加A试剂盒使用说明书
第一链cDNA合成试剂盒Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit 中文说明书
第一链cDNA合成试剂盒Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit中文说明书2013-12-07 13:20:16Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit试剂盒包装与含量小瓶/瓶盖标签适用于a) 04 379012001b)04896866001c************1红色TranscriptorReverseTranscriptase（逆转录酶）a) 1瓶，25 μl (20 U/μl)b) 1瓶，50 μl (20 U/μl)c) 2瓶，各50 μl (20 U/ μl)•储存缓冲液：200 mM 磷酸钾，2 mM 二硫苏糖醇，0.2% Triton X-100(v/v)，50% 甘油(v/v)，pH 约为7.22无色Transcriptor RTReaction Buffer(5×)（逆转录缓冲液）a) 1瓶，1 mlb) 1瓶，1 mlc) 2瓶，各1 ml• 5×浓度：250 mM Tris/HCl，150 mM KCl，40 mM MgCl2，pH约为8.5(25°C)3无色ProtectorRNase Inhibitor（RNase抑制剂）a) 1瓶，50 μl(40 U/μl)b) 1瓶，100 μl(40 U/μl)c) 2瓶，各100 μl(40 U/μl)•储存缓冲液：20 mM Hepes-KOH，50 mM KCl，8 mM 二硫苏糖醇，50 % 甘油(v/v)，pH 约为7.6 (4°C)4黄色/紫色Deoxynuc-leo-tideMix（dNTP）a) 1瓶，100 μl(黄色瓶盖)b) 1瓶，200 μl(紫色瓶盖)c) 2瓶，各200 μl(紫色瓶盖)• dATP, dCTP, dGTP, dTTP各10 mM5蓝色Anchored-oligo(dT)18Primer（锚定oligo(dT)18引物）a) 1瓶，100 μl(50 μM)b) 1瓶，200 μl(50 μM)c) 2瓶，各200 μl(50 μM)6Random Hexamera) 1瓶，100 μl(600 μM)蓝色Primer（随机引物）b) 1瓶，200 μl(600 μM)c) 2瓶，各200 μl(600 μM)7绿色Control RNA（对照RNA）a) 1瓶，20 μl(50 ng/μl)•包含提取于永生细胞系(K562)的总RNA片段稳定溶液8绿色Control Primer Mix PBGD（对照基因引物）a) 1瓶，40 μl•5 μM 人类PBGD特异性正向与反向引物9(b和c为瓶7)无色Water, PCR-gradea) 1瓶，1 mlb) 2瓶，各1 mlc) 3瓶，各1 ml注意：货号为***********和***********的产品不含有control试剂(瓶7和瓶8)，因此瓶7即为Water, PCR-grade。
细胞周期素A2检测试剂盒说明书
细胞周期索A2检测试剂盒说明书实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中血清素/血清胺(ST)水平。
用纯化的血清素/血清胺(ST)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入血清素/血清胺(ST),再与HRP标记的血消素/血清胺(ST)抗体结合，形成抗体-抗原-的标抗体梵合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的血清索/血清胺(ST)呈正相关。
用假标仪在4SO AM波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品中血清素/血清胺(SD浓度。
试剂盒性能：1.灵敏度：Z山小的检测浓度小于1号标准品。
稀释度的线性。
样品线性回归与预期浓度相关系数尺值为Oqqo2∙特异性：不与其它细胞因子反应。
3.重且性：板内、板间变异系数均小于工O%∙标本要求：1 .标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-2。
C 保存，但应避免反完冻融2 .不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物陶的(HRP)活性。
样本处理及要求，1■.血清：全血标本请于室温放置2小时或4C过夜后于工Og离心2。
分钟，取上清即可检测，或将标本放于-WC或-8OC保存，但应避免反复冻融。
2∙血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2-8。
ClRog离心20分钟，或将标本放于-3七或-8O c C 保存，但应避免反复冻融，3 .组织匀浆：用预冷的PBS9Ql∙M,pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果)，称重后将组织剪碎。
将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比，比如Ig的组织样品对应9M L的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。
推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。
为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反熨冻融。
BCA蛋白定量说明书
c. 低浓度蛋白质样品的操作流程（定量范围：0～50 μg/ml）【1 ml 反应体系】 d. 低浓度蛋白质样品的操作流程（定量范围：0～50 μg/ml）【0.2 ml 反应体系 使用 Microtube】 e. 低浓度蛋白质样品的操作流程（定量范围：0～200 μg/ml）【0.2 ml 反应体系 使用微孔板】
所需工作液量的计算方法如下： 所需工作液总体积（ml）= [（BSA 标准溶液 8 份或 7 份 + 检测样品数）×平行样本数（n）＋ 1 ] ×1
个样品所需的工作液体积 例） 标准操作流程【1 ml 反应体系】检测样品数为 12 个、平行样（n=2）时：
[（8 ＋ 12）× 2 ＋ 1 ] × 1 ml ＝ 41 ml 例） 标准操作流程【200 μl 反应体系】、检测样品数为 20 个、平行样（n=2）时：
2 mg/ml BSA Standard (μl)
稀释液 (μl)
BSA 终浓度 (μg/ml)
120
0
2,000
90
30
1,500
60
60
1,000
45
75
750
30
90
500
15
105
250
10
150
125
0
120
0 (Blank)
2. BSA 标准曲线的制备
1) 分别取 50 μl 稀释后的 BSA 标准品溶液加入到 1.5 ml microtube 中，每个浓度取 2 个平行样。
20 分钟内检测完毕所有样品。
5) 各样品溶液的吸光度值减去 Blank 值的平均值，根据标准曲线可计算出检测样品的蛋白浓度。
d. 低浓度蛋白质样品的操作流程（定量范围：0～50 μg/ml）【0.2 ml 反应体系】 1. BSA 标准品溶液的配制。 1) 0.2 mg/ml BSA 标准品溶液的制备：取 100 μl BSA Standard Solution (2 mg/ml)，加入 900 μl 稀释液后充分混合。 2) 按照下表所示在 1.5 ml microtube 中稀释 BSA 标准品溶液（2 个平行样）（7 个浓度×2=14 管）。 BSA 标准品溶液和检测样品的稀释可使用去离子水、0.9% NaCl 或 PBS。
takara反转录试剂盒说明书
Code No. RR047A 研究用PrimeScript™RT reagent Kitwith gDNA Eraser(Perfect Real Time)说明书目录内容页码●制品说明1●制品内容 1 ●试剂盒外必备材料 1 ●保存 1 ●特长 2 ●使用注意 2 ●操作方法 2 ● Real Time PCR 4 ●实验例 6 ●附录7 ●关联产品8●制品说明为了准确地进行基因表达量分析，必须满足只有cDNA作为模板检出的先决条件，但Total RNA中常常混有基因组DNA，并可以直接作为PCR反应的模板进行扩增，因此会造成解析结果不准确。
为了避免这种情况发生，通常将检测用引物设计在内含子前后的外显子上，使基因组DNA得不到扩增。
但是，此方法不适合具有单个外显子的基因或两个外显子之间所跨的内含子过小的基因，同时当基因组上有伪基因存在时、或设计引物对基因组有非特异性扩增时、以及基因信息没被完全解析的生物种等也同样不适合于本方法。
在这种情况下，我们常常需要对Total RNA样品进行DNase I处理，以除去残存的基因组DNA。
而DNase I处理通常要进行复杂的纯化操作，同时会造成RNA的降解和损失。
PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser是可以除去基因组DNA进行Real Time RT-PCR反应的专用反转录试剂。
Kit中使用了具有较强DNA分解活性的gDNA Eraser，通过42℃，2 min即可除去基因组DNA。
同时由于反转录试剂中含有抑制DNA分解酶活性的组分，经过gDNA Eraser处理后的样品可以直接进行15 min的反转录反应合成cDNA，因此，20 min内即可迅速完成从基因组DNA去除到cDNA合成的全过程。
使用本制品合成的cDNA适用于SYBR® Green分析法和TaqMan®探针分析法，可以根据实验目的，选择与SYBR Premix Ex Taq™ II（Tli RNaseH Plus）（Code No. RR820Q/A/B）、Probe qPCR Mix（Code No. RR391S/A/B）组合使用。
Elabscience碱性磷酸酶(ALP)比色法测试盒使用说明书
（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断！）Elabscience®碱性磷酸酶(ALP)比色法测试盒Alkaline Phosphatase (ALP) Activity Assay Kit产品货号：E-BC-K091-M产品规格：48T(32 samples)/96T(80 samples)检测仪器：酶标仪（500-530 nm）使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话************，************技术部电话131****6790具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。
用途本试剂盒适用于检测动物血清(浆)、体液、组织及细胞中碱性磷酸酶的活力。
检测原理在pH=10的反应液中，碱性磷酸酶催化磷酸苯二钠水解，生成游离酚和磷酸。
酚在碱性溶液中与4-氨基安替吡啉结合，并经铁氰化钾氧化生成红色的醌的衍生物，根据红色的深浅计算酶活的高低。
本试剂盒检测组织和细胞样本时，需测定总蛋白浓度，推荐使用BCA法（货号：E-BC-K318-M）。
提供试剂和物品说明：试剂严格按上表中的保存条件保存，不同测试盒中的试剂不能混用。
对于体积较少的试剂，使用前请先离心，以免量取不到足够量的试剂。
所需自备物品仪器：酶标仪（500-530 nm，最佳检测波长520 nm）、涡旋混匀仪、37℃恒温箱。
耗材：枪头（1000 µL，200 µL，10 μL）、EP管（10 mL，2 mL）。
试剂：双蒸水、PBS（0.01 M，pH 7.4）或生理盐水（0.9% NaCl）试剂准备①试剂盒中的试剂平衡至室温。
②工作液的配制：按试剂一：试剂二为1:1的体积比混匀，现用现配，未用完的试剂2-8℃避光可保存1天。
③不同浓度标准品的稀释：样本准备①样本处理血清血浆等液体样本：直接测定。
PCR产物加A试剂盒(dA
技术咨询电话：400-607-9999注意：本制品仅供研究使用，请勿用于临床治疗等其他用途PCR 产物加A 试剂盒（dA Tailing Kit ） 货号：M020018产品及特点：本产品利用Taq DNA polymerase 的不依赖于模板的末端转移酶活性，在只有dA TP 存在的情况下，在平末端的DNA 片段加上一个dA 尾巴，使平末端片段也能被T 载体克隆。
1. 简单, 2X Tailing Buffer 中含有所需要的所有成分,不需要单独准备。
2. 适用于任何平末端的DNA 片段，包括Pfu DNA polymerase 等酶合成的DNA 片段。
3. 产物可以直接用于与T 载体的连接。
规格及成分成份 50 次包装 2 X Tailing Buffer 1.25 mL Taq DNA olymerase(5U/uL)50 uL 使用手册1份运输及保存：低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。
使用方法二：加A 反应：在干净的0.5 mL 或1.5 mL 离心管中，分别加入下列成分：1. 回收的DNA 片段(0.2-2 ug)2. 25 uL 2 X dA Tailing Buffer3. 1 uL Taq DNA polymerase （5 U/uL ） 补水到50 uL; 72℃保温2小时三：反应后处理：加A 反应后，Taq DNA polymerase 将与DNA 末端紧密结合，所以必须酚/氯仿抽提去除。
如果使用Proteinase K 处理后再用酚/氯仿抽提效果会更好。
得到的DNA 溶于适量水和TE 中后即可用于T 载体的连接反应。
疑难解答Q ：Taq DNA polymerase 加尾有特异性吗？A ：在有四种核苷酸存在的反应体系中，Taq DNA polymerase 加尾特异性跟DNA 的3’末端的核苷酸有关。
如果要加T ，要加尾的DNA 片段最好末位为T 。
如果要加A ，要加尾的DNA 片段最好末位为C 。
KAPA DNA HyperPrep 文库构建试剂盒说明书
技术数据表KAPA DNA HyperPrep文库构建试剂盒KR0961 – v6.17此技术数据表提供了KAPA DNA HyperPrep文库构建试剂盒的产品信息和一份详细的实验方法。
该文件适用于KAPA DNA HyperPrep文库构建试剂盒（***********、***********和***********），也适用于无PCR扩增流程的KAPA DNA HyperPrep 文库构建试剂盒（***********、***********和***********）。
目录产品描述 (2)产品应用 (2)产品规格 (2)货运和储存 (2)处理 (2)质量控制 (2)重要参数 (3)自动化文库构建 (3)安全停止点 (3)起始DNA和片段化 (3)接头设计和浓度 (4)连接后处理 (5)反应纯化 (5)片段选择 (6)文库扩增 (6)评估文库构建的成功 (7)工作流程 (9)文库构建实验方法 (10)附录1：片段选择 (12)附录2：Roche SeqCap EZ靶向捕获系统的文库构建指南 (14)限制和责任 (15)买方须知：有限的产品保证 (15)买方须知：有限许可 (15)试剂。
产品描述KAPA DNA HyperPrep文库构建试剂盒提供了一种灵活、操作简化的实验方法，用于从片段化的双链DNA（dsDNA）开始的快速构建Illumina测序文库。
新型化学法和简化的单管工作流程提高了不同类型和起始量的DNA样本中进行文库构建的效率和一致性。
该工作流程结合了酶促步骤，并采用最少的基于磁珠的纯化，从而将样本处理和整个文库制备时间缩短至2 - 3小时。
该试剂盒包含以下所需的所有酶和反应缓冲液：1. 末端修复和加A尾，可产生末端经修复的，并5’-磷酸化、3’-dA加尾的dsDNA片段；2. 接头连接，这期间具有3’-dTMP端的dsDNA接头与3’-dA加尾的分子连接；3. 文库扩增（可选），采用高保真、低偏差PCR扩增两端携带适当接头序列的文库片段。
人（Human）β淀粉样蛋白1-42（Aβ1-42）-NEWA
⼈（Human）β淀粉样蛋⽩1-42（Aβ1-42）-NEWA本试剂盒只能⽤于科学研究，不得⽤于医学诊断⼈（Human）β淀粉样蛋⽩1-42（Aβ1-42）ELISA检测试剂盒使⽤说明书检测原理试剂盒采⽤双抗体⼀步夹⼼法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被β淀粉样蛋⽩1-42（Aβ1-42）抗体的包被微孔中，依次加⼊标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
⽤底物TMB显⾊，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝⾊，并在酸的作⽤下转化成最终的黄⾊。
颜⾊的深浅和样品中的β淀粉样蛋⽩1-42（A β1-42）呈正相关。
⽤酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存⽅法1.⾎清：使⽤不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集⾎液后，3000转离⼼10分钟将⾎清和红细胞迅速⼩⼼地分离。
2.⾎浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离⼼30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离⼼10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加⼊适量⽣理盐⽔捣碎。
3000转离⼼10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按⼀次⽤量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
⾃备物品1.酶标仪（450nm）2.⾼精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使⽤前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，⽔浴加热使结晶完全溶解后再使⽤。
2.实验中不⽤的板条应⽴即放回⾃封袋中，密封（低温⼲燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空⽩；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进⾏温育操作。
5.所有液体组分使⽤前充分摇匀。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
编码品名规格单位
北京华越洋生物
加A试剂盒50次盒GX9133
北京华越洋生物
加A试剂盒100次盒GX9133
产品及特点本产品利用Taq DNA polymerase的不依赖于模板的末端转
移酶活性，在只有dATP存在的情况下，在平末端的DNA片段加
上一个dA尾巴，使平末端片段也能被T载体克隆。
1.简单, 2X Tailing Buffer 中含有所需要的所有成分,不需要
单独准备。
2.适用于任何平末端的DNA片段，包括Pfu DNA
polymerase等酶合成的DNA片段。
3.产物可以直接用于与T载体的连接。
规格及成分成份50 次包装
2 X Tailing Buffer 1.25 mL
Taq DNA olymerase(5U/uL) 50 uL
使用手册1份运输及保存低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。
自备试剂PCR片段
使用方法一：反应前纯化处理：
用Vent, Deep Vent, Pfu, Pwo等具有3到5外切活性的
DNA聚合酶扩增得到的DNA片段，必须经过彻底的去除残留的酶
的处理过程（如酚/氯仿抽提或Proteinase K处理），否则它们将
在加A反应时，切除掉加上的A尾巴，干扰反应。
可以采取胶回收
和酚/氯仿抽提法等常规方法纯化，最后溶解在水或TE中，终浓度
以0.1 ug/uL为宜。
二：加A反应
在干净的0.5 mL或1.5 mL离心管中，分别加入下列成分：
回收的DNA片段(0.2-2 ug)
25 uL 2 X dA Tailing Buffer
1 uL Taq DNA polymerase（5 U/uL）
补水到50 uL
72℃保温2小时
三：反应后处理
加A反应后，Taq DNA polymerase将与DNA末端紧密结合，所以必须酚/氯仿抽提去除。
如果使用Proteinase K处理后再
用酚/氯仿抽提效果会更好。
得到的DNA溶于适量水和TE中后即
可用于T载体的连接反应。
疑难解答Q：Taq DNA polymerase加尾有特异性吗？
A：在有四种核苷酸存在的反应体系中，Taq DNA polymerase加
尾特异性跟DNA的3’末端的核苷酸有关。
如果要加T，要加尾的
DNA片段最好末位为T。
如果要加A，要加尾的DNA片段最好末
位为C。
其关系具体见下表：
3’末端核苷酸加尾核苷酸
A A,但效率极低
C A>C
G G>A>C
T T>A
--DNA & Cell Biol. 12:763, 1993
关联产品加T试剂盒（dT Tailing Kit）、一站式T载体制备套装。