上调miRNA-145表达对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡及放射敏感性的影响
MIR-145通过靶向EGFR和NUDT1抑制人肺腺癌细胞增殖
MIR-145通过靶向EGFR和NUDT1抑制人肺腺癌细胞增殖参考文献:William c.s. cho,* Andrew s.c. chow and Joseph s.K. Au.MiR-145 inhibits cell proliferation of human lung adenocarcinoma by targeting EGFR and NUDT1.RNA Biology 8:1, January/February 2011, 125-131.摘要：小RNA（miRNA）是新兴的具有重要调节功能的RNA,它们的出现在肿瘤发生中也发挥着关键作用。
MIR-145在几种人类恶性肿瘤中表达下调，包括肺癌，但其分子机制仍不清楚。
我们曾报道过，hsa-miR-145能够抑制癌细胞的生长，对于表皮生长因子受体（EGFR）突变的肺腺癌患者。
这项研究表明，hsa-miR-145针对肺腺癌细胞EGFR和二磷酸核苷相连部分的X- 1（NUDT1或MTh1）。
EGFR和NUDT1的mRNA表达对人肺腺癌细胞的miR-145转染后显著下调。
我们的研究结果证实了miR-145对EGFR和NUDT1表达无论是在mRNA还是蛋白水平都是负调控。
进一步分析发现，miR-145在这三个时间点（24，48和72小时），具有抑制转染肺腺癌细胞的细胞增殖能力。
miR-145的上调似乎是肺腺癌细胞增殖的重要基因调控机制，它与EGFR和NUDT1的下调密切相关。
有趣的是，我们的研究显示，改变肺癌细胞的增殖不伴随细胞凋亡的变化。
我们的发现提供了新的对复杂的调节通路的深刻理解，包含miR-145，EGFR，NUDT1和其他对细胞增殖而不是细胞凋亡的未知因素，。
了解miR-145的作用靶点及其调控通路可能产生对肺腺癌新的治疗策略。
方法:1,细胞转染miR-145或miRNA阴性对照miR-145表达载体（miRNASelect PEP-的miR-145）和miRNA的阴性对照载体（miRNASelect PEP-MIR空控制）购自Cell Biolabs公司（圣地亚哥，CA获得美国）。
miR-145通过靶向抑制SMAD3的表达抑制非小细胞肺癌细胞侵袭能力
•26何高燕，等miR-55通过靶向抑制SMAD3的表达抑制非小细胞肺癌细胞侵袭能力suppresson]J].Nut/tiox,2716,26(65):33-35.[16]LEE SUN EN,LIM JOO WEON,KIM HYEYOUNG.Achvatccproteis-1mediates docosabexaepoic acid-induced apoptosis oIhumao gastric ccoccs cells-J] ■Ann NY Acab Sci,O OC^,121：23-169.[26]ZHANG H,XU P,JIANG Y,et aU Gexomic,transc/ptomie,andepigexomic features diRerextiate gexes that are re/vvot Io muscular polyyasaturated fat/acibs is the commoo carp[J].Froot Gex-et,2616,16:22-228,[21]GIROS ANNA,GRZYBOWSKI MIKE,SOHN VANESSA R.Reg-ec Prev Res,2099,2(8)：732-742.[22]KATAN T,CABALLERO-SOLARES A,TAYLOR RG,et aUEffect oI plant-based diets with varyino ratios oI36to<n3fattyacibs ox growth pebormadce,tissue compositiox,Jatty acid bdsyy-thesis and lipib-related gexe expressiox is Atlantic salmoo(Sal-mo sa/r t[J]•Comp Biochem Physiol Pa/D Gexomicr Pre-teomicr,2616,2(39)：299-394.[23]DUAN YH,LI FN,LI LL,et aU Regulatiox oI physio/gdal func-tiox by proportiop oI o-6/2-3polyyasaturated fatty acibs-J].Natural Product Research and Developmext,2214,2：926-631.ulatiox oI colorectal cancer cell apoptosis by the n-3polyyasatu-(编校：张西敏) rated fatty acibs doccnaPexaeqoic and eicosapextaedoic t J].Cano-miR-55通过靶向抑制SMAD5的表达抑制非小细胞肺癌细胞侵袭能力何高燕，罗晓斌，赵勇，罗丽miR-103inhibits the invasion of non-small cell lung cancer cells by targeting inhibition of SMAD3expressiovHE Gaoyon,LUO Xiaobis,ZHAO Yony,LUO LlDepartment of'Respiratory and Critical Medicine,Suining City Central Hospital,Sichuan Suining626000,China.【Abstract】Objective:To investigate the effect of miR-55Braetiny the1011/1/0of SMAD3expression on theinvvsive abi/ty of non-small cell luny cancec cefs.Methods：The expression levels of miR-55and SMAD3in30oon-small cell luny caocer tissues and aPjacent tissues were deBcted by qRT-PCR and their000/1/00were ana-Uzed.The target geoe predichon site was used to predict the potenUal target geoe SMAD3of miR-145,which wasverified by the dual luciferase mpo/er gene assay.The tmnsfected cells of miR-55mimics,miR-55inhibitoc,siRNA SMAD3and related controls were Bansfected into oon-small cell luny cahcec A549cells by cell tmnsfechonexperiments j Trauswell assay was used to detect the iovvsive ability of A549cefs after tmnsfechon.The effect ofmiR-55on the expression of SMAD3protein was up-!011//0or dowo-1011//0in A549cells by Western b/t.Results:The results of qRT-PCR showed that miR-55was dowo-regumBq and SMAD3was highlo expressed inoon-small cell luuy cancec tissues,and the expression levels of both were hegakvelo00^//0.Taraet gene yredic-tion and vvhbation experiments showed that miR-55can specificaho bind to the3'-UTR of SMAD3,which was ataraet gene of miR-55.Western b/t analysis showed that tmnsfechon of miR-55mimics signi/cantlo decreasedthe expression of SMAD3proteih(P<0.001):and tmnsfechon of miR-55inhib/oc signi/cantlo iocmased the ep-pression of SMAD3protein(P<0.01).Tmoswef in vitro iovvsion assay showed that the transfected miR-145mimicgropp signi/cantlo reduced the iovvsive abi/ty of A549cells compared with the control groxa(P<0.001):and thetransfected miR-55inhibitor groxa signi/cantlo iocmased the invvsive abi/ty of A549cells(P<0.05).Comparedwith the control gropp,the iovvsive ability of khochdowh of SMAD3expressiny cells was weabened(P<0.001):The iovvsive abi/ty of co-transfected siRNA SMAD3and miR-55mimics A549cells was weaker than that ofkhochdowo of SMAD3alone(P<0.05).There was co significaot diderence in the iovvsive abi/ty of co-transfected【收稿日期】2629-93-92【基金项目】四川省卫生和计划生育委员会资助项目(编号：17pj937,5PJ499)【作者单位】遂宁市中心医院呼吸与危重症医学科，四川遂宁626009【作者简介】何高燕(192-),女，四川自贡人，硕士，医师，主要从事肺癌、肺纤维化及慢阻肺的诊疗工作。
miR-145过表达增强非小细胞肺癌细胞的放疗敏感性
中 国老 年 学 杂 志 ２０１８年 ｌ０月 第 ３８卷
ｍｉＲ一１４５过表 达 增 强 非小 细 胞 肺 癌 细胞 的放 疗 敏感 性
杨 峥 房 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ娜 饶 石磊 （南 阳市 中心 医院肿瘤 放疗 科 ，河 南 南 阳 ４７３００９）
［摘 要］ 目的 探讨 ｍｉＲ－１４５过表达 对非 小细胞 肺癌细 胞放疗 敏感性 的影 响。方法 ＲＴ—ＰＣＲ检测非 小细 胞肺 癌细胞 株 Ａ５４９、Ｃａｌｕ－３、Ｉ－Ｉ４６０、ＳＰＣ－Ａ－１及支气管黏膜上皮细胞 １６ＨＢＥ中 ｍｉＲ·１４５的表达水平 。细胞转染 ｍｉＲ．１４５模 拟物（ｍｉＲ一１４５ ｍｉｍｉｃｓ）、 阴性对 照（ｍｉｍｉｃｓ ｃｏｎｔｒｏ１），ＲＴ－ＰＣＲ检测转染效果 。噻唑蓝 （ＭＴＴ）、流式细胞术分别检测 ｍｉＲ一１４５过表达 、放疗 和 ｍｉＲ－１４５过表达联 合放疗后 细胞 的增殖 、凋 亡能力 ，细胞克 隆实 验检测放疗敏感性 。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测细胞 中活化 的含半胱氨 酸的天冬 氨酸蛋 白水解 酶 ３（酶切 Ｃａｓｐａｓｅ一３）、Ｗｎｔ信号通 路 下游靶 基 因 （ｃ—ｍｙｃ）、ｐ一连 环蛋 白 （Ｂ－ｃａｔｅｎｉｎ）表 达水 平 。结果 非 小 细胞 肺癌 细胞 株 Ａ５４９、 Ｃａｌｕ一３、Ｈ４６０，ＳＰＣ—Ａ－１中 ｍｉＲ．１４５的表达水平均 明显低于支气管黏膜上皮 细胞 １６ＨＢＥ（Ｐ＜０．０５），且 Ｃａｌｕ－３细 胞中 ｍｉＲ－１４５水平 最 低 ，后续选 用 Ｃａｌｕ－３细胞为 研究对 象。ｍｉＲ一１４５ ｍｉｍｉｃｓ有 效促进 Ｃａｌｕ－３细胞 中 ｍｉＲ－１４５的表 达 ，而 ｍｉｍｉｃｓ ｃｏｎｔｒｏｌ没 有明显 作用 。 ｍｉＲ一１４５过表 达或者放疗均能够抑制 Ｃａｌｕ－３细胞增殖 ，促进 Ｃａｌｕ－３细胞凋亡 ，促进 细胞 中酶切 Ｃａｓｐａｓｅ－３的表达 ，抑制细胞 中 ｃ—ｍｙｃ、 Ｂ－ｃａｔｅｎｉｎ的表达 ，且 ｍｉＲ一１４５过表达联合放疗后 细胞存 活率最低 ，凋亡率 最高 ，酶切 Ｃａｓｐａｓｅ－３表达 水平也 最高 ，ｃ－ｍｙｃ、ｐ·ｃａｔｅｎｉｎ表 达水平最低 。ｍｉＲ一１４５能够 增加细胞放疗敏感性 ，增敏 比为 １．３６３。结论 ｍｉＲ一１４５过表 达能够 抑制 非小细 胞肺癌 细胞增 殖 ，促进 非小细胞肺癌 细胞凋亡 ，增加 非小细胞肺癌细胞放疗敏感性 ，作用机制可 能与 Ｗｎｔ信号通路有关 。
miR-145对HepG2细胞中肿瘤干细胞增殖的影响
抑制 Ｈ ｅ ｐ Ｇ ２细胞 生 长；转 染后 ４ ８ ｈ 模 拟 物转 染 组过 表达 的 ｍ ｉ Ｒ 一 １ ４ ５ 可 明显 降低 Ｏ Ｃ Ｔ ４蛋 白 水平 及 干细 胞标 志物 Ｃ Ｄ ９ ０ ｍＲ Ｎ Ａ 的 表达 。结
论 以Ｌ ｉ ｐ ｏ ｆ ｅ ｃ ｔ ａ ｍｉ ｎ ２ ０ ０ ０为转 染试剂 ，使 用 中剂量 的 ｓ ｉ Ｒ Ｎ Ａｏ ｌ ｉ ｇ ｏ 转染 Ｈ ｅ ｐ Ｇ ２细胞 效果优 于低 、 高剂量 ， 同时明显优 于转 染 ｓ ｈ Ｒ ＮＡ者 ；过
表达 ｍｉ Ｒ一 １ ４ ５可抑 制 Ｈｅ ｐ Ｇ２细 胞株 增殖 ；ｍｉ Ｒ 一 １ ４ ５可 能通 过 下调 ＯＣＴ ４基 因表达 抑制 Ｈｅ ｐ Ｇ２细 胞株 中肿 瘤干 细胞 的增 殖 ，是 一 种潜 在 的
Ｍｉ ｃ ｒ ｏ Ｒ Ｎ Ａ ｓ（ ｍｉ Ｒ Ｎ Ａ ｓ ）是生 物进化上 高度保 守的一类 非编码小
①实验分 组：１ 、ｈ ｓ ａ — ｍ ｉ Ｒ 一 １ ４ ５ ｍｉ ｍ ｉ ｃ ｓ 组２ 、Ｂ ｌ ａ ｎ ｋ 组３ 、Ｍｏ ｃ ｋ 组４ 、 Ｎ Ｃ 组 。②引物设计 ：参考Ｇ ｅ ｎ Ｂ ａ ｎ ｋ ￣ 因序列进行引物设计 ，并证 实设
计碱基序列与 目的基 因相符 。③逆转录反应体系 （ 表１ ）。
表１逆 转 录反应体 系表
பைடு நூலகம்
Ｒ Ｎ Ａ，研究表 明其参与 细胞活动的各方面 ，包括分化 、生长、代谢 、
增 殖 、凋亡 、肿 瘤生成 等 Ｊ 。ｍ ｉ Ｒ ＮＡ 主 要参 与基 因的转录 后调 控 ， 通 过 与靶基 因的ｍ Ｒ Ｎ Ａ完全或 者不 完全 的互补 配对 而起 到促进 目标 ｍＲ Ｎ Ａ降解或者抑 制蛋白翻译 的作 用 】 。研究显示ｍｉ Ｒ Ｎ Ａ与肝癌的转 移 、复发及预后关系密切 。胡臻等 研究证实ｍｉ Ｒ － １ ４ ５ 在肝癌Ｈ ｅ ｐ Ｇ ２ 细胞系 中的表达水平低于正 常肝 组织。张帅等＿ ６ 研究 发现ｍｉ Ｒ ． １ ４ ５ 通过
miRNA-145调控靶基因c-Myc抑制胃癌增殖、侵袭
miRNA-145调控靶基因c-Myc抑制胃癌增殖、侵袭彭伟辉;黄江生;段伦喜;张磊屹;左仲坤;唐腾龙【摘要】目的探索microRNA145(miR-145)对胃癌细胞增殖活性的影响,及与其靶基因c-Myc的调控关系.方法选取人胃癌细胞株SGC-7901作为研究对象,并向细胞株内转染miR-145模拟物和miR-145阴性对照物,荧光显微镜观察、Q-PCR 检测转染后细胞株miR-145的变化,并通过细胞软琼脂克隆增殖实验和MTT实验检测转染后SGC-7901细胞株的增殖能力、Transwell侵袭小室检测细胞侵袭能力.Western blot法检测转染后SGC-7901细胞株中c-Myc蛋白的表达情况.结果转染后,miR-145模拟物组中miR-145的表达明显高于miR-145阴性对照和空白组,转染miR-145模拟物后SGC-7901细胞增殖能力显著降低(P＜0.05),c-Myc蛋白表达也明显较低(P＜0.05).结论 miR-145能通过抑制靶基因c-Myc的表达,抑制胃癌细胞的增殖与侵袭能力.总之,miR-145可能在胃癌中发挥抑癌基因的作用,是胃癌潜在的早期诊断指标和治疗靶点.%Objective To investigate the effect of miR-145 on proliferation of gastric cancer,And its relationship with target gene c-Myc.Methods Human gastric cancer cell line SGC-7901 was selected as study object.miR-145 mimic and miR-145 NC were synthesised and transfected into SGC-7901 cells.Q-PCR was used to detect the relative expression levels of miR-145.The effects of miR-145 on proliferation and invasion were detected by colony formation and MTT assay and Transwell invasion chambers.The expression of c-Myc were detected by Western blot.Results miR-145 were successfully transfected into SGC-7901 cells.The number of colony-forming units was obviously lower than the miR-145 NC group and Normal group (P ＜ 0.05).The expression of c-Myc protein inmiR145 mimic group were significantly lower than miR-145 NC group and Normal group (P ＜ 0.05).Conclusion Therefore,we concluded that miRNA-145 can inhibit cell proliferation and invasion,and the partial mechanism may relate to the inhibition of the expression of c-Myc protein.Inbrief,miRNA-145 may play a role of cancer suppressor gene and it may become a new early diagnosis mark and therapy target in gastric cancer.【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2018(047)005【总页数】5页(P60-64)【关键词】胃癌;miR-145;c-Myc;增殖【作者】彭伟辉;黄江生;段伦喜;张磊屹;左仲坤;唐腾龙【作者单位】410001 长沙,中南大学湘雅二医院微创外科;410001 长沙,中南大学湘雅二医院微创外科;410001 长沙,中南大学湘雅二医院微创外科;410001 长沙,中南大学湘雅二医院微创外科;410001 长沙,中南大学湘雅二医院微创外科;410001 长沙,中南大学湘雅二医院微创外科【正文语种】中文【中图分类】R4胃癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一，在我国胃癌发生率和病死率排名第2，其发生率一直呈上升趋势。
miR145通过靶向AP4对非小细胞肺癌A549细胞迁移侵袭的影响
doi:10.3971/j.issn.1000-8578.2019.18.1160miR-145通过靶向AP4对非小细胞肺癌A549细胞迁移侵袭的影响赵天增，杨金华，刘向前，徐萌博miR-145 Attenuates Migration and Invasion of Non-small Cell Lung Cancer A549 Cells by Targeting AP4ZHAO Tianzeng, YANG Jinhua, LIU Xiangqian, XU MengboDepartment of General Thoracic Surgery, The First Affiliated Hospital of Nanyang Medical College, Nanyang 473000, ChinaAbstract: Objective To investigate the effect of miR-145 on the migration and invasion of non-small cell lung cancer (NSCLC) cells and possible mechanism. Methods The expression of miR-145 and activating enhancer binding protein 4 (AP4) mRNA in NSCLC tissues were detected by qRT-PCR. After the transfection with miR-145 mimic or AP4 siRNA, the migration and invasion of A549 cells were examined by wound healing and Transwell assay, respectively; The mRNA and protein expressions of AP4 were detected by qRT-PCR and Western blot, respectively. The relationship between AP4 mRNA and miR-145 was detected by double luciferase reporter gene method. Results Compared with adjacent normal tissues, the level of miR-145 was significantly decreased in NSCLC tissues (P <0.05), however, the mRNA and protein levels of AP4 were significantly increased (P <0.05). Compared with control group, the level of miR-145 was significantly increased (P <0.05), the mRNA and protein levels of AP4 were significantly decreased (P <0.05), and cells migration and invasion were significantly decreased (P <0.05) in A549 cells after the transfection with miR-145 mimic. Moreover, AP4 was a direct target of miR-145. After the transfection with AP4 siRNA, the migration and invasion of A549 cells were significantly decreased (P <0.05). Conclusion miR-145 upregulation could efficiently attenuate the migration and invasion of A549 cells via inhibiting target gene AP4 expression.Key words: Lung cancer; miR-145; Migration; Invasion; AP4摘 要：目的 探讨miR-145对非小细胞肺癌迁移与侵袭能力的影响及其可能的作用机制。
miR-145在非小细胞肺癌中的表达
ｗａｓ ０．８７５。ａｎｄ ｔｈｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ｗｅｒｅ ８８．５％ ａｎｄ ８４．８％ ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ ｌＯＷ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｍｉＲ 一１４５ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ ｔｉｓｓｕｅｓ ａｎｄ ｓｅｒｕ ｍ ｆｒｏｍ ｎｏｎ —ｓｍａｌｌ ｃｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｎｏｎｉｎｖａｓｉｖｅ ｂｉｏｍａｒｋｅｒ ｆｏｒ ｄｉ— ａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｎｏｎ — ｓｍ ａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ．
Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＴｈｏｒａｃｉｃ Ｓｕｒｇｅｒｙ，３２０１ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈａａｎｘｉ Ｈａｎｚｈｏｎｇ ７２３０００，Ｃｈｉｎａ； Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＴｈｏｒａｃｉｃ Ｓｕｒｇｅｒｙ，Ｔｈｅ ＳｅｃｏｎｄＡｆｆｉｌｉａ— ｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆＸＦａｎ Ｊｉａｏｔｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ．Ｓｈａａｎｘｉ 缸ｎ ７１０００４．Ｃｈｉｎａ．
· ２４２４ ·
ｍｉＲ 一１４５存 非 ／
ｍｉＲ一１４５在 非 小细 胞 肺癌 中的 表达
张 伟 ，刘伟 良 ，王 勇 ，张 潍
Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｍｉＲ——１４５ ｉｎ ｎｏｎ——ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ
Ｚｈａｎｇ Ｗ ｅｉ ，Ｌｉｕ Ｗ ｅｉｌｉａｎｇ ，Ｗ ａｎｇ Ｙｏｎｇ ，Ｚｈａｎｇ Ｗ ｅｉ
肺 癌 目前 是 世 界 范 围 内对 人 类 健 康 威 胁 最 大 的 恶 性 肿 瘤 之 一 ，近 半 个 世 纪 以来 ，我 国 肺 癌 的 发 病 率 和 死 亡 率 明显 增 加 ，大城市 中肺癌 发病 率已 占恶性肿 瘤的首位 … 。肺癌 的 病 理类 型中约 ８０％是非小细 胞肺癌 （ＮＳＣＬＣ），尽管手 术 、放 疗 、化疗等 治疗技术 不断发展 ，但 ＮＳＣＬＣ的总体五 年生存 率 仍 不足 ２０％ｌ２ Ｊ。研究发 现 ｍｉＲＮＡ参 与了细胞分裂 ，增殖及
lncR_FOXD2-AS1_调控miR-145-5p_对非小细胞肺癌细胞生物学特性的影响
lncR FOXD2-AS1调控miR-145-5p对非小细胞肺癌细胞生物学特性的影响王巍1，王志武1，于镓锐1，董量1，曹博2，李剑锋31 唐山市人民医院放化二科，河北唐山063000；2 唐山市人民医院普外科；3 唐山市人民医院胸外科摘要：目的 探讨长链非编码RNA（lncR）FOXD2-AS1调控微小RNA（miR）-145-5p对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化（EMT）等生物学特性的影响。
方法 体外培养人NSCLC细胞系A549、H1299、SK-MES-1及人正常肺支气管上皮细胞系16HBE，应用RT-qPCR检测各细胞系中lncR-FOXD2-AS1和miR-145-5p表达。
选取lncR-FOXD2-AS1相对高表达的SK-MES-1作为敲低实验的研究对象，将SK-MES-1细胞按照转染处理的不同分为NC组（转染si-NC）和si-FOXD2-AS1组（转染si-FOXD2-AS1），转染后，RT-qPCR检测细胞中lncR-FOXD2-AS1、miR-145-5p表达，CCK-8法检测细胞增殖活性，Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力，Western blotting法检测细胞中E-cadherin、N-cadherin、Fibronectin蛋白表达。
双荧光素酶报告基因实验验证lncR-FOXD2-AS1和miR-145-5p的相互关系。
结果 与16HBE细胞相比，lncR-FOXD2-AS1在NSCLC细胞系中高表达（P<0.05），miR-145-5p在NSCLC 细胞系中低表达（P均<0.05）。
与NC组比较，si-FOXD2-AS1组细胞miR-145-5p表达升高（P<0.05），0、24、48 h时OD值降低（P均<0.05），迁移及侵袭穿膜细胞数减少（P均<0.05），E-cadherin蛋白表达升高（P<0.05），N-cadherin、Fibronectin 蛋白表达降低（P均<0.05）。
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Effect of up regulation of miRNA-145 on cell proliferation, apoptosis and radiosensitivity in non-small cell lung cancer
WANG Yafei1 #, SONG Changliang1, ZHANG Zhenjun1, YANG Qiong1, YANG Gengwu1, ZHANG Lei2, TIAN Yunxiao3, SONG Xiaotian4 1Department of Oncology, 3Department of Pathology, Handan Central Hospital, Handan 056000, Hebei, China 2Department of Orthopedics, Orthopedics Hospital of Handan City, Handan 056000, Hebei, China 4Department of Immunology, Basic Medical Sciences of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050017, Hebei, China
邯郸市中心医院 1肿瘤科，3病理科，河北 邯郸 056000 2邯郸市骨科医院骨科，河北 邯郸 056000 4河北医科大学基础医学院免疫学教研室，石家庄 0500170
摘要：目的 探讨上调 miRNA-145 表达对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡及放射敏感性的影响。方法 收集
人正常肺上皮细胞株 BEAS-2B 和非小细胞肺癌细胞株 A549，采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测两种细胞
较，A549 细胞中 miRNA-145 的相对表达量较低，上调其表达能够抑制 A549 细胞增殖，促进细胞凋亡，增强放射
敏感性。
关键词：非小细胞肺癌；miRNA-145；细胞增殖；细胞凋亡；放射敏感性
中图分类号：R734.2
文献标志码：A
doi：10.11877/j.issn.1672-1535.2019.17.10.10
比较，差异无统计学意义（P﹥0.05）；miRNA-145 组细胞转染 24、48、72 h 的光密度（OD）值均低于对照组（P﹤
0.05）；转染 48 h 后，miRNA-145 组细胞的凋亡率高于对照组（P﹤0.05）；2、4、6、8 Gy 剂量的 X 线照射后 miRNA-
145 组细胞的存活分数（SF）均低于对照组，放射增敏比（SER）为 1.491。结论 与正常肺上皮 BEAS-2B 细胞比
对细胞增殖和凋亡的影响。给予不同放射剂量 X 线照射后采用克隆形-145 的相对表达量明显低于正常肺上皮 BEAS-2B 细胞（P﹤0.01）；转染后，miRNA-145 组细
胞中 miRNA-145 的相对表达量高于对照组（P﹤0.05）；转染后，NC 组与对照组细胞中 miRNA-145 的相对表达量
中 miRNA-145 的相对表达量。以 LipofectamineTM2000 转染试剂将 miRNA-145 模拟物和阴性对照质粒转染至
A549 细胞中，分别作为 miRNA-145 组和 NC 组，以只加入转染试剂的 A549 细胞作为对照组，RT-PCR 检测各组细
胞中 miRNA-145 的相对表达量。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法和流式细胞术（FCM）检测上调 miRNA-145 表达
*论
著*
《 癌 症 进 展 》 2019 年 5 月 第 17 卷 第 10 期 ONCOLOGY PROGRESS, May 2019, Vol. 17, No. 10
1152
上调 miRNA-145 表达对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡及放射 敏感性的影响
王亚飞 1 #，宋长亮 1，张振军 1，杨琼 1，杨庚武 1，张磊 2，田云霄 3，宋小天 4
Abstract: Objective To investigate the effect of up regulation of miRNA-145 on cell proliferation, apoptosis and radiosensitivity in non-small cell lung cancer. Method The human lung epithelial cell line BEAS-2B cells and non-small cell lung cancer A549 cells were collected, and the relative expression level of miRNA-145 was detected by quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). A549 cells were transfected with the miRNA-145 mimic (miRNA-145 group) and negative control plasmid (NC group) using LipofectamineTM2000 transfection reagent, only transfection reagents were added to the control group. The relative expression level of miRNA-145 in above three groups were detected by RT-PCR. Proliferation and apoptosis of A549 cells were also evaluated by methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide (MTT) assay and flow cytometry (FCM). The radiosensitivity of the cells was examined by clonogenic assay after various doses of irradiation exposure. Result A549 cells showed significant decreased in miRNA-145 relative expression compared with the normal lung epithelial BEAS-2B cell (P<0.01). After transfection, the relative expression of miRNA-145 in the miRNA-145 group was significant higher than that in the control group (P<0.05), while there was no significant difference between the NC group and the control group (P>0.05). The optical density (OD) values of miRNA145 group at 24, 48, 72 h post transfection were lower than those of control group (P<0.05), and the apoptotic rate of nonsmall cell lung cancer cells at 48 h post transfection was higher than that of control group (P<0.05). The cells were irradiated with 2, 4, 6 or 8 Gy X-ray irradiation and the survival fraction (SF) of cells in the miRNA-145 group was lower than that in the control group, and the enhancement ratio (SER) was 1.491. Conclusion Compared with normal lung epithelial BEAS-2B cells, the relative expression of miRNA-145 is lower in non-small cell lung cancer cells, and up regulation of miRNA-145 can inhibit the proliferation, improve the apoptosis, and enhance the radiosensitivity of A549 cells.