ADP含量试剂盒使用说明
辅酶ⅡNADP(H)含量试剂盒使用说明
取上清液冰上保存供测定 NADPH 含量。
二、测定步骤(在 1.5mLEP 管中按下表依次加样）：
试剂名称
测定孔(μL)
样本
50
双蒸水
试剂一
250
试剂二
75
试剂三
75
试剂四
75
试剂五
35
对照管可以只做一个，不需每一个样品都做一个对照。充分混匀后，室温避光静置 40min
2、组织中 NADP 和 NADPH 的提取：
称取约 0.1g 组织，加入 0.9mL 酸性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min，冰浴中冷却后，10000g
4℃离心 10min，取上清液至另一新的离心管中，加入等体积的碱性提取液使之中和，10000g
4℃离心 10min，取上清液冰上保存供测定 NADP+含量。
辅酶ⅡNADP(H)含量试剂盒使用说明
产品简介：
NADP+和 NADPH 含量测定可以计算 NADP（NADPH + NADP+)含量和 NADPH/NADP+比值，其变化与
磷酸戊糖途径和生物合成以及抗氧化反应密切相关。NADPH/NADP+比值不仅是细胞氧化还原
态的主要标志之一，而且在 PPP 途径、生物合成和抗氧化代谢中具有重要调控作用。
分别用酸性和碱性提取液提取样品中 NADP+和 NADPH。NADPH 通过 PMS 的递氢作用，使氧化型
噻唑蓝（MTT）还原为甲瓒，570nm 下检测吸光值，从而测定 NADPH 含量。利用 6-磷酸葡萄
糖脱氢酶还原 NADP+为 NADPH，从而检测 NADP+含量。
血小板聚集功能(ADP及AA途径)检测试剂盒(粘度测定法)产品技术要求lepu
血小板聚集功能（ADP及AA途径）检测试剂盒(粘度测定法)
适用范围：本试剂盒与血栓弹力图仪配套使用，体外检测人全血的血块强度（MA）指标，通过MA计算抑制率，用于评价患者服用阿司匹林及噻吩并吡啶类药物后的血小板聚集功能。
1.1 包装规格
1人份/盒、5人份/盒。
1.2 产品主要组成成分
2.1 外观
试剂盒外观整洁，标识清晰。
试剂盒内的各液体组分应澄清透明，无沉淀或絮状物，无漏液。
样品测定杯无破损，无变形。
2.2 准确性
2.2.1用本试剂盒同Haemoneticse公司血小板聚集功能检测试剂盒对40例临床样本进行对照检测，各自测得的抑制率进行相关性分析，应满足r≥0.975。
2.2.2用本试剂盒测定正常人群抗凝全血样本，应满足表1的要求
表1 正常人群抗凝全血样本ADP及AA途径MA值测试结果范围
2.3 批内精密度
用同批试剂盒的普通杯检测同一份枸橼酸钠抗凝全血5次，计算血块强度（MA）的变异系数（CV），应小于15%。
用同批试剂盒的巴曲酶杯、二磷酸腺苷杯及花生四烯酸杯分别检测同一份肝素钠抗凝全血各5次，计算各自的血块强度（MA）的变异系数（CV），均应小于15%。
2.4批间精密度
用不同三批试剂盒每一批的普通杯检测同一份枸橼酸钠抗凝全血各5次，计算血块强度（MA）的变异系数（CV），应小于15%。
用不同三批试剂盒每一批的巴曲酶杯、二磷酸腺苷杯及花生四烯酸杯分别检测同一份肝素钠抗凝全血5次，计算各自的血块强度（MA）的变异系数（CV），均应小于15%。
2.5 稳定性
将试剂盒置于2℃～8℃，保存12个月之后对试剂盒进行检测，其结果应符合2.1、2.2.2、2.3的要求。
磷酸葡萄糖脱氢酶活性检测试剂盒说明书
6-磷酸葡萄糖脱氢酶（微量法货号:BC0265规格:100T/96S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体100 mL×1瓶4℃保存试剂一液体20 mL×1瓶4℃保存（切忌放-20℃）试剂二粉剂×1支4℃保存试剂三粉剂×1支4℃保存溶液的配制：1、试剂二：用时每支加250 μL双蒸水充分溶解备用；2、试剂三：用时每支加250 μL双蒸水充分溶解备用。
3、工作液配制：临用前将试剂一、试剂二、试剂三以15：0.2：0.2比例混合。
产品说明：G6PDH（EC 1.1.1.49）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是磷酸戊糖途径的关键酶，催化6-磷酸葡萄糖氧化为6-磷酸葡萄糖酸内酯，同时将NADP+还原为NADPH，供生物合成及维持细胞内的还原状态用。
因此6-磷酸葡萄糖脱氢酶活性的高低可以从一定程度上反映出生物体的生物合成和抗氧化能力。
G6PDH催化NADP+还原生成NADPH，在340nm下测定NADPH增加速率。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板（UV板）、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、细菌、细胞或组织样本的制备：细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，弃上清，按照每500万细菌或细胞加入1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20%，超声3s，间隔10s，重复30次）。
8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
ATP含量试剂盒使用说明
ATP含量试剂盒使用说明一、试剂盒的组成1.ATP酶：可催化ATP与啶酮核苷酸底物反应，产生荧光发射。
2.底物液：包含啶酮核苷酸底物、辅酶CoA、磷酸化底物和缓冲液等成分。
3.酶反应终止液：用于停止ATP酶的活性，停止荧光信号的产生。
4.荧光标准品：已知浓度的ATP溶液，用于绘制标准曲线。
5.读取缓冲液：用于在荧光分析仪上读取荧光信号。
二、使用步骤1.试剂室温平衡：将试剂盒中的所有试剂恢复到室温，并确保所有试剂充分均匀混合。
2.样品预处理：根据实验需要，选择合适的方法提取细胞或组织中的ATP，并计算样品的蛋白质含量。
3.准备标准曲线：取不同浓度的荧光标准品，并用读取缓冲液稀释到一系列已知浓度的溶液。
每个浓度至少重复3次。
将这些标准品稀释到试管中。
4.样品处理：将不同待测样品分别加入到试管中，各样品至少重复3次。
同时加入空白对照组，只加读取缓冲液而无待测样品。
5.加入试剂：将相应体积的底物液加入到每个试管中，充分混合。
立即向每个试管中加入适量的ATP酶，同时进行混合。
6.反应：将试管密封，并在37℃下孵育一段时间，一般为10-30分钟。
7.停止反应：向每个试管中加入相应体积的酶反应终止液，停止ATP酶的活性，停止荧光信号的产生。
8.读取荧光：将每个试管置于荧光分析仪上，使用适当的激发波长和发射波长对荧光信号进行测量，记录下荧光单位值。
9.绘制标准曲线：将标准曲线上的荧光单位值与标准品的ATP浓度进行对应，绘制标准曲线。
10.计算样品ATP含量：根据样品荧光单位值和标准曲线，计算出样品中的ATP含量。
三、注意事项1.所有试剂的操作应按照试剂盒说明进行，不同品牌可能有些许差异，应严格按照相应说明进行操作。
2.手术操作时应采取无菌操作，避免对样品的污染。
3.混合试剂时需充分振荡，确保试剂均匀混合。
4.在实验过程中，所有试管、吸头等实验用具应标注清楚，避免混淆和误操作。
5.反应时间会影响结果，不同实验目的可根据需要进行时间的调整，一般30分钟内可得到稳定的信号。
细胞ATPADPAMP含量高效液相色谱法HPLC定量检测
细胞ATP/ADP/AMP含量高效液相色谱法（HPLC）定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途细胞A TP/ADP/AMP含量高效液相色谱法（HPLC）定量检测试剂是一种旨在通过高氯酸酸性处理，碱性中和后，在高效液相色谱仪和紫外光度仪下（254nm波长）检测分析，分离出ATP、ADP或AMP波峰，以定量测定样品中腺嘌呤核苷酸含量的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种动物或人体细胞裂解样品中A TP、ADP、AMP的含量检测。
产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。
技术背景腺嘌呤核苷酸（adenine nucleotides），简称腺苷，包括单磷酸腺苷、二磷酸腺苷和三磷酸腺苷，是一种单体单位，为核糖核酸（RNA）和脱氧核糖核酸（DNA）的组成成分，并提供化学能量，在能量代谢通路中维护诸如肌肉、胞膜等组织细胞结构的生化和生理功能，调节细胞糖酵解、三羧酸循环、电子传递系统、氧化磷酸化活动。
腺嘌呤核苷酸在细胞中浓度低，且不稳定，通常通过其类型不同、浓度差异、分布状况，来评价细胞的代谢情况和能量状态。
单磷酸腺苷（Adenosine monophosphate；AMP），又称为5'-腺嘌呤核苷酸或腺苷酸（5'-adenylic acid），是一种在（脱氧）核糖核酸中发现的核苷酸。
它是一种磷酸及核苷腺苷的酯，并由磷酸基团、戊糖核酸糖及碱基腺嘌呤所组成。
分子式为C10H14N5O7P，分子量347。
AMP可以通过腺苷酸激酶（adenylate kinase）催化2分子ADP生成，或通过ATP以及ADP水解产生。
AMP常以腺苷-3',5'-环化一磷酸（cAMP）形式存在于细胞中。
AMP与A TP之比反映细胞ATP生成状况以及脂肪酸氧化程度。
二磷酸腺苷（adenosine diphosphate；ADP），参与ADP-ATP循环，提供热能转换和动态平衡，尤其在线粒体需氧呼吸、光合成等实现。
大鼠脂联素(ADP)ELISA试剂盒说明书
大鼠脂联素（ADP)酶联免疫分析试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中脂联素（ADP)的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠脂联素（ADP)水平。
用纯化的大鼠脂联素（ADP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入脂联素（ADP)，再与HRP标记的脂联素（ADP)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的脂联素（ADP)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠脂联素（ADP)浓度。
样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
大鼠脂联素(ADP)酶联免疫吸附测定试剂盒 说明书
大鼠脂联素(ADP)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书产品编号：E0605r本试剂盒仅供体外研究使用!预期应用ELISA法定量测定大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清或其它相关液体中ADP 含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中ADP水平。
用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被有固相抗体的微孔中依次加入ADP抗原、生物素化的抗ADP抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的ADP呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板：一块（96孔）2.标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 ng/mL，做系列倍比稀释后，分别稀释成100 ng/mL，50 ng/mL，25 ng/mL，12.5 ng/mL，6.25 ng/mL，3.12 ng/mL，其原液直接作为最高标准浓度，样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/mL，临用前15分钟内配制。
如配制100 ng/mL标准品：取0.5ml 200 ng/mL的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3.样品稀释液：1×20ml/瓶。
4.检测稀释液A：1×10ml/瓶。
5.检测稀释液B：1×10ml/瓶。
6.检测溶液A：1×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液A 1：100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100ul），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如1ul 检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7.检测溶液B：1×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液B1：100稀释。
小鼠脂联素(ADP)说明书
小鼠脂联素（ADP)酶联免疫分析试剂盒使用说明书南京金益柏ELISA试剂仅供研究使用目的：南京金益柏ELISA试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中脂联素（ADP)的含量。
实验原理：南京金益柏ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠脂联素（ADP)水平。
用纯化的小鼠脂联素（ADP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入脂联素（ADP)，再与HRP标记的脂联素（ADP)抗体结合南京金益柏ELISA试剂盒，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，南京金益柏ELISA试剂盒并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的脂联素（ADP)呈正相关。
南京金益柏ELISA试剂盒用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠脂联素（ADP)浓度。
试剂盒组成：样本处理及要求：1. 南京金益柏ELISA试剂盒血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3.南京金益柏ELISA试剂盒尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
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ADP含量试剂盒使用说明
产品简介：
ADP广泛存在于动物、植物、、微生物和培养细胞中，是描述细胞能量代谢状态的主要参数。
测定ADP含量并且计算能荷，能够反映能量代谢状态。
ADP在254nm下有吸收峰，可以利用高效液相色谱法测定其含量。
试验中所需的仪器和试剂：
高效液相色谱仪、低速离心机、溶剂抽滤装置、针头式过滤器（水系，50个，0.22μm）、滤膜（水系和有机系各1个，0.45μm）、C18柱（4.6×150mm）、可调式移液器、样品瓶（50个，2mL）、甲醇（色谱级，300mL）、甲醇（色谱级，300mL）、蒸馏水
产品内容：
试剂一：液体60mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：液体60mL×1瓶，4℃保存；
试剂三：粉剂1×1瓶，粉剂2×1瓶，4℃保存；临用前用少量蒸馏水将粉剂1和粉剂2溶解后倒入1000mL容量瓶中，用蒸馏水定容至1000mL，形成流动相缓冲液基质（注：试剂瓶中的粉剂要冲洗干净）,4℃可保存1周；
试剂四：ADP标准品5mg×1支，-20℃保存。
临用前加入1mL双蒸水，配成5mg/mL溶液，配好后-20℃可保存1周；
操作步骤：
一、实验前的准备工作：
1、将双蒸水1000mL、流动相缓冲液基质1000mL和甲醇300mL用0.45μm的滤膜抽滤，以除去溶剂中的杂质，防止堵塞色谱柱。
（注：双蒸水和缓冲液基质用水系滤膜抽滤，甲醇用有机系滤膜抽滤）。
2、流动相的配制：将抽滤完毕的流动相缓冲液基质1000mL与甲醇配比为99.9：0.1（v/v），即取999mL缓冲液基质与1mL甲醇混合。
3、将抽滤完毕的甲醇和双蒸水配比成100%的甲醇，10%的甲醇，双蒸水各250mL。
将2和3中的溶剂超声30分钟，以脱去溶剂中的气泡，防止堵塞色谱柱。
二、ADP的提取：
1、组织的处理：准确称取组织重量0.1g，加入1mL试剂一，提取ADP，4000g常温离心15min，取上清液，加入等体积的试剂二，混匀，4000g常温离心15min，取上清，0.22μm水系微孔滤膜过滤后冰上放置，待测。
2、细胞处理：收集约30mL细胞，离心菌体经干燥后，加入1mL试剂一，超声破壁细胞(950 W，30%，15min，工作1s间隔2s)，4000g常温离心15min，取上清液，加入等体积的试剂二，混匀，4000g常温离心15min，取上清，0.22μm水系微孔滤膜过滤后冰上放置，待测。
三、ADP含量测定操作步骤：
1.开启电脑、检测器和泵，安装上色谱柱，打开empower软件，在方法组中设置进样量20μL，流速1mL/min，保留时间10min，检测波长254nm,设置完毕保存方法组。
2.用100%的甲醇、10%的甲醇、双蒸水按甲醇浓度从大到小的顺序洗色谱柱30min。
3.用流动相洗柱子，待基线稳定后开始加样。
4.加入标准品20μL，在10min内可分离ADP，ADP的保留时间在4min左右（柱子不同，保留时间有差异），计算不同浓度的ADP标准品的峰面积。
5.加入样品20μL，在相应保留时间处检测ADP的峰面积。
ADP含量的计算：
将5mg/ml的ADP标准品用双蒸水分别稀释成100μg/ml、80μg/ml、60μg/ml、40μg/ml和20μg/ml的ADP标准品溶液，以标准品浓度（μg/ml）为横坐标，峰面积为纵坐标分别计算ADP标准曲线。
注：标准品的稀释倍数要根据样品中ADP浓度确定，样品中ADP的峰面积必须落在不同浓度的ADP标准品的峰面积之内，该标准品稀释倍数只是一个参考。