, 结果见表 1。
10m l 置 50m l 容量瓶, 平分 3 份, 分别精密加入 100Λg m l 皮 素对照溶液 2、3、4m l, 加入甲醇至刻度, 作回收测定, 分别进样 10Λl, 每份测 3 次, 平均回收为 10010%。
回收率= 实测回回收收率率测测定定银添杏加黄的酮 - 皮供素试对品照银品杏黄酮×100% 2. 4 含量测定
Ξ 作者简介: 冯冬梅 (1966- ) , 女, 1988 年华中师范大学化学系毕业, 桂林医学院药学院 医 学 16 卷
表 1 线性关系数据 (进样量: 10Λl)
编号 浓度 (Λg m l) 测得峰面积 (n= 3) 平均峰面积
2 方法与结果
2. 1 测定条件的选择 2. 1. 1 检测波长 取 0101m g m l 皮素对照品甲醇溶液, 以 甲醇为空白, 自 200～ 450nm 作紫外扫描, 在 370nm 处附近有 最大吸收, 且峰顶较延缓。 故选 370nm 为本检测波长。 2. 1. 2 色 谱 柱 选 用 D IAM ON S IL TM C18 柱 ( 150mm × 416mm , 10Λl)。该型色谱柱柱容量、分辨率和稳定性能满足分 离与测定要求, 同时具有较快捷的分析速度和较低的柱压。 2. 1. 3 流动相 选用 014% 磷酸: 甲醇 (1∶1) , 黄酮峰与前后 杂质峰分离良好。 2. 2 线性关系与范围
[ 3 ] 佘佳红. SFE2H PL C 法测定银杏粗提物中黄酮类化合物的含量 [J ]. 中草药杂志, 2000, 3 (2) : 101- 103. (收稿日期: 2002- 12- 20) [ 责任编辑 高莉丽 邓德灵 ]
16461003
16657978
10. 00
16692334
结果表明: 银杏叶口服液黄酮含量在 0112～ 0160Λg m l 范围内, 其浓度与峰面积呈良好的线形关系, 见图 1。
a. 皮素标准品 b. 银杏口服液供试品 图 2 二种药物的峰面积
图 1 线性回归图
2. 3 回收率试验 精密量取已知总黄酮含量的银杏叶口服液 (010723 批)
高效液相色谱法测定复方银杏通脉口服液中总黄酮醇苷含量
高效液相色谱法测定复方银杏通脉口服液中总黄酮醇苷含量张耕;刘译;唐勇;杨跃龙【摘要】目的建立测定复方银杏通脉口服液中总黄酮醇苷含量的高效液相色谱(HPLC)法.方法色谱柱为Shimadzu C 18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.4％磷酸溶液(55:45),流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,进样量为10μL,检测波长为360 nm,外标法定量.结果成功建立回归方程,槲皮素为Y=40994 X-15542,r=0.9998(n=7),线性范围为0.0148～0.1486μg;山柰素为Y=42969 X-11186,r=0.9998(n=7),线性范围为0.0149～0.1496μg;异鼠李素为Y=37968 X-9333.6,r=0.9997(n=7),线性范围为0.0079～0.0795μg.平均加样回收率,槲皮素为97.30％,RSD=1.61％(n=6);山柰素为97.50％,RSD=1.44％(n=6);异鼠李素为97.83％,RSD=1.63％(n=6).结论该方法操作简单,结果准确,重复性好,可用于复方银杏通脉口服液的质量控制.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2018(027)020【总页数】4页(P12-15)【关键词】复方银杏通脉口服液;总黄酮醇苷;高效液相色谱法;质量控制【作者】张耕;刘译;唐勇;杨跃龙【作者单位】湖南省怀化市食品药品检验所,湖南怀化 418000;湖南省怀化市食品药品检验所,湖南怀化 418000;湖南省怀化市食品药品检验所,湖南怀化 418000;湖南省怀化市食品药品检验所,湖南怀化 418000【正文语种】中文【中图分类】R932;R284.1复方银杏通脉口服液主要由银杏叶、（制）何首乌、女贞子、丹参、杜仲、川牛膝、钩藤7种中药组方，具有滋阴补肾、舒肝通脉功效，临床主要用于治疗中老年人轻度脑动脉硬化所致头晕头痛、耳鸣耳聋、视物模糊、记忆力减退、腰膝酸软、肢体麻木等。
银杏叶P.E中银杏黄酮含量测定方法(H)
FZD0117
银杏叶提取物中银杏黄酮（Total Flavonglycoside）含量测定方法一、色谱条件
色谱柱：Inertsil ODS-3 4.6×150mm 5μm
流动相：甲醇:水:磷酸(50:50:0.3，V/V)
检测波长：360nm
流速：1mL/min
柱温：室温
进样量：10μL
二、溶液制备
1. 对照品溶液制备精密称取槲皮素对照品约3mg于25mL容量瓶中，加入甲醇溶解定容。
2. 样品溶液制备精密称取银杏叶提取物样品约35mg于100mL 圆底烧瓶中，加入甲醇-25%盐酸(4：1)的混合溶液25ml，振摇使样品溶解后，置沸水浴回流30min，迅速冷却至室温，转移到50mL容量瓶中，用甲醇冲洗圆底烧瓶并定容，摇匀即得供试样品溶液。
三、样品测定
在上述色谱条件下，待仪器稳定、基线平稳后进样测定，槲皮素（Quercetin）保留时间约为13min，山奈酚（Kaempferol）约为21min 异鼠李素（Isorhamnetin）约为23min。
银杏黄酮含量按下式计算：
（2.5Q+2.59K+2.44I）Ws×2
银杏黄酮含量（%）= ×S
As×Wi
式中Q、K、I分别为样品中槲皮素、山奈酚、异鼠李素的峰面积As、Ws分别为槲皮素对照品的峰面积和称样量（mg）
S为槲皮素对照品的纯度(%)
Wi为样品称取量（mg）。
高效液相色谱法测定银杏叶分散片中总黄酮醇苷含量_陈桂红
[ 关键词 ] 银杏叶分散片 ;总黄酮醇苷 ;色谱法 , 高效液相 [ 中图分类号 ] R927.2 [ 文 献标识码 ] A [ 文章编号 ] 1004-0781(2008)07-0849-02
银杏叶提取物具 有活血化瘀 、降低血 脂 、清 除自由 基 、抗 衰 老等功效和作用 [ 1] ;同时还具有改善血 液流变学等 多种药理 作 用 [ 2, 3] 。 银杏叶分散 片是银 杏叶 片的剂 型改 变 , 其主要 活性 成 分为总黄 酮苷 醇 和萜 类 内酯 。 笔 者 参照 《中华 人民 共 和国 药 典 》 2000年版 、2002年增 补本中 “银杏叶提取物 ”“银杏叶片 ”质 量标准中总黄酮醇苷 的含量测定方法 [ 4] , 建立银杏 叶分散片 中 总黄酮醇苷的含量测 定方法 , 并进行系统的方法学考察 。 1 材料 1.1 仪器 LC-10A型高效液相色谱仪 , 包括 SPD-10AUV检
1 2.77
1 3.14
1 3.82
1 3.14
1 3.84
1 3.14
测得量 /
mg 2 5.58 2 6.60 2 6.10 2 5.93 2 6.93 2 6.98
HPLC法测定银杏叶软胶囊中总黄酮的含量
ｗ ｓ３ ０ ｎ ｎ ｏ ｍｕ ｔｍｐ ｒｔｒ ａ ０ ． ｓ ｌ ： ｈ ｉｅ ｒｒｎ ｅ ｆＱ ｅｃｔ ，Ｋ ｅ ｆ ｏ ａ ｄＩｏｈ ｍｎ ｔ ａ ６ ｍ ａｄ ｃｌ ｅ ｅａ ｅ ｗ ｓ３ ℃ Ｒｅｕｔ Ｔ ｅｌ ａ ａ ｇｓｏ ｕ ｒｅｉ ａｍｐｅ ｌ ｎ ｓｒａ ｅｉ ｕ ｕ ｓ ｎ ｎ ｒ ｎ
酮 含 量 分 别 为 ６４ ６ ６ ５ 、． ８ ． 、． ５ ６８ ６ ４ ３ ｍ 垃 。结 论 ： 法 简 便 、 确 、 离 效 果 好 ， 合 于 银 杏 叶 软 胶 囊 总 黄 酮 的 含 量 测 定 。 本 准 分 适
【 键 词 】 杏 叶 软 胶 囊 ； 黄 酮 ； 皮 素 ； 奈 素 ； 鼠 李 素 ； 量 测 定 关 银 总 槲 山 畀 含
ｃ ｍｐ ｓｄ ｏ ｔａ ｏ ｎ ｔｒ ｆ ｔ ｈ ｓ ｈ ｒｃａ ｉ Ｈ＝ １ａ ｏ ａｅｏ ． ／ ｎ ｈ ｖ ｌｎ ｔ ｆＵＶ ｅｅ ｔｒ ｏ ｏ ｅ ｆｍｅｈ ｎ ｌａ ｄ ｗａｅ ｗｉ ｐ ｏ ｐ ｏｉ ｃｄ ｐ ２ ｔａｆ ｗ ｒｔ ｆ１０ ｍｌ ｈ ｌ ｍｉ．Ｔ ｅｗａ ｅｅ ｇｈ ｏ ｄ ｔｃｏ
ｌ ｉｂ Ｃ Ｎ ∞ ， ， Ｘ ｕ ｏ， Ｅ Ｇ Ｅ ☆ Ｌ ｕｍ ｎ ２ ＩＲ ｉ ｉｇ
ｆ． ａ ｉ ｏ ａ ｉｅ ｅ Ｍｅ ｉｉｅ Ｈｏ ｐｔｌｏ ｉｈ ｓｒ ｔ １Ｔｒｄｔ ｎ Ｃｈｎ ｓ ｄ ｃｎ ｓ ｉ ｆＨａｚ ｕ Ｄｉｔｉ ，Ｇｕ ｎ ｚ ｏ ５ ０ ２ ，Ｃｈｎ ；２Ｄｅ ａ ｔ ｎ ｆＰ ａｍａ ｙ ｈ ｉ ｌ ａ ｃ ａ ｇｈ ｕ １２ ０ ｉ ａ ． ｐ ｒｍｅ ｔｏ ｈ ｒ ｃ ，ｔｅ
ｗｅ ｅ １ Ｃａ ｓ ｌ ． ６ 。６ ４ ５ ． ３ ．Ｃｏ ｃ ｕ ｉ ｎ：Ｔ ｉ ｍｅｈ ｄ ｉ ｅ ｓｔ ｅ ｅ ｅ ｔ ｂ ｅ ａ ｄ ｓ ｉ ｂ ｅ ｔ ｅ ｅ ｉ ｅ ｔ ｅ ｒ ｐ ｕ ｅ ６ ４ ６ ． ５ ，６ ８ ８ ｍｇ ｎ ｌ ｓｏ ｈｓ ｔ ｏ Ｓ ｓ ｎ ｉ ｖ ，ｒ ｐ ａ ａ ｌ ｎ ｕ ｔ ｌ ｏ ｄ ｔ ｒ ｎ ｈ ｉ ａ ｍ
银杏叶总黄酮提取工艺
［基金项目］ 济南市科技局高校院所自主创新计划项目（编号： 201004032）
［通 讯 作 者 ］ 李 峰 （1957－ ），男 ，山 东 安 丘 人 ，教 授 ，博 士 研 究 生 导 师，研究方向：中药质量控制研究，E－ mail：ly0123＠hotmail．com。
水平
1 2 3
表1 溶剂浓度 A
（％） 60 70 80
正交试验考察因素表
料液比 B
提取时间 C （t/h）
提取次数 D
1∶40
1
1
1∶50
2
2
1∶60
3
3
360 nm；进样量：20 μL；用高效液相色谱 法 测 定 ，以 甲醇 － 0．2％磷酸（52∶48，V/V）为流动相，在 360 nm 处 进 行 测 定 ［7］，以 槲 皮 素 的 塔 板 理 论 数 不 少 于 2 500， 测定总黄酮的含量。
第 36 卷 第 5 期 201220年12 9年月9 月
山东中医药大学学报
JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY OF TCM
Vol．36，No．5 第 36 S卷ep第.2051期2
银杏叶总黄酮提取工艺研究
王 心 1，李 峰 2
（1．山东中医药大学 2009 年级硕士研究生，山东 济南 250355； 2．山东中医药大学药学院，山东 济南 250355）
［摘要］ 目的：筛选银杏叶总黄酮最佳提取工艺，以银杏叶总黄酮的提取率为指标进行研究。 方法：运用正交设
计法，系统考察料液比、乙醇浓度、提取次数和提取时间 4 个因素对银杏叶总黄酮提取工艺的影响，并用高效液相
法 （HPLC）测定银杏叶总黄酮的含量。 结果：以乙醇浓度 80％，料液比 1∶50，提取 1 次，每次提取 1 h 为最佳提取条件。
药学论文-高效液相色谱法测定复方银杏叶片中银杏总黄酮的含量
药学论文-高效液相色谱法测定复方银杏叶片中银杏总黄酮的含量【摘要】目的建立复方银杏叶片中银杏总黄酮含量测定方法。
方法采用高效液相色谱法，用Symmetry C18色谱柱( 250 mm×4.6 mm,5 μm )，以甲醇0.4%磷酸溶液（52∶48）为流动相，流速为1.0 ml·min-1，检测波长360 nm ，柱温35℃。
结果该法线性关系良好，平均加样回收率为98.35 % ,RSD为1.17 % ( n = 5 )。
结论该法操作简便，分离效果好，结果准确，专属性强，可作为复方银杏叶片的质量控制方法。
【关键词】复方银杏叶片；黄酮；槲皮素；山柰素；异鼠李素；高效液相色谱法Abstract：ObjectiveTo establish the determination method of flavonoids in compound Ginkgo biloba Leaves Tablets .MethodsThe analysis was performed on aSymmetry C18 column（4.6 mm ×250 mm,5 μm） with methanol 0.4% phosphoric acid( 52:48 ) as mobile phase at a flow rate of 1.0 ml ·min-1, and at a column temperature of 35℃. The detection wavelength was 360nm.ResultsThe linearity of this method was good.The average recovery of added samples was 98.35 % with RSD 1.17 %. (n=5 ) .ConclusionThe method is convient with a good separating degree for the determination of flavonoids and can be used to evaluate the quality of compound Ginkgo biloba Leaves Tablets.Key words：Compound Ginkgo biloba LeavesTablets； Flavonoid； Quercetin ； Kaempferol； Isorhamnetin； HPLC复方银杏叶片是由银杏叶提取物和广西野葛根提取物等制成的复方制剂，具有活血化淤，降低血脂，清除自由基和抗衰老等功效和作用［1］。
HPLC法测定银杏叶粉针中总黄酮醇苷和萜类内酯
和萜类内酯为其重要有效成分, 对这些有效成分的 控制可直接反映银杏叶制剂的质量。为了更好地控 制自行研发的新药银杏叶粉针的质量, 本实验采用 HPL C-UV 法测定了黄酮醇苷成分, 并采用 HP L CEL SD 法测定了萜类内酯, 取得了满意的结果。 1 仪器与试药
Wat ers 1525 液相色谱仪, Wat er s 2487 紫外检 测 器, Wat ers 2420 蒸发 散射 光 检测 器, Empow er Pro ject 色谱工作站, SZ- 93 自动双重纯水蒸馏器 ( 上海亚荣生化仪器厂) 。
取内容物约12g精密称定加水10ml振摇使溶解用2盐酸溶液调节至ph2用醋酸乙酯振摇提取4次15101010ml合并提取液用5醋酸钠溶液20ml洗涤分取醋酸钠液再用醋酸乙酯10ml洗涤合并醋酸乙酯提取液和洗液用水洗涤2次每次20ml分出水洗液用醋酸乙酯10ml洗涤合并醋酸乙酯液回收醋酸乙酯至于残渣用丙酮溶解并转移至5ml量瓶中加丙酮至刻度摇匀即得
对照溶液。分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液和 阴性对照溶液各 20 LL , 进样测定。结果表明, 样品 中银杏内酯 A、B、C, 白果内酯 与其他组分分 离较 好, 且阴性对照在相应的位置无干扰, 见图 2。 3. 5 标准曲线的制备: 分别精密称取银杏内酯 A、 B、C 和 白 果 内 酯 对 照 品 适 量, 加 甲 醇 制 成 各 含 2. 075、2. 010 、2. 130、4. 015 m g/ m L 的混 合溶液。 分别进样 4、8、10、16、20 LL, 测定峰面积。以质量浓 度的对数值为横坐标, 峰面积的对数值为纵坐标, 绘 制标准曲线。结果表明, 银杏内酯 A、B、C 和白果内 酯线性范围分别为 0. 803～4. 015、0. 415～2. 075、 0. 402～2. 010、0. 426～2. 130 m g/ m L , 回归方程分 别为 lnY = 1. 338 lnX + 5. 385 3 ( r = 0. 998 8) 、 l nY = 1. 5153 lnX + 5. 198 1 ( r = 0. 997 3) 、lnY = 1. 4182 lnX + 4. 773 6( r = 0. 995 9) 、l nY = 1. 241 l nX + 5. 551 7( r = 0. 994 6) 。
分光光度法测定复方银杏口服液中总黄酮的含量
UV-2201紫外分光光 度计 (日本 岛津 ), 芦丁 对 照品 (中 国 药品生物制品 检定 所提供 ), 其他 试剂 均为分 析纯。复 方银 杏 口服液为湖北中医学 院自制。
2 方法与结果 2. 1 供试品溶液的制备 精密吸取复方银杏口服液 30 mL, 挥 去水后用 80 mL 甲醇回流提取 4 h, 冷却, 静置 24 h后 过滤, 回 收甲醇至干, 用 70% 乙醇定容至 100 mL, 即得。 2. 2 对照品溶液的制备 精密称取 干燥至 恒重的 芦丁标准 品 25. 23 mg 置于 10 mL容量 瓶中, 加入 70% 乙醇约 7 mL, 微 热使 溶解, 放冷后用 70% 乙醇稀 释至 刻度, 摇匀, 精 密量取 5 mL 置 于 50 mL 容量瓶中, 用 70% 乙醇稀释至刻度, 即得浓度为 0. 252 m g# mL-1的对照品溶 液。 2. 3 测定波长的确定 以芦丁为对 照品测 定复方 银杏口服 液 中总黄酮的含量。精密量取对 照品溶液 和供试 品溶液 适量, 分 别加入 25 mL 容量瓶中, 各加 5% 亚硝酸钠 溶液 1 mL 混 匀, 静 置 6 m in, 各加 10% 硝酸铝溶液 1 mL, 再加入 4% 氢氧化钠 溶液 5 mL, 加 70% 乙醇稀释 至刻 度, 摇匀, 放置 15 m in后, 在 400~ 600 nm 波长范围内扫描, 结果 两种溶 液均 在 500 nm 波长处 有 最大吸收, 其他成分对测定无干 扰, 故选择 500 nm 作为测定 波 长。 2. 4 标准曲线的 绘制 精密 吸取 对 照品 溶液 1. 0, 2. 0, 3. 0, 4. 0, 5. 0, 6. 0 mL, 分别置于 25 mL 容量瓶中, 各加 5% 亚硝 酸钠 溶液 1 mL 混匀, 放置 6 m in, 加 10% 硝酸铝 溶液 1 mL, 再加 入 4% 氢氧化钠溶液 5 mL, 加 70% 乙醇稀释至 刻度, 摇 匀, 放 置 15 m in后, 在 500 nm 波长处测 定吸光 度 ( A ) 。以吸 光度 (A )为 纵 坐标, 浓 度 ( X ) 为 横 坐 标, 绘 制 标 准 曲 线, 得 回 归 方 程: A = 9. 738 7X + 0. 022 67, r = 0. 999 7, 芦 丁 对照 品 浓 度在 0. 011 ~ 0. 065mg# mL-1间呈线性关系。
HPLC法测定银杏叶软胶囊中总黄酮的含量
HPLC法测定银杏叶软胶囊中总黄酮的含量高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）法是一种常用的分析方法，常用于药物、食品、环境等领域的分析。
本文将使用HPLC法来测定银杏叶软胶囊中总黄酮的含量。
1. 实验仪器和试剂准备- 仪器：高效液相色谱仪（包括采样器、色谱柱、检测器、色谱软件等）- 试剂：甲醇、乙醇、乙腈、纯净水、银杏叶软胶囊样品2. 样品制备将银杏叶软胶囊样品取重量（大约0.5克），加入适量的甲醇或乙醇中，以达到合适的浓度。
然后使用超声波清洗仪进行超声提取，提取时间约15分钟。
提取液离心，取上清液。
如果需要，可以通过滤膜过滤以去除颗粒杂质。
3. 色谱条件设置- 色谱柱：C18反相色谱柱（5μm，4.6mm×250mm）- 流动相：甲醇-水（80:20）- 流速：1.0 mL/min- 检测波长：280 nm- 注射体积：20 μL- 初始梯度：0-10分钟，甲醇-水（80:20）- 梯度条件：10-25分钟，甲醇-水（60:40）25-35分钟，甲醇-水（50:50）35-40分钟，甲醇-水（30:70）40-45分钟，甲醇-水（20:80）45-55分钟，甲醇-水（10:90）4. 标准曲线绘制选取适量的外标总黄酮标准品，加入适量的甲醇或乙醇中，得到一系列的浓度。
分别进行HPLC分析，测量各浓度的峰面积，并绘制出标准曲线。
5. 样品测试用之前制备好的样品提取液进行HPLC分析。
将待测样品注入色谱柱，使用上述的色谱条件进行分析。
分析时重复进行3次实验，并计算出平均值。
6. 数据计算利用标准曲线上的峰面积和浓度，计算出待测样品中总黄酮的含量。
7. 结果和讨论通过HPLC法测定银杏叶软胶囊中总黄酮的含量，得到了样品的峰面积。
通过比对标准曲线，可以计算出样品中总黄酮的含量。
通过以上步骤，我们可以使用HPLC法测定银杏叶软胶囊中总黄酮的含量。
高效液相色谱法测定银杏叶提取物中总黄酮醇苷含量
高效液相色谱法测定银杏叶提取物中总黄酮醇苷含量宋唯唯;刘芬芬;刘彩红【摘要】目的建立银杏叶提取物中总黄酮醇苷的HPLC含量测定方法.方法采用Hypersil ODS2色谱柱(4.6×250 mm,5μm),以甲醇-0.4％磷酸溶液(55∶45)为流动相,检测波长360 nm,流速1.0 ml/min,柱温35℃.结果槲皮素、山奈酚、异鼠李素进样量分别在10.0～60.0 μg/ml、10.0～60.0 μg/ml、1.0～ 30.0 μg/ml范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.42％、99.92％、98.11％.结论本方法简单、准确,可以用于银杏叶提取物中总黄酮醇苷的定量分析.【期刊名称】《泰山医学院学报》【年(卷),期】2016(037)001【总页数】3页(P33-35)【关键词】高效液相色谱法;银杏叶提取物;总黄酮醇苷【作者】宋唯唯;刘芬芬;刘彩红【作者单位】泰山医学院药学院,山东泰安271016;泰山医学院药学院,山东泰安271016;泰山医学院药学院,山东泰安271016【正文语种】中文【中图分类】R917银杏叶提取物(GBE)是银杏科植物银杏 Ginkgo biloba.L.的干燥叶经加工制成的提取物[1],具有扩张冠状动脉血管、改善脑循环及明显的抗血小板活化因子等独特的药理作用，主要活性成分为黄酮类和萜类内酯[2]，它们是制定银杏叶提取物和制剂质量标准的重要依据。
国内外制药行业所用的GBE的含量标准为:银杏黄酮质量分数 24%、银杏萜内酯质量分数 6%。
不论是为衡量提取工艺的优劣和控制GBE的质量,还是为后续药理药效的实验研究提供可靠的数据,建立一种能稳定、可靠的定量分析其主要药效物质黄酮类化合物的方法是十分必要的。
银杏叶提取物含有 20多种黄酮类化合物,通常都以糖苷的形式存在,测定每一种黄酮成分的含量十分复杂,这些成分的苷元部分为槲皮素、山萘酚、异鼠李素，通过测定样品酸水解后三种主要甙元含量，再乘以一定的因子换算成总黄酮的含量[3]，是国际上公认的衡量银杏叶提取物内在品质的依据。