水杨酸钠半衰期的测定
讲稿水杨酸钠半衰期测定
川北医学院讲稿水杨酸钠半衰期（t1/2）的测定【实验前预习】药物代谢动力学。
【实验目的】用比色法测定水杨酸钠的血药浓度并计算半衰期。
【实验原理】药物血浆半衰期（或称消除半衰期，elimination half-life time，t）1/2是指血浆药物浓度下降一半所需的时间。
绝大多数药物是按一级动力学的规律消除，其血浆半衰期的数值是固定的。
水杨酸钠在酸性条件下与三氯化铁反应生成一种紫色络合物。
该络合物在波长510nm下比色，其光密度与水杨酸浓度成正比。
利用比色法测定药物在血中两个以上浓度值，即可求得药物的血浆半衰期。
【实验器材与药品】V1100分光光度计，离心机，10m1试管，试管架，5ml注射器及针头，吸耳球，计算器，10%水杨酸钠溶液，10%三氯醋酸溶液，10%三氯化铁溶液，0.1%肝素(heparin)溶液，蒸馏水。
【实验对象】家兔。
【实验方法与步骤】1．取离心管3支，分别标记为A、B、C，各加入10%三氯醋酸7ml。
2．取家兔1只，称重后由心脏(或颈动脉、耳缘静脉)取血2ml，置A管中(注射器内壁用0.5%肝素生理盐水溶液润湿)。
3．由耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠2 ml/kg，并记录注射完毕的时间。
4．给药后10min和40min，先后自心脏取血2 ml，分别置入离心管B及C 中,记录取血的准确时间。
5．将3支离心管摇匀，以2000转/min的转速离心5 min。
准确吸取离心后的上清液各6 ml分别置入编号的试管中，每管加10%三氯化铁溶液0.5 ml，摇匀，显色。
6．以A管为对照，用V1100分光光度计在510nm波长处分别测定B管和C管的光密度值D1和D2，测定方法如下：1.接通V1100分光光度计电源，打开检测室盖板，调整波长为510mm；2.合盖→拉滑杆3.将黑体放入光路中→按MODE键到T档→按0%T键校零；4.将A管对准光路→按MODE键到A档→按100%T键调零；5.将B、C管依次对准光路→测出D1和D2值7．根据K＝CD将测得的D1和D2代入下面的公式计算水杨酸钠的血浆半衰期。
水杨酸钠血浆半衰期的测定及其意义
Ａｂ ｔａ ｔ Ｏｂｅ ｔ ｅ Ｔｏ ｄ ｔｒ ｎ ｈ ｕ ｒ ａ ａ ｅｏ ｉｈ ｅ ｓ ｆ ｏ ｉ ａｉ ｌ ｅｂ ｏｏｉ ｔｉ ｓｒｃ ｊｃｉ ： ｅｅｍｉｅｔｅｎ ｍｅｉ ｌ ｌ ｆｌ ｔｄ ｎ ｅｏ ｄｕ ｓｌ ｙａ ｙｃ ｌｒ ｖ ｃ ｖｕ ｇ ｓ ｍ ｃ ｔ ｍｅｒ ｃ ａ ａｙｉ，ｎ ａｃｌｔ ｓｐａｍａｈ ｌ ｌｅ Ｍｅｈ ｄ ： ｆｅ ｔａ ｅ ｏ ｓｉ ｅｔ ｎ １ ｅｃｎ ｏ ｉ ａ ｃ ｌｔ ｌ— ｎ ｌｓ ａ ｄ ｃｌ ａｅｉ ｌ ｓ ｕ ｔ ｓ ａｆ ｉ ． ｔｏ ｓ Ａ ｔｒ ｎ ｒｖ ｎ ｕ ｊｃｉ ０ ｐ ｒｅ ｔ ｄｕ ｓ ｌ ｙａｅｓ ｕ ｆ ｉ ｎ ｏ ｓ ｍ ｉ ｏ
Ｘｌ
缉
１
０． ０ ５
２
０． ８ １
３
０． ６ １
４
０． ５ １
５
０． ８ １
６
０． ２ １
７
０． ４ １
８
０． １ ２
９
０． ４ １
１ ０
０． ２ ２
１ １
０． ９ １
ｘ ２
Ｔｔ ／ ２
００ ．８
１．５ １３
０ ０ ．８
三 氯 化 铁 ０ ５ｍｌ摇 匀 后 可 显 色 ， 分 光 光 度 计 ５ ０ ． ， 在 ２ ｎｎ波 长 下 ， 第 一 管 校 “ ” ， 定 其 它 两 管 的 光 Ｉ 用 ０管 测
密 度 值 ｘ 、２ １ｘ 。
用于药代动力学 的研究 ， 有 关其 血浆 半 衰期 的研 但 究数据各 实验室相差较 大 。本文测定 了家兔耳缘静 脉 注射水杨 酸 钠后 的浓 度一 时 间过程 ， 算相 应 的 计
２
【精品】水杨酸钠半衰期的测定
【精品】水杨酸钠半衰期的测定水杨酸钠是一种常用的药物，广泛应用于治疗炎症和疼痛等疾病。
了解其药代动力学参数对于对药物的合理使用非常必要，而药物的半衰期是其中一个比较重要的指标。
本研究旨在测定水杨酸钠在人体内的半衰期，并探讨其影响因素。
一、实验方法1、药物注射将水杨酸钠溶解在10毫升的生理盐水中，注入人体体内。
2、血液采集在药物注射后，每隔一定时间采集被测者的血液样本，同时记录每次的时间。
3、样本处理采集的血液样本在室温下放置一定时间，离心去除血细胞，再将血样转移到新离心管中，冰箱中保存以用于后续分析。
4、分析测定采用高效液相色谱法（HPLC）对血样中的水杨酸钠含量进行分析。
同时，将测得的水杨酸钠含量值与采集样本时间进行对比，绘制药物浓度-时间曲线。
5、半衰期计算根据药物浓度-时间曲线，计算药物的半衰期，公式为T1/2=0.693/K。
其中，K为药物消除速率常数。
二、实验结果1、药物浓度-时间曲线根据实验测定到的数据，得到水杨酸钠的药物浓度-时间曲线如下图：（图片）2、药物的半衰期三、实验分析从实验结果可以得出，水杨酸钠在人体内的半衰期为3.5小时。
这说明，水杨酸钠在人体内的代谢速度较快，需要在相对短的时间内进行频繁的使用才能维持药物浓度的稳定。
此外，半衰期的长短受到许多因素的影响，如体内药物代谢酶的活性、肝功能状态等。
因此，需要将半衰期测定结果与个体情况结合考虑，制定合理的用药方案。
根据本实验结果，得出以下结论：1、水杨酸钠在人体内的半衰期为3.5小时。
2、个体差异和一些因素可能影响药物的半衰期，需要在用药时进行综合考虑。
药理学-药理实验2水杨酸钠半衰期的测定
半衰期计算与结果分析
半衰期计算
根据血药浓度随时间变化的曲线图，计算出水杨酸钠的半衰期。
结果分析
分析实验结果，比较不同个体或不同条件下的血药浓度和半衰期，探讨水杨酸钠在体内的代谢和排泄规律。
结果解释与讨论
结果解释
根据实验结果解释水杨酸钠在体内的代谢和排泄机制，以及影响半衰期的因素。
讨论
结合实验结果和相关文献，探讨水杨酸钠的药理作用、临床应用和不良反应，为进一步的药理学研究 和临床用药提供参考。
问题3
实验操作过程中存在误差。
解决方案
加强实验操作培训，提高实验人员的操作技能和责任心 。
对实验的改进建议与展望
建议1
优化动物模型的生理特征，使其更接近人类。
建议2
采用更准确的血药浓度测定方法。
建议3
加强实验操作培训，提高实验结果的可靠性。
展望1
将本实验方法应用于其他药物的药代动力学研究。
展望2
探索更多种动物模型在药代动力学研究中的应用。
通过测定水杨酸钠的半衰期，可以了解该药物的消除速度 ，从而为制定合理的给药方案提供依据。同时，半衰期也 是评估药物疗效和安全性的重要参考指标。
水杨酸钠半衰期的意义
水杨酸钠半衰期是评价药物在体内消除速度的重要指标， 对于指导临床用药、制定给药方案以及评估药物疗效等方 面具有重要意义。
通过测定水杨酸钠的半衰期，可以了解该药物的消除速度 ，从而为制定合理的给药方案提供依据。同时，半衰期也 是评估药物疗效和安全性的重要参考指标。
掌握药理学实验的基本操作流程
实验前准备
准备实验器材、试剂，确保实 验环境符合要求。
数据处理
对采集的数据进行处理和分析 ，计算水杨酸钠的半衰期。
药代动力学参数测定
药代动力学参数测定水杨酸钠血浆半衰期的测定 【目的和原理】掌握用分光光度法测定水杨酸钠（sodium salicylate）的血药浓度,并学会用公式计算半衰期。
水杨酸钠在酸性环境中成为水杨酸（salicylic acid），与三氯化铁生成一种紫色络合物。
该络合物在520nm 波长下比色，其光密度与salicylic acid 浓度成正比。
反应式为：OH CO O H【实验对象】【实验器材和药品】 722分光光度计、离心机、50ml 烧杯、effendorff 管、加样器（1000μl）、试管、试管架、记号笔、兔手术台、手术器械一套、动脉插管、注射器（2ml、5ml、10ml）、BL-410生物机能实验系统。
10%水杨酸钠，0.02%水杨酸钠标准液，10%三氯醋酸，10%三氯化铁，0.3%肝素生理盐水，1%普鲁卡因等。
【实验步骤和观察项目】1. 取兔一只，称重，然后将其固定在兔手术台上。
2. 颈总动脉插管：用1%普鲁卡因在颈部正中局麻后，在气管上方将皮肤剪一纵向开口，用止血钳钝性分离皮下筋膜及肌肉组织，将气管暴露，在气管旁边可见较粗大的颈总动脉，将其与周围的组织分离，然后将充满肝素生理盐水的动脉插管插入，固定确切。
由颈总动脉缓慢给入0.2%肝素生理盐水，1ml/kg，防止凝血。
3. 取试管5只编号，各管中加入10%三氯醋酸3.5ml。
4. 由颈总动脉放血2ml，分别放入1号管（对照管）和2号管（标准管）内各1.0ml,摇匀静置。
5. 由耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠，2ml/kg，给药后开始计时。
6. 给药后10min、25min、40min，先后取血1ml，分别置于3 、4、5号试管内，摇匀静置。
7. 以0.02%水杨酸钠标准液1ml 放入2号管内，其余各管加入蒸馏水1ml，摇匀。
8. 将5支试管离心5分钟（2000转/分），精确吸取上清液3.0ml，分别放入另一编号的试管中，每管加10%三氯化铁0.5ml，摇匀显色。
毒理学实验指导一、二
《食品毒理学》实验指导综合实验（四氯化碳）对肝脏谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT) 的影响实验实验一半衰期的测定-比色法测定水杨酸钠的血浆半衰期实验二血液红细胞、白细胞计数*所需实验仪器：电子天平、pH计（试纸）、显微镜、分光光度计、灌胃针头、（小）/（大）离心机、注射器。
实验一半衰期的测定-比色法测定水杨酸钠的血浆半衰期一、原理、目的药物血浆半衰期t1/2即血浆药物浓度下降一半所需的时间。
绝大多数药物是按一级动力学规律消除（恒比消除），因此每种药物都有固定的t1/2，不因血浆浓度高低而改变。
本实验用分光光度法测定水杨酸钠的血浆浓度并计算t1/2。
水杨酸钠为抗炎药，经肝代谢，在酸性环境中与三氯化铁生成一种紫色的络合物，在520nm波长下比色，其光密度与水杨酸浓度成正比。
通过测定水杨酸钠的血浆半衰期，使学生了解水杨酸钠在体内的消除速度，并掌握其血浆半衰期的测定方法。
半衰期是判断毒物蓄积程度的重要参数，对中毒和解毒有一定的实践意义。
二、试剂、器材及动物离心管、试管、磅秤、玻璃棒、注射器、吸管、离心机、721型分光光度计；三氯醋酸、水杨酸钠、三氯化铁；兔。
三、方法步骤1、取离心管和试管各5支，分别标为1~5号，备用。
5支离心管各加入10％三氯醋酸7ml。
2、取兔1只，称体重，从耳静脉取血2ml置入1号离心管，用玻璃棒搅拌。
然而自耳静脉注入10%水杨酸钠(剂量为150mg/kg)，并立即和60min后两次自另一耳静脉取血2ml，分别注入2、3号离心管中，搅拌。
4、5号离心管分别加入蒸馏水和0.02%水杨酸钠2ml。
3、取上述5支离心管进行离心(2 000r/min，5min)，准确吸取上清液6ml放入编号相对应的试管中，分别滴入10%三氯化铁12滴(0.6m1)摇匀5min后比色。
4、用721型分光光度计510nm波长比色，以4号管调“0”，读得5号管光密度为x，再以1号管调“0”，读得2号管为x1，3号管为x2，将上述操作归纳为下表：水杨酸钠血浆半衰期的测定试管名编号三氯醋酸（ml）兔血（ml）0.02%水杨酸钠（ml）蒸馏水（ml）离心上清液（ml）三氯化铁（gtt）对照 1 7 2 —— 6 12 立即 2 7 2 —— 6 12 60min 3 7 2 —— 6 12 空白 4 7 —— 2 6 12 标准 5 7 — 2 — 6 125、计算半衰期①求k值：k=y/x; y=0.02②求水杨酸钠血浓度：给药后立即血浓度y1=kx l；给药后60min血浓度y2=kx2 。
药理实验2
光密度（X）
k值ห้องสมุดไป่ตู้
血药浓度（Y）
结果:用分光光度计测定结果，计算水杨酸钠的半衰期
表1 分光光度法测定静注水杨酸钠血药浓度
管号 标准管 A号（给药前对照管） B号（5分钟取血管） C号（30分钟取血管）
计算半衰期：t1/2=0.301△t/(logy1-logy2) 讨论题:测定药物半衰期的意义 注意事项 （1）剂量要准确，时间掌握好。 （2）用肝素浸润注射器。 （3）给药后应保持室内安静，避免刺激实验动物。
实验二 水杨酸钠半衰期（t1/2）测定
目的：了解药物半衰期的简单测定方法；学习兔采血 技术。 原理：水杨酸钠在酸性环境中成为水杨酸，可与三氯 化铁生成一种配位化合物。该化合物在510nm波长 下比色，其光密度值与水杨酸的浓度成正比。利用 比色法测定药物在血中两个以上的浓度值，可求得 药物的血浆半衰期。用标准管内水杨酸钠浓度y与 光密度x，求比值k=y/x。再根据k=y/x由x1和x2，求 得y1和y2，进行半衰期的计算， t1/2=0.301△t/(logy1-logy2)。
动物:家兔、体重2.5kg～3kg 药品:10%三氯乙酸、0.5%肝素、10%水杨酸钠、0.02% 水杨酸钠、10%三氯化铁 器材：注射器、镊子等
方法步骤: （1）取离心管3支，分别标记A、B、C，各加入10%三氯乙酸3.5毫 升。 （2）取家兔1只，称重后由耳缘静脉取血1毫升（用浸润肝素的注 射器）置于A管内。 （3）由耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠150mg/kg，并记录注射完毕 时间。 （4）给药后5分钟以及间隔25分钟，先后由耳缘静脉取血1毫升 （用浸润肝素的注射器）分别置于B、C管内，记录取血的准确时 间t0以及t1，计算△t值。 （5）将三只离心管摇匀，以2000转/分钟的转速离心5分钟，取上 清液加10%三氯化铁0.3毫升，摇匀，显色。 （6）以给药前管为对照，用分光光度计510nm波长测定光密度x1和 x2。 （7）配标准管和空白对照管： 水杨酸钠0.02%2毫升+10%三氯乙酸3.5毫升+三氯化铁0.6毫升 空白管：蒸馏水2毫升+10%三氯乙酸3.5毫升+三氯化铁0.6毫升。
最新药理学药理实验2 水杨酸钠半衰期的测定1幻灯片课件
0.301
t1/2 =
_____________ (lgX1-lgX2)/Δt
式中X1、X2分别为血药浓度值，Δt为两次取血间隔时间。
11.实验结果记录：
试管
10%三 氯醋酸
1号（对照管） 3.5ml
2号（标准管） 3.5ml
3号（10min） 3.5ml
4号（25min） 3.5ml
血 1.0ml 1.0ml 1.0ml
期货市场
股票市场
（2）期货市场的操作可以当 （2）股票市场的操作是当天 天进出买卖,即T+0交易。 买进,第二天才可以卖出,即
T+1交易。
（3）期货市场的保证金交易 制度使投资者可以“以小搏 大”, 保证金实行逐日结算， 因此更强调资金管理 。以
（3）股票市场是全额保证金 买卖,无追加保证金之虞。如 10万的资金最多只能购买等额 10万的股票
7.以0.02%水杨酸钠标准液1ml放入2号管内，其余各管加 入蒸馏水1ml，摇匀。
8.将5支试管离心5min（2000转/分），精确吸取上清液 3.0ml，分别放入另一编号的试管中，每管加10%三氯化铁 0.5ml，摇匀显色。
9.在酶标仪520nm波长下，测定各管的光密度值。
10.由标准管的光密度值（Y）和已知浓度（X）求比值K， 再通过X=K Y，求得其余各管的浓度值，代入下 式：
（一） 1848年芝加哥期货交易所产生 （二） 1874年芝加哥商业交易所产生 （三） 1876年伦敦金属交易所产生
中国期货发展
1990年10月12日，中国郑州粮食批发市场经国务院 批准，以现货交易为基础，引入期货交易机制，作为 我国第一个商品期货市场开业，迈出了中国期货市场 发展的第一步。纵观我国期货市场的发展历史，从 1986年就开始了理论探讨。开始试点后基本上经历了 以下发展阶段： 初步形成阶段(1990年-1994年) 清理整顿阶段(1995年-2000年) 规范发展阶段(2001年至今)
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5ml注射器
【注意事项】
整个操作过程中应注意枪头、移液管、试管之间不 能相互污染
放血操作时，一开始放出的血舍去不用 离心时必须将套管＋离心管配平 分光光度计分析时需将比色皿的光面用擦镜纸擦净
擦干
【数据处理】
（1）求算水杨酸浓度（Y）分光密度（X）的比例常数。 K＝Y/X
（2）求算水杨酸钠血浓度 给药后 5分钟血浓度 Y1=KX1 给药后30分钟血浓度 Y2=KX2
麻醉→固定→颈总动脉插管→耳缘静脉注入0.5%肝素
1ml/kg→松开动脉夹放血于空白试管→移液器 精密量
取1ml于1号试管、搅拌 3、耳缘静脉注入5%水杨酸钠5ml/kg，计时→注射后
5'，30'时松开动脉夹放血于空白试管→移液器 精密量
取1ml，分别加入2、3号试管，分别用洁净玻棒搅拌
【实验步骤】-2
4、4号和5号试管先后用1ml移液管 加入蒸馏水和
0.05%水杨酸钠各1ml。 5、取1、2、3试管进行离心（3000转×5'）→（用
5ml注射器＋长针头）准确吸取上清液3ml转移至 相同编号的另一套试管中→用移液器 精密加入
10%三氯化铁0.3ml→摇匀 6、722型分光光度计于510mu波长比色：以4号管
水杨酸钠 半衰期的测定
医学院药理学系
【实验目的】
学习
取空白 样本
采不同时间点 含药体液样本
分析测定
绘制CT曲线 计算拟合参数
【实验步骤】-1
1、取试管5支，分别标1-5号，用5ml移液管 加入10%
三氯醋酸5ml 2、取家兔一只→称重→乌拉坦（5ml/kg）腹腔注射
调“零”读出5号管光密度（A）（记为X）→再以 1号管调零,读出2,3管的光密度（A）（记为X1和 X2）
Protocal
1
2
3
4
5
10%三氯醋酸5ml
5ml 移液管
0’
5’
30’
蒸馏水 0.05%水杨酸钠 1ml枪
充分混匀后离心（3000转×5'）
无处理
取3ml上清移至另一套试管 并加入10%三氯化铁0.3ml，摇匀 于510mu波长比色： 以4号管调“零”读出5号管光密度（A）（记为X） 以1号管调零,读出2,3管的光密度（A）（记为X1和X2）