16Hz次声作用对大鼠海马神经干细胞增殖能力的影响

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浅析高频电磁辐射对大鼠血脑屏障的影响及参力胶囊防护作用论文

浅析高频电磁辐射对大鼠血脑屏障的影响及参力胶囊防护作用论文浅析高频电磁辐射对大鼠血脑屏障的影响及参力胶囊防护作用论文电磁辐射作为一种污染的方式越来越引起社会的广泛关注。

其标准界定300 MHz 以上即为高频与微波频段的辐射。

手机、微波炉、电磁炉、电视等家电皆为高频范围。

电磁辐射可引发中枢神经系统认知能力障碍，使海马神经元受损，造成学习、记忆能力下降。

血脑屏障( BBB) 是由基膜、脑毛细血管内皮细胞( BCECs) 和毛细血管周围的神经胶质膜构成的。

其中BCECs 及其之间的紧密连接( TJ) 是构成BBB 的主要结构。

本实验通过对SD 大鼠海马区血脑屏障的观测，探讨抗辐射类的中药制剂参力胶囊的保护作用。

材料与方法1. 研究对象: 鼠龄8 周的健康SD 大鼠80 只，体重220 ～280 g，雄性，由大连动物中心实验室提供。

大鼠随机分为4 组，分别为正常对照组( A 组) ，模型组( B 组) 、参力低浓度组( C 组) 、参力高浓度组( D 组) ，每组20 只。

每组按辐照后取材时间点又分为2 个亚组: 6 小时组和24 小时组，每组各10 只。

2. 方法: 在实验室条件下，适应性喂养7 天，以颗粒型大鼠饲料喂养( 含蛋白质23%、脂肪4. 7%、钠盐0. 24%) ，饮用水为纯净水，室温控制在21 ℃左右，相对湿度40% ～ 55%。

各组按剂量给药，用药10 天。

采用灌胃给药法用药后除A 组外，其余各组均给予高频辐射: 大鼠自由体位，装于塑料制整理箱中，置于辐射源医科达公司Precise 医用直线加速器( 佳木斯大学附属医院核医学科) 定点辐照，照射时间: 200 min，辐射功率: 10 kw/m2。

辐射后观察大鼠行动、对刺激的反应。

3. 检测血脑屏障通透性: 于辐射后6 h 和24 h 时，用10%的水合氯醛将大鼠麻醉，开胸暴露心脏，剪开右心耳，再从左心室插入注射针头，用生理盐水缓慢冲洗大鼠体内的血液，直至冲出清澈液体。

内源性神经干细胞激活增殖的研究进展

内源性神经干细胞激活增殖的研究进展脑血管疾病已经成为人类致死、致残最主要的原因之一，其发病率有逐年上升的趋势，且其发病呈现年轻化的趋势。

近年来大量研究证实内源性神经干细胞（NSCs）在治疗中枢神经系统疾病方面有其独特的优势，本文针对能够刺激NSCs激活的各类文献进行了综述，分析了这一领域目前存在的问题，并就今后发展进行了积极的思考。

标签：NSCs激活综述1 NSCs的激活、增殖正常机体内的神经干细胞存在于特定的位置，处于静息状态，在中枢神经系统受到损伤的情况下，如脑缺血，可以受到刺激而被激活，并迁移到受损的区域发生增殖、分化，但是激活、增殖NSCs的数量有限，分化受到很大的限制，且分化后的神经组织通常会大量的凋亡，限制了修复受损组织的能力。

许多化学、物理等的因素能够促进NSCs的激活。

1.1 细胞因子神经营养因子具有增加神经出芽、突触发生、神经递质传递和促进神经递质释放的作用。

研究表明，在脑缺血坏死后，会有大量的吞噬细胞浸润在梗死及梗死周边区，并分泌细胞因子和趋化因子，这些因子可使脑内多个部位的神经干细胞激活，促使其向损伤区迁移，并在多种因子、基因调控等的调节下在良好适合的微环境中发生增殖、迁移和分化等连续的变化，使受损神经组织得到不同程度的修复。

脑源性神经营养因子（(BDNF）主要分布于海马和皮质，在中枢神经系统发育过程中对神经元的生存、分化、生长和维持神经元的正常的生理功能中起关键性的作用，近来研究证实其还有抗伤害性刺激，促使神经损伤后的再生等作用[1]。

白血病抑制因子[2]是一种能提升NSCs的激活、调控其朝向神经元及少突胶质细胞分化的神经营养因子，其不但促进NSCs的增殖，而且能够显著降低多巴胺能神经元的凋亡，从而使发生分化的神经元继续存活。

许多其它的细胞因子，如粒细胞集落刺激因子，促红细胞生成素等在中枢神经系统疾病的治疗过程中能明显促进大鼠缺血周围脑组织神经细胞的增殖，及向神经元和神经胶质细胞发生分化；显著减少引起的神经细胞凋亡，增加缺血周围脑组织Bcl-2的表达、抑制Bax、Caspase-3的表达，促进神经细胞再生；明显改善大鼠的神经功能症状、减轻脑组织病理改变。

AAV1-Rheb(S16H)在成人海马中的神经保护作用

AAV1-Rheb（S16H）在成人海马中的神经保护作用星形胶质细胞是大脑中最丰富的细胞，在体内稳态维持中起着重要作用。

尽管成人大脑中星形胶质细胞的过度活化可能通过炎症反应参与神经变性，但活化的星形胶质细胞也可以诱导有益作用，例如通过限制组织损伤和神经炎症的屏障功能以及通过产生神经胶质而增加神经元存活，生长和活性。

最近，在AAV1-Rheb（S16H）干预的大鼠海马中，观察到星形胶质细胞形态变化，而促炎性细胞因子水平却没有明显变化，提示Rheb（S16H）转导海马神经元中星形胶质细胞活化可能有助于AAV1-Rheb（S16H）诱导的神经保护作用。

来自韩国庆北国立大学生命科学学院的Sang Ryong Kim团队认为，通过施用AAV1-Rheb（S16H）等方法进行海马神经元病毒转导，可以增强潜在的神经保护系统的构建，这在阿尔茨海默病大鼠模型的海马中通过脑源性神经营养因子增加诱导的神经元和星形胶质细胞之间的相互作用得到了证实。

此外，AAV1-Rheb（S16H）给药后神经保护系统的增强是通过海马体的自分泌和旁分泌信号激活来促进神经保护。

Rheb的诱导可能有助于减少淀粉样蛋白β肽的产生。

尽管需要进行进一步的研究来确定AAV-Rheb（S16H）转导方法与神经退行性疾病的临床相关性，但AAV1-Rheb（S16H）转导方法可能是保护受损脑海马神经元的潜在策略，其作用可能与阿尔茨海默病患者有关。

文章在《中国神经再生研究（英文版）》杂志2020年8月8 期发表。

文章来源：Kim SR (2020) Beneficial effects of AAV1-Rheb(S16H) administration in the adult hippocampus. Neural Regen Res 15(8):1479-1480. doi:10.4103/1673-5374.274335。

不同频率经颅磁刺激对正常和脑缺血大鼠海马记忆能力的影响

．
Ｋｅｒｓ：ｙｗｏｄ
ｔａｓｒｎｉｌｍａｎｅｉｔｍｕｌｔｏｎ；ｆｅｅｙ；ｈｐｃｍｐｕｓｃｒｂｒｌｉｃｍｉｒｖｅｒｎｃａａｇｔｃｓｉａｉｒｑｕｎｃｉｐｏａ；ｅｅａｓｈｅａ；ｅｉｗ
是影响大鼠记忆能力的主要作用机制之一。２调制脉冲磁０Ｈｚ
场刺激后１ｈ大鼠记忆保持能力降低（＜Ｏ０）刺激后２，，Ｐ．５，４ｈ
磁场的影响基本消失；０Ｈｚ调制脉冲磁场刺激后ｌｈ和２１４ｈ大鼠记忆保持能力有所增强，实验组与对照组相比无显著性但差异。电镜观察结果显示，低大鼠记忆能力的调制脉冲磁场降
ＬＵＡＮ — ｎ，ＨＵｏｇ．ＤｅａｔｎｆｈｂｌｔｔｏＹｕｍｉＺｈｎｐｒｍｅｔｏＲｅａｉｉｉｎ，ｔｅ］ｔｆｉｉｔｄＨｏｐｔｌｏＫｕｍｉｇＭｅｃｌＵｎｅｓｔａｈｓＡｆｌｅｓｉａｆｎｎｄｉａｖｒｉｙ．Ｋｕ — ａｎ
ｅｆｃｓｏｆｅｅｒｑｕｅｙｔａｃａｎａｌｍａｎｅｉｔｍｕａｉｒｆｅｅｎｅｏｙａｌｔｓｏｉｔｄｗｉｈｈｉｏｐａｕｎｒｔｆｅｔｆｄｉｆｒｎｔｆｅｎｃｒｎｓｒｉｇｔｃｓｉｌｔｏｎａｅｄｉｆｒｎｔｏｍｍｒｂｉｉｙａｓｃａｅｔｐｐｏｔｍｓｉａｓ，ｗｈｉｈｓｅｓｔａａｎｇｉａｔｙｒｔｃｅｍｏｂｅｄｍｇｉｎｈｅｌｈａｓ，ｂｕｔｐｒｔｃｉｎｒｔｉｈｃｒｂａｓｈｅｉｏｅｔｖｅｉａｓｗｔｅｅｒｌｉｃｍａ

大鼠海马神经细胞原代培养技术的优化_张金波

大鼠海马神经细胞原代培养技术的优化张金波,王淑秋,朱金玲,罗佳滨,张淑红,金岳雷(佳木斯大学基础医学院,黑龙江佳木斯154007)摘要:目的:建立海马神经细胞原代培养技术。

方法:取新生1～3d 的W istar 大鼠,开颅,迅速分离出海马组织在H ank s 中剪碎,加入0.125%胰蛋白酶2mL 消化,胎牛血清终止消化,细胞计数后种植于多聚赖氨酸包被的6孔培养板中。

结果:神经细胞存活率高,纯度达90%以上,神经细胞生长良好。

结论:用此方法能成功获取大鼠海马神经细胞。

关键词:海马神经细胞;原代培养;胰蛋白酶中图分类号:Q 421;R 388　文献标识码:A 文章编号:1008-0104(2009)04-0020-02 海马锥体神经元是海马区的主要成分,主要功能是参与近期记忆、情绪及内脏功能调节,是老年性痴呆、癫痫等疾病的主要病灶之一[1]。

为了能在细胞水平和分子水平深入研究发育中海马神经细胞的生化、代谢、生理、药理及形态,建立海马神经细胞原代分散培养技术,越来越引起基础医学和临床医学的重视。

1　材料与方法1.1　动物与试剂实验动物:新生1～3d 的W istar 大鼠,由佳木斯大学实验动物中心提供。

主要试剂:N euralbasal 培养基、B 27培养基添加剂、青链霉素(Gibco 公司产品),胰蛋白酶、胎牛血清、多聚赖氨酸(Sigm a 公司产品),阿糖胞苷(上海华联制药有限公司)。

1.2　方法1.2.1　培养板的处理在取海马前一天,用35mm 孔径的6孔培养板,每个孔中加入0.1g L 的聚L -赖氨酸2mL ,静止30m in 除去溶液,用三蒸水冲洗3遍,放入二氧化碳培养箱内过夜待用。

1.2.2　培养方法取新生1～3d 的W istar 大鼠,用95%乙醇消毒,开颅,剥离脑膜,迅速分离出海马组织在H ank s 液中剪碎约1mm 3,然后离心500r m in ,5m in ,去掉H ank s 液,加入0.125%胰蛋白酶2mL ,消化约20m in (37℃、5%CO 2条件下),中间轻轻振摇2～3次,尽量去除胰酶,加入10%胎牛血清终止消化,离心500r m in ,5m in ,去上清,加入无血清培养基,用火焰刨光的玻璃吸管轻轻吹打数次,用200目的细胞筛过滤后,取0.1mL 按台盼蓝拒染法进行活细胞计数,制成5×105 mL 密度的细胞悬液,种植于多聚赖氨酸包被的6孔培养板中,每孔加2mL ,24h 后全量换无血清培养基。

血管内皮生长因子165对神经干细胞生长及分化的影响

【Ａｂｓｔｒａｃｔ】ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｏｆｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ（ＶＥＧＦ一１６５）
中华脑科疾病与康复杂志（电子版）２０１３年６月第３卷第３期
ＣｈｉｎＪＢｒａｉｎＤｉｓＲｅｈａｂｉｌ（ＥｌｅｃｔｒｏｎｉｃＥｄｉｔｉｏｎ），Ｊｕｎｅ０１２３，Ｖｏ１．３，Ｎｏ．３
ＳＯＮＧＬａｉ－ｊｕｎ，ＧＵＯＸｉｎ — ｂｉｎ．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ，ＴｈｅＦｉｒｓｔＡｆｉｆｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｆｏＺｈｅｎｇｚｈｏｕ
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈｅｎｇｚｏｕｈ４５０００３，Ｃｈｉｎａ
Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＳＯＮＧＬａｉ－ｊｕｎ，Ｅｍａｉｌ：ｈｅｒｏｄｘ２＠１６３．ｃｏｎｒ
ｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｒａｔｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓｎｅｕｒａｌｓｔｅｍｃｅｉｌｓ（ＮＳＣ）．Ｍｅ￣ｏｄｓＥｘｔｒａｃｔｅｄＮＳＣ

长期噪声暴露对大鼠海马CRF系统的影响

ｓｙｓｔｅｍｉｎｔｈｅｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓｏｆｒａｔｓ．ＭｅｔｈｏｄｓＳｉｘｔｙ — ｔｗｏｍａｌｅＷｉｓｔａｒｒａｔｓｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙａｎｄｅｑｕｌｌａｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｃｏｎｔｒｏｌｎｄａｎｏｉｓｅ
高于对照组，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），到１４ｄ时恢复到正常水平；暴露组ＣＲＦＲ２ｍＲＮＡ及蛋白表达水平在恢复０ｄ无明显变化，恢复３、７ｄ时明显升高，差异有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０５），到１４ｄ时其蛋白表达恢复到正常水平，ｍＲＮＡ水平
ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＣｈｒｏｎｉｃＮｏｉｓｅＥｘｐｏｓｕｒｅｏｎＣＲＦＳｙｓｔｅｍｉｎＲａｔＨｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ
ＧＡＩＺｈｉｈｕｉ，ＬＩＫａｎｇ，ＳＨＥＸｉａｏｊｕｎ，ＷＡＮＧＲｕｉ，ＣＵＩＢｏ
ｅｘｐｏｓｕｒｅｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅｅｘｐｏｓｕｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗｅｒｅ９５ｄＢｗｈｉｔｅｎｏｉｓｅ（４ｈ／ｄｘ３０ｄ）．Ａｔ０，３，７ｎｄａｌ４ｄａｆｔｅｒｔｈｅ３０ｄｅｘｐｏｓｕｒｅ，ｔｈｅｒａｔｓｉｎ

8Hz和16Hz次声多次作用后TNF—α及IL—8的变化

ｉｆｓｕｄｎｒｏｎ｛② Ａｅｎｒｓｕｄａｔｎａｉｔｒｉｆａｏｎｃｉ．Ｔ．ｎＬ８ｏｏＮＦｑａｄＩ一ｆ
ｌｎｏｇｎｔｅｒｓｎｈｎｅｎａｔｍｅｃｕｓｅｅ－ｕｇｈｍｏｅａｅｒｐｅｅｔｃａｇｓｉｉ — ｏｒｅｄｐｎｄｎｎｅ，ｗｈｃｙｈｅａｅｏｔｅｐｉｒｆｅｔｎｅｔｍａｎｒｉｈｍａｅｒｌｔｄｔｈｒｍａｙａｆｃｉｏ
研制的次声压力仓内致伤。次声作用组蹦８Ｈ，ｚ声压分别为１０３Ｂ和１Ｈｚ２．１０ｄ６声压为９．３Ｂ的强度，次作用２ｏ１０ｄ每ｈ连续２次．结果８ｌ２．Ｂ次声作用３，４，１－Ｉ０１Ｏｚ１３ｄ．７１次
ｏｔａｓｎｈｅｒｔ
０引言
次声是频率低于２Ｉ０Ｆｚ的声波，物理学特性是其波长较长，能够绕射，大气中衰减程度低，在在空气中传播较远．次声的听觉阈较可听音要高，ｌＨｚ时，听阈高达１０ｄ＿４ＢＩ ’ ．故一般认为次声是听不见的．随着工业、通业的发展，交次声作为环境污染因素正引起人们的关注．同时次声在军事上的应用也令人瞩目．自２０世纪６０年代起，少数国家就进行了次声及其生物效应的研究．我国对次声生物学效应的研究报道尚少．次声生物学效应的研究涉及职业卫生、环

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唐晨，李玲，袁华，陈景藻，张美霞
［摘要］目的研究１６Ｈｚ次声作用对大鼠海马神经干细胞增殖能力的影响。方法将７２只ＳＤ大鼠随机分为１６Ｈｚ，１３０ｄＢ
次声作用组（ｎ一２４）、１６Ｈｚ，９０ｄＢ次声作用组（ｎ一２４）以及对照组（ｎ一２４）。次声作用组大鼠暴露于１６Ｈｚ，１３０ｄＢ和９ＯｄＢ的次
ｇｒｏｕｐ（ｎ一２４）ａｎｄｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（ｎ一２４）．Ｒａｔｓｏｆｔｈｅｉｎｆｒａｓｏｕｎｄｅｘｐｏｓｕｒｅｇｒｏｕｐｓｗｅｒｅｅｘｐｏｓｅｄｔｏ１６Ｈｚ９０ｄＢ／１３０ｄＢｉｎｆｒａｓｏｕｎｄｂａｒｏｃｈａｍｂｅｒｓｙｓｔｅｍ，２ｈ／ｄｆｏｒ１ｄ，７ｄ，１４ｄ，ｏｒ２１ｄ．Ｔｈｅｉｒｂｒａｉｎｓｗｅｒｅｒｅｍｏｖｅｄａｎｄａｎｔｉ～ｎｅｓｔｉｎｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙｗａｓｕｓｅｄ
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中国康复理论与实践２００７年ｌ１月第ｌ３卷第ｌｌ期Ｃｈｉ』
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・１Ｏ２９・
基础研究
１６Ｈｚ次声作用对大鼠海马神经干细胞增殖能力的影响
声压力仓系统，２ｈ／ｄ，分别作用１ｄ、７ｄ、１４ｄ、２１ｄ。取脑进行巢蛋白（ｎｅｓｔｉｎ）免疫组化染色，观察大鼠海马ｎｅｓｔｉｎ标记的神经干细胞的变化情况。结果１３０ｄＢ组从作用ｉｄ开始，大鼠海马中ｎｅｓｔｉｎ阳性细胞数量开始增加；随着作用次数增加而增多，于１４ｄ达到高峰，２１ｄ下降，但仍然高于对照组。９ＯｄＢ组大鼠各时间点ｎｅｓｔｉｎ表达均比１３０ｄＢ组弱（Ｐ＜Ｏ．０５）。结论１６Ｈｚ次声作用所致的脑损伤能刺激大鼠海马神经干细胞增殖，从而参与受损神经的修复过程。
Ｓｈａａｎｘｉ，Ｃｈｉｎａ
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆ１６Ｈｚｉｎｆｒａｓｏｕｎｄｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｎｅｕｒａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓｉｎｒａｔｓ＂ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ．
ＮＨｕａ，ｅｔａ１．
ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈｙｓｉｏｔｈｅｒａｐｙａｎｄＲｅｈａｂｉｌｉｔａｔｉｏｎ，ＸｉｊｉｎｇＨｏｓｐｉｔａｌ，ｔｈｅＦｏｕｒｔｈＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉａｎ７１００３２，
ｔＯｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｎｅｕｒａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓｉｎｒａｔｓ＂ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｎｅｓｔｉｎｉｎｒａｔｓ＂ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓｉｎｃｒｅａｓｅｄａｆｔｅｒｅｘｐｏｓｕｒｅｆｏｒｏｎｃｅａｎｄｉｎｃｒｅａｓｅｄｗｉｔｈｔｈｅｅｘｐｏｓｕｒｅｔｉｍｅ．Ｉｔｒｅａｃｈｅｄｉｔｓｐｅａｋｏｎｔｈｅ１４ｔｈｄａｙ，ｄｅｃｒｅａｓｅｄｏｎｔｈｅ２１ｓｔｄａｙｂｕｔｒｅｍａｉｎｅｄｈｉｇｈｅｒ
Ｍｅｔｈｏｄｓ７２ＳＤｒａｔｓｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｉｚｅｄｉｎｔｏ１６Ｈｚ一１３０ｄＢｉｎｆｒａｓｏｕｎｄｅｘｐｏｓｕｒｅｇｒｏｕｐ（ｎ一２４），１６Ｈｚ～９０ｄＢｉｎｆｒａｓｏｕｎｄｅｘｐｏｓｕｒｅ
［关键词］次声；海马；神经干细胞；巢蛋白（ｎｅｓｔｉｎ）；增殖
Ｅｆｆｅｃｔｏｆ１６ＨｚＩｎｆｒａｓｏｕｎｄｏｎＰｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＮｅｕｒａｌＳｔｅｍＣｅｌｌｓｉｎＲａｔｓ＂Ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ１、ＡＮＧＣｈｅｎ，ＬＬｉｎｇ，