水杨酸钠血浆半衰期的测定
讲稿水杨酸钠半衰期测定
川北医学院讲稿水杨酸钠半衰期（t1/2）的测定【实验前预习】药物代谢动力学。
【实验目的】用比色法测定水杨酸钠的血药浓度并计算半衰期。
【实验原理】药物血浆半衰期（或称消除半衰期，elimination half-life time，t）1/2是指血浆药物浓度下降一半所需的时间。
绝大多数药物是按一级动力学的规律消除，其血浆半衰期的数值是固定的。
水杨酸钠在酸性条件下与三氯化铁反应生成一种紫色络合物。
该络合物在波长510nm下比色，其光密度与水杨酸浓度成正比。
利用比色法测定药物在血中两个以上浓度值，即可求得药物的血浆半衰期。
【实验器材与药品】V1100分光光度计，离心机，10m1试管，试管架，5ml注射器及针头，吸耳球，计算器，10%水杨酸钠溶液，10%三氯醋酸溶液，10%三氯化铁溶液，0.1%肝素(heparin)溶液，蒸馏水。
【实验对象】家兔。
【实验方法与步骤】1．取离心管3支，分别标记为A、B、C，各加入10%三氯醋酸7ml。
2．取家兔1只，称重后由心脏(或颈动脉、耳缘静脉)取血2ml，置A管中(注射器内壁用0.5%肝素生理盐水溶液润湿)。
3．由耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠2 ml/kg，并记录注射完毕的时间。
4．给药后10min和40min，先后自心脏取血2 ml，分别置入离心管B及C 中,记录取血的准确时间。
5．将3支离心管摇匀，以2000转/min的转速离心5 min。
准确吸取离心后的上清液各6 ml分别置入编号的试管中，每管加10%三氯化铁溶液0.5 ml，摇匀，显色。
6．以A管为对照，用V1100分光光度计在510nm波长处分别测定B管和C管的光密度值D1和D2，测定方法如下：1.接通V1100分光光度计电源，打开检测室盖板，调整波长为510mm；2.合盖→拉滑杆3.将黑体放入光路中→按MODE键到T档→按0%T键校零；4.将A管对准光路→按MODE键到A档→按100%T键调零；5.将B、C管依次对准光路→测出D1和D2值7．根据K＝CD将测得的D1和D2代入下面的公式计算水杨酸钠的血浆半衰期。
天津商业大学《生理药理学》实验讲义
《生理药理学》实验指导课程编号：0741535048实验一水杨酸钠血浆半衰期的测定一、实验目的了解分光光度法测定水杨酸钠的血药浓度和计算半衰期的方法。
二、实验内容家兔静脉采血、静脉注射、离心、光电比色等。
三、实验要求集中授课形式。
四、实验准备预习药物代谢动力学，药动学参数的概念、意义、计算方法等理论知识。
五、实验原理、方法和手段在酸性条件下，水杨酸钠解离为水杨酸，后者与三氯化铁生成一种紫色络合物，该络合物在520nm波长处，其光密度与水杨酸的浓度成正比。
采用光电比色法，计算血药浓度，进一步计算药物的半衰期。
六、实验条件1. 动物家兔，2～3kg，雌雄均可。
2. 药品10% 及0.02% 水杨酸钠（sodium salicylic），10% 三氯化铁，10% 三氯醋酸（trichloroacetic acid），0.5% 肝素（heparin），蒸馏水。
3. 器材试管架、试管、离心管、吸管（10mL、2mL、1mL 0.5mL）、注射器（2mL、5mL）、针头、吸耳球、分光光度计、离心机、计算器等。
七、实验步骤1、取4支离心试管，编号后各加入10% 三氯醋酸5mL。
2、取家兔一只，称体重，使其耳部充血后，用经0.5% 肝素湿润过的注射器由耳缘静脉缓慢抽血2.5mL，分别置于1号管和2号管内各1 mL，余血弃掉，将试管摇匀静置。
3、由耳缘静脉缓慢注射10% 水杨酸钠1.5 mL/kg，（150mg/kg），给药后5min 和35min，各采血1mL，分别置于3号管和4号管内，摇匀静置。
4、1，3，4号管内各加入蒸馏水1mL ，2号管内加入0.02%水杨酸钠1mL。
摇匀。
5、将4支离心管置于离心机内，以1500～3000rpm，离心5min，使血浆蛋白沉淀。
6、另取相应编号的试管4支，将离心后的上清液倒入相应编号的试管中，从中准确吸取3mL 分别置入相应编号的另外4支试管中，每管再加入10% 三氯化铁溶液0.5mL，摇匀显色。
水杨酸钠血浆半衰期的测定及其意义
Ａｂ ｔａ ｔ Ｏｂｅ ｔ ｅ Ｔｏ ｄ ｔｒ ｎ ｈ ｕ ｒ ａ ａ ｅｏ ｉｈ ｅ ｓ ｆ ｏ ｉ ａｉ ｌ ｅｂ ｏｏｉ ｔｉ ｓｒｃ ｊｃｉ ： ｅｅｍｉｅｔｅｎ ｍｅｉ ｌ ｌ ｆｌ ｔｄ ｎ ｅｏ ｄｕ ｓｌ ｙａ ｙｃ ｌｒ ｖ ｃ ｖｕ ｇ ｓ ｍ ｃ ｔ ｍｅｒ ｃ ａ ａｙｉ，ｎ ａｃｌｔ ｓｐａｍａｈ ｌ ｌｅ Ｍｅｈ ｄ ： ｆｅ ｔａ ｅ ｏ ｓｉ ｅｔ ｎ １ ｅｃｎ ｏ ｉ ａ ｃ ｌｔ ｌ— ｎ ｌｓ ａ ｄ ｃｌ ａｅｉ ｌ ｓ ｕ ｔ ｓ ａｆ ｉ ． ｔｏ ｓ Ａ ｔｒ ｎ ｒｖ ｎ ｕ ｊｃｉ ０ ｐ ｒｅ ｔ ｄｕ ｓ ｌ ｙａｅｓ ｕ ｆ ｉ ｎ ｏ ｓ ｍ ｉ ｏ
Ｘｌ
缉
１
０． ０ ５
２
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３
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４
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５
０． ８ １
６
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７
０． ４ １
８
０． １ ２
９
０． ４ １
１ ０
０． ２ ２
１ １
０． ９ １
ｘ ２
Ｔｔ ／ ２
００ ．８
１．５ １３
０ ０ ．８
三 氯 化 铁 ０ ５ｍｌ摇 匀 后 可 显 色 ， 分 光 光 度 计 ５ ０ ． ， 在 ２ ｎｎ波 长 下 ， 第 一 管 校 “ ” ， 定 其 它 两 管 的 光 Ｉ 用 ０管 测
密 度 值 ｘ 、２ １ｘ 。
用于药代动力学 的研究 ， 有 关其 血浆 半 衰期 的研 但 究数据各 实验室相差较 大 。本文测定 了家兔耳缘静 脉 注射水杨 酸 钠后 的浓 度一 时 间过程 ， 算相 应 的 计
２
【精品】水杨酸钠半衰期的测定
【精品】水杨酸钠半衰期的测定水杨酸钠是一种常用的药物，广泛应用于治疗炎症和疼痛等疾病。
了解其药代动力学参数对于对药物的合理使用非常必要，而药物的半衰期是其中一个比较重要的指标。
本研究旨在测定水杨酸钠在人体内的半衰期，并探讨其影响因素。
一、实验方法1、药物注射将水杨酸钠溶解在10毫升的生理盐水中，注入人体体内。
2、血液采集在药物注射后，每隔一定时间采集被测者的血液样本，同时记录每次的时间。
3、样本处理采集的血液样本在室温下放置一定时间，离心去除血细胞，再将血样转移到新离心管中，冰箱中保存以用于后续分析。
4、分析测定采用高效液相色谱法（HPLC）对血样中的水杨酸钠含量进行分析。
同时，将测得的水杨酸钠含量值与采集样本时间进行对比，绘制药物浓度-时间曲线。
5、半衰期计算根据药物浓度-时间曲线，计算药物的半衰期，公式为T1/2=0.693/K。
其中，K为药物消除速率常数。
二、实验结果1、药物浓度-时间曲线根据实验测定到的数据，得到水杨酸钠的药物浓度-时间曲线如下图：（图片）2、药物的半衰期三、实验分析从实验结果可以得出，水杨酸钠在人体内的半衰期为3.5小时。
这说明，水杨酸钠在人体内的代谢速度较快，需要在相对短的时间内进行频繁的使用才能维持药物浓度的稳定。
此外，半衰期的长短受到许多因素的影响，如体内药物代谢酶的活性、肝功能状态等。
因此，需要将半衰期测定结果与个体情况结合考虑，制定合理的用药方案。
根据本实验结果，得出以下结论：1、水杨酸钠在人体内的半衰期为3.5小时。
2、个体差异和一些因素可能影响药物的半衰期，需要在用药时进行综合考虑。
药理学-药理实验2水杨酸钠半衰期的测定
半衰期计算与结果分析
半衰期计算
根据血药浓度随时间变化的曲线图，计算出水杨酸钠的半衰期。
结果分析
分析实验结果，比较不同个体或不同条件下的血药浓度和半衰期，探讨水杨酸钠在体内的代谢和排泄规律。
结果解释与讨论
结果解释
根据实验结果解释水杨酸钠在体内的代谢和排泄机制，以及影响半衰期的因素。
讨论
结合实验结果和相关文献，探讨水杨酸钠的药理作用、临床应用和不良反应，为进一步的药理学研究 和临床用药提供参考。
问题3
实验操作过程中存在误差。
解决方案
加强实验操作培训，提高实验人员的操作技能和责任心 。
对实验的改进建议与展望
建议1
优化动物模型的生理特征，使其更接近人类。
建议2
采用更准确的血药浓度测定方法。
建议3
加强实验操作培训，提高实验结果的可靠性。
展望1
将本实验方法应用于其他药物的药代动力学研究。
展望2
探索更多种动物模型在药代动力学研究中的应用。
通过测定水杨酸钠的半衰期，可以了解该药物的消除速度 ，从而为制定合理的给药方案提供依据。同时，半衰期也 是评估药物疗效和安全性的重要参考指标。
水杨酸钠半衰期的意义
水杨酸钠半衰期是评价药物在体内消除速度的重要指标， 对于指导临床用药、制定给药方案以及评估药物疗效等方 面具有重要意义。
通过测定水杨酸钠的半衰期，可以了解该药物的消除速度 ，从而为制定合理的给药方案提供依据。同时，半衰期也 是评估药物疗效和安全性的重要参考指标。
掌握药理学实验的基本操作流程
实验前准备
准备实验器材、试剂，确保实 验环境符合要求。
数据处理
对采集的数据进行处理和分析 ，计算水杨酸钠的半衰期。
实验九水杨酸钠的血浆半衰期(t12)的测定【目的】用分光光度计测定水
实验九水杨酸钠的血浆半衰期（t1/2）的测定
【目的】用分光光度计测定水杨酸钠的血浓度及计算半衰期。
【原理】标准含量推算法。
用标准管内水杨酸钠浓度y与光密度x，求比值k=y/x。
再根据k=y/x由x1和x2，求得y1和y2，进行半衰期的计算。
=0.301t/(logy1- logy2)
t
y2
利用比色法测定药物在血中两个以上的浓度值，可求得药物的血浆半衰期。
【材料】
1、动物：家兔；
2、器材：移液管，注射器，镊子
3、药品：10%三氯乙酸、0.5%肝素、10%水杨酸钠、0.02%水杨酸钠、10%三氯化铁。
【方法】
1、取离心管3支，分别标记A、B、C，各加入10%三氯乙酸3.5毫升
2、取家兔1只，称重后由耳缘静脉取血1毫升置于A管内
3、由耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠150mg/kg，并记录注射完毕时间
4、给药后5分钟以及间隔25分钟，先后由耳缘静脉取血1毫升分别置于B、C管内，记录取血的准确时间t0以及t1。
5、将三只离心管摇匀，以2000转/分钟的转速离心5分钟，取上清液加10%三氯化铁0.3毫升，摇匀，显色。
6、以给药前管为对照，用750型分光光度计510波长测定x1和x2
7、配标准管：0.02%水杨酸钠： 2毫升 + 三氯化铁0.6毫升
空白管：蒸馏水2毫升 + 三氯化铁0.6毫升【结果】用750型分光光度计测定结果，计算水杨酸钠的半衰期
【注意事项】
1、剂量要准确，时间掌握好；
2、给药后应保持室内安静，避免刺激实验动物。
药代动力学参数测定
药代动力学参数测定水杨酸钠血浆半衰期的测定 【目的和原理】掌握用分光光度法测定水杨酸钠（sodium salicylate）的血药浓度,并学会用公式计算半衰期。
水杨酸钠在酸性环境中成为水杨酸（salicylic acid），与三氯化铁生成一种紫色络合物。
该络合物在520nm 波长下比色，其光密度与salicylic acid 浓度成正比。
反应式为：OH CO O H【实验对象】【实验器材和药品】 722分光光度计、离心机、50ml 烧杯、effendorff 管、加样器（1000μl）、试管、试管架、记号笔、兔手术台、手术器械一套、动脉插管、注射器（2ml、5ml、10ml）、BL-410生物机能实验系统。
10%水杨酸钠，0.02%水杨酸钠标准液，10%三氯醋酸，10%三氯化铁，0.3%肝素生理盐水，1%普鲁卡因等。
【实验步骤和观察项目】1. 取兔一只，称重，然后将其固定在兔手术台上。
2. 颈总动脉插管：用1%普鲁卡因在颈部正中局麻后，在气管上方将皮肤剪一纵向开口，用止血钳钝性分离皮下筋膜及肌肉组织，将气管暴露，在气管旁边可见较粗大的颈总动脉，将其与周围的组织分离，然后将充满肝素生理盐水的动脉插管插入，固定确切。
由颈总动脉缓慢给入0.2%肝素生理盐水，1ml/kg，防止凝血。
3. 取试管5只编号，各管中加入10%三氯醋酸3.5ml。
4. 由颈总动脉放血2ml，分别放入1号管（对照管）和2号管（标准管）内各1.0ml,摇匀静置。
5. 由耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠，2ml/kg，给药后开始计时。
6. 给药后10min、25min、40min，先后取血1ml，分别置于3 、4、5号试管内，摇匀静置。
7. 以0.02%水杨酸钠标准液1ml 放入2号管内，其余各管加入蒸馏水1ml，摇匀。
8. 将5支试管离心5分钟（2000转/分），精确吸取上清液3.0ml，分别放入另一编号的试管中，每管加10%三氯化铁0.5ml，摇匀显色。
水杨酸钠半衰期的测定
5ml注射器
【注意事项】
整个操作过程中应注意枪头、移液管、试管之间不 能相互污染
放血操作时，一开始放出的血舍去不用 离心时必须将套管＋离心管配平 分光光度计分析时需将比色皿的光面用擦镜纸擦净
擦干
【数据处理】
（1）求算水杨酸浓度（Y）分光密度（X）的比例常数。 K＝Y/X
（2）求算水杨酸钠血浓度 给药后 5分钟血浓度 Y1=KX1 给药后30分钟血浓度 Y2=KX2
麻醉→固定→颈总动脉插管→耳缘静脉注入0.5%肝素
1ml/kg→松开动脉夹放血于空白试管→移液器 精密量
取1ml于1号试管、搅拌 3、耳缘静脉注入5%水杨酸钠5ml/kg，计时→注射后
5'，30'时松开动脉夹放血于空白试管→移液器 精密量
取1ml，分别加入2、3号试管，分别用洁净玻棒搅拌
【实验步骤】-2
4、4号和5号试管先后用1ml移液管 加入蒸馏水和
0.05%水杨酸钠各1ml。 5、取1、2、3试管进行离心（3000转×5'）→（用
5ml注射器＋长针头）准确吸取上清液3ml转移至 相同编号的另一套试管中→用移液器 精密加入
10%三氯化铁0.3ml→摇匀 6、722型分光光度计于510mu波长比色：以4号管
水杨酸钠 半衰期的测定
医学院药理学系
【实验目的】
学习
取空白 样本
采不同时间点 含药体液样本
分析测定
绘制CT曲线 计算拟合参数
【实验步骤】-1
1、取试管5支，分别标1-5号，用5ml移液管 加入10%
三氯醋酸5ml 2、取家兔一只→称重→乌拉坦（5ml/kg）腹腔注射
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V1100型分光光度计 测量光密度方法
（1）接通仪器电源，打开检测室盖板，选 择所需波长510mm
（2）按MODE键切换到T档，将黑体放入光 路中，合上盖，按0%T键校零，再按 MODE键切换到A档，将参比液放入光路 中，合上盖，按100%T键调零，再将待测 液依次放入光路中，即可得出待测液的 吸光度。
5
实验方法与步骤
标记
取血
给药
取血
管
取离心管3支， 分别标记为A、 B、C管，各 加入10%三氯 醋酸7ml
取家兔1只， 称重，心脏
取血（肝素 NS润）2ml置 A管
耳缘静脉注 射10%水杨酸 钠2ml/kg ,记
录注射完毕 的时间
给药后10分、 40分钟，先 后自心脏取 血2ml,分别置 于B、C管中， 记录取血准 确间隔时间t
t1/2计算方法 t1/2=0.301*t/( lgD1-lgD2)
7
家兔捉拿
1
2
3
4
5
一手抓颈背部皮肤，一手托臀部。 8
耳缘静脉注射
暴露血管（局部拔毛、拍打、压迫近心端），尽量
从远心端进针，回血推药（或无阻力推药）
家兔心脏取血方法
1 2 3 4
由两位助手将兔仰卧
固定。用左手指在兔左侧 胸部可摸到心尖搏动位置 （一般在靠近胸骨剑突左 侧上缘3-4肋间），确定 针尖进入部位，针栓先用 肝素NS润湿，垂直进针， 插入心室腔时，可见血液 涌入注射器。此时固定好 注射器位置，缓慢回抽针 栓至所需要血量，拔出针 头
机能实验中心 李旭伟
水杨酸钠血浆 半衰期的测定
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血浆半衰期测定意义血浆药物浓度
下降一半所需时间 half life
反映药物在体内停留时间的长短, 推测药物在体内达稳态血药浓度 的时间
确定给药时间间隔的依据,了解消 除器官的功能状态
用于药物分类
2
房室模型
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6
实验方法与步骤
离心
显色
比色
Hale Waihona Puke 计算将3支离心管 摇匀，离心5 分钟（2000 r/m),精确倒 取上清液
精确倒取上 清液6.0ml置 于编号为A、 B、C试管中， 每管加入10%
三氯化铁 0.6ml摇匀显 色
以给药前A管 为对照，用 V1100型分光 光度计 510nm波长 测定光密度 值D1和D2
P14页第3项测吸光度 11
注意事项
1.取血量要准确,避免出现泡沫 2.取血时间要记录准确 3.避免上清液被污染 4.a管不加三氯化铁
知识回顾 Knowledge Review
祝您成功！
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房室模型房室概念是将机体视为一个系统，系统内部按动力学 特点分为若干房室空间，定量分析药物在体内的动态过程。
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C C eket lgCt1=-ket1/2.303 + lgC0
t0
lgCt2=-ket2/2.303 + lgC0
(1) (2)
公式（1）-（2）
血中药物浓 度随时间推 移呈规律性 （一级动力 学消除）下 降
斜率=-ke/2.303
t1/2 = lg2*2.303/ke=0.301*2.303/ke
t1/2=0.301*t/(lgD1-lgD2)
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实验原理
水杨酸钠在碱性溶液中与三氯化铁结合后生成微紫色化合物，利用比 色法测得药物在血中浓度值，求得药物血浆半衰期