实验小鼠眼眶静脉丛采血方法
大、小鼠摘眼球采血标准操作规程
大、小鼠摘眼球采血标准操作规程一、目的本规程规定了实验室大、小鼠摘眼球采血的操作步骤、注意事项和安全要求，以确保实验结果的准确性和动物福利的考虑。
二、适用范围本规程适用于实验室进行大、小鼠摘眼球采血的操作。
三、操作步骤1.准备工具和材料：眼科剪、眼科镊、止血棉球、生理盐水或肝素抗凝剂。
2.操作前准备：确保实验动物处于深度麻醉状态，以减少动物的痛苦和应激。
3.保定动物：将动物固定在实验台上，保持头部和身体稳定。
4.剪毛消毒：用剪刀轻轻剪去眼睑周围的毛发，然后使用消毒液对眼部进行消毒。
5.暴露眼球：用眼科镊轻轻分开眼睑，暴露出眼球。
6.采血：用眼科剪在眼球根部剪断血管，然后用止血棉球压迫止血。
如果需要采集较多血液，可以在剪断血管后轻轻挤出血液。
7.抗凝处理：将采集的血液样本放入含有肝素抗凝剂的试管中，轻轻摇匀，防止血液凝固。
8.清理动物：在采血完成后，用生理盐水清洁眼部，避免感染。
9.观察动物：密切观察动物的恢复情况，确保无并发症发生。
四、注意事项1.操作过程中要轻柔、迅速，减少动物的痛苦和应激。
2.采血时要注意血管的选择和剪断，避免破坏其他组织。
3.使用抗凝剂时要注意与血液的比例，防止影响实验结果。
4.在操作过程中要保持实验台和工具的清洁消毒，避免交叉感染。
5.如果动物出现并发症或死亡，应立即停止操作并向上级报告。
五、安全要求1.操作人员必须经过专业培训，熟悉操作步骤和注意事项。
2.实验动物必须处于深度麻醉状态，以减少动物的痛苦和应激。
3.在操作过程中要注意自我防护，避免受伤或感染。
4.对于使用过的工具和材料要进行妥善处理，防止交叉感染或环境污染。
5.在实验结束后要做好记录和分析，以便于数据的追溯和总结。
药理动物采血实验报告
一、实验目的1. 掌握药理实验中动物采血的方法和技巧。
2. 学习不同动物采血点的选择及其适用性。
3. 了解采血过程中的注意事项，确保实验数据的准确性。
二、实验原理药理实验中，动物采血是获取实验数据的重要环节。
通过采血，可以检测动物体内的血液指标，如血糖、血脂、血常规等，从而评估药物对动物的影响。
本实验采用小鼠作为实验动物，分别通过尾静脉采血和眼眶静脉采血两种方法获取血液样本。
三、实验材料1. 实验动物：小鼠（体重18-22g）。
2. 采血器材：采血针、注射器、试管、酒精棉球、止血带等。
3. 实验试剂：生理盐水、抗凝剂等。
四、实验方法1. 尾静脉采血- 将小鼠放入固定盒中，用止血带固定尾部。
- 将尾部毛剪去，用酒精棉球消毒。
- 观察尾静脉，选择较粗的静脉进行采血。
- 用采血针对准静脉，缓慢插入，避免损伤血管。
- 收集血液至试管中，加入适量抗凝剂。
- 采血完毕后，用酒精棉球消毒伤口，压迫止血。
2. 眼眶静脉采血- 将小鼠放入固定盒中，用止血带固定头部。
- 用酒精棉球消毒眼眶周围。
- 用拇指和食指轻轻按压眼球，使眼眶静脉暴露。
- 用采血针对准静脉，缓慢插入，避免损伤血管。
- 收集血液至试管中，加入适量抗凝剂。
- 采血完毕后，用酒精棉球消毒伤口，压迫止血。
五、实验结果1. 尾静脉采血：小鼠体重18-22g，每次采血量约0.1ml，可重复采血3-5次。
2. 眼眶静脉采血：小鼠体重18-22g，每次采血量约0.05ml，可重复采血2-3次。
六、实验讨论1. 尾静脉采血操作简便，采血量充足，适用于一般药理实验。
但反复采血可能导致小鼠尾部损伤，影响实验动物的存活率。
2. 眼眶静脉采血操作相对复杂，采血量较少，但损伤较小，适用于需要多次采血或对动物存活率要求较高的实验。
3. 采血过程中应注意以下几点：- 操作者应熟悉动物解剖结构，避免损伤血管。
- 采血针插入血管后，应缓慢抽拉，避免血液凝固。
- 采血完毕后，应及时对伤口进行消毒和压迫止血。
大小鼠眼眶取血方法(附图)知识讲解
2014-5-5
交流提纲
实验环境 实验材料
具体操作
动物处理
大鼠 PK 取血
血样处理
.
取血容量 时间安排
问题讨论
动物处理
动物 体重要求 一般 不低于250g 给药前 禁食12-24h，给药前 提前 0.5-1.0h 按 0.5-1.0%（V/W）给水
实验期间 ，补充体液 ，目前常规为：取血后灌胃给予 等统计生理盐水/葡萄糖溶液。
5去管止血
Step5.取血完成，立即 除去颈部压力，将采血 器拔出，按压止血
Step 5 A 当得到所需的血量后，即 除去加于颈部的压力，同时，将 采血器拔出，以防止术后穿刺孔 出血。 B 尽量把眼睛周围的血渍搽 干净，避免结块影响下次取血。
6样品摇匀 Step6.血样管轻轻混匀， 防止凝血、溶血
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实验之后，外用消炎药涂布眼部
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容量 时间
取血 容量 时间 安排
选点一般原则
吸收相 3-4个点 吸收相 3-4个点 分布相 3-4个点
一般12h内取血 不超过动物质量 2.0% （v/w）
每次0.25- 0.5 mL
药物性质
预实验建立
给药途径
注射 一般 呈现 降低 趋势，给药后较短时间内采集的点数适当增加； 灌胃 存在Cmax-tmax，需通过考察tmax，根据一般原则，适当调整时间间隔。
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大鼠眼眶取血流程
2压迫颈部
Step2.紧握颈部，压 迫颈两侧，使眼突出， 眶后静脉丛充血
Step2 A 可用管试探性触碰眼球是否已经 突出； B 此时大鼠反抗挣扎最厉害，保证抓 紧的同时，不能太过，使其窒息死亡。
小鼠眼球取血技巧 根据需要捻动拇指与食指的方向,使血液从眼眶内以不同速度垂直流
小鼠眼球取血技巧小鼠摘除眼球采血及分离血清一．器材离心管，弯头镊子，离心机，移液器二．步骤1. 摘除眼球采血（1）左手拇、食指抓取小鼠双耳及颈后皮肤，小指固定尾部；（2）中指将小鼠左侧前肢轻压在胸骨心脏部位，无名指按在腹部，捻动拇指，轻压取血侧眼部皮肤，使眼球充血突出；（3）用弯头镊夹取眼球；（4）根据需要捻动拇指与食指的方向，使血液从眼眶内以不同速度垂直流入离心管；（5）同时用左手中指轻按小鼠心脏部位，以加快心脏泵血速度；（6）当血液流尽时，用脱臼法处死小鼠。
2. 分离血清（1）将离心管中的血置37℃温箱或水浴1小时，也可室温2小时；（2）再置4℃冰箱内3～4小时或过夜；（3）待血液凝固血块收缩后，4000rpm离心10分钟；（4）取上清于干净的离心管中，保存于-20℃，或加入防腐剂(0.01％硫柳汞或0.02％叠氮钠)，置4℃冰箱中保存备用。
三．注意：1. 采血前，可给小鼠喂点水；2. 摘眼球采血取血量能达0.8～1.2ml，但老年和疾病小鼠血量会降低；3. 采血场所有充足的光线；室温夏季保持在25～28℃，冬季，15～20℃为宜；4. 防止血液浸入眼部周围毛发，否则会造成污染和溶血；5. 按压心脏时，用力一定要适度，若用力过度，一是会造成动物采血中途死亡，使采血不完全，二是有可能引起溶血现象发生，影响实验结果；6. 采血用的器材和试管必须保持清洁干燥；7. 采血时要防止小鼠挣扎，否则会损失比较多的血样；8. 血液凝固后不宜在4℃放置过久，否则会溶血。
另附其他几种采血方法1）尾尖取血：当所需血量很少时采用本法。
固定动物并历出鼠尾，将鼠尾在45℃温水中浸泡数分钟，也可用二甲苯等化学药物涂擦，使局新血管扩张。
将鼠尾擦干，剪去尾尖，血自尾尖流出，让血液滴入盛器或直接用移液器吸取。
如需间隔一定时间，多次采取鼠尾尖部血液，每次采血时，将鼠尾剪去很小一段，取血后，先用棉球压迫止血并立即用6％液体火棉胶涂于尾巴伤口处，使伤口外结一层火棉胶薄膜，保护伤口。
小鼠采血及给药方法
小鼠采血及给药方法一、小鼠采血方法1.静脉采血法：(1)静脉穿刺法：将小鼠固定在实验台上，清洁采血部位（常常是尾静脉），用适当的方法固定小鼠尾部，例如用取血夹固定。
用消毒棉球涂抹于采血部位，利用一只针筒或采集针对静脉进行穿刺。
(2) 尾静脉切割法：先用消毒棉球涂抹于小鼠尾部静脉附近，接着使用锋利的剪刀剪切尾部皮肤，直到出现静脉。
使用脱针管（micro-hematocrit tube）将血液抽吸出来。
采血结束后，可用消毒剂处理采血点，以防止感染。
2.额高度法：采用颅内针，固定小鼠在颅骨穿刺装置上，选用滑动固定针。
先用洗净针按住头部，再通过颅针插入到穿刺装置中。
同时使用抽吸器抽取出血液。
3.围尾车压法：将小鼠固定在一块平板上，用三个围绳将其尾部固定，留一个关节使小鼠尾部随意摆动。
在上方围绳旁边的固定处架设一只容器，用于收集滴下的尾血。
二、小鼠给药方法1.口服给药：该方法较简单，将药物以适当的剂量溶解于注射用水或生理盐水中，用灌胃针或注射器将药液直接灌入小鼠口腔中。
要确保给药的准确剂量和流量，避免嗓子喉咙堵塞。
2.腹腔注射法：将小鼠放在工作台上，用适当的方法固定小鼠身体，清洗注射部位。
用消毒棉球涂抹于腹部，使用22-25号注射针或微量注射器将药物缓慢注射入腹腔。
注射速度要控制得适当，避免损伤内脏器官。
3.尾静脉注射法：将小鼠固定在工作台上，清洁尾部毛发，用爪式血管夹固定尾部血管。
使用注射针插入尾静脉，并注意发现血斗标志。
缓慢将药物注射入尾静脉。
4.静脉注射法：将小鼠固定在工作台上，清洗注射部位。
用消毒棉球涂抹于注射部位（通常是尾静脉），固定小鼠尾部。
使用注射针或微量注射器将药物注射入静脉。
5.肌肉注射法：将小鼠放在工作台上，用适当的方法固定小鼠身体。
将药物以适当的剂量溶解后，使用注射针插入小鼠腹股沟或胫肌中缓慢注射。
以上是小鼠采血及给药的常用方法，注意采血和给药的操作应该规范、缓慢、准确，以避免对小鼠造成不必要的伤害。
小鼠眼眶静脉丛采血方法经验总结
小鼠眼眶静脉丛采血1、器材碘伏、1ml注射器或长颈(3～4cm)硬质玻璃管(毛细管内径0.5-1.0mm×100mm，对半折断)、5%葡萄糖注射液或生理盐水。
2、步骤先麻醉小鼠。
（可在采血前给予相应量5%葡萄糖注射液或生理盐水腹腔注射，这样可提高穿刺失血后小鼠的存活率）碘伏消毒眼周皮毛。
（必须等碘伏干后才可穿刺，否则会溶血）采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手套)，应防止动物窒息。
当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧，使眶后静脉丛充血。
右手持注射器或玻璃管。
玻璃管平端先沿着鼻侧眼角慢慢滑动至眼球正下方的眼皮内，此时左手微微顺时针旋转，使小鼠头部相对位置微向右下偏转，即相当于玻璃管刺入时是对着口腔方向的（这样做可避免小鼠失明）。
从眼眶下端中间垂直于鼠面略斜向内眦方刺入，针头斜面先向眼球，当感到有阻力时即停止推进，刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。
（刺入深度，小鼠约2～3mm，大鼠约4～5mm，不能插过深！）这个动作应稳且迅速。
一般情况下，即会有血液流出，若不行，则将针退出约0.1-0.5mm，若还不行，可快速拧搓毛细管，进一步破坏内眦静脉丛，加快出血速度。
（若血量还是不足或要不惜处死小鼠以尽可能多取血，可使臀部高于头部）如出血速度满意，最好计数出血小滴数目，一般25g左右的小鼠28小滴血（0.4毫升）的出血量不会危及小鼠生命。
当得到所需的血量后，即除去加于颈部的压力，同时，将采血器拔出，清洁棉球压迫眼部片刻，碘伏消毒眼部。
若要重复采血，可左右两眼轮换，同一动物可反复交替穿刺双眼多次。
（每次采血后需要3到4周才可采下一次）。
小鼠取血方法范文
小鼠取血方法范文小鼠是常用的实验动物之一，常需要从小鼠身上进行取血以获取血液样本进行分析和研究。
小鼠取血方法有多种，包括尾静脉取血、眼眶窝静脉取血、颈静脉穿刺取血等。
下面将对这些方法逐一进行详细介绍。
1.尾静脉取血方法：尾静脉取血是最常用且最方便的小鼠取血方法之一、具体步骤如下：1)麻醉小鼠：使用合适的麻醉方法麻醉小鼠，常见的方法有气体麻醉和注射麻醉剂。
2)准备工具：准备好所需的器械，如注射器、针头、72%医用酒精等。
3)清洗尾部：将小鼠放置在无菌条件下，用温水和肥皂轻轻清洗尾部，并用酒精擦拭消毒。
4)取血操作：将小鼠的尾部放置于温暖的环境恢复血流，用酒精擦拭尾部的静脉，然后用一只手控制住小鼠的尾巴，用另一只手将注射器针头的一端插入小鼠尾部的静脉中，缓慢地抽取所需的血样。
5)处理伤口：取血完成后，用棉球轻轻地按压尾部，使创口停止出血，并用消毒棉球擦拭尾部的酒精，帮助伤口愈合。
2.眼眶窝静脉取血方法：眼眶窝静脉取血适用于需要大量血样的实验。
具体步骤如下：1)麻醉小鼠：使用合适的麻醉方法麻醉小鼠，常见的方法有气体麻醉和注射麻醉剂。
2)准备工具：准备好所需的器械，如注射器、针头、72%医用酒精等。
3)定位小鼠：将小鼠的头部固定于工作台上，使眼眶窝静脉暴露。
4)消毒处理：用酒精擦拭眼眶窝上方的毛发，然后用酒精将取血点消毒。
5)取血操作：用一只手控制住小鼠的头部，用另一只手将注射器针头的一端插入眼眶窝静脉中，缓慢地抽取所需的血样。
6)处理伤口：取血完成后，用消毒棉球轻轻按压取血点，使创口停止出血，并用消毒棉球擦拭取血点的酒精，帮助伤口愈合。
3.颈静脉穿刺取血方法：颈静脉穿刺取血方法适用于表层静脉无法清晰可见或不方便取血的情况。
具体步骤如下：1)麻醉小鼠：使用合适的麻醉方法麻醉小鼠，常见的方法有气体麻醉和注射麻醉剂。
2)准备工具：准备好所需的器械，如注射器、针头、72%医用酒精等。
3)小鼠体位：将小鼠放置于工作台上，头部略微向后仰。
大小鼠眼眶取血方法(附图)课件
在实际操作中，需要注意压迫的力度和时间，以 免对动物造成不必要的损伤或影响实验结果。
采血后需要对动物进行适当的护理和观察，以确 保其健康和生存。
结论应用
眼眶取血方法适用于需要反复采血的 实验，如药物筛选、毒理学研究等。
需要注意的是，眼眶取血方法不适用 于需要大量采血的实验，如血液生理 研究等。
由于该方法对动物损伤小，因此在需 要长时间观察的实验中具有优势。
尽量快速地完成采血过程，以减少动物的不适感 。
观察动物状态
在采血过程中，要密切观察动物的状态，如出现 异常反应应及时停止操作。
操作注意事项
01
02
03
04
消毒措施
在操作前应确保所有工具和材 料都已经消毒，以减少感染的
风险。
动物福利
在采血过程中，要确保动物的 福利，避免对其造成不必要的
பைடு நூலகம்痛苦和应激。
避免损伤其他组织
眼眶取血针
专用的眼眶取血针，确保取血 准确、快速、方便。
试管
用于存放采集的血液样本，根 据需要选择不同规格的试管。
实验台和实验器具
实验台应保持清洁，准备好其 他必要的实验器具，如手术刀 、棉球等。
实验环境
清洁度
实验环境应保持清洁，定期进行消毒，确保无菌操 作。
温度和湿度
控制实验环境的温度和湿度，保持适宜的温湿度， 以减少对实验结果的影响。
光照
实验环境的光照应适度，避免过强或过弱的光照对 实验结果产生影响。
03
方法
操作步骤
准备工具与材料
准备大小鼠固定装置、消毒棉球、 眼科剪、眼科镊、试管、抗凝剂等 。
固定动物
将大小鼠置于固定装置中，确保其 舒适且稳定。
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实验小鼠眼眶静脉丛采血方法
优点：眼眶后静脉丛采血法方法简单，便于掌握。
血流较快，采血量多，能在较短时间内采约0.5mL血。
伤口较小，愈合较快。
成功率高，死亡率低。
缺点：不能避免组织液的混入，对于血样要求较高的研究应谨慎使用。
小鼠经气体麻醉后，左手拇指及食指压迫小鼠的颈部两侧，阻碍静脉回流，使眼球充分外突，提示眼眶后静脉丛充血。
也可以将小鼠放置在侧卧位，拇指与食指分别置于小鼠头顶和下颌，将皮肤向后及向下拉。
抓握时要避免对气管施压，否则可能会影响小鼠呼吸。
将毛细采血管（建议采用0.5*100mm规格的毛细管，在使用前折成小段，每段大约3-4cm）置于内侧眼角处，并且以与鼻翼平面成30-45度沿内眦插入内眼角，滑入眼球后方，轻轻向眼底方向刺入。
当感到有阻力时即轻轻旋转采血管的同时施加压力以切开静脉丛，血液将通过毛细作用流入采血管。
不能刺地过深，一般2-3mm即可。
采血结束后，立即松开手指对小鼠的压迫，使眼球复位，同时将采血器拔出。
可用干棉球压住眼眶，确保止血。
一般眼眶静脉丛采血量可以达到0.2-0.3ml。