脱落细胞基本技术
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脱落细胞基本技术
《脱落细胞学》 脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
（二）自然分泌液的收集法 自然分泌液包括痰液、尿液、前列腺液、乳头溢液等。 自然分泌液包括痰液、尿液、前列腺液、乳头溢液等。 • 1．痰液涂片检查 因痰液为支气管等呼吸道的分泌物， 因痰液为支气管等呼吸道的分泌物，对支气管肺癌和呼
吸道的疾病诊断具有重要价值。 吸道的疾病诊断具有重要价值。 • 泌尿道的上皮、 2．尿液涂片检查 泌尿道的上皮、炎症细胞及恶性肿瘤细胞等均可在腔内 脱落，随尿液排出，因此，收集尿液细胞作检查，对泌尿道肿痛及某些疾病 脱落，随尿液排出，因此，收集尿液细胞作检查， 诊断有一定意义。 诊断有一定意义。 • 3．前列腺液涂片检查 采用前列腺按摩法取得分泌物作涂片， 采用前列腺按摩法取得分泌物作涂片，对前列腺炎
《脱落细胞学》 脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
1．细针吸取细胞学穿刺部位的选择
正确选择穿刺部位是一个十分重要的问题
，实践证明，对肿块穿刺部位的选择应参考下列原则进行： 实践证明，对肿块穿刺部位的选择应参考下列原则进行： • • • • （1）肿块暴露较好，操作较方便。 肿块暴露较好，操作较方便。 （2）怀疑原发性病灶的肿块。 怀疑原发性病灶的肿块。 （3）淋巴结或肿块较大、较硬，无液化、坏死或继发感染者。 淋巴结或肿块较大、较硬，无液化、坏死或继发感染者。 （4）穿刺点应避开体表血管、炎症及溃疡等部位，且肿物邻近无重要神经 穿刺点应避开体表血管、炎症及溃疡等部位， 、血管、脏器。 血管、脏器。
《脱落细胞学》 脱落细胞学》 台州学院医学院检验系
第二节 涂片制作
良好、适宜的涂片是脱落细胞学能否正确诊断的重要条件之一。 良好、适宜的涂片是脱落细胞学能否正确诊断的重要条件之一。 一、涂片制备的原则： 涂片制备的原则： • 第一，在标本制片之前，要把材料准备好，如载玻片、推片、盖玻片、滴管 第一，在标本制片之前，要把材料准备好，如载玻片、推片、盖玻片、 等，各种用品均要求清洁、干燥，载玻片要求表面光滑，无油渍、无划痕及 各种用品均要求清洁、干燥，载玻片要求表面光滑，无油渍、 破损等。 破损等。 • 第二，标本采集后，应尽快做出处理、以最快的速度制片， 第二，标本采集后，应尽快做出处理、以最快的速度制片，否则标本凝固或 pH值改变，引起细胞形态变化或自溶、腐败等，影响诊断结果。 pH值改变，引起细胞形态变化或自溶、腐败等，影响诊断结果。 值改变 • 第三，制片时操作应轻巧，以免损伤细胞。涂片的厚薄应适宜， 第三，制片时操作应轻巧，以免损伤细胞。涂片的厚薄应适宜，太厚则细胞 过多、重叠．不易染色且细胞形态不易辨别；太薄则细胞稀少， 过多、重叠．不易染色且细胞形态不易辨别；太薄则细胞稀少，影响阳性的 检出率。一张好的涂片应是分布均匀、厚薄适宜，涂片呈舌状，分为头、 检出率。一张好的涂片应是分布均匀、厚薄适宜，涂片呈舌状，分为头、体 、尾三部分，镜下各个视野均有细胞成分，红细胞无明显重叠现象。 尾三部分，镜下各个视野均有细胞成分，红细胞无明显重叠现象。
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（二）自然分泌液的收集法 自然分泌液包括痰液、尿液、前列腺液、乳头溢液等。 自然分泌液包括痰液、尿液、前列腺液、乳头溢液等。 • 1．痰液涂片检查 因痰液为支气管等呼吸道的分泌物， 因痰液为支气管等呼吸道的分泌物，对支气管肺癌和呼
吸道的疾病诊断具有重要价值。 吸道的疾病诊断具有重要价值。 • 泌尿道的上皮、 2．尿液涂片检查 泌尿道的上皮、炎症细胞及恶性肿瘤细胞等均可在腔内 脱落，随尿液排出，因此，收集尿液细胞作检查，对泌尿道肿痛及某些疾病 脱落，随尿液排出，因此，收集尿液细胞作检查， 诊断有一定意义。 诊断有一定意义。 • 3．前列腺液涂片检查 采用前列腺按摩法取得分泌物作涂片， 采用前列腺按摩法取得分泌物作涂片，对前列腺炎
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1．细针吸取细胞学穿刺部位的选择
正确选择穿刺部位是一个十分重要的问题
，实践证明，对肿块穿刺部位的选择应参考下列原则进行： 实践证明，对肿块穿刺部位的选择应参考下列原则进行： • • • • （1）肿块暴露较好，操作较方便。 肿块暴露较好，操作较方便。 （2）怀疑原发性病灶的肿块。 怀疑原发性病灶的肿块。 （3）淋巴结或肿块较大、较硬，无液化、坏死或继发感染者。 淋巴结或肿块较大、较硬，无液化、坏死或继发感染者。 （4）穿刺点应避开体表血管、炎症及溃疡等部位，且肿物邻近无重要神经 穿刺点应避开体表血管、炎症及溃疡等部位， 、血管、脏器。 血管、脏器。
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第二节 涂片制作
良好、适宜的涂片是脱落细胞学能否正确诊断的重要条件之一。 良好、适宜的涂片是脱落细胞学能否正确诊断的重要条件之一。 一、涂片制备的原则： 涂片制备的原则： • 第一，在标本制片之前，要把材料准备好，如载玻片、推片、盖玻片、滴管 第一，在标本制片之前，要把材料准备好，如载玻片、推片、盖玻片、 等，各种用品均要求清洁、干燥，载玻片要求表面光滑，无油渍、无划痕及 各种用品均要求清洁、干燥，载玻片要求表面光滑，无油渍、 破损等。 破损等。 • 第二，标本采集后，应尽快做出处理、以最快的速度制片， 第二，标本采集后，应尽快做出处理、以最快的速度制片，否则标本凝固或 pH值改变，引起细胞形态变化或自溶、腐败等，影响诊断结果。 pH值改变，引起细胞形态变化或自溶、腐败等，影响诊断结果。 值改变 • 第三，制片时操作应轻巧，以免损伤细胞。涂片的厚薄应适宜， 第三，制片时操作应轻巧，以免损伤细胞。涂片的厚薄应适宜，太厚则细胞 过多、重叠．不易染色且细胞形态不易辨别；太薄则细胞稀少， 过多、重叠．不易染色且细胞形态不易辨别；太薄则细胞稀少，影响阳性的 检出率。一张好的涂片应是分布均匀、厚薄适宜，涂片呈舌状，分为头、 检出率。一张好的涂片应是分布均匀、厚薄适宜，涂片呈舌状，分为头、体 、尾三部分，镜下各个视野均有细胞成分，红细胞无明显重叠现象。 尾三部分，镜下各个视野均有细胞成分，红细胞无明显重叠现象。
脱落细胞检查技术和临床应用评价讲解
脱落细胞检查技术和 临床应用评价
第一节
标本采集和涂片制作方法
一、标本采集 （一）直视采集法 身体直视部位直接用刮片刮取、吸管 吸取、刷洗、刷取等取细液涂片检查： 2．尿液涂片检查： 3．乳头溢涂片检查： 4．前列腺液涂片检查。
（三）灌洗洗 向空腔器官或腹腔、盆腔（剖腹探查 时）灌注一定量生理盐水冲洗，使其细 胞成分脱落于液体中，收集灌洗液离心 制片，作细胞学检查。
三、细胞学诊断的质量管理体系 1.标本采集 2.制片过程 3.阅片诊断 4.理论学习 5.复查会诊 6.定期随访
第三节 脱落细胞学检查的 临床应用评价
一、脱落细胞学诊断的优势 1.安全，病人痛苦少，无不良反应可多次重 复取材； 2.所需设备简单，操作方便，可用于普查； 3.癌细胞检出率较高，一般在60%以上； 4.采集的细胞代表范围较大。
思考题
1.常用的标本采集方法有那些？ 2.涂片有那些基本要求？ 3.涂片为什么要求固定？ 4.常用的染色方法有几种，各自的临床意义 是什么？ 5.简述脱落细胞学诊断的优势和不足。
二、涂片制作方法 （一）涂片前准备工作及涂片方法 1．涂片前准备工作 （1）取材后尽快制片。 （2）避免挤压以防止损伤细胞。 （3）涂片要均匀，厚薄要适度。 （4）玻片要清洁。 • （5）涂片前先在玻片上涂薄层粘附剂， （6）至少涂两张玻片，以避免漏诊。 • （7）及时玻片编号 。
2．涂片制备方法 （1）推片法：用推片用30度夹角将玻 片上检液轻轻向左推。 （2）涂抹法：由玻片中心经顺时针方 向外转圈涂抹；或从玻片一端开始平行涂 抹。 （3）压拉涂片法：将标本夹于横竖交 叉的两张玻片之间，然后移动两张玻片， 使之重叠，再边压边拉，获得两张涂片。
各染料都具有两种性质，即产生颜 色；和与被染组织形成亲和力。这两种 性质主要由发色基因和助色基因所产生 的。 发色基团：苯的衍生物具有可见光 区吸收带。其产生颜色的醌式环称为发 色基团。 助色基团：是一种能使化合物发生 电离作用的辅助原子团（酸碱性基团）。 它能使染色的色泽进一步加深，并使其 与被染色组织具有亲和力。
第一节
标本采集和涂片制作方法
一、标本采集 （一）直视采集法 身体直视部位直接用刮片刮取、吸管 吸取、刷洗、刷取等取细液涂片检查： 2．尿液涂片检查： 3．乳头溢涂片检查： 4．前列腺液涂片检查。
（三）灌洗洗 向空腔器官或腹腔、盆腔（剖腹探查 时）灌注一定量生理盐水冲洗，使其细 胞成分脱落于液体中，收集灌洗液离心 制片，作细胞学检查。
三、细胞学诊断的质量管理体系 1.标本采集 2.制片过程 3.阅片诊断 4.理论学习 5.复查会诊 6.定期随访
第三节 脱落细胞学检查的 临床应用评价
一、脱落细胞学诊断的优势 1.安全，病人痛苦少，无不良反应可多次重 复取材； 2.所需设备简单，操作方便，可用于普查； 3.癌细胞检出率较高，一般在60%以上； 4.采集的细胞代表范围较大。
思考题
1.常用的标本采集方法有那些？ 2.涂片有那些基本要求？ 3.涂片为什么要求固定？ 4.常用的染色方法有几种，各自的临床意义 是什么？ 5.简述脱落细胞学诊断的优势和不足。
二、涂片制作方法 （一）涂片前准备工作及涂片方法 1．涂片前准备工作 （1）取材后尽快制片。 （2）避免挤压以防止损伤细胞。 （3）涂片要均匀，厚薄要适度。 （4）玻片要清洁。 • （5）涂片前先在玻片上涂薄层粘附剂， （6）至少涂两张玻片，以避免漏诊。 • （7）及时玻片编号 。
2．涂片制备方法 （1）推片法：用推片用30度夹角将玻 片上检液轻轻向左推。 （2）涂抹法：由玻片中心经顺时针方 向外转圈涂抹；或从玻片一端开始平行涂 抹。 （3）压拉涂片法：将标本夹于横竖交 叉的两张玻片之间，然后移动两张玻片， 使之重叠，再边压边拉，获得两张涂片。
各染料都具有两种性质，即产生颜 色；和与被染组织形成亲和力。这两种 性质主要由发色基因和助色基因所产生 的。 发色基团：苯的衍生物具有可见光 区吸收带。其产生颜色的醌式环称为发 色基团。 助色基团：是一种能使化合物发生 电离作用的辅助原子团（酸碱性基团）。 它能使染色的色泽进一步加深，并使其 与被染色组织具有亲和力。
脱落细胞学和细胞蜡块的区别
脱落细胞学和细胞蜡块的区别全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：脱落细胞学和细胞蜡块都是生物学领域中重要的研究对象，它们在细胞生物学和病理学方面扮演着重要的角色。
虽然它们都是从细胞中提取出来的物质，但在性质和用途上有着明显的区别。
下面将详细介绍脱落细胞学和细胞蜡块的区别。
1. 定义：脱落细胞学是研究从皮肤、口腔、泌尿道等体表黏膜中脱落的细胞的学科。
这些细胞通常通过刮擦或盐水冲洗等方法采集，然后在显微镜下观察其形态和结构，用于临床诊断和疾病监测。
而细胞蜡块是在组织标本中应用于病理学检测的常见技术，是将组织固定在蜡块中，然后切割成薄片以供显微镜观察。
2. 采集方式：脱落细胞学主要通过非侵入性的方法采集细胞样本，如刮擦、拭子采集等，对患者的伤害较小，可以直接从患部获得细胞样本。
而细胞蜡块需要进行组织切片和固定等处理，通常需要手术或活检进行组织采集，对患者有一定的伤害。
3.应用领域：脱落细胞学主要应用于早期诊断和筛查，如宫颈癌细胞学检测、尿液细胞学检测等，可以帮助医生及早发现疾病并给予治疗。
而细胞蜡块常用于病理学检测，用于明确病变性质、细胞来源、异型增生等，对恶性肿瘤和疾病的诊断起着至关重要的作用。
4.检测信息：脱落细胞学一般用于细胞学检测，可以观察到细胞的形态、数量、染色质状态、核仁情况等信息，对于细胞的生长状态和病理变化提供重要依据。
而细胞蜡块则提供了组织学的信息，可以观察到细胞在组织中的分布、形态、结构等信息，更有利于病理诊断。
5.技术发展：随着科学技术的不断发展和进步，脱落细胞学和细胞蜡块的检测技术也在不断改进和完善。
脱落细胞学中引入了液基细胞学技术，提高了细胞检测的准确性和灵敏度；细胞蜡块中引入了免疫组织化学染色技术，增加了组织学信息的丰富性和准确性。
脱落细胞学和细胞蜡块虽然都是细胞学研究的一部分，但在定义、采集方式、应用领域、检测信息和技术发展等方面存在着明显的区别。
它们各自在医学研究和临床诊断中发挥着不可替代的作用，为医学的发展和进步提供了重要的支持和保障。
脱落细胞学基本检验技术
临床基础检验学技术
脱落细胞学基本检验技术
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
第二十六章
脱落细胞学基本知识和检验技术
吉林医药学院 郭素红
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
概述
➢脱落细胞学 (exfoliative cytology) 检验是采集人体各 部位管腔器官表面的脱落细胞，经染色后在显微镜下观察细 胞的形态，并作出细胞学诊断的一门临床检验学科，又名诊 断细胞学 (diagnostic cytology) 或临床细胞学 (clinical cytology)，属于临床病理学的一个分支。
如脂肪肉瘤、骨肉瘤
增生
恶性淋巴瘤
--
白血病
良性畸胎瘤
恶性畸胎瘤
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
受累范围 细胞膜 细胞体积 核染色质 细胞器 溶酶体 后期 炎症反应
凋亡
坏死
多为单个细胞 仍保持完整性 减小、固缩 聚集在核膜下、呈半月状 仍保持完整，未崩解 保持完整，酶不外溢 凋亡小体、被吞噬 不引起周围的炎症反应
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
分布: 体表及与外界直接相通的腔道，如皮肤、口腔、 咽、食管、子宫颈外口等部位。
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
脱落细胞学基本检验技术
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
第二十六章
脱落细胞学基本知识和检验技术
吉林医药学院 郭素红
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
概述
➢脱落细胞学 (exfoliative cytology) 检验是采集人体各 部位管腔器官表面的脱落细胞，经染色后在显微镜下观察细 胞的形态，并作出细胞学诊断的一门临床检验学科，又名诊 断细胞学 (diagnostic cytology) 或临床细胞学 (clinical cytology)，属于临床病理学的一个分支。
如脂肪肉瘤、骨肉瘤
增生
恶性淋巴瘤
--
白血病
良性畸胎瘤
恶性畸胎瘤
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
受累范围 细胞膜 细胞体积 核染色质 细胞器 溶酶体 后期 炎症反应
凋亡
坏死
多为单个细胞 仍保持完整性 减小、固缩 聚集在核膜下、呈半月状 仍保持完整，未崩解 保持完整，酶不外溢 凋亡小体、被吞噬 不引起周围的炎症反应
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
分布: 体表及与外界直接相通的腔道，如皮肤、口腔、 咽、食管、子宫颈外口等部位。
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
脱落细胞学的基本知识
脱落细胞学的基本知识
·
一、标本采集
标本的采集是脱落细胞学检验的基础也是细胞学 诊断成败的关键之一 .
（一）标本的采集原则
1.正确的选择采集部位，尽可能从病变区直接采取细 胞，有经验的医生采集标本的有效成份比无经验的 好，尤其外观观查，更显得尤为重要（胃镜下取材 涂片，支气管镜下取材，肠镜下，B超下取材等都 需要有经验圆形，直径12—15 μm，
核圆形或椭圆形，直经8-10μm，核居中或略偏位，核浆比
为，（1：0.5-1）成团聚集，分界不清，瑞氏染色，核染
粉红色，可见一小而清晰的核仁，胞浆少，嗜硷性，染淡
兰色。
· 外基底细胞
内底层之上2—3 层，在涂片中，细胞直径15—30μm，
比内底层细胞稍大，常成群分布，圆形或椭圆形，胞浆较 丰富，，嗜硷性，核较大圆、椭圆、核染色质疏松，核浆 比1：（1—2）
28
· 2.固缩性改变
· 可能与细胞器和染色质脱水有关，表现为整个细胞 变小，固缩变形，胞质染成深红色，胞核染色质致 密深兰色，核边皱缩变形进而呈致密无结构团块。 使细胞核与胞质之间形成空隙，称核周晕。最后细 胞核破裂为碎片或溶解成淡染的核阴影，称影细胞。 表层鳞状上皮细胞退变表现为固缩性，胞质内常见 细菌或异常颗粒，底层或中层细胞退变表现为肿胀 性，脱落的柱状上皮细胞比鳞状上皮更容易发生退 变。表现为细胞横断分离或纤毛消失，有时需要根 据残存的终板和锥形外观来判断是纤毛柱状上皮细 胞。
核居细胞中下部，直经8-12μm，呈卵圆形，
顺细胞长轴排列，染色质颗粒细而均匀，染 色较淡，有时见1-2个核仁。核边清晰，有时 可见双核或多核细胞。
22
纤毛柱状上皮细胞
23
· 2.粘液柱状上皮细胞 细胞肥大，呈卵圆形、锥形或圆柱形，胞核卵圆形， 居底部，其大小染色和纤毛柱状上皮细胞相似，胞 质丰富，含大量粘液，着色浅而透明，可见胞质内 有巨大空泡，核被挤压至底部，呈月牙形。
·
一、标本采集
标本的采集是脱落细胞学检验的基础也是细胞学 诊断成败的关键之一 .
（一）标本的采集原则
1.正确的选择采集部位，尽可能从病变区直接采取细 胞，有经验的医生采集标本的有效成份比无经验的 好，尤其外观观查，更显得尤为重要（胃镜下取材 涂片，支气管镜下取材，肠镜下，B超下取材等都 需要有经验圆形，直径12—15 μm，
核圆形或椭圆形，直经8-10μm，核居中或略偏位，核浆比
为，（1：0.5-1）成团聚集，分界不清，瑞氏染色，核染
粉红色，可见一小而清晰的核仁，胞浆少，嗜硷性，染淡
兰色。
· 外基底细胞
内底层之上2—3 层，在涂片中，细胞直径15—30μm，
比内底层细胞稍大，常成群分布，圆形或椭圆形，胞浆较 丰富，，嗜硷性，核较大圆、椭圆、核染色质疏松，核浆 比1：（1—2）
28
· 2.固缩性改变
· 可能与细胞器和染色质脱水有关，表现为整个细胞 变小，固缩变形，胞质染成深红色，胞核染色质致 密深兰色，核边皱缩变形进而呈致密无结构团块。 使细胞核与胞质之间形成空隙，称核周晕。最后细 胞核破裂为碎片或溶解成淡染的核阴影，称影细胞。 表层鳞状上皮细胞退变表现为固缩性，胞质内常见 细菌或异常颗粒，底层或中层细胞退变表现为肿胀 性，脱落的柱状上皮细胞比鳞状上皮更容易发生退 变。表现为细胞横断分离或纤毛消失，有时需要根 据残存的终板和锥形外观来判断是纤毛柱状上皮细 胞。
核居细胞中下部，直经8-12μm，呈卵圆形，
顺细胞长轴排列，染色质颗粒细而均匀，染 色较淡，有时见1-2个核仁。核边清晰，有时 可见双核或多核细胞。
22
纤毛柱状上皮细胞
23
· 2.粘液柱状上皮细胞 细胞肥大，呈卵圆形、锥形或圆柱形，胞核卵圆形， 居底部，其大小染色和纤毛柱状上皮细胞相似，胞 质丰富，含大量粘液，着色浅而透明，可见胞质内 有巨大空泡，核被挤压至底部，呈月牙形。
脱落细胞学
脱落细胞学摘要脱落细胞学是研究脱落细胞在生物体内的生理功能和病理机制的学科。
脱落细胞包括表皮细胞、粘膜细胞等在生物体内自然脱离或被排泄出来的细胞。
本文将探讨脱落细胞在健康和疾病状态下的重要性、研究方法以及相关领域的最新进展。
前言脱落细胞是生物体内一种重要的细胞类型，它们在维持机体稳态、免疫反应、疾病诊断等方面发挥着重要作用。
脱落细胞学作为一个新兴跨学科领域，正在深入探索脱落细胞的奥秘。
本文将从脱落细胞的定义、生理功能、病理意义以及研究方法等方面进行介绍。
一、脱落细胞的定义脱落细胞指的是在生物体内自然脱离或被排泄出来的细胞，包括但不限于表皮细胞、粘膜细胞等。
这些细胞往往携带着重要的信息，可以反映细胞内环境的变化，因此被广泛应用于生理学研究、临床诊断等领域。
二、脱落细胞的生理功能脱落细胞在机体内具有多种重要生理功能，包括维护皮肤和黏膜的完整性、促进伤口愈合、参与免疫反应等。
此外，脱落细胞还可以释放细胞外囊泡，传递信号分子，影响周围细胞的生理活动，起到相互调控的作用。
三、脱落细胞在疾病中的作用在一些疾病状态下，脱落细胞的数量或质量会发生改变，反映出机体的病理状态。
比如，在肿瘤、炎症、免疫性疾病等疾病中，脱落细胞的分泌和功能异常，可能导致疾病的发生和发展，因此研究脱落细胞在疾病中的作用对于疾病的诊断和治疗具有重要意义。
四、脱落细胞的研究方法目前，研究脱落细胞的方法主要包括细胞培养、流式细胞术、原位杂交、转录组学、蛋白质组学等技术。
这些方法的应用使得我们能够深入了解脱落细胞的特征、功能及其在疾病中的作用机制，为脱落细胞学的发展提供了重要的技术支持。
结论脱落细胞学作为一个新兴的交叉学科领域，正在引起越来越多研究者的关注。
通过深入研究脱落细胞的生理功能和病理机制，有望为临床诊断、药物治疗以及生物医学研究提供新的思路和方法。
相信随着科学技术的不断发展，脱落细胞学必将取得更多重要成果，推动医学科学的进步和发展。
脱落细胞学检查技术及基本知识
各1min • 染核：苏木素染3～5min • 分色：1％盐酸中数秒，水洗 • 蓝化：置饱和碳酸锂溶液中1min，水洗 • 脱水：50％、70％、80％、95％乙醇各1min • 染浆：置于橘黄G液中染2～4min→95％乙醇洗2次→置于
EA36染液中4～5min • 脱水：95％、无水乙醇各1～2min→二甲苯透明2～
05.03e.2.0血24 片自然干燥后即可镜检。
21
第二节 显微镜检查
一、阅片
要求：核对送检单与涂片的编号；了解病史及临 床情况与送检目的；涂片应封固；先低倍镜逐个 视野仔细阅片每个视野部分重叠，以免遗漏；找 到具有诊断意义或值得讨论的细胞，要作标记。
观察项目：涂片中的细胞成分；细胞的排列方式； 一群细胞的毗邻关系；单个细胞的特征；核浆比 例；细胞的退变情况；涂片背景中细胞成分和非 细胞成分。
1) 缓冲液作用：染色对氢离子浓度是十分敏感的， 据观察 pH 值的改变，可使蛋白质与染料形成的化 合物重新离解。 缓冲液须保持 一定的 pH 使染色稳 定， pH 一般在 6.4~6.8 ，偏碱性染料可与缓冲液中 酸基起 中和作用，偏酸性染料则与缓冲液中的碱基
起中和作用，使 pH 恒定。
2) 缓冲液配制（ pH6.4~6.8 ，弱酸性）：
细胞的染色既有物理的吸附作用，又有化学 的亲和作用，各种细胞成分化学性质不同， 对各种染料的亲和力也不一样。
⑴.血红蛋白，嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与 酸性染料伊红结合，染红色，称为嗜酸性物 质；
⑵细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性蛋白质， 与碱性染料美蓝或天青结合，染蓝色，称为 嗜碱性物质；
⑶中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结 合，染淡紫红色，称为中性物质。
11
注意事项：
EA36染液中4～5min • 脱水：95％、无水乙醇各1～2min→二甲苯透明2～
05.03e.2.0血24 片自然干燥后即可镜检。
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第二节 显微镜检查
一、阅片
要求：核对送检单与涂片的编号；了解病史及临 床情况与送检目的；涂片应封固；先低倍镜逐个 视野仔细阅片每个视野部分重叠，以免遗漏；找 到具有诊断意义或值得讨论的细胞，要作标记。
观察项目：涂片中的细胞成分；细胞的排列方式； 一群细胞的毗邻关系；单个细胞的特征；核浆比 例；细胞的退变情况；涂片背景中细胞成分和非 细胞成分。
1) 缓冲液作用：染色对氢离子浓度是十分敏感的， 据观察 pH 值的改变，可使蛋白质与染料形成的化 合物重新离解。 缓冲液须保持 一定的 pH 使染色稳 定， pH 一般在 6.4~6.8 ，偏碱性染料可与缓冲液中 酸基起 中和作用，偏酸性染料则与缓冲液中的碱基
起中和作用，使 pH 恒定。
2) 缓冲液配制（ pH6.4~6.8 ，弱酸性）：
细胞的染色既有物理的吸附作用，又有化学 的亲和作用，各种细胞成分化学性质不同， 对各种染料的亲和力也不一样。
⑴.血红蛋白，嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与 酸性染料伊红结合，染红色，称为嗜酸性物 质；
⑵细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性蛋白质， 与碱性染料美蓝或天青结合，染蓝色，称为 嗜碱性物质；
⑶中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结 合，染淡紫红色，称为中性物质。
11
注意事项：
第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
✓恶性肿瘤: 上皮组织的统称为“癌”(鳞癌,腺癌) 中胚层组织的统称为“肉瘤”(脂肪肉瘤)
临床基础检验学技术
人类常见肿瘤的分类和术语
组织起源
鳞状上皮组织 柱状上皮组织 间皮组织 中胚层组织 淋巴组织 血细胞 多种组织组成
良性肿瘤
恶性肿瘤
乳头状瘤
鳞状上皮细胞癌、膀胱上皮细胞癌
息肉
腺癌、黏液表皮样癌
良性间皮瘤
副基底层细胞
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
(3)中层细胞 ① 圆/菱/多边形, 30～40μm
② 核/质比为1：2～3
(4)表层细胞 最大
① 多角形,40～60μm ② 核小而深染,核/质比为
1：3～5
角化前 不全角化 完全角化
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
建巴氏染色法，并于1954年编著《脱落细胞学图谱》 50年代 我国杨大望教授推广应用脱落细胞学技术 70年代 针吸细胞学的开展 80年代 应用液基细胞学检验技术（LBC）
临床基础检验学技术
主要内容
第一节 正常细胞形态学 第二节 良性病变细胞形态学 第三节 肿瘤细胞形态学 第四节 标本采集与处理 第五节 常用染色方法 第六节 脱落细胞学检验病理学诊断及应用评价
二、细胞死亡
程序性死亡称为凋亡； 发生于某种特定疾病的死亡称为坏死
1.凋亡 多发生于淋巴细胞 细胞核：核破裂或凋亡小体
细胞质：皱缩，膜破裂
恶性淋巴瘤凋亡细胞（淋巴结涂片）
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
2.坏死
理化损伤、制备涂片不当或部分癌细胞。 常缺乏典型形态学表现。
1.移形上皮表层细胞（大圆上皮细胞） 2.移形上皮中层细胞（尾形上皮细胞） 3.移形上皮底层细胞（小圆上皮细胞）
临床基础检验学技术
人类常见肿瘤的分类和术语
组织起源
鳞状上皮组织 柱状上皮组织 间皮组织 中胚层组织 淋巴组织 血细胞 多种组织组成
良性肿瘤
恶性肿瘤
乳头状瘤
鳞状上皮细胞癌、膀胱上皮细胞癌
息肉
腺癌、黏液表皮样癌
良性间皮瘤
副基底层细胞
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
(3)中层细胞 ① 圆/菱/多边形, 30～40μm
② 核/质比为1：2～3
(4)表层细胞 最大
① 多角形,40～60μm ② 核小而深染,核/质比为
1：3～5
角化前 不全角化 完全角化
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
建巴氏染色法，并于1954年编著《脱落细胞学图谱》 50年代 我国杨大望教授推广应用脱落细胞学技术 70年代 针吸细胞学的开展 80年代 应用液基细胞学检验技术（LBC）
临床基础检验学技术
主要内容
第一节 正常细胞形态学 第二节 良性病变细胞形态学 第三节 肿瘤细胞形态学 第四节 标本采集与处理 第五节 常用染色方法 第六节 脱落细胞学检验病理学诊断及应用评价
二、细胞死亡
程序性死亡称为凋亡； 发生于某种特定疾病的死亡称为坏死
1.凋亡 多发生于淋巴细胞 细胞核：核破裂或凋亡小体
细胞质：皱缩，膜破裂
恶性淋巴瘤凋亡细胞（淋巴结涂片）
临床基础检验学技术 第二十六章 脱落细胞学基本知识和检验技术
2.坏死
理化损伤、制备涂片不当或部分癌细胞。 常缺乏典型形态学表现。
1.移形上皮表层细胞（大圆上皮细胞） 2.移形上皮中层细胞（尾形上皮细胞） 3.移形上皮底层细胞（小圆上皮细胞）
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《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
• 助色基团：是一种能使化合物以生电离作用的辅助原子团（酸碱性基团）。 它能使染色的色泽进一步加深，并使其与被染色组织具有亲和力。 助色基团的性质决定染料是酸性碱性。碱性染料具有碱性助色基团，在 溶酶中产生的带色部分为带正电荷的阳离子，易与组织细胞内带负电荷的物 质结合而显色。如细胞核内的主要化学成分脱氧化核糖核酸易被苏木素染成 紫蓝色，称嗜碱性。酸性染料具有酸性助色基团，在溶酶中产生带色部分为 阴离子，易与组织细胞内带正电荷部分结合而显色，此性质被称为嗜酸性， 如细胞浆内成分为蛋白质，易与伊红或橘黄结合呈红色或橘黄色。
《脱落细胞学》
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第三节 涂片的固定
• 固定的目的是保持细胞自然形态，防止细胞自溶和细菌所 致的腐败；固定液能沉淀和凝固细胞内蛋白质和破坏细胞 内溶酶体酶，使细胞不但保持自然形态，而且结构清晰， 易于着色。因此标本愈新鲜，固定愈及时，细胞结构愈清 晰，染色效果愈好。
《脱落细胞学》
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但数量过少，还不能完全排除癌前期病变或高度炎症增生生的可能，建议临床 重复送检。 • Ⅳ级：阳性。
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（3）五级分类法 • Ⅰ级：无核异质细胞。 • Ⅱ级：少量轻度核异质细胞，但无恶性证据。 • Ⅲ级：有较多重度核异质细胞，但不能肯定为恶性。 • Ⅳ级：有大量重度核异质细胞，但仍缺乏典型恶性肿瘤细胞的证据。 • Ⅴ级：发现典型恶性肿瘤细胞，根据其细胞形态，作出初步的分类。
颗粒与核安危质结构显示较清晰。操作简便。
《脱落细胞学》
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第五节 涂片的观察与诊断
一、涂片观察的方法 • 为提高诊断率和防止造成差错，检查涂片前必须严格核对涂片编号，
了解送检单上填写的全部资料；阅片要全面、认真、细心观察。 • 因涂片中细胞成分分布极为分散，所以显微镜观察时必须按顺序视全
• 第二，标本采集后，应尽快做出处理、以最快的速度制片，否则标本凝固或 pH值改变，引起细胞形态变化或自溶、腐败等，影响诊断结果。
• 第三，制片时操作应轻巧，以免损伤细胞。涂片的厚薄应适宜，太厚则细胞 过多、重叠．不易染色且细胞形态不易辨别；太薄则细胞稀少，影响阳性的 检出率。一张好的涂片应是分布均匀、厚薄适宜，涂片呈舌状，分为头、体 、尾三部分，镜下各个视野均有细胞成分，红细胞无明显重叠现象。
• （1）肿块暴露较好，操作较方便。 • （2）怀疑原发性病灶的肿块。 • （3）淋巴结或肿块较大、较硬，无液化、坏死或继发感染者。 • （4）穿刺点应避开体表血管、炎症及溃疡等部位，且肿物邻近无重要神经
、血管、脏器。
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2．细针吸取细胞学的优点
• （1）穿刺抽取操作简单易片法：用吸和将标本滴在玻片一端，然后将滴管前端平行置于 标本滴上，平行向另一端均速移动滴管即可推出均匀薄膜。此法亦适用于胸 、腹水标本。 （5）喷射法：用配细针头的注射器将标本从左至右反复均匀地喷射在玻片 上，此法适用于各种吸取的液体标本。 （6）印片法：将切取的病变组织用手术切开，立即将切面平放在玻片上， 轻轻按印。此方法为活体组织检查的辅助方法。
• （2）操作安全，极少发生副作用或意外，病人痛苦小，不需切开，无明显 瘢痕形成。
• （3）取样迅速、制片、诊断亦较快．一般仅需1h左右．可用于手术中的快 速诊断。
• （4）应用范围，几乎适用于任何部位。穿刺检查可到达人体不同组织器官 的病灶，并可同时对多个肿块进行穿刺提高了阳性率及准确率。
• （5）可对同—肿物进行多次穿刺，重复检在，有利于动态观察肿块的生长
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（三）灌洗法 • 此法是通过向空腔器官灌注一定量生理盐水等液体，运用冲洗、振动、揉捏
等方法，使空腔器官中的某些细胞包括癌细胞脱落于其中，然后将灌洗液取 出，经适当处理后检查。 （四）摩擦法 • 此法主要采用摩擦工具，摩揉病变区的粘膜直接涂片。
《脱落细胞学》
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（二）自然分泌液的收集法 自然分泌液包括痰液、尿液、前列腺液、乳头溢液等。 • 1．痰液涂片检查 因痰液为支气管等呼吸道的分泌物，对支气管肺癌和呼
吸道的疾病诊断具有重要价值。 • 2．尿液涂片检查 泌尿道的上皮、炎症细胞及恶性肿瘤细胞等均可在腔内
脱落，随尿液排出，因此，收集尿液细胞作检查，对泌尿道肿痛及某些疾病 诊断有一定意义。 • 3．前列腺液涂片检查 采用前列腺按摩法取得分泌物作涂片，对前列腺炎 及癌的诊断有一定价值。 • 4．乳头溢液涂片检查 用于诊断乳腺病。
第一节 标本采集
标本采集是脱落细胞学检验的基础，也是细胞学诊断成败的关键之一。 一、标本采集的原则 • 正确选择采集部位，尽可能自病变区直接采取细胞。 • 采集的标本必须保持新鲜，以免细胞自溶或腐败。 • 尽可能避免干扰物，如血液、粘液等混入标本内。 • 采集方法应简便，病人少受痛苫，且不致引起严重的并发症或促使肿瘤扩散
重复送检。 • Ⅲ级：阳性。涂片中发现典型癌细胞，有时根据癌细胞形态特征及分
布，初步进行分类。
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（2）四级分类法：将细胞学检查结果分为阴性、核异质，可疑和阳性四级。 • Ⅰ级：阴性。 • Ⅱ级：核异质。涂片中发现少量核异质细胞，由高度炎症增生所致。 • Ⅲ级：可疑。涂片中见重度核异质细胞，其形态基本符合恶性肿瘤细胞标准，
脱落细胞学检验 ---脱落细胞学基本技术
戚永孝
《脱落细胞学》
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概述
脱落细胞学技术是本课程的重要内容。脱落细胞检验者除 要熟练掌握细胞形态学特征外，还必须掌握各项操作技术 和观察方法。包括标本的采集、制片、固定、染色、镜下 观察以及书写诊断报告等。
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
《脱落细胞学》
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• 染色的化学作用是渗入组织细胞的染料与其相应的物质起化学反应，产生有 色的化合物。 各染料都具有两种性质，即产生颜色；与组织形成亲和力。这两种性质 主要由发色基因和助色基因所产生的。 发色基团：苯的衍生物具有可见光区吸收带。这些衍生物的吸收带与其 价键的不稳定性有关，如对苯二酚为无色，当其氧化后失去两个氢原子，它 的分子或则变为有黄色的对醌，这种产生颜色的醌式环称为发色基团。若一 种化合物含有几个环，只要其中有一个醌式环就会发出颜色，称此发色基团 为色原.
• 第六．标本一般应制片4张以上，并逐张固定、染色及镜检，以防遗漏。 • 第七，涂片应统一进行编号、登记，以免混淆。
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二、涂片的制备方法
（1）推片法：用于稀薄的标本，如血液，胸、腹水等。取离心后标本一小 滴滴在玻片偏右侧端，用推片用30度夹角将玻片上检液轻轻向左推。 （2）涂抹法：适用于稍稠的检液，如鼻咽部标本。用竹棉签在玻片上涂布 ，由玻片中心经顺时针方向外转圈涂抹；或从玻片一端开始平行涂抹，涂抹 要均匀，不宜重复。 （3）压拉涂片法：将标本夹于横竖交叉的两张玻片之间，然后移动两张玻 片，使之重叠，再边压边拉，获得两张涂片。该法适用于较粘稠标本，如痰 液。
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• 第四，若液体标本内缺乏蛋白质时，在制片过程户，可先在玻片上涂上粘附 剂（如甘油血清、甘油蛋白、血清等）或直接在液体标本中加入粘附剂，以 防标本在固定及染色过程中脱落。
• 第五，应采取标本的各部分制片，特别是对于组织钳取物及较大组织的印片 ，并尽可能选取具有代表件的部位制片，以减少漏诊，提高阳性的检出率。
、发展或肿块放疗、化疗的疗效。
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第二节 涂片制作
良好、适宜的涂片是脱落细胞学能否正确诊断的重要条件之一。
一、涂片制备的原则：
• 第一，在标本制片之前，要把材料准备好，如载玻片、推片、盖玻片、滴管 等，各种用品均要求清洁、干燥，载玻片要求表面光滑，无油渍、无划痕及 破损等。
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第四节 涂片的染色
• 1．染色的目的和原理：染色的目的是借助于一种或多种染料，使组 织和细胞内结构分别着不同的染色，这样在显微镜下能清楚地观察细 胞内部结构，作出正确判断。 组织细胞染色原理至今尚无满意的解释，可能是物理作用，也可 能是化学作用，或者是两者综合作用的结果。 染色的物理作用是利用毛细管现象，渗透、吸收和吸附作用，使 染料的色素颗粒牢固地进入组织细胞，并使其显色。
张涂片，用推进器从左至右。自上而下移动，仔细观察每一个视野， 归后将盖片边缘亦做仔细检查，防止漏诊（图20-1）。
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
图20-1 观察切片的移动法 A错误的玻片移动法 B正确的玻片移动法
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
• 涂片细胞学检查十分重视低倍观察，先宏观涂片中各种细 胞成分，发现异常细胞时，再转换高倍视野，仔细观察细 胞结构，明确性质，做出正确诊断。
实地反映细胞学所见。比较客观。目前有三级、四级、和五级三种分类方法。五级分 类法过于繁琐，实际应用中较难掌握。因此国内仍常用三级或四级分类法，该两种分 类 法较为简单明确，易于掌握，能够更准确地反映涂片的本质。
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（1）三级分类法：将细胞学检查结果分为阴性，可疑和阳性三级。 • Ⅰ级：阴性：无核异质细胞，涂片中均为正常细胞或一般退变细胞。 • Ⅱ级：可疑。涂片中发现核异质细胞，但不能肯定的是肿瘤细胞，应
适用于上皮细胞染色或观察阴道涂片中激素水平对上皮细胞的影响。此方法
的缺点是染色程序比较复杂。
（2）苏木精—伊红（HE）染色法：该方法染色透明度好，核与胞质对比鲜
明。染色步骤简便，效果稳定。适用于痰液涂片，异质核呈紫蓝色，胞质淡