糖化血红蛋白定量测定试剂盒标准操作程序
PDQ PLus糖化血红蛋白标准操作程序
1 目的PDQ PLus TM用于体外诊断，定量检测全血中糖化血红蛋白含量。
2 范围糖化血红蛋白的含量检测。
3 职责3.1 生化实验室的检测人员负责糖化血红蛋白含量检测。
3.2质量监督员负责监督检测是否按照程序文件和作业指导书中检验过程的要求进行。
4 原理高压液相亲和层析：PDQ PLusTM采用了高压液相亲和层析将糖化血红蛋白分离出来，然后根据415nm 波长的吸光度的变化生成层析图，并记录和保存在内置的计算机里，仪器内置的软件程序会自动分析层析图并通过打印机输出结果。
5 标本采集、运输、保存静脉血或末梢血，推荐使用EDTA钾盐或肝素氨做抗凝剂。
在-20℃保存稳定6个月，5℃保存稳定2周，25℃保存稳定1周。
冷藏标本应放置至室温，混匀后操作，避免反复冻融。
注意：所有全血标本在分析前要完全混匀。
6 标本拒收标准6.1 不合格标签，包括没有标签，或标本信息不全，或编号错误。
6.2 未使用正确的容器。
6.3 凝结（如EDTA采血管）。
6.4 容量不足。
6.5 未能正确运送。
6.6 受污染。
6.7 检测申请不完全。
7 试剂及仪器设备普莱默斯糖化血红蛋白检测试剂，PDQ PLus TM糖化血红蛋白检测仪。
7.1 包装规格7.2 试剂成份试剂成份：5%酒精、磷酸盐缓冲液、蒸馏水、清洗液、0.001%叠氮化钠、羟基盐等。
7.3 试剂准备标本预处理：稀释模式：30μl的全血与3000μl稀释液混合（1：100），避免起泡沫。
室温孵育5分钟。
全血模式：标本不凝血、足量7.4 试剂储藏和稳定期未处理的标本：密闭保存2-4℃，稳定7天7.5 仪器设备PDQ PLus TM糖化血红蛋白检测仪8 操作步骤按仪器操作说明书输入正确的实验参数和试剂使用通道代号。
具体操作步骤参照PDQ 日常操作规程。
9 结果判断与分析对超出可报告范围的结果,可用稀释液稀释样品，再重新测定，结果乘以稀释倍数。
报告发出时必须经过双重审核，一人测试结果，另一人负责复核结果。
糖化血红蛋白测定仪器使用方法
糖化血红蛋白测定仪器使用方法
糖化血红蛋白测定仪器的使用方法如下：
1. 准备工作：将糖化血红蛋白测定仪器放置在水平稳定的工作台上，并接通电源。
2. 校准仪器：根据仪器使用说明书的指导，进行仪器的校准。
校准可以确保仪器的准确度和可靠性。
3. 样品处理：将采集的血样加入预先提供的试剂中，按照指定的比例混匀。
待混合液稳定后，取出一定量样品。
4. 操作仪器：将取出的样品加入仪器提供的测试池中，确保样品完全覆盖测试池。
按下开始/测试按钮启动测试程序。
5. 等待结果：在仪器显示屏上，可以观察到样品的测试进度。
等待一定时间后，仪器会自动显示测试结果。
6. 计算结果：根据仪器提供的测试结果，可以计算出血液中的糖化血红蛋白含量。
根据仪器使用说明书，进行相应的计算和解释。
7. 清洁和维护：测试结束后，及时清洁仪器的测试池和其他零部件，保证仪器的正常使用和长寿命。
需要注意的是，具体的操作步骤可能会因不同型号的糖化血红
蛋白测定仪器而有所不同。
在使用仪器前，应仔细阅读仪器的使用说明书，并按照说明书的指导进行操作。
艾威德糖化血红蛋白(HbA1c)测定试剂盒（胶乳免疫比浊法）说明书
糖化血红蛋白(HbA1c)测定试剂盒（胶乳免疫比浊法）说明书【产品名称】糖化血红蛋白(HbA1c)测定试剂盒（胶乳免疫比浊法）【包装规格】a)试剂1：1×30mL；试剂2a：1×9.5mL；试剂2b：1×0.5mL；试剂3：2×50mLb)试剂1：2×30mL；试剂2a：2×9.5mL；试剂2b：2×0.5mL；试剂3：4×50mL【预期用途】用于体外定量测定人体血中糖化血红蛋白的含量。
HbA1c主要用于糖尿病的长期控制评价和治疗监测，可提示测试前30～90天的平均血糖水平。
测定糖化血红蛋白常用于糖尿病等病症的辅助诊断[1]。
【检验原理】HbA1c的测定是利用抗原、抗体反应直接测定总Hb中HbA1c的百分含量的方法。
样品中总Hb和HbA1c与胶乳有相同的非特异性吸附而固相化，当加入HbA1c的特异性单克隆抗体后形成胶乳-HbA1c-鼠抗人HbA1c单克隆抗体的复合物，此复合物由于羊抗鼠抗体而形成凝集，凝集量因胶乳表面固相化的HbA1c量的不同而不同。
通过测定其吸光度并与HbA1c百分浓度的标准曲线比较后即可求出样品中HbA1c所占Hb的百分比含量。
【主要组成成分】试剂1主要组分缓冲液15mmol/L胶乳0.13%试剂2a主要组分缓冲液15mmol/L试剂2b主要组分羊抗鼠抗体0.08mg/mL鼠抗人单克隆抗体0.05mg/mL试剂3主要组分溶血剂0.5%注：不同批号试剂盒中各组分未经试验不可互换。
【储存条件及有效期】1.试剂原包装在2～8℃储存，有效期为18个月，生产日期、有效期见标签。
2.开口后的试剂在仪器仓中（2～8℃）可稳定30天。
【适用仪器】艾威德AS-420/AS-660/AS-1200；日立HITACHI7020型/7060型/7180型/7600型/LABOSPECT008AS型；贝克曼AU400/AU480/AU640/AU680/ AU2700/AU5400/AU5800/AU5811/AU5821；佳能TBA-FX8/TBA-120FR/ TBA-2000FR；罗氏cobas8000c702/cobas8000c701/cobas8000c502；西门子SIEMENS ADVIA1800/ADVIA2400；雅培ABBOTT ARCHITECT c8000/ARCHITECT c16000/ARCHITECT ci8200；西森美康SYSMEX BM6010/C；科华KHB卓越310/卓越330/卓越400/卓越450/ZY-1200/ZY-1280；迪瑞CS-240/CS-T300/CS-300B/CS-380/CS-400A/CS-400B/CS-600A/ CS-600B/CS-800A/CS-800B/CS-1200/CS-1200ISE/CS-1300B/CS-1400；迈瑞MINDRAY BS-220/BS-330/BS-350E/BS-380/BS-390/BS-400/BS-430/BS-600/ BS-800/BS-2000M；颐兰贝ES-200/ES-380/ES-480；赛诺迈德SUNMATIK-9050型；雷杜Chemray420；英诺华D280；特康TC6010L；锦瑞GS400；普康6066。
GLU文档,糖化血红蛋白(HbA1c)检测标准操作规程
1、方法依据：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司葡萄糖（GLU）测定试剂盒（葡萄糖氧化酶法）测定方法2、适用范围：适用于人血清、血浆葡萄糖的测定。
3、试剂仪器：3.1 试剂：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒。
3.2未开启的试剂盒避光保存于无腐蚀性气体和通风良好的室内，在2℃～8℃有效期为一年。
试剂开瓶后2℃～8℃避光保存可稳定1个月。
试剂不可冰冻。
3.3 仪器：迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪.4、操作程序4.1方法原理葡萄糖被葡萄糖氧化酶氧化后生成过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下，与4-氨基安替比林和对羟基苯甲酸钠缩合，生成醌系色素，通过测定此反应的吸光度可求得葡萄糖的含量。
4.2样本要求空腹血清或血浆。
如血浆在采集30分钟内分离，保存在2℃～8℃可稳定24小时。
4.3上机操作4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”。
4.3.2 校准：4.3.2.1 标准液的准备：校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品，按说明书要求稀释后分装，-20℃冷冻保存，用前提前15分钟从冰箱中取出，复溶到室温后上机检测。
4.3.2.2 校准程序：首次使用校准。
当有以下情况时需重新校准：1）换试剂批号或出现质控漂移时；2）当仪器做完保养后；3）仪器进行零件更换时。
每次试验前用准备好的校准品进行校准，校准通过后进行检测。
4.3.2.3 质控：在标本开始之前做质控，质控通过后方能进行标本的检测。
4.3.3 测试基本参数4.4参考范围3.33～6.11 mmol/L（60～110 mg/dL）（注：各实验室应有自己的参考范围。
）4.5 方法评价线性范围：0.3～28 mmol/L。
样本中含量超出可报告范围，请用生理盐水稀释后测定，结果乘以稀释倍数。
反应曲线异常时应进行重复测定确认。
精密度：批内CV ≤ 3.0%批间CV ≤ 5.0%分析灵敏度：本试剂盒的检测低限不高于0.3 mmol/L。
BIO-RADD10糖化血红蛋白检测系统标准操作规程
BIO-RAD D-10糖化血红蛋白检测系统标准操作规程（一）BIO-RAD D-10糖化血红蛋白检测系统开/关机程序1 开机前准备1.1 检查并打开电源开关。
1.2 检查室温是否在15到30摄氏度之间。
1.3 检查外部废物罐水平1.3.1保证废物罐有充足的空间容纳下一次运行所产生的废物。
1.4检查压力。
1.4.1 从MAINTAIN界面,选择50%缓冲液2并设定流速为1.5ML/min;按开始泵按钮。
1.4.2 监测系统压力3到4分钟.假如压力波动不超过5%,记录系统压力在日期日志上。
1.5 检查泄漏情况:当泵在运行时,打开前下部棉班并用眼观察隔舱是否有液体漏出。
1.6 检查打印纸张的供应。
1.7 检查缓冲液和清洗/稀释溶液水平。
1.8 在LOTINFO界面检查剩余的管注射数,假如注射数剩余不足要更换管。
2 开机2.1检查并打开电源开关。
3 分析前准备3.1在启动程序过程中,操作人员检查:缓冲液1水平充足?缓冲液2水平充足?清洗/稀释溶剂水平充足?废物水平,是否要处理?是否要校正?管支持器温度设定?内部废物环路被封?3.2 在开始运行之前,系统必须处于等待状态.选择运行界面标签来接触运行界面.按启动按纽来初始化启动程序.在进行另外别的操作之前允许系统完成5分钟的启动程序.当启动程序完成系统打印一个日期报告。
3.3在开始启动程序时,一声滴答声被听到.状态栏提示系统正处于运行状态并显示当前操作所剩余时间。
3.4 一旦启动程序完成系统会进入等待状。
4 关机4.1 关闭系统电源4.2 紧急关机在系统必须立即被关闭的事件中,操作者必须评估迫切性并执行以下操作之一:4.2.1停止当前运行,允许系统去完成当前操作,按关闭按钮并等信息提示可以安全地去关系统.关上电源并拔掉电源线.本方法应只用于必要时。
4.3 长时间关机4.3.1 假如D-10将要被长时间关闭超过2星期,依照以下程序来保证系统仍旧处于最佳操作状态。
糖化血清蛋白（GSP）测定试剂盒（果糖胺法）
糖化血清蛋白（GSP）测定试剂盒说明书
（果糖胺法）一、原理：
血清葡萄糖能与白蛋白及其它血清蛋白分子N末端的氨基发生非酶促糖化反应，形成高分子酮胺结构。
此酮胺结构能在碱性环境中与硝基四氮唑蓝NBT 发生还原反应，生成甲月替，并以果糖胺DMF为标准参照物进行比色反应。
二、50管试剂盒组成与配制
1、2mmol/LDMF标准液：0.5ml×2瓶，-20℃保存。
2、牛血清白蛋白：0.5ml×2瓶，-20℃保存。
3、NBT显色剂：60ml×2瓶，避光4℃保存。
4、稳定剂：6ml×1瓶，室温保存。
（如凝固，请水浴加热至透明后再用。
）
三、血清中GSP的检测
混匀，37℃水浴15min。
混匀，530nm，1cm光径，空白管调零，比色。
五、计算公式：
测定管吸光度
×标准液浓度（2mmol/L）=GSPmmol/L
标准管吸光度−标准管吸光度
测定管吸光度
×标准管浓度（2mmol/L）×分子量（249）÷1000=GSPmg/L
标准管吸光度
本试剂盒仅用于科研。
糖化血红蛋白的SOP
糖化血红蛋白检测的SOP预期用途适用于体外定量检测人手指末梢血、静脉全血样本中的糖化血红蛋白的浓度。
检验原理糖化血红蛋白检测试剂盒是硼酸亲和色谱层析法。
试剂盒由层析器、R1试剂、R2试剂组成。
R1试剂包括专门裂解红细胞和沉淀血红蛋白及一种结合糖化血红蛋白的蓝色硼酸共轭物。
当血液加至R1试剂中时，红细胞裂解，并且所有的血红蛋白沉淀，硼酸共轭物与糖化血红蛋白的顺式二醇配合物相结合。
一定量的反应混合物加入到层析器，所有沉淀的血红蛋白与糖化血红蛋白结合或未结合的硼酸共轭物残留到层析器膜上。
任何未结合的硼化物通过R2试剂移除。
该沉淀通过使用分析仪分别检测蓝色（糖化血红蛋白）和红色（总血红蛋白）的颜色强度进行定量分析，从而测定血液样本中糖化血红蛋白的百分比。
样本要求：加了抗凝剂（EDTA、肝素、柠檬酸钠）的样本可在2-8℃保存7天，不能用血红蛋白裂解的样本。
不能冻融。
没有添加抗凝剂的手指末梢血和静脉全血样本采样后要立即检测。
检验方法在检测之前所有的检测试剂应平衡至室温。
分析仪内置定标曲线，测试前不需要定标。
A采集5ul的全血样本至R1试管中，混合均匀，至少反应2分钟，最多不能超过3分钟。
B待全血样本与R1反应完毕后，再次摇晃该试管以便组分充分混合。
打开试管吸取25ul的混合物，加入到层析器中。
注意过程中不要触碰到层析器中的滤膜，也不能让样本有气泡产生。
C当步骤2中的混合物被层析器完全吸收后，再取25ul的R2试剂滴到层吸器上，反应大约10秒。
D待R2试剂被完全吸收后，把层析器放到托盘上，用分析仪进行分析。
E分析仪在每次开机时有自动校准功能，校准成功才能开展上述试验。
参考区间参考区间为：4.3-6.0％检验结果的解释血液中红细胞内的血红蛋白与血糖结合的产物是糖化血红蛋白，血糖和血红蛋白的结合生成糖化血红蛋白是不可逆反应，并与血糖浓度成正比，且保持120天左右，所以可以观测到120天之前的血糖浓度。
糖化血红蛋白测试通常可以反应患者近8至12周的血糖控制情况。
糖化血红蛋白液相色谱仪操作流程
糖化血红蛋白液相色谱仪操作流程1.首先确保糖化血红蛋白检测试剂盒中的所有试剂和标准品未过期。
First, ensure that all reagents and standards in the glycated hemoglobin test kit have not expired.2.打开色谱仪仪器，按照仪器说明书的指示进行初始化操作。
Turn on the chromatograph instrument and follow the instructions in the instrument manual for initialization.3.准备样本，使用吸管或自动吸取器将糖化血红蛋白样本吸取到专用的色谱仪样本瓶中。
Prepare the sample by using a pipette or automatic sampler to draw the glycated hemoglobin sample into the dedicated chromatograph sample bottle.4.加入适量的样本稀释液到样本瓶中，混匀使样本充分溶解。
Add an appropriate amount of sample diluent to the sample bottle, mix well to fully dissolve the sample.5.根据试剂盒说明书，加入相应的试剂到样本中，并混匀。
According to the kit instructions, add the corresponding reagent to the sample and mix well.6.载入样本瓶到色谱仪的样本架上，并关闭样本瓶盖。
Load the sample bottle onto the sample rack of the chromatograph and close the sample bottle cap.7.打开色谱仪的软件，设定分析方法和参数，包括流速、柱温等。
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糖化血红蛋白定量测定试剂盒标准操作程序
1.摘要
本试剂盒供医疗机构用于体外定量测定人全血中的糖化血红蛋白的百分含量。
2.适用范围
程序适用于日立7600自动生化分析仪检测人全血中的糖化血红蛋白含量。
3.职责
使用日立7600自动生化分析仪进行测定总蛋白浓度的工作人员要严格按照本SOP程序进行，室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4.检测方法
上海科华生物工程股份有限公司生产的糖化血红蛋白定量测定试剂盒采用的是酶法。
5.原理
本试剂盒测定人全血糖化血红蛋白（HbA1c）的含量采用百分含量表示。
采用酶法测定，全血样本中血红蛋白（THb）被特定的蛋白酶裂解，其中糖化血红蛋白（HbA1c）裂解产生果糖氨基酸，然后果糖氨基酸在果糖氨基酸氧化酶（FAOD）作用下产生H2O2，H2O2经POD与发色剂偶联Trinder反应，在700nm测定其吸光度。
通过使用合适的校准品建立校准曲线，在一定浓度范围内糖化血红蛋白（HbA1c）百分含量与吸光度变化成正比。
6.仪器
日立7600自动生化分析仪
7.试剂
7.1试剂来源：
上海科华生物工程股份有限公司提供
7.2试剂瓶内主要成分：
R1a：MES缓冲液、蛋白酶
R1b：MES缓冲液、NaCl
R2：FAOD、POD、发色剂
溶血剂：MOPS缓冲液、表面活性剂
糖化血红蛋白校准品a、b：由新鲜人EDTA或肝素抗凝全血（HBsAg，抗HIV1/2、抗
HCV、TP抗体均为阴性）冷冻干燥制备而成，冻干品。
不同批号试剂盒各组分请勿混用。
7.3试剂稳定性：
未打开试剂在2-8℃避光保存可至失效期。
校准品使用后应密封保存，以免液体挥发。
8.标准品和质量控制
8.1校准程序：
使用某某公司的校准品对自动分析仪进行校准。
按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品通过合适的数学模型绘制校准曲线。
8.2质控品：
某某公司提供的生化复合定值质控血清作为室内质控品。
每日在测定前做一次质控。
该质控品为干粉包装，在2-8℃冰箱可稳定到失效期，使用前用5ml去离子水复溶，待质控物充分溶解（大约30分钟）后使用。
8.3质控数据管理：
按程序对检验后的质控后结果进行转换，及时质控数据进行分析处理，如出现失控值，应及时分析失控原因，并填写好相关失控记录。
8.4质控判断规则：
按《Westgard多规则质控方法测定标准操作程序》
8.5室间质评：
分别参加某地区室间质评，对回报的室间质评结果按《室间质量评价程序》进行处理。
9.标本
9.1标本要求：
EDTA或肝素抗凝血：吸取标本前应立即充分混匀抗凝全血使红细胞均匀分布，避
免产生气泡。
20μl抗凝血加250μl溶血剂于一检测管或样本杯中，轻轻用旋涡或用
震动混匀器混匀，避免产生气泡，混匀后放置。
当溶血物变为澄清红色即可使用（溶
血剂作用时间37℃大约15分钟；室温大约30分钟）。
9.2标本拒收：
由实验室人员核收送来标本，如有溶血、已被污染、标识不清或与申请单不符状况，一律要求重新留取标本。
9.3标本处理：
收集编号后离心获取血清/血浆以备检测使用。
10.测定程序：
10.1分析参数：
详见参数表。
10.2操作步骤：
签收样本→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。
10.3获取结果：
在日立7600仪器上或日立7600传送的中文系统电脑上查找相应结果。
10.4结果报告：
对检验后的结果进行审核，系统分析，判断结果的可报告性。
可报告的结果直接发报告，对不可报告结果进行复检后发报告。
11.计算
标准品校准项目后，测定室内质控，质控结果符合质控要求后方可测定样本。
无需手工计算，每个标本的结果自动打印。
12.废液处理
参阅检验科《安全手册》废液处理标准规程处理。
13.操作性能：
13.1可报告范围：
要求试剂盒在样本浓度为4.0～15.0%（此数值可以追溯到美国NGSP项目）时，整个反应呈线性线性相关系数r应不小于0.990。
13.2特异性/干扰：
样本中抗坏血酸低于4mg/dl，胆红素低于10mg/dl，葡萄糖低于2400mg/dl，甘油三酯低于200mg/dl，尿酸低于5mg/dl对测定没干扰。
HbS、HbC、HbE对测定没有干扰；乙酸化HbAIc、氨基甲酰化HbAlc、不稳定的HbAlc对测定没有干扰。
HbF高于10%对测定有显著影响，使得测定不准确。
13.3精密度：
批内精密度CV≤10%；
批间相对极差≤15%
13.4准确度：
用质控品做样本，其测定结果应在该批质控品规定的范围内。
13.5分析灵敏度：
测试浓度约为5.5%的样本，吸光度差值应≥0.015A。
14.注意事项：
14.1试剂盒仅用于体外诊断。
14.2全血等标本有些可能含有感染性成分，因此应以具有感染危险性而充分注意操作。
14.3测试全血样本前，全血应充分混匀后再吸取样品溶血。
14.4测定样本时，溶血剂处理全血标本必须按照全血样本：溶血剂=20:250（V/V）的比
例进行溶血处理，处理后的样本直接测试，切勿稀释，如标本测定值超出线性范围，
不需要稀释重新测定，直接报结果大于15%
14.5测试全血质控品，应与标本测试一样进行溶血处理后进行测试。
14.6本试剂中具有一定腐蚀性，应避免与皮肤及粘膜。
如不慎接触，应用大量清水冲洗，
如误服，应立即上医院诊治。
15.参考范围：
≤7%；各实验室应建立自己的参考值范围。
16.临床意义：
糖化血红蛋白（HbA1c）是人血红蛋白的成份之一，是血红蛋白在高血糖的作用下发生缓慢连续的非酶促糖化反应的产物，通常占总血红蛋白(THb)的5%～8%，主要成分为HbA1c，正常生理条件下非酶促糖化反应中生成量与反应物成正比。
由于血红蛋白浓度保持相对稳定，糖化水平主要决定于葡萄糖的浓度，也与血红蛋白和葡萄糖接触时间长短有关，由于葡萄糖可以自由透过红细胞膜，血红蛋白的半衰期为60～90天，故HbA1c的测定可反应2～3个月的平均血糖水平。
糖化血红蛋白（HbA1c）的作用机制是影响细胞外信息传导途径，改变细胞内活性因子的浓度及正常血红蛋白的结构和功能。
糖化血红蛋白（HbA1c）持续升高可以导致糖尿病人的并发症的发生的危险性增加。
因此测定糖化血红蛋白（HbA1c）作为糖尿病的诊断和评价糖尿病的控制，是一项具有重要意义的实用指标。
17.支持性文件：
17.1日立7600自动生化分析仪使用说明书。
17.2日立7600自动生化分析仪分析参数。
17.3上海科华生物工程股份有限公司提供的试剂说明书。
用户可根据自身情况添加支持性文件。
18.参考文献
1.Weichselbaum,P.E., Am.J.Clin.Path.16:40(1946).
2.Doumas.B.T.,Clin.Chem.27:1642(1981).。