AB-PAS试剂盒使用说明

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5、 Schiff Reagent 浸 染 10-20min
6、 倾 去 Schiff Reagent, 流 水 冲 洗 10min
7、 ( 可 选 ) 苏 木 素 染 色 液 染 核 1-2min
8、 用 酸 性 分 化 液 分 化 2-5s, 水 洗 。
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AB-PAS 试 剂 盒 使 用 说 明
产品简介 :
糖 原 染 色 是 病 理 学 中 常 规 的 染 色 方 法 之 一 , McManus 在 1946 年 最 先 使 用 高 碘 酸 -雪 夫 技 术 显 示 黏 蛋 白 ,该 法 常 用 来 显 示 糖 原 和 其 他 多 糖 ,该 染 色 液 不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质。
8、为了您 的安全和健康 ,请穿实验服 并戴一次性手 套操作。
有效期:6 个月有效。
蛋白多糖和透明质酸——蓝色
备注:含有中性黏蛋白和酸性黏蛋白的细胞或组织可染成不同程度的蓝 紫色至紫色。
注意事项 :
1、切片脱 蜡应尽量干净 ,否则影响染 色效果。
2、 过 碘 酸 氧 化 时 间 不 宜 过 久 , 氧 化 时 的 温 度 以 18-22℃ 最 佳 。
3、试剂 (A) 、试剂 (B) 、试剂 (C)应置于 4℃ 密闭保 存,使用时 避 免 接 触 过 多 的 阳 光 和 空 气 。 使 用 前 , 最 好 提 前 30min 取 出 恢 复 到 室 温 后 , 避光暗处使用。
4、酸 性 分 化 液 应 经 常 更 换 新 液 ,其 分 化 时 间 应 该 依 据 切 片 厚 薄 、组 织 的 类别和酸性分化液的新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够。
5、切 片 在 过 碘 酸 和 Schiff Reagent 中 作 用 时 间 非 常 重 要 ,该 依 据 切 片 厚薄、组织的类别等决定。
100ml 100ml 100ml 100ml 100ml
自备材料 :
1、 蒸馏水
2、系列乙 醇
操作步骤 ( 仅供参考 )
1、 脱 蜡 至 水 , 蒸 馏 水 水 洗 2min。
2、 阿 利 新 蓝 染 色 液 染 色 10-20min。
3、 蒸 馏 水 洗 3 次 , 每 次 1-2min。
4、 放 入 过 碘 酸 溶 液 中 进 行 氧 化 5min。
阿利新蓝是类铜钛花青染料,这种阳离子染料与酸性基团结合,也即阿 利新蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物。分子 中带正电荷的盐键与酸性黏蛋白多糖物质中带负电荷的酸性基团结合形成不 溶 性 的 复 合 物 而 呈 蓝 色 ,再 于 PAS 进 行 复 合 染 色 ,就 能 显 示 三 种 不 同 黏 液 物 质成分。
4℃ 避光 4℃ 避光 4℃ 避光
RT RT
9、 用 Scott 蓝 化 液 返 蓝 , 水 洗 3min
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10、 逐 级 常 规 乙 醇 脱 水 , 二 甲 苯 透 明 , 中 性 树 胶 封 固
染色结果 :
糖原、中性黏蛋白、各种糖蛋白——紫红色
酸性黏蛋白(硫黏蛋白和唾液黏蛋白)——蓝色
阿 利 新 蓝 和 PAS 技 术 联 合 使 用 可 鉴 别 同 一 组 织 切 片 中 的 中 性 黏 蛋 白 和 酸性黏蛋白。 这种技术也常用作广泛检测黏蛋白的手段。该技术染色阴性, 可明确断定该物质不是黏蛋白。在大多数方法中,切片先经标准的阿利新蓝 ( pH 值 为 2.5)染 色 ,在 使 用 PAS 技 术 。阿 利 新 蓝 可 将 唾 液 黏 蛋 白 、硫 黏 蛋 白 和 蛋 白 多 糖 染 成 蓝 色 。 PAS 技 术 可 将 中 性 黏 蛋 白 染 成 深 红 /红 紫 色 , 同 时将既含中性黏蛋白有含酸性黏蛋白的组织和细胞染成深浅不同的紫色,这 是 有 于 阿 利 新 蓝 与 Schiff 试 剂 结 合 并 反 应 。 上 述 染 色 常 可 出 现 在 含 有 中 性 黏蛋白和唾液黏蛋白的小肠杯状细胞中。
产品组成 :
名称
编号
Leabharlann Baidu
试 剂 ( A) 阿利新蓝染色液
6x50ml 50ml
6x100ml 100ml
Storage 4℃ 避光
试剂( B) 过碘酸溶液
试 剂 ( C) Schiff Reagent
试剂( D) 苏木素染色液
试 剂 ( E) 酸性分化液
试 剂 ( F) Scott 蓝 化 液
50ml 50ml 50ml 50ml 50ml
6、如用苏木素染色液复染细胞核时一定要淡染, 以免影响阳性物质观 察, 目的是防止胞浆或黏蛋白着色而掩盖阿利新蓝的颜色。
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7、研 究 表 明 ,阿 利 新 蓝 -PAS 联 合 技 术 的 染 色 顺 序 可 影 响 最 终 结 果 。PAS 技术在阿利新蓝染色之前时,中性黏蛋白和糖原可染成紫色。与此相反,阿 尔 辛 蓝 染 色 在 PAS 技 术 之 前 时 , 则 可 将 这 些 物 质 染 成 预 期 的 紫 红 色 。
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