第十三章生化药物制造工艺酶类药物
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生物制药工艺学第13章生化药物制造工艺核酸药物
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第九页，编辑于星期二：十三点 三十八分。
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第十一页，编辑于星期二：十三点 三十八分。
第十二页，编辑于星期二：十三点 三十八分。
第十三页，编辑于星期二：十三点 三十八分。
第十四页，编辑于星期二：十三点 三十八分。
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第十三章生化药物制造工艺多肽与蛋白质类药物
（9）根据蛋白质的某些特殊性质进行纯化
如：白蛋白在弱酸性条件下加辛酸钠可耐受67℃的 温度，而其他蛋白质将变性。球蛋白或白蛋白在碱性 条件下，可以和利凡诺作用，形成络合物而与其他蛋 白质分离。细胞色素C和胰岛素可用一定浓度的蛋白 沉淀剂如三氯醋酸沉淀，而保存其活力。
又如：酶蛋白——超氧化物岐化酶（SOD）能抵抗蛋 白水解酶的水解，因而可用蛋白水解酶降解其他蛋白 质，以便于SOD进一步的纯化。
9、我们的市场行为主要的导向因素，第一个是市场需求的导向，第二个是技术进步的导向，第三大导向是竞争对手的行为导向。21.8.821.8.8Sunday, August 08, 2021 10、市场销售中最重要的字就是“问”。20:09:1420:09:1420:098/8/2021 8:09:14 PM 11、现今，每个人都在谈论着创意，坦白讲，我害怕我们会假创意之名犯下一切过失。21.8.820:09:1420:09Aug-218-Aug-21 12、在购买时，你可以用任何语言；但在销售时，你必须使用购买者的语言。20:09:1420:09:1420:09Sunday, August 08, 2021 13、He who seize the right moment, is the right man.谁把握机遇，谁就心想事成。21.8.821.8.820:09:1420:09:14August 8, 2021 14、市场营销观念：目标市场，顾客需求，协调市场营销，通过满足消费者需求来创造利润。2021年8月8日星期日下午8时9分14秒20:09:1421.8.8 15、我就像一个厨师，喜欢品尝食物。如果不好吃，我就不要它。2021年8月下午8时9分21.8.820:09August 8, 2021 16、我总是站在顾客的角度看待即将推出的产品或服务，因为我就是顾客。2021年8月8日星期日8时9分14秒20:09:148 August 2021 17、利人为利已的根基，市场营销上老是为自己着想，而不顾及到他人，他人也不会顾及你。下午8时9分14秒下午8时9分20:09:1421.8.8
如：白蛋白在弱酸性条件下加辛酸钠可耐受67℃的 温度，而其他蛋白质将变性。球蛋白或白蛋白在碱性 条件下，可以和利凡诺作用，形成络合物而与其他蛋 白质分离。细胞色素C和胰岛素可用一定浓度的蛋白 沉淀剂如三氯醋酸沉淀，而保存其活力。
又如：酶蛋白——超氧化物岐化酶（SOD）能抵抗蛋 白水解酶的水解，因而可用蛋白水解酶降解其他蛋白 质，以便于SOD进一步的纯化。
9、我们的市场行为主要的导向因素，第一个是市场需求的导向，第二个是技术进步的导向，第三大导向是竞争对手的行为导向。21.8.821.8.8Sunday, August 08, 2021 10、市场销售中最重要的字就是“问”。20:09:1420:09:1420:098/8/2021 8:09:14 PM 11、现今，每个人都在谈论着创意，坦白讲，我害怕我们会假创意之名犯下一切过失。21.8.820:09:1420:09Aug-218-Aug-21 12、在购买时，你可以用任何语言；但在销售时，你必须使用购买者的语言。20:09:1420:09:1420:09Sunday, August 08, 2021 13、He who seize the right moment, is the right man.谁把握机遇，谁就心想事成。21.8.821.8.820:09:1420:09:14August 8, 2021 14、市场营销观念：目标市场，顾客需求，协调市场营销，通过满足消费者需求来创造利润。2021年8月8日星期日下午8时9分14秒20:09:1421.8.8 15、我就像一个厨师，喜欢品尝食物。如果不好吃，我就不要它。2021年8月下午8时9分21.8.820:09August 8, 2021 16、我总是站在顾客的角度看待即将推出的产品或服务，因为我就是顾客。2021年8月8日星期日8时9分14秒20:09:148 August 2021 17、利人为利已的根基，市场营销上老是为自己着想，而不顾及到他人，他人也不会顾及你。下午8时9分14秒下午8时9分20:09:1421.8.8
第十三章 生物药物
肝素为天然抗凝药，对已形成血栓无效。此外，还具有澄
清血浆脂质、降低血胆固醇和增强抗癌药物疗效等作用。
化学工业出版社
第十三章 生物药物
第一节 生化药物
五、脂质类药物
1.脂质类药物分类及功能
主要的脂类药物有磷脂、胆汁酸、卟啉和不饱和脂肪酸。 通过生物组织抽提，微生物发酵，动植物细胞培养和化学合 成等途径制备。前列腺素（PG）是近几年来迅速发展的一 类含五元环的不饱和脂肪酸，具有广泛的生理功能。
化学工业出版社
第十三章 生物药物
第二节 生物技术药物
二、重组蛋白质类药物 4.临床重组蛋白质类药物 （1）激素类药物
① 天然胰岛素； ② 赖脯胰岛素：是将胰岛素 B28 Pro-B29Lys顺序颠倒后得 到的胰岛素类似物，具有与天然胰岛素相同的降低血糖作用， 在人体实验中发挥降血糖作用比天然胰岛素快。 ③ 人胰岛素类似物：人胰岛素类似物与天然胰岛素相比， 仅有一个氨基酸残基的差别，B28（脯氨酸）用天冬氨酸残基 替换，大大降低了胰岛素单体间聚合。
化学工业出版社
第十三章 生物药物
第二节 生物技术药物
二、重组蛋白质类药物 4.临床重组蛋白质类药物 （2）细胞因子类药物
①人干扰素：干扰素（IFN）是一种通过干扰病毒复制，保 护同种细胞，避免入侵病毒向同种细胞扩散感染的细胞因子。 ②人细胞介素（IL）：由白细胞分泌产生的一类具有免疫调 节作用的细胞因子。它是由一个和几个基因表达合成，是一类 相对分子质量较小的蛋白多肽，多在6×104以下 .以人重组白 细胞介素-2为例介绍。
化学工业出版社
第十三章 生物药物
第二节生物技术药物
一、生物技术药物的概述
1.生物技术药物的特性：
①分子结构复杂。 ②具有种属特异性。 ④稳定性差。 ⑤基因稳定性。 ⑥免疫原性。 ⑦体内的半衰期短 ⑧受体效应 ⑩检验的特殊性
酶类药物及其生产工艺.pptx
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④提取、沉淀、热处理 每千克菌 体干粉加入0.01 mol/LpH8的硼酸 缓冲液10L37℃搅拌1.5h， 30℃8mol/L醋酸调节pH4.2～4.4， 压滤，滤液加入2倍体积的丙酮， 放置3～4h过滤，收集沉淀，自然 风干，得干粗酶。
取粗制酶，加入0·3％甘氨酸，调节 pH8.8搅拌1.5h离心，上清液 60℃30min热处第理4页/共。10页 上清液加 2倍 体积的丙酮，析出沉淀，离心，
加入固体硫酸镀达到 45％ 饱和度，使杂蛋白析出，过
滤。收集透明滤液，缓缓加 入 20％三氯醋酸，边加边搅 拌使细胞色素 C沉淀析出， 离心收集沉淀。再将沉淀溶
于蒸馏水，装入透析袋中，
透析至无硫酸根为止，过滤 第8页/共10页
得细胞色素C粗品溶液。
④吸附、洗脱、透析
粗品溶液通过处理好的 Amberite IRC－50（NH4＋） 树脂柱吸附，然后将树脂移入大烧杯中，水洗至澄清 为止，再分别上柱，用0·6mol/L磷酸氢二钠与0.4mol /L氯化钠混合液洗脱，洗脱液用蒸馏水透析去氯离子 ，得细胞色素C精品溶液。
第1页/共10页
1、L-天门冬酰胺酶工艺路线
第2页/共10页
L-天门冬酰胺酶工艺说明
①菌种培米浆，接种量 1～ 1.5％， 37℃，通气搅拌培养 4～8h;
③发酵罐培养 玉米浆培养基，接种量 8％，37℃ 通气搅拌培养 6～ 8h，离心分离发酵液，得菌体 ，加2倍量丙酮搅拌，压滤，滤饼过筛，自然风干 成菌体干粉;
②中和、吸附、洗脱
提取液加氨水中和至pH7.5，在冰箱中静止沉淀杂蛋 白，吸取上层清液，每升提取液加入10g人造沸石， 搅拌吸附40min，静置倾去上层清液。收集吸附细胞 色素 C的人造沸石，用蒸馏水和氯化钠溶液反复洗涤 ，然后装柱，用 25％硫第酸7页氨/共1溶0页液洗脱，得洗脱液。
④提取、沉淀、热处理 每千克菌 体干粉加入0.01 mol/LpH8的硼酸 缓冲液10L37℃搅拌1.5h， 30℃8mol/L醋酸调节pH4.2～4.4， 压滤，滤液加入2倍体积的丙酮， 放置3～4h过滤，收集沉淀，自然 风干，得干粗酶。
取粗制酶，加入0·3％甘氨酸，调节 pH8.8搅拌1.5h离心，上清液 60℃30min热处第理4页/共。10页 上清液加 2倍 体积的丙酮，析出沉淀，离心，
加入固体硫酸镀达到 45％ 饱和度，使杂蛋白析出，过
滤。收集透明滤液，缓缓加 入 20％三氯醋酸，边加边搅 拌使细胞色素 C沉淀析出， 离心收集沉淀。再将沉淀溶
于蒸馏水，装入透析袋中，
透析至无硫酸根为止，过滤 第8页/共10页
得细胞色素C粗品溶液。
④吸附、洗脱、透析
粗品溶液通过处理好的 Amberite IRC－50（NH4＋） 树脂柱吸附，然后将树脂移入大烧杯中，水洗至澄清 为止，再分别上柱，用0·6mol/L磷酸氢二钠与0.4mol /L氯化钠混合液洗脱，洗脱液用蒸馏水透析去氯离子 ，得细胞色素C精品溶液。
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1、L-天门冬酰胺酶工艺路线
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L-天门冬酰胺酶工艺说明
①菌种培米浆，接种量 1～ 1.5％， 37℃，通气搅拌培养 4～8h;
③发酵罐培养 玉米浆培养基，接种量 8％，37℃ 通气搅拌培养 6～ 8h，离心分离发酵液，得菌体 ，加2倍量丙酮搅拌，压滤，滤饼过筛，自然风干 成菌体干粉;
②中和、吸附、洗脱
提取液加氨水中和至pH7.5，在冰箱中静止沉淀杂蛋 白，吸取上层清液，每升提取液加入10g人造沸石， 搅拌吸附40min，静置倾去上层清液。收集吸附细胞 色素 C的人造沸石，用蒸馏水和氯化钠溶液反复洗涤 ，然后装柱，用 25％硫第酸7页氨/共1溶0页液洗脱，得洗脱液。
生物制药工艺学第13章生化药物制造工艺糖类药物
糖医药品
（Asa糖等）
新一代蛋白质医药
糖链修饰胰岛素、 抗体医药等
新型诊断药
抗病毒药
抗菌药
抗癌药
（抑制癌转移药等）
糖链作为工具使用（使用途径② ）
糖链作为标靶使用（使用途径③ ）
糖链的生产
理论上可以生产任何一种结构的糖链。但是，从成本和 时间角度考虑，合成链长的糖链并不现实。只要确立了 工业合成工艺过程就可以大量生产
【洗涤】 2mol/L NaCl
树脂吸附物 【洗脱】
5mol/L NaCl
1.2mol/L NaCl
3mol/L NaCl
洗脱液 【沉淀】
乙醇
“糖链”——三种使用途径
已经实用化 接近实用化 设想阶段
① 直接使用
透明质酸 蘑菇多糖类提取物
墨角藻聚糖
“Id抗ra凝pa固rin剂ux”等
(法国Sanofi-Aventis 公司临床试验中)
用于各种原因引起的白细胞减少症，乙型肝 炎及急慢性盆腔炎等疾病的辅助治疗
用于白细胞减少症,传染性肝炎,神经衰 弱等症的辅助治疗 肿瘤辅助治疗
广泛应用于各种病毒，细菌性疾病的防治
用于肿瘤患者放化疗脾胃气虚证者
粘多糖的特点
粘多糖：是指含有氨基糖与糖醛酸或它的衍生物的多糖。 粘多糖在结构上的特点：
1. 粘多糖基本上是由特殊的重复双糖单位构成，在此双糖单 位中包括一个 N-乙酰氨基己糖
糖科学
蛋
核
糖
白
酸
类
糖类药物 的分类
单糖
低聚糖
糖的衍生物
多糖
葡萄糖、果糖、 氨基葡萄糖、
维生素C等
蔗糖、麦芽糖、 乳糖、乳果糖
6-磷酸葡萄糖、 1,6-二磷酸葡萄糖
第十三章生物制品PPT课件
O
CH2
HCOH
CH2
O CH2 O
OH
HO
OO
O
HO
O
OH
O
CH2
CH2
HCOH
O H2C OH
O
O HO OH
O H2C O
O H 2C
HO
O HO
O CH2
HCOH
CH2
O
HO
O
CH3 O
OH O
CH2 O OH
OH O
O CH2
HO
OO
CH2 OH
CH2
HCOH
HCOH
CH2
CH2
HO
O
O
OH
*
二、安全性检查
（一）无菌检查 （二）热原检查 家兔法检查热原 （三）细菌内毒素检查：家兔法、鲎试验 （四）异常毒性检查与特异性毒性检查：
观察一定剂量药物的急性毒性反应。 （五）过敏试验：检查异源蛋白 （六）致突变试验 （七）生殖毒性试验
人血白蛋白、乙型肝炎人免疫球蛋白
*
4、重组DNA制品（recombinant DNA products） 利用重组DNA技术，将遗传修饰的编码DNA通
过质粒或病毒载体导入受体细胞、微生物，DNA在 细胞中不断复制、表达，产生蛋白质(药物)。
*
重组DNA制品种类： 1、细胞因子：重组人干扰素、白介素 2、生长因子：重组人表皮生长因子 3、激素：重组人胰岛素 4、酶：重组链激酶 5、疫苗：重组乙型肝炎疫苗（酵母） 6、单克隆抗体：抗人T细胞CD3鼠单抗
*
生物芯片技术是一种将生命科学研究中的许 多分析检测步骤和装置通过并行化和微型化处理 后集成在一个只有几平方厘米大小的载体上的分 析检测系统。