总胆汁酸(TBA)试剂盒标准操作程序
总胆红素(TBIL)测定试剂盒(重氮法)产品技术要求百奥泰康
总胆红素（TBIL）测定试剂盒（重氮法）适用范围：该试剂盒用于体外定量测定人血清中总胆红素的浓度。
1.1 产品规格1.2 组成成分该试剂盒由试剂1（R1）、试剂2（R2）和校准品（选配）组成。
1.2.1试剂组成试剂1: 对氨基苯磺酸≥10.0mmol/L 十六烷基三甲基溴化铵≥5.0mmol/L试剂2: 亚硝酸钠≥1.0mmol/L 1.2.2 校准品组成牛血清总胆红素目标浓度：200μmol/L该校准品为牛血清基质冻干品2.1 外观a) R1应为无色溶液，无混浊，无未溶解物。
b) R2应为无色溶液，无混浊，无未溶解物。
c) 校准品应为白色至淡黄色固体。
2.2 净含量液体组分不少于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度应不大于0.050。
2.4 分析灵敏度TBIL试剂盒测定浓度100.0μmol/L的被测物时，吸光度差值（ΔA）应不小于0.050。
2.5 准确度用纯品测定回收率，应在85%-115%之间。
2.6 精密度2.6.1重复性变异系数应不大于5%。
2.6.2批间差批间相对极差（R）应不大于10%。
2.6.3校准品批内瓶间差测试校准品，所得结果的批内瓶间差应不大于5%。
2.7 线性在（0,427.0]μmol/L范围内，TBIL试剂盒的线性相关系数r应不低于0.9900；在（0,50.0]范围内绝对偏差应不超过5.0μmol/L，在(50.0,427.0]范围内相对偏差应不超过±10%。
2.8校准品溯源性依据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供总胆红素校准品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容。
校准品溯源至国家参考物质GBW(E)090002。
2.9稳定性2.9.1校准品复溶稳定性校准品复溶后，在2℃～8℃密封保存24小时，测试试剂盒准确度，应符合2.5的要求。
2.9.2 试剂盒稳定性原包装的TBIL试剂盒在2℃～8℃避光保存，有效期为18个月。
总胆固醇检测试剂盒(COD-PAP 双试剂比色法)说明书
主波长/次波长 反应类型 反应方向
500/600nm 终点法
升反应(+)
计算公式：
血清、血浆等液体样本(空白调零)： FC(mmol/L)=A 测定/A 标准×5
血清、血浆等液体样本(全自动生化分析仪)：
FC(mmol/L)=(A 测定-A 空白)/(A 标准-A 空白)×5 组织样本(空白调零)：
V1=细胞样本取样量（ml）
V2=样本匀浆液总体积（ml）
参考区间： 健康成年人理想范围：<5.2mmol/L(<200mg/dl)
边缘升高：<5.23~5.69mmol/L(201~219mg/dl)
升高：≥5.72mmol/L(≥220mg/dl)
备注：TC 标准(5mmol/L)=442.48mg/dl
产品组成：
名称
规格
保存条件
总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP 双试剂比色法)
100T
4℃
试剂(A):
Good'sBuffer
Good's 溶液
显色剂
2×25ml
4℃
活性剂、稳定剂
试剂(B):
胆固醇氧化酶
COD-POD 溶液 4-氨基安替比林
2×25ml
-20℃避光
CEH、POD
临用前，按 A：B=1：1 混合，即为 COD-PAP 工作液，4℃保存。
FC(mmol/g)=A 测定/A 标准×5×V2/(m×1000) 组织样本(全自动生化分析仪)：
FC(mmol/g)=(A 测定-A 空白)/(A 标准-A 空白)×5×V/(m×1000) 细胞样本(空白调零)：
FC(mmol/L)=A 测定/A 标准×5×V2/V1
二氧化碳(CO2)、总胆汁酸(TBA)复合质控品产品技术要求mairui
2性能指标
2.1外观和性状
2.1.1颜色性状
质控品复溶前为浅黄色或黄色冻干粉末，复溶后为浅黄色或黄色液体。
2.1.2包装
分装瓶为棕色硬质玻璃瓶，盖有橡胶瓶内塞；盒贴、瓶贴、标签标识应完整、清晰。
橡胶瓶内塞与玻璃配合后应无泄漏；外盖应无明显划痕、崩缺。
2.2装量
质控品装量差异应在±7.0%以内。
2.3均一性
2.3.1瓶内均一性
质控品瓶内均一性应不大于表2的要求。
表 2 质控品瓶内均一性要求
2.3.2瓶间均一性
质控品瓶间均一性应不大于表3的要求。
表 3 质控品瓶间均一性要求
1
2.4参考值及参考范围
每批质控品均应提供本批产品的参考值表。
经迈瑞校准品校准的适用仪器及配套试剂对质控品进行测定，测定结果应在给定的参考范围内。
2.5生物安全性
质控品使用国家权威管理机构认可的、且不低于我国法定用于血源筛查体外诊断试剂灵敏度的检测试剂，乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体、丙型肝炎病毒（HCV）抗体、梅毒螺旋体（TP）抗体检测应为阴性。
2。
总胆固醇测定试剂盒标准操作程序.
总胆固醇测定试剂盒标准操作程序1. 摘要本试剂盒供医疗机构用于体外定量测定人血清或血浆样本中总胆固醇的含量。
2. 适用范围程序适用于AU5811自动生化分析仪检测血清样本中总胆固醇的含量。
3. 职责使用AU5811自动生化分析仪进行测定总胆固醇浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行，室负责人监督管理；本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4. 检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的总胆固醇测定试剂盒采用的是氧化酶法。
5. 原理OH ESPAS O H O H O O H 222222244+−−−→−+-+-∆+−−−−→−++−−−→−+醌亚胺氨基安替比林胆甾烯酮游离胆固醇脂肪酸游离胆固醇总胆固醇过氧化物酶胆固醇氧化酶胆固醇酯酶ESPAS:N-乙基-N-(3-磺丙基)-间-茴香胺血清中的总胆固醇在胆固醇酯酶的作用下水解成游离胆固醇和脂肪酸,游离胆固醇在胆固醇氧化酶的催化下,氧化成Δ4-胆甾烯酮和双氧水,最后双氧水在过氧化物酶的催化下与色原底物4-氨基安替比林和ESPAS 反应生成红色化合物醌亚胺。
由于醌亚胺在波长550nm 处有吸收峰,所以在一定底物浓度范围内，550nm 处吸光度的变化值与样本中总胆固醇的含量成正比6. 仪器AU5811自动生化分析仪7. 试剂7.1 试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2 试剂瓶内主要成分：R1：胆固醇酯酶、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶、ESPAS （ADPS ）；R2：胆固醇氧化酶、 -氨基安替比林；校准品：胆固醇7.3试剂稳定性：未打开试剂于2℃-8℃避光保存可至失效期。
校准品应密闭保存，以免液体挥发。
8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用科华公司的校准品对自动分析仪进行校准。
按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品通过合适的数学模型绘制校准曲线。
总胆汁酸检测ppt课件
酶比色法测定总胆汁酸
【操作步骤】
1．手工法按表
加入物(ml) 血清 标准液 试剂Ⅰ
测.1
0.3
标准
0.1 0.3
标准对照 a
0.1 b 0.3 c
试剂Ⅱ
0.1
0.1
d
去离子水
0.1
0.1 e
混匀，37℃水浴10min，加终止液0.1ml，摇匀，
500nm波长，以水校零，读取各管A值。
血清总胆汁酸的检测
酶比色法测定总胆汁酸 循环法测定胆汁酸
酶比色法测定总胆汁酸
【原理】
在3α -羟类固醇脱氢酶(3α -HSD)作用下，各种
胆汁酸C3上α 位的烃基(3α -OH)脱氢形成碳基
(3α =O)。同时NAD还原成NADH。随后，
NADH上的氢由黄递酶催化转移给碘化硝基四
氮唑(INT)，产生红色的甲臢。甲臢的产量与
酶比色法测定总胆汁酸
-----注意事项
由于血清中TBA含量低，样品中存在干扰物质的 影响相对就大，乳酸脱氢酶(LD)是主要的干扰物质， 由LD反应中生成的NADH往往比TBA反应中生成 的量要大得多，因此测定前去除血清中LD的影响 至关重要，方法有：血清67℃加温30min；加草 氨酸作为LD的封闭剂；碱或酸处理；用丙酮酸钠 抑制LD活性。上述5种方法中丙酮酸钠法最好，可 免去前处理步骤，直接加入反应体系，不影响体系 的pH，且对反应无干扰。 血清中还存在其它脱氢酶(有相应底物存在时)和 还原性物质，如不除去，测定结果会偏高。据无选 择的40例肝功能标本的测定结果来看，平均干扰 相当于TBA 18μmol/L，范围在5.5～45μmol/L之 间。因此自动分析设计成双试剂二步法，样品先和 不加3α -HSD的体系孵育，使样品中的干扰物质先 反应，然后再加入3α -HSD，启动TBA反应。
生化项目SOP
沭阳县仁慈医院检验科生化室作业指导书文件编号：SYXRCYYLAB-SH –SOP第A版编制：路珊珊钱丽萍审核：李萍批准：侯波生效日期：2012年10月01日沭阳县仁慈医院检验科修订页血清总胆红素(T-BIL)测定一、目的保证总胆红素测定的结果准确、可靠。
二、修改程序本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：质量主管、授权人（科主任）。
三、适用范围钒酸盐氧化法测定总胆红素。
四、试剂来源本标准操作程序适用于上海执诚生物科技股份有限公司生产的总胆红素测定试剂盒。
五、溯源全国临床检验操作规程（第二版）。
六、原理此方法基于样品中的总胆红素在pH3.0 环境中，在有机复合物氧化剂的作用下，可以被氧化成胆绿素，而胆红素特有的黄色也随即消失，在450nm 处测定吸光度的变化，即可计算出样品中总胆红素的浓度。
七、试剂R1：硫磺酸缓冲液（pH2.9） 0.1mol/L表面活性剂R2：磷酸缓冲液（pH7.0） 10mmol/L有机钒酸盐 4mmol/L 不同批号试剂盒中各组份不能互换。
本试剂对光敏感，2～8℃密闭避光保存可以稳定18个月（勿冷冻）；首次开启试剂后，避光保存于2～8℃防污染环境中，可继续稳定至效期。
校准液： Randox 公司提供的系列校准品。
八、标本采血清总胆红素(T-BIL)测定血清、血浆。
样本2～8℃保存可以存放约3天，-20℃保存可以存放3个月，但只能冻融一次。
九、操作步骤1、标本编号，分离血清，依顺序置样品架上。
2、按标本编号在全自动化生化仪器上输入标本的基本信息和测定要求，进行测定。
3、仪器校准：将校准液置试管架上，输入校准液浓度，然后进行测定（测定参数与下同），其吸光度贮存在电脑中，浓度值测定符合要求即可应用。
一般每3～6个月校准一次，若更换不同批号的试剂、质控超标或仪器维修处理后应进行校准。
4、测定参数：血清量 7μl试剂Ⅰ 200μl试剂Ⅱ 50μl主波长 444nm次波长 548nm反应类型终点法；负反应测定时间 10分钟温度 37℃报告单位μmol/L5、结果计算：ΔA 样品样本中总胆红素的含量 = ------- ×标准液浓度ΔA 标准单位换算：mg/dl×17.1=μmol/L十、正常参考值5.1-20μmol/L血清总胆红素(T-BIL)测定十一、室内质控质控方法：每天测定样品前做一组质控，在标本中间插一组质控，最后再做一组质控品，共三组。
生化室标准操作程序
凤庆县人民医院质量管理体系文件生化室SOP文件编号：FQYY-LAB-SH-CZ-01~47第二版编制：鲁伟审核：李树荣批准：李树荣生效日期：2012年10月1日凤庆县人民医院检验科目录目录目录修订页临床标本采集程序1.目的:规范临床标本的采集，减少实验前的影响因素。
2.范围:适用于为协助疾病诊断和治疗而进行的临床生化样品采集活动。
临床样本包括血液、尿液、胸腹水等各种体液。
3.职责:临床生化实验室：指导临床各科室正确采集标本，提高实验结果的准确性。
4.程序:4.1 静脉血的采集：4.1.1 静脉血标本采集前病人应注意的问题：4.1.1.1 避免剧烈运动，一般主张抽血前24小时不做剧烈运动，清晨取血，住院病人可在起床前抽血，匆忙赶到门诊的人应至少休息15分钟后取血。
4.1.1.2 注意合理饮食。
除了急诊或其它特殊原因外，一般主张在禁食12小时后空腹取血，延长空腹时间(饥饿)或餐后血液的化学成分都会变化.饮酒对实验亦有影响。
4.1.1.3 药物的影响。
很多的药物进入人体后可影响某些化验项目的结果，病人在化验前应尽可能停服对实验有干扰的药物。
4.1.2 静脉血标本采集前医生、护士应注意的问题：4.1.2.1.检验申请单填写要求：检验申请单用钢笔或黑笔填写，使用正楷字，字迹清楚，填写完整。
填写内容包括：受检者姓名、性别、年龄、临床诊断、送检标本、检验项目、标本采集年月日时、申请医生及采样者签名。
4.1.2.2 采用一次性真空采血管，多项化验时应首先将血注入血常规管，然后是抗凝管（注意要正确使用抗凝剂），最后是非抗凝管。
4.1.2.3 采血时的体位建议以坐位5分钟后取血为宜，止血带使用应少于1分钟，以免引起血液淤滞，造成血管内溶血或血液某些成分的改变。
4.1.2.4 当一侧手臂输液时应从对侧手臂取血，以降低对血糖、血钾等实验结果的影响。
4.1.2.5 血标本应防止溶血，影响溶血的因素有:使用止血带时间过长；抗凝管使用不当或抗凝混合时过度振荡；容器污染；血液中泡沫注入试管；标本放置时间过长；突然受冷或受热及离心力过大等。
总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒使用说明
总抗氧化能力（T-AOC）检测试剂盒使用说明微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC1315规格：100管/96样产品内容:提取液：液体100mL×1瓶，使用前预冷。
试剂一：液体15mL×1瓶，避光保存。
试剂二：液体1.5mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体1.5mL×1瓶，避光保存。
产品说明:测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。
在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。
在酸性环境下，物质还原Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)产生蓝色的Fe2+-TPTZ的能力反映了其总抗氧化能力。
自备实验用品可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、低温离心机、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
操作步骤:一、样品的制备(1)血清、血浆、唾液或尿液样品血浆（制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝，不宜使用EDTA抗凝）4℃，5000rpm离心10min，取上清待测。
血清、唾液或尿液样品直接用于测定，也可以-80℃冻存（不宜超过30d）后再测定。
(2)组织样品按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后10000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
(3)细胞样品按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎（功率200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；10000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
二、测定操作混合液(现配现用)：将试剂一、试剂二、试剂三按10:1:1的比例混合，使用前预温至37℃。
对照管测定管混合液（μL）180180样本（μL）/6双蒸水（μL）2418充分混匀，反应10min，双蒸水调零，于微量石英比色皿/96孔板，测定593nm处吸光值，△A=A测定-A空白注意：空白管只需测定一次。
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总胆汁酸（TBA）试剂盒标准操作程序
1.摘要
本试剂盒供医疗机构用于体外定量测定人血清或血浆样本中总胆汁酸（TBA）的含量。
2.适用范围
程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清或血浆样本中总胆汁酸（TBA）的含量。
3.职责
使用日立7600自动生化分析仪进行测定直接胆红素浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行，室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4.检测方法
上海科华生物工程股份有限公司生产的总胆汁酸（TBA）试剂盒采用的是循环酶法。
5.原理
血清中微量的胆汁酸（3α-羟甾醇）会被3α-羟甾醇脱氢酶（3α-HSD）及β-硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型（Thio-NAD）特异性氧化生成3α-酮甾醇，同时Thio-NAD被还原成β-硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原型（Thio-NADH）。
新生成的3α-酮甾醇在3α-HSD及β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还化型（NADH）存在下，还原成胆汁酸，同时NADH氧化为β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型（NAD）。
这样，血清中微量的胆汁酸在多次酶循环的过程中被放大，同时可使生成的Thio-NADH扩增。
在405nm处测定Thio-NADH吸光度的变化值，可以求得血清中胆汁酸的含量。
胆汁酸THio−NAD3α−HSD
→THio−NADH
NAD←NADH
3α−铜羟甾醇
6.仪器
日立7600自动生化分析仪
7.试剂
7.1试剂来源：
上海科华生物工程股份有限公司提供
7.2注册号：
沪食药监械（准）字2011第2400009号
7.3试剂瓶内主要成分：
R1： -硫烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型（THio-NAD）、Good’s缓冲液；
R2 ：β-硫烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原型（NADH）、3α-羟甾醇脱氢酶（3α-HSD）、Good’s 缓冲液、叠氮钠
7.4试剂稳定性：试剂于2℃-8℃避光保存，有效期为一年；开瓶后2-8℃避光保存，可
稳定一个月
8.标准品和质量控制
8.1校准程序：
使用某某公司的校准品对自动分析仪进行校准。
按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品通过合适的数学模型绘制校准曲线。
8.2质控品：
某某公司提供的生化复合定值质控血清作为室内质控品。
每日在测定前做一次质控。
该质控品为干粉包装，在2-8℃冰箱可稳定到失效期，使用前用5ml去离子水复溶，待质控物充分溶解（大约30分钟）后使用。
8.3质控数据管理：
按程序对检验后的质控后结果进行转换，及时质控数据进行分析处理，如出现失控值，应及时分析失控原因，并填写好相关失控记录。
8.4质控判断规则：
按《Westgard多规则质控方法测定标准操作程序》
8.5室间质评：
分别参加某地区室间质评，对回报的室间质评结果按《室间质量评价程序》进行处理。
9.标本
9.1标本要求：
血清、肝素或EDTA抗凝的血浆。
尽量使用新鲜标本。
已知血清中总胆汁酸（TBA）的浓度在饭后上升，因此要注意采血时间。
不进行负荷试验时，应严守早晨空腹时采血。
血清中胆汁酸在4℃保存时一周内稳定，冷冻-20℃可保存三个月。
9.2标本拒收：
由实验室人员核收送来标本，如有溶血、已被污染、标识不清或与申请单不符状况，一律要求重新留取标本。
9.3标本处理：
收集编号后离心获取血清/血浆以备检测使用。
10.测定程序：
10.1分析参数：
详见参数表。
10.2操作步骤：
签收样本→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。
10.3获取结果：
在日立7600仪器上或日立7600传送的中文系统电脑上查找相应结果。
10.4结果报告：
对检验后的结果进行审核，系统分析，判断结果的可报告性。
可报告的结果直接发报告，对不可报告结果进行复检后发报告。
11.计算
标准品校准项目后，测定室内质控，质控结果符合质控要求后方可测定样本。
无需手工计算，每个标本的结果自动打印。
12.废液处理
参阅检验科《安全手册》废液处理标准规程处理。
13.操作性能：
13.1可报告范围：
1-150 mol/L；样品中含量超出线性范围，则以0.1ml标本加0.5ml生理盐水稀释，再测定，结果乘以6。
13.2特异性/干扰：
样本中胆红素含量＜50mg/dl，抗换血酸＜100mg/dl，血红蛋白含量＜500mg/dl时对试剂的测定没有影响。
13.3精密度：
批内变异系数CV≤10%；
批间相对极差≤10%
13.4准确度：
用质控品做样本，其测定结果应在该批质控品规定的范围内。
14.注意事项：
14.1试剂盒仅用于体外诊断。
14.2血清等标本有些含有感染性成分，因此应以具有感染危险性而充分注意操作。
14.3本试剂盒含有防腐剂叠氮钠，叠氮钠与铅、铜等反应，有时会形成一爆炸的叠氮化
金属盐，因此废液应用大量水冲洗。
14.4测定结果仅作为各种疾病的临床辅助诊断依据。
15.参考范围：
0-10 mol/L各实验室应建立自己的参考值范围。
16.临床意义：
总胆汁酸（TBA）是肝细胞合成并分泌，随胆汁排泄，是胆汁中存在的一大类胆烷酸的总称。
由于其是由肝脏分解代谢，能反映肝实质性损伤。
测定血清胆汁酸可提供肝胆系统是否正常的重要信息。
肝胆疾病时周围血液循环中的胆汁酸水平明显增高。
急性肝炎早期和肝外阻塞性黄疸时，有些病例可增至正常值的100倍以上。
血清中胆汁酸含量受肠道吸收的胆汁酸量与肝门静脉中的胆汁酸被肝脏摄取的摄取率所决定。
由于肝损伤的存在，经肝门静脉回肝的胆汁酸因肝细胞功能低下或侧枝循环的形成，导致肝不能充分摄取胆汁酸，则胆汁酸在血中浓度增高。
肝胆疾病时血清总胆汁酸浓度的升高与其他肝功能试验及肝组织学的变化极为吻合，在肝细胞仅有轻微坏死时，血清胆汁酸的升高常比其他检查更为灵敏。
有报告统计，急性肝炎、肝硬化、原发性肝癌、急性肝内胆汁淤滞、原发性胆汁性肝硬化以及肝外阻塞性黄疸，其血清总胆汁酸均100％出现异常，上述疾病时均有血清胆汁酸含量的增高。
17.支持性文件：
17.1日立7600自动生化分析仪使用说明书。
17.2日立7600自动生化分析仪分析参数。
17.3上海科华生物工程股份有限公司提供的试剂说明书。
用户可根据自身情况添加支持性文件。
18.参考文献
1.F.Mashige etc.,Clinical Chemistry, Vol 27,1352-1356(1981).。