人MyoDELISA试剂盒使用说明书

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免疫球蛋白M测定试剂盒(免疫比浊法)产品技术要求北京世纪沃德生物

免疫球蛋白M测定试剂盒(免疫比浊法)产品技术要求北京世纪沃德生物

免疫球蛋白M测定试剂盒(免疫比浊法)
适用范围:用于体外定量测定人血清中免疫球蛋白M(IgM)的含量。

1.1产品规格
2.1 外观
试剂1应为无色澄清液体,试剂2应为无色或淡褐色澄清液体。

试剂盒标签标识清晰,外包装完整无损。

2.2 装量
不少于瓶签标示量。

2.3 试剂空白
在340nm处测定试剂空白吸光度,应≤0.5。

2.4 分析灵敏度
测试2.0 g/L的被测物时,吸光度变化值(ΔA)应≥0.1。

2.5 线性
2.5.1 在[0.1,
3.0] g/L区间内,线性相关系数r≥0.990。

2.5.2 在[0.1,1.0) g/L区间内,线性绝对偏差不超过±0.15g/L;在[1.0,
3.0] g/L区间内,线性相对偏差不超过±15%。

2.6 精密度
2.6.1 重复性
测试高、低两个水平浓度样本,其结果的变异系数应不超过5%。

2.6.2 批间差
随机抽取三批试剂盒测试同一份样本,批间相对极差(R)应≤10%。

2.7 准确度
待检系统与比对系统测值的相关系数r≥0.975;在[0.1,1.0) g/L区间内,绝对偏差不超过±0.15g/L;在[1.0,3.0] g/L区间内,相对偏差不超过±15%。

2.8稳定性
该产品在2℃~8℃条件下贮存有效期为12个月,取效期末的产品进行检测,应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7之规定。

ELISA检测试剂盒操作流程

ELISA检测试剂盒操作流程

ELISA检测试剂盒操作流程1.准备实验材料和试剂-检验样本:例如血清、尿液、细胞上清液等。

-ELISA试板:根据样本数量选择96孔或384孔的板。

- 试剂盒:包括标准品、washes缓冲液、检测抗体、底物等。

2.样本处理-对于血清等生物液体样本,可用离心将固体物质沉淀并分离下清液。

-样本需储存或运输途中应避免反复冻融。

3.实验板的板液处理-将实验板从包装中取出,将不需要的孔进行盖膜封闭。

- 根据试剂盒说明书,添加适量的板液(Coating Buffer)到每个孔中,使其充分覆盖孔内壁。

-封闭板液的孔,将实验板在2-8℃下放置静置一夜或在37℃下1-2小时孵育。

4.样本添加-倒掉盘液,用PBS或TBST洗板3次,去除残留物。

-将样本加到每个孔中,根据需要添加正样本、负样本和待测样本。

-注意每个样本的剂量和添加的体积,通过试剂盒说明书和实验设计标准控制。

5.抗体添加-清洗步骤同上,将洗板缓冲液加到孔中,重复3次。

-加入检测抗体,根据试剂盒说明书的建议将其添加到孔中。

-要确保抗体的浓度和添加的体积适宜。

6.洗涤-洗涤步骤同上,用洗涤缓冲液洗板,重复3次。

-每次洗涤时,将洗液完全加满孔,静置1分钟,然后倒出洗液。

-注意洗涤时间和洗涤次数的准确控制,以将非特异性结合物质彻底清除。

7.底物添加-清洗步骤同上,将洗液加到孔中,重复3次。

-加入底物,根据试剂盒说明书的建议将其添加到孔中。

-底物液体应完全覆盖孔底,防止反应过程中氧化。

8.反应停止-根据试剂盒说明书,将反应停止液加入到孔中,停止底物的反应。

-注意反应停止液的体积和浓度,以保证反应的准确停止。

9.色谱分析-用ELISA板读板仪读取各个孔的OD值。

-根据试剂盒说明书和实验设计的标准曲线确定样本中目标物质的含量。

-注意设置适当的控制组和标准曲线来保证测量结果的准确性。

总结:ELISA检测试剂盒的操作流程主要包括实验板处理、样本添加、抗体添加、洗涤、底物添加、反应停止和色谱分析。

简述使用elisa试剂盒的操作流程

简述使用elisa试剂盒的操作流程

简述使用elisa试剂盒的操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。

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人(Amylase)ELISA试剂盒说明书,淀粉酶ELISA试剂盒

人(Amylase)ELISA试剂盒说明书,淀粉酶ELISA试剂盒

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试剂盒,人试剂盒,人刀豆素A(ConA)ELISA试剂盒使用说明书

试剂盒,人试剂盒,人刀豆素A(ConA)ELISA试剂盒使用说明书

人刀豆素A(ConA)ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆樊克生物供应使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本刀豆素A(ConA)含量。

试验原理:ConA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知ConA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。

先将ConA和生物素标记的抗体同时温育。

洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。

再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。

产生颜色。

颜色的深浅和样品中ConA的浓度呈比例关系。

刀豆素A试剂盒,elisa试剂盒说明书,ELISA试剂盒,ELISA检测试剂盒,人elisa试剂盒说明书试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:80ng/ml 1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗ConA抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP 1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料1.蒸馏水。

2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3.振荡器及磁力搅拌器等。

安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。

一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。

2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。

人Myo-DELISA试剂盒使用说明书

人Myo-DELISA试剂盒使用说明书

人Myo-DELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人Myo-D含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人Myo-D水平。

用纯化的人Myo-D抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入Myo-D,再与HRP标记的Myo-D抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的Myo-D 呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人Myo-D浓度。

样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5.组织标本:切割标本后,称取重量。

加入一定量的PBS,PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

标本融化后仍然保持2-8℃的温度。

加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

人的二胺氧化酶(DAO)酶联免疫吸附测定试剂盒使用

人的二胺氧化酶(DAO)酶联免疫吸附测定试剂盒使用

1:100 稀释(如:10 检测溶液 A / 990 检测稀释液 A),充分混匀,稀释前根据预 先计算好的每次实验所需的总量配制(100 /孔),实际配制时应多配制 0.1-0.2mL。 5、 浓洗涤液:用 580mL 蒸馏水或去离子水将 20mL 浓洗涤液稀释至 600mL,进行 30 倍稀释。 6、 底物溶液:请用灭菌的移液器吸头吸取所需体积的 TMB 至另一干净容器中使用,容 器中剩余的底物应予丢弃,不要倒回 TMB 瓶中。 注意: 1、 标准品请于临用前 15 分钟内配制。该标准品只能使用一次。 2、 标准品的稀释不能直接在板中进行。 3、 标准品、检测溶液 A 工作液、检测溶液 B 工作液请使用相应的稀释液配制,不能混 淆。混匀时要轻轻充分混匀,避免起泡。为保证实验结果的准确请使用微量吸管,并 校准微量加液器。请依据所需的量精确配制,尽量不要微量配制(如吸取检测溶液 A 时,一次不要小于 10 ),以避免造成浓度误差。 4、 请勿重复使用已经稀释过的标准品、检测溶液 A 工作液和检测溶液 B 工作液。 5、 浓洗涤液中如有结晶析出,请先温育至室温,轻轻混匀,至到结晶完全溶解再进行配 制。
标本的采集与保存
1、 血清: 将收集于血清分离管的 全血标本 在室温放置 30 分钟 或 4 过夜 ,然后 1000 g 离心 20 分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20 或-80 保存,但应避免 反复冻融。
2、 血浆:用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的 30 分钟内于 2 8 1000 g 离心 15 分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20 或-80 保存,但应 避免反复冻融。
试剂准备
1、 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25 ),试剂不能直接在 37 溶解。 2、 标准品(冻干品):每瓶 标准品用标准品稀释液稀释至 1mL,盖好后室温静置大约

人骨保护素配体(OPGL)elisa试剂盒使用说明书

人骨保护素配体(OPGL)elisa试剂盒使用说明书

人骨保护素配体(OPGL)elisa试剂盒使用说明书Elisa kit规格:48孔配置/96孔配置标准品稀释液:1.5ml×1瓶酶标试剂:3 ml×1瓶(48)/6 ml×1瓶(96)【人骨保护素配体(OPGL)elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

试剂盒组成:封板膜:2片(48)/2片(96)说明书:1份密封袋:1个标准品:2700ng/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液: 3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人骨保护素配体(OPGL)水平。

用纯化的人骨保护素配体(OPGL)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入骨保护素配体(OPGL),再与HRP标记的骨保护素配体(OPGL)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的骨保护素配体(OPGL)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人骨保护素配体(OPGL)浓度。

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人Myo-DELISA试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人Myo-D含量。

实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人Myo-D水平。

用纯化的人Myo-D抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入Myo-D,再与HRP标记的Myo-D抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的Myo-D 呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人Myo-D浓度。

样本处理及要求:
1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上
清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中
如有沉淀形成,应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5.组织标本:切割标本后,称取重量。

加入一定量的PBS,PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

标本融化后仍然保持2-8℃的温度。

加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

分装后一份待检测,其余冷冻备用。

操作步骤
1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标
准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。

(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为150 pg/mL,100 pg/mL ,50 pg/mL,25 pg/mL,12.5 pg/mL)。

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样
品孔。

在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3。

8.洗涤:操作同5。

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。

测定应在加终止
液后15分钟以内进行。

注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。

一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。

如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

计算:
在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD
值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释
倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值
代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释
倍数,即为样品的实际浓度。

(此图仅供参考)试剂盒性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。

2.批内与批见应分别小于9%和11%
检测范围:
6pg/mL -200 pg/mL
保存条件及有效期:
1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6个月。

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