安捷伦1260操作规程1

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安捷伦1260全自动高效液相操作规程

安捷伦1260全自动高效液相操作规程

安捷伦1260全自动高效液相操作规程
1.样品的准备:最好使用流动相溶解样品;进样前样品需过滤膜,除去悬浮不溶杂质。

2.流动相的选择和处理:使用高纯度试剂,所有含盐或含水溶剂必须膜过滤,100%色谱纯有机试剂,滤膜过滤后方可使用;流动相现配现用,剩余的流动相(水相)及时清理,实验间隔>2天,建议倒掉;任何溶剂,如果有可见悬浮物、菌丝,不可使用;更换流动相之前,必须事先阅读色谱柱的说明书;除非有说明,反相柱不得使用100%水。

3.开机注意事项:先开HPLC仪器开关、脱气机、泵和紫外检测电源;等各电源开启后(30s),打开在线软件;冲柱子和平衡时,暂不开紫外灯;平衡完后,打开紫外灯,设置梯度和波长或引用方法。

4.实验结束:C18反相柱应用色谱甲醇保存,不能含任何酸、盐;用甲醇替换通道,四个过滤头均存放于有机溶剂瓶中,以防长菌;流速调零,再关闭软件,最后依次关闭脱气机、泵和紫外检测器的电源。

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程资料

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程资料

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程资料安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、开机(1)打开计算机,登陆windows操作系统。

(2)打开主机各模块电源(从上至下),待各模块完成自检后,再双击桌面“仪器1联机”图标,进入化学工作站,从视图菜单中选择“方法和运行控制”画面。

(3)进行仪器配置,点仪器-仪器配置-选择所需模块-自动配置-输入IP地址:192.168.254.11。

把各流动相放入相应的溶剂瓶中。

(4)编辑方法。

方法-新建方法-方法-编辑完整方法-编辑各项(四元泵、TCC、VWD、仪器曲线参数设定,仪器参数默认),完成后,文件→方法另存为→编辑名称,保存方法。

(5)排气。

旋开排气阀(逆时针),右单击“四元泵”图标出现快捷键,点击“方法”设置泵流速,排气可设置1.2ml/min,l流量梯度100,也可5ml/min,流量梯度10。

一般冲洗3-5min,注意倾斜储液瓶使过滤头处的气体进入管道才可使气体排出,观察管路中气体位置,以其排净为目的。

关泵,关闭排气阀(顺时针)。

(注意:先开排气阀,再开泵,先关泵,后关排气阀)。

(6)在让液体进入柱子之前应将甁填充设置为实际值,谨防空进。

将泵流速设置1ml/min,用过渡液即缓冲液冲洗色谱柱20—30分钟。

(7)换流动相,待柱前压力基本稳定后,打开检测器,视图,在线信号,选择信号,观察基线情况。

二、数据采集信息编辑及进样(1)编辑样品信息:点“单次样品”小瓶,或点击运行信息-单次进样,设定操作者姓名,样品数据文件名,进样量等。

(2)编辑好样品信息后方可进样。

三、数据处理(1)打开桌面“仪器1脱机”,单击“数据分析”进入数据分析画面。

(2)从“文件”菜单中选择调用信号,选择您的数据文件名,单击确定。

(3)谱图优化。

从“图形”菜单中选择“信号选项”从范围中选择“自动量程”及合适的显示时间,或选择“自定义量程”调整,反复进行,直到图比例合适为止。

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、仪器介绍二、前期准备1.打开仪器电源,待仪器自检完成后,确保所有指示灯都亮起。

2.检查溶剂瓶的液位,确保足够的溶剂供给。

3.清洁好色谱柱并连接到系统中。

三、仪器启动1.打开色谱软件,选择相应的方法。

2.点击“系统”菜单,选择“启动系统”命令,系统开始进行初始化。

3.在系统初始化完成后,点击“准备”菜单,选择“准备系统”命令,系统开始进行一系列的自动化准备工作,比如冲洗和平衡柱子。

4.检查系统的压力和温度,确保在正常范围。

四、样品进样1.准备好待测样品和标准品。

2.将样品装入进样瓶中,注意不要超过瓶口。

3.将进样瓶插入样品进样系统中,按照方法设置的条件进行进样。

4.点击软件界面上的“进样”按钮,开始进样。

五、色谱柱选择1.根据待测样品的性质和分离特点,选择合适的色谱柱。

2.将色谱柱连接到色谱仪系统中。

3.检查色谱柱的压力和温度,确保在正常范围。

六、色谱条件设置根据分析方法的要求,设置好色谱条件,包括流量、温度、柱温等参数。

七、检测器设置1.根据需要选择合适的检测器,比如紫外检测器、荧光检测器等。

2.设置检测器的工作参数,如波长、增益、基线噪声等。

八、开始分析1.在样品进样后,点击软件界面上的“开始”按钮,开始进行色谱分析。

2.监控检测器输出的信号,根据需要可以对信号进行放大或调整。

九、结果解析1.根据所用方法的要求,对分析结果进行解析。

2.可以通过软件导出结果并进行后续处理。

十、仪器关机1.关闭色谱仪软件。

2.关闭色谱柱进样系统。

3.关闭色谱仪电源。

此为安捷伦1260高效液相色谱仪的操作规程,希望能对使用者提供一定的参考和帮助。

在操作过程中,应严格按照安全操作规范进行,并及时进行维护和保养,以保证仪器的正常运行。

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程资料

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程资料

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、开机(1)打开计算机,登陆windows操作系统。

(2)打开主机各模块电源(从上至下),待各模块完成自检后,再双击桌面“仪器1联机”图标,进入化学工作站,从视图菜单中选择“方法和运行控制”画面。

(3)进行仪器配置,点仪器-仪器配置-选择所需模块-自动配置-输入IP地址:192.168.254.11。

把各流动相放入相应的溶剂瓶中。

(4)编辑方法。

方法-新建方法-方法-编辑完整方法-编辑各项(四元泵、TCC、VWD、仪器曲线参数设定,仪器参数默认),完成后,文件→方法另存为→编辑名称,保存方法。

(5)排气。

旋开排气阀(逆时针),右单击“四元泵”图标出现快捷键,点击“方法”设置泵流速,排气可设置1.2ml/min,l流量梯度100,也可5ml/min,流量梯度10。

一般冲洗3-5min,注意倾斜储液瓶使过滤头处的气体进入管道才可使气体排出,观察管路中气体位置,以其排净为目的。

关泵,关闭排气阀(顺时针)。

(注意:先开排气阀,再开泵,先关泵,后关排气阀)。

(6)在让液体进入柱子之前应将甁填充设置为实际值,谨防空进。

将泵流速设置1ml/min,用过渡液即缓冲液冲洗色谱柱20—30分钟。

(7)换流动相,待柱前压力基本稳定后,打开检测器,视图,在线信号,选择信号,观察基线情况。

二、数据采集信息编辑及进样(1)编辑样品信息:点“单次样品”小瓶,或点击运行信息-单次进样,设定操作者姓名,样品数据文件名,进样量等。

(2)编辑好样品信息后方可进样。

三、数据处理(1)打开桌面“仪器1脱机”,单击“数据分析”进入数据分析画面。

(2)从“文件”菜单中选择调用信号,选择您的数据文件名,单击确定。

(3)谱图优化。

从“图形”菜单中选择“信号选项”从范围中选择“自动量程”及合适的显示时间,或选择“自定义量程”调整,反复进行,直到图比例合适为止。

(4)积分。

从“积分”中选择“自动积分”,若积分结果不理想,从菜单中选“积分事件”,更改数据为合适的“斜率灵敏度、峰宽、最小峰面积、最小峰高”,从“积分”中选择积分选项,则数据被积分,如积分结果不理想则修改相应的积分参数直到满意为止。

安捷伦1260操作规程

安捷伦1260操作规程

安捷伦1260LC操作规程一开机1)打开计算机,登陆windows操作系统。

2)打开主机各模块电源(从上至下),待各模块完成自检后,再双击桌面“仪器1联机”图标,进入化学工作站,从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面。

3)把各流动相放入溶剂瓶中。

4)旋开排气阀(逆时针旋开半圈左右),右键单击“四元泵”图标出现快捷键,点击“方法”选项进入泵编辑画面。

将泵流量设到5ml/min,溶剂A设到100%,打开泵,排出管线中的气体2~3min,直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止,查看柱前压力(若大于10bar,则应更换排气阀内过滤白头)。

5)依此切换到B、C、D溶剂分别排气。

6)将泵的流量设到0.5ml/min,多元泵则再设定溶剂配比,如A=80%,B=20%;关闭排气阀(顺时针)。

7)再将泵的流量设到0.8ml/min,2分钟后将泵的流量设到1ml/min,冲洗色谱柱20~30min。

8)把缓冲液换成流动相,待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯,观察基线情况。

二数据采集方法编辑1)编辑样品信息:现在“视图”菜单下“首选项”中添加路径,然后由“运行控制”进入“样品信息”,设定操作者姓名、样品数据文件名、样品数据保存路径等。

2)编辑完整方法:从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项。

单击“确定”入下一画面“方法注释”,后单击“确定”进入下一画面“选择进样源”,选中Als单击“确定”下一画面“设臵方法”进行参数设定。

3)四元泵参数设定:在“流速”处输入流量,如1ml/min;在“溶剂”处根据各自的流动相比例填写即可(A=100-B-C-D);设臵泵的“停止时间”(即样品的出峰时间)在“压力限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子,如:250bar。

4)TCC检测器参数设定:在“温度”左侧下面的方框内输入所需温度,并选中它,右侧选中“与左侧相同”使柱温箱的温度左右一致。

5)DAD检测器参数设定:在“波长”下方的空白处输入样品所需的检测波长,如254nm,在“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间,如>0.1min(2s)。

LC1260二元操作规程(DAD)

LC1260二元操作规程(DAD)

安捷伦HPLC1260二元泵(DAD)操作规程及维护一、操作1.开机前准备1.1配制流动相,须经0.45μm滤膜过滤,之后再进行脱气处理,用超声波震荡10-15min,分别装入溶剂瓶。

1.2若流动相中含有缓冲盐,必须以每分钟2-3滴的速度虹吸10%的异丙醇水冲洗seal-wash,以防有盐结晶在泵头产生而损坏泵头。

2.采样前准备(排气泡)2.1打开计算机,进入windows系统,从上到下依次打开各模块电源(可同时打开Purge阀)。

2.2自检完成后,点击联机online,进入工作站画面。

2.3右击“泵Pump”,选择“方法Method”项,设定流速Flow 5ml/min,溶剂比Solvent处设置A通道为100%,点击OK。

再右击“泵Pump”,选择“控制Control”项,在泵的设置下单击ON,则系统开始排除A通道内气泡,清洗约3-5min,再依法排除B通道内气泡。

气泡排完后,将流速降为0ml/min,关闭Purge阀。

2.4将溶剂比设定实验所需比例,再将泵的流速逐步上升到实验所需流速(以0.2的上升幅度提高流速,每次柱压稳定后再上升流速),冲洗色谱柱,同时打开检测器的灯,待达到所需流速、柱压稳定后且基线平稳后即可进样。

3进样当进样器处于inject位置时,将进样针插入进样口,调节进样器于load处,进样,再迅速调回inject处,即可等待谱图。

4关机关机前,用90%-95%水乙腈溶液,冲洗柱子和系统约1h,流速设置1ml/min,再用100%有机溶剂(乙腈)冲洗半小时,然后关闭各模块电源,退出化学工作站,关闭计算机。

5编辑方法菜单栏处单击方法Method→编辑完整方法Edit entire method,选择除数据分析Data analyic外的另外三项(仪器/采集instrument/acquisition、方法信息method information、运行时间run time checklist),点击确定OK,弹出选择进样方式select injection source对话框,选择手动进样Manual,点击确定OK。

安捷伦1260操作规程

安捷伦1260操作规程

安捷伦1260操作规程安捷伦(Agilent)1260操作规程一、仪器概述安捷伦1260高效液相色谱仪是一种用于液相色谱分析的仪器,具有高灵敏度、高分辨率和高效率的特点。

该仪器由进样器、色谱柱、色谱泵、检测器等组成。

二、仪器准备1. 确保仪器的电源已连接并接通。

2. 检查进样器、色谱柱和检测器是否安装正确。

3. 检查液相色谱仪的液相系统是否已进行适当的液相填充,以及是否有足够的溶剂。

三、方法设置1. 打开色谱软件,并选择合适的方法模板。

2. 根据分析需求,在方法设置中输入样品信息、进样量、流速等参数。

3. 设置检测器的波长、增益和测量范围。

四、进样操作1. 打开进样器的盖子,将待测样品加入样品瓶中。

2. 点击软件中的进样按钮,设置样品名称和进样量。

3. 将样品瓶放入进样器,并关闭盖子。

4. 点击软件中的进样按钮,开始进样。

5. 进样完成后,从进样器中取出样品瓶,并将它放入垃圾桶中。

五、色谱柱操作1. 打开色谱柱的阀门,并将柱端与色谱柱连接。

2. 检查色谱柱是否没有泄漏,如果有泄漏,则需重新连接。

3. 检查色谱柱的温度,确保它处于合适的温度范围内。

六、液相泵操作1. 打开液相泵的电源,并连接到电脑上。

2. 设置合适的流速和梯度梯度。

3. 点击软件中的启动按钮,开始进行分析。

七、数据分析1. 使用色谱软件进行数据采集和分析。

2. 根据需要选择适当的数据处理方法,如峰面积计算、定量分析等。

3. 导出分析结果并保存。

八、仪器维护1. 分析结束后,关闭液相泵、进样器、色谱柱和检测器等设备的电源。

2. 清洗色谱柱和进样器,保持其清洁。

3. 定期检查仪器的连接线和电源线是否有松动或损坏。

九、安全操作1. 在操作仪器时,注意安全,避免接触到有害化学品。

2. 在操作过程中,严禁随意触摸仪器或移动连接线。

3. 在操作过程中,如遇到异常情况,请及时停止分析并向管理员报告。

通过以上操作规程,可以有效地使用安捷伦1260高效液相色谱仪进行样品分析。

安捷伦1260型HPLC使用操作

安捷伦1260型HPLC使用操作

安捷伦1260型HPLC使用操作安捷伦1260型高效液相色谱仪(HPLC)是一种目前广泛应用于科研实验室和分析化验室的仪器,用于分离、鉴定和定量化学物质,尤其在药物研究、食品安全和环境监测等领域有着重要的应用价值。

下面将介绍如何使用安捷伦1260型HPLC进行操作。

1.准备工作-确保HPLC仪器和相关附件的电源已正常连接,并打开电源开关。

-检查溶剂瓶中的溶剂是否充足,并确保应用的溶剂完全溶解。

-测量并记录样品的重量或体积,并准备相应的样品溶液。

-在毛细管芯上安装合适的毛细管,确保毛细管没有损坏。

2.打开安捷伦1260型HPLC软件-打开计算机并登录HPLC软件。

-确保计算机与HPLC仪器连接正常,并与仪器建立通信。

-在软件界面上选择打开一个新的分析方法。

3.设置分析方法-在打开的分析方法中,设置适当的柱温、流速、柱压和波长等参数。

-根据样品的性质,选择合适的检测波长,以获得最佳的检测结果。

-设定进样器的进样体积和方法运行时间等参数,以获得期望的分析效果。

4.进样样品-使用自动进样器或手动进样器将待测样品进入HPLC系统中。

-设置进样器的洗涤方法,以确保不同样品的交叉污染风险降至最低。

-如果使用了自动进样器,将样品盘或样品架连接到进样器上,并设置自动进样的参数。

5.启动HPLC分析-在软件界面上,点击启动按钮,开始运行分析方法。

-监控仪器运行情况,确保流速、柱压等参数稳定在设定范围内。

-观察检测结果的峰形和峰高,并记录峰面积或峰高数据以便后续分析。

6.数据处理与结果分析-使用HPLC软件进行数据处理,可以进行峰识别、峰面积计算和浓度计算等操作。

-将结果数据导出并进行统计分析,如绘制色谱图、拟合曲线和计算浓度等。

-分析结果的可靠性和准确性需要通过质控样品或标准品进行验证。

7.仪器维护和清洁-定期对HPLC仪器进行维护,包括更换毛细管、清洗进样器和柱子,并检查其他配件的磨损情况。

-使用合适的溶剂进行清洗,以去除可能留在系统中的残留物。

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安捷伦液相操作规程
一开机
1)打开计算机,登陆windows操作系统。

2)打开主机各模块电源(从上至下),待各模块完成自检后,再双击桌面“仪
器1联机”图标,进入化学工作站,从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面。

3)把各流动相放入溶剂瓶中。

4)旋开排气阀(逆时针),右单击“四元泵”图标出现快捷键,点击“方法”
选项进入泵编辑画面。

将泵流量设到5ml/min,溶剂A设到100%,打开泵,排出管线中的气体2—3分钟,直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止,查看柱前压力(若大于10bar,则应更换排气阀内过滤白头)。

5)依此切换到B、C、D溶剂分别排气。

6)将泵的流量设到0.5ml/min,多元泵则再设定溶剂配比,如A=80%,B=20%;
关闭排气阀(顺时针)。

7)再将泵的流量设到0.8ml/min,2分钟后将泵的流量设到1ml/min,冲洗色谱
柱20—30分钟。

8)把缓冲液换成流动相,待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯,观察基线情
况。

二数据采集方法编辑
1)编辑样品信息:由“运行控制”进入“样品信息”,设定操作者姓名,样
品数据文件名等。

2)编辑完整方法:从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项.选中项单击
“确定”入下一画面“方法注释”,编辑好单击“确定”进入下一画面“选择进样源”,选中Als单击“确定”入下一画面“设置方法”进行参数设定。

3)四元泵参数设定:在“流速”处输入流量,如1ml/min,在“溶剂”处选中
B输入80%(A=100-B-C-D),在右面注释栏中标明各溶剂的名称;设置“停止时间”和“后运行时间”,在“压力限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子如:250bar,在“时间表”添加编辑梯度。

4)进样器参数设定:在进样模式中输入进样量xxul。

“标准进针”——只能
输入进样体积此方式无洗针功能。

“针清洗后进样”——可以输入进样体积和洗瓶位置为xx,此方式针从样品瓶抽完样品后会在洗瓶中洗针。

5)进样器进样程序参数设定:选中使用进样程序,在“函数”中添加相应函
数即可按程序进样。

6)TCC检测器参数设定:在“温度”左侧下面的方框内输入所需温度,并选中
它,右侧选中“与左侧相同”——使柱温箱的温度左右一致。

7)VWD检测器参数设定:在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如
254nm,在“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间,如>0.1min(2s),再设置“停止时间”和“后运行时间”。

8)仪器曲线设置:默认即可。

三数据处理
1)从“视图”菜单中单击“数据分析”进入数据分析画面
2)从“文件”菜单选择“调用信号”选中您的数据文件名,单击“确定”。

3)谱图优化,从“图形”菜单中选择“信号选项”从“范围”中选择“自动量
程”及合适的显示时间单击“确定”,或选择”自定义量程”调整,反复进行直到图的比例合适为止。

4)积分:从“积分”中选择“自动积分”,积分结果不理想,再从菜单中选“积
分事件”,选项选择合适的“斜率灵敏度,峰宽,最小峰面积,最小峰高”.从“积分”菜单中选择“积分”选项则数据被积分.如积分结果不理想则修改相应的积分参数直到满意为止。

单击左边图标将积分参数存入方法。

5)校正表设计:点击“校正”菜单中的“校正设置”,给出各个参数:点击“确
定”;调出建立校正表所需的谱图并对谱图进行图形优化和积分优化;点击“校正”菜单中的“新建校正表;在“新建校正表”栏里选定“自动设定”
点击“确定”;在“校正表”中给出正确的“化合物名”和“含量”;如需增加校正点数,给出第二校正点的“含量”,校正表建立完成后点击“确定“,点击“保存图标”将校正表存入方法中。

6)打印报告:从“报告”菜单中选择“设定报告”选项进入画面:单击“定量结
果”框中“定量”右侧的黑三角选中“百分比法”面积百分比其它选项不变单击“确定”.从“报告”菜单中选择“打印”则报告结果将打印到屏幕上如想输出到打印机上则单击“报告”底部的“打印”钮。

四关机
1)关机前,用95%水冲洗柱子和系统0.5—1小时,流量0.5—1ml/min,再用
100%有机溶剂冲0.5小时,然后关泵。

2)退出化学工作站,及其它窗口,关闭计算机(用shutdown关)。

3)关掉主机电源开关。

注意事项:
1)氘灯是易耗品,应最后开灯,不分析样品即关灯。

2)开机时,打开排气阀,100%水,泵流量5ml/min,若此时显示压力>10bar,
则应更换排气阀内玻璃料。

3)流动相使用前必须过滤,不要使用多日存放的蒸馏水(易长菌)。

4)流动相使用前必须进行脱气处理,可用超声波振荡10-15min。

5)配制90%水+10%异丙醇,以每分2—3滴的速度虹吸排出,进行seal-wash,
溶剂不能干涸。

6)当使用缓冲溶液时,要用水冲洗手动进样器进样口,同时搬动进样阀数次,
每次数毫升。

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