降糖通脉片对人肾小球内皮细胞外基质影响的拆方研究

肾 小球 进 行 原 代 和继 代 培 养 ． 验 中 使 用 传 代 ３代 的 Ｅ 采 实 Ｃ 用 间接 免疫 荧 光 法 对 培 养 的 Ｅ Ｃ进 行 免 疫 病 理 鉴 定 【 收 集 一
小 球 体 外 分 离 、 化 ． 照 陈 氏 等…的方 法 取 去 掉 包 囊 的 单 个 消 参
京 巾 医 药 大 学 中 医药 研 究 院 提 供 ．每 克 浸 膏 相 当 于 原 生 药
６ 。肾组 织 来源 为 孕 ５月 引 产 胎 肾 。Ｖ型 胶 原 酶 、 Ｐ ｇ ＨＥ ＥＳ均 系 Ｓｇ ｉｍａ公 司 产 品 ： ＭＩ６ ０、 胰 蛋 白酶 、胰 岛 素 均 为 美 国 ＲＰ １ ４
摘 要 目 的 ： 讨 降 糖 通 脉 片 中 清 化 瘀 热 与 滋 阴 补 气 两 法 不 同 组 成 部 分 对 人 肾 小 球 内 皮 细 胞 外 基 质 （ ＣＭ） 影 探 Ｅ 的
响 方 法 ： 用 肾小球 体 外 分 离 、 化技 术 ， 行 肾 小球 内皮 细 胞 原 代 培 养 ， 采 消 进 同时 提 取 实验 动 物 含 药血 清 ， 察 降 糖 通 脉 片 观
一
周 后 ．造 模 大 鼠 一 次 性 腹 腔 注 射 Ｓ Ｚ 枸 橼 酸 缓 冲 液 （ Ｔ Ｔ一 ＳＺ
４ ｍ ／ｇ ． 白对 照 组 仅 注 射 等 量 的 枸 橼 酸 缓 冲 液 。４ ｈ后 尾 ０ ｇｋ ） 空 ８
静 脉 采 血 测 定 血 糖 ≥ １ ．ｍｍｏ／ ６７ １ Ｌ．同 时 尿 糖 阳性 者 确 定 为 造
糖 尿 病 肾 病 ｆ Ｎ） 发 生 机 制 目前 尚不 完 全 清 楚 ． 不 论 Ｄ 的 但
其 机制 如 何 ． 患 者 均 出现 细胞 外 基 质 （ ＤＮ ＥＣＭ） 的生 化 和结 构 改 变 ．而 且 目前 大量 的研 究 已证 实 Ｅ ＣＭ 在 肾 小 球 内 蓄 积 是 ＤＮ 肾小 球 硬 化 时 的主 要 特 征 性 变 化 因 此 ． 研 究 采 用 人 肾 本
１１ 实 验 动 物 选 用 ｗｉｔｒ雄 性 大 鼠 ． 重 １ ０ ２ ０ ， ３ ． ｓ ａ 体 ８ ～ ０ ｇ共 Ｏ
只 ． 由南 京 军 区南 京 总 医 院 实 验 动 物 研 究 叶 心 提 供 ． 格 证 均 Ｉ 合
号 ： 动 （ ）７ ０ 苏 质 ９０１
１ 药 品 与 试 剂 降 糖 通 脉 片 （ Ｔ Ｍ） 鬼 箭 羽 、 水 蛭 、 ＿ ２ Ｊｒ 由 ｒ 炙 地
组 单 侧 肾 切 除 大 鼠作 为 空 白对 照 组 （ 组 ） 每组 均 为 ６只 。除 Ｎ ．
（ ｏⅣ ） 的影 响 ．冀 从 细 胞 水 平 探 讨 其 不 同 组 成 部 分 对 Ｅ Ｍ Ｃｌ Ｃ 的作 用 强 度 ． 进 一 步 提 高 Ｄ 的 中 医药 防 治 水 平 提 供 依 据 。 为 Ｎ
骨 皮 、 术 、 地 、 芪 、 参 等 组 成 ， 制 刹 中 间 体 浸 膏 由南 苍 生 黄 玄 其
２３ ’小 Βιβλιοθήκη Ｅ ． ｇ － Ｃ培 养 与 鉴 定
作 ） 分 离血 清 ． 清 于 ５ ℃灭 活 ３ ｍｉ，２ ℃冻 存 备 用 。 ， 血 ６ ０ ｎ～０ 无 菌 剪 取 胎 肾 肾皮 质 ．进 行 肾
模成功 。
２２ 实验 血 清 的 制 备 ． 将 造 模 成 功 的大 鼠 随 机分 为 ４组 ． 分
小球 内皮 细胞 （ Ｃ） 外 培 养 技 术 和 血 清 药 理 学 方 法 ， 察 了 Ｅ 体 观 具有 清化 瘀 热 、滋 阴 补 气 功 效 的 降 糖 通 脉 片 的不 同组 成 部 分
１ 实验 材 料
Ｎ组 、 Ｍ 组 给 予 生 理 盐 水 灌 胃外 ．其 他 各 实验 组 灌 胃剂 量 分 Ｄ 别 按 各 药 在原 方 中 的剂 量 及 比例 折 算 ． 天 灌 胃 ２次 给药 ４ 每 周后 ． 最后 １ 灌 胃 ２ 在 次 ｈ后 ． 侧 颈 总 动 脉插 管 采 血 （ 菌 操 右 无
阴补 气 法相 比 ． 者在 阻抑 肾 小球 硬 化 方 面发 挥 着 更 为 重 要 的 作 用 前
关 键 词 降糖 通 脉 片 肾小 球 内皮 细胞 细胞 外基 质 实验 研 究 中图 分 类 号 Ｒ２ ９５ ８． 文 献标 识 码 Ａ 文章 编 号 １ ７ — ９ Ｘ（ ０ ０ １ — ０ ５ ０ ６ ２ ３ ７ ２ １ ）２ ０ ７ — ２
实 验 研
降糖 通 脉 片 对 人 肾小 球 内皮 细 胞 外 基 质 影 响 的 拆 方 研 究
方 亚 祥 １ 郭 茗 ２ 张 薇 君 ２ 贾 晓 玮 ２ 李 英 英 ２ 郭 立 中 ２
（ ． 州 市第四人 民医院 ， 苏泰 州 ２ ５ ０ ；２南京 中医药大 学 第一 临床 医学 院 ， 苏 南京 ２ ０ ４ ） １泰 江 ２ ３０ ． 江 １ ０ ６
清化 瘀 热 与滋 阴补 气不 同纽 分 对 Ｅ Ｍ 的 影 响 结 果 ： Ｃ 降糖 通 脉 片 中清 化 瘀 热 及 滋 阴补 气 两 法 均具 有押 制 Ｅ Ｍ 成 分 中纤 Ｃ
维连 接 蛋 白 （ Ｎ） 层 粘连 蛋 白 （ Ｎ） Ⅳ 型 胶 原 （ ｏＩ 含 量 的 作 用 ， 清 化瘀 热 法 的 作 用 更 为 明显 。 论 ： Ｆ 、 Ｌ 和 Ｃｌ Ｖ） 但 结 清化 瘀 热 法 与 滋
对 Ｅ ＣＭ 中纤 维 连 接 蛋 白 （ Ｎ） 层 粘 连 蛋 白 （ Ｎ） Ⅳ 型 胶 原 Ｆ 、 Ｌ 及
别 为 糖 尿 病 组 （ Ｍ 组 ）清 化 瘀 热 组 （ Ｑ 组 ． 用 鬼 箭 羽 、 Ｄ 、 即 Ｘ 药 炙 水 蛭 、 骨 皮 、 术 ）滋 阴 补 气 组 （ Ｆ 地 苍 、 即 Ｚ组 。 用 生 地 、 药 玄 参 、 芪 ） 全 方组 （ Ｆ 黄 及 即 Ｆ组 ， 用 降 糖 通 脉 片 原 方 ） 另 设 一 药 ．