姜黄多糖提取工艺优化研究

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姜黄做实验报告

一、实验目的1. 探究姜黄中有效成分的提取方法；2. 评价姜黄提取物的抗氧化活性；3. 分析姜黄提取物的抗氧化作用机制。

二、实验材料1. 姜黄粉末：购自药材市场；2. 乙醇、甲醇、水等溶剂；3. 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）、维生素C（Vc）、亚硝酸钠等试剂；4. 721型可见分光光度计；5. 电子天平、超声波清洗器、旋转蒸发仪等仪器。

三、实验方法1. 姜黄提取（1）采用超声波辅助提取法：将姜黄粉末加入适量溶剂，置于超声波清洗器中，超声提取30分钟；（2）采用微波辅助提取法：将姜黄粉末加入适量溶剂，置于微波炉中，微波提取10分钟；（3）采用传统回流提取法：将姜黄粉末加入适量溶剂，置于电热套中，回流提取2小时。

2. 姜黄提取物抗氧化活性测定（1）DPPH自由基清除实验：取适量姜黄提取物，加入一定浓度的DPPH溶液，室温下反应30分钟，测定吸光度值；（2）亚硝酸盐还原实验：取适量姜黄提取物，加入一定浓度的亚硝酸钠溶液，室温下反应30分钟，测定吸光度值；（3）超氧阴离子自由基清除实验：取适量姜黄提取物，加入一定浓度的超氧阴离子自由基溶液，室温下反应30分钟，测定吸光度值。

3. 数据处理采用SPSS 22.0软件对实验数据进行统计分析，采用单因素方差分析（One-way ANOVA）和Duncan检验进行差异显著性分析。

四、实验结果1. 姜黄提取方法比较（1）超声波辅助提取法：姜黄提取率为15.2%；（2）微波辅助提取法：姜黄提取率为14.8%；（3）传统回流提取法：姜黄提取率为13.6%。

结果表明，超声波辅助提取法和微波辅助提取法的姜黄提取率高于传统回流提取法。

2. 姜黄提取物抗氧化活性（1）DPPH自由基清除实验：姜黄提取物对DPPH自由基的清除率随浓度的增加而增加，在浓度为100μg/mL时，清除率为70.2%；（2）亚硝酸盐还原实验：姜黄提取物对亚硝酸盐的还原率随浓度的增加而增加，在浓度为100μg/mL时，还原率为48.6%；（3）超氧阴离子自由基清除实验：姜黄提取物对超氧阴离子自由基的清除率随浓度的增加而增加，在浓度为100μg/mL时，清除率为58.2%。

正交优化设计优选姜黄中姜黄素提取工艺

正交优化设计优选姜黄中姜黄素提取工艺目的研究姜黄中姜黄素的提取工艺。

方法运用正交设计法优选提取工艺，以高效液相色谱法测定姜黄中姜黄素的含量。

结果最佳提取工艺为采用30 mL 的75%乙醇提取3次，1.5 h/次。

结论优化的提取工艺简便、合理、重现性好，可为姜黄中姜黄素的制备及姜黄的进一步开发利用提供参考。

标签：姜黄；姜黄素；HPLC；正交设计；提取工艺姜黄为姜科姜黄属植物Curcuma longa L.的干燥根茎[1]。

始载于《新修本草》，在《本草纲目》、《本草拾遗》等文献中均有记载，因其根茎呈黄色，形似生姜而圆，故得其名。

姜黄性温，味辛、苦，归脾、肝经；具有破血行气、通经止痛的作用，临床用于治疗胸胁剌痛、闭经、跌扑肿痛等[2]。

现代药理研究表明其还具有抗炎、抗肿瘤、抗氧化、对消化系统和心血管系统等作用。

姜黄素为姜黄中主要的有效成分之一，且具有多种药理活性，本实验通过正交试验方法优选出了其最佳提取方法。

1实验器材与试药1.1实验仪器BP211D型电子天平（德国赛多利斯）；CG-16W高速微量离心机（北京医用离心机厂）；安捷伦Ageilent 1100高效液相色谱仪，含在线真空脱气机器（G-1322A），智能化柱温箱（G-1316A），可变波长检测器（G-1313A），二极管阵列检测器，Agilent1100 series色谱工作站（美国安捷伦科技公司）等。

1.2实验试剂乙腈（色谱纯，国药集团化学试剂有限公司）；水（娃哈哈矿泉水）等；其它试剂均为分析纯。

1.3实验材料本实验所用的姜黄药材样品于2012年由广西金秀瑶族自治县连诚农产品贸易有限公司提供，产自广东，经广西中医药大学中药鉴定教研室蔡毅教授鉴定均为Curcuma longa L.的干燥根茎。

姜黄对照药材（四川省维克奇生物科技有限公司，批号120407）；姜黄对照品（四川省维克奇生物科技有限公司，纯度HPLC≥98%，批号111212）。

2方法与结果2.1色谱条件色谱柱：Agilent Eclipse XDB-C18（150×4.6 mm，5？m）；流动相：乙腈-1%冰醋酸（45：55）；流速：1.0 mL/min；柱温：35℃；进量体积：10 μL；检测波长：430 nm。

生姜多糖的提取

按1：5加入无水乙醇80℃回流2 h，重复2次。过滤后风干备用。
5.3 提取准确称取生姜多糖粉末40克按照确定的料液比:1:14、温度:90℃和时间:2.5小时在圆底烧瓶中反应。
5.4沉淀
将提取液加入一定量的无水乙醇，使最后乙醇浓度达到80%（同时加入1‰氯化钾溶液）,生成白色沉淀后过滤烘干称重:19克。
溶解后进行比色，计算多糖的含量，每组做3 个重复，求平均值。
1.提取温度对生姜多糖得率的影响
在料液比和提取时间相同的前提下，采用5个不同温度(75℃、80℃、85℃、90℃和 95℃)对生姜多糖进行提取试验。
多糖提取的最适温度不同实验温度对生姜多糖的影响如图2-1
• 由图2-1可知，随着温度的升高，生蒸姜多糖的得率逐渐增大，90℃时生姜多糖的得率达到最高(4．23％)。在60—80℃之间曲线的斜率逐渐增大，而后曲线斜率逐渐减小。这是由于温度的升高加速了生姜多糖分子的扩散和运动而利于生姜多糖分子克服生姜内分子间约束而溶胀于水中，当温度升至90℃ 时生姜多糖的得率也达到了4.32％。因此，选取80一95℃作为生姜多糖提取试验的温度范围较为合理。
2 提取时间对生姜多糖得率的影响
• 在90℃的条件下，按料液比l：14，采用6 个不同提取时间(60 min、90 min、120 min、150 min、180 rnin和210 min)对生姜多糖进行提取试验
• 不同提取时间对生姜多糖提取率的影响如图 2-2
• 由图2-2可知，随着提取时间的延长，生姜多糖的得率呈现增大趋势。从多糖得率曲线的斜率可以看出：150 min以前生姜多糖得率曲线的斜率逐渐增大，特别是在120— 150 min内的变化尤为明显，而后斜率逐渐减少。这是由于生姜多糖在水溶液中溶解和扩散达到了平衡而使多糖得率变化趋缓。因此从提取效率考虑，选用150—210 min作为生姜多糖提取试验的时间范围较为合适。

姜黄素的提取工艺研究

１按１，９（３４）正交设计表安排试验，用９０％乙醇回流提取，过滤合并滤液，离心，取上清液９０％乙醇定容至２５０ｍＬ，分别吸取提取色谱柱：ＨｙｐｅｒｓｉｌＣｌ８柱（４．６ｍｍｘ２００ｍｉｌ１）；流动相：甲醇一水液２０ｍＬ，水浴蒸干，甲醇溶解并定容至２５ｍＬ，０．４５Ｉｘｍ微孔滤（７２：２８）；检测波长：４２５ａｍ，柱温：２５ ℃；流速：１．０ｍＬ・ａｒｉｎ一１；进膜滤过，按上述色谱条件进样，以峰面积计算，得各组实验中姜样量：ｌＯｌＬ。黄素含量。结果见表２。合并提取液、滤过、水浴浓缩至一定程度，真空干燥至恒重，精密称量，计算出膏率。２溶液的配制表２正交试验设计表及结果２．１对照品溶液的制备：精密称取姜黄素对照品，加甲醇制成０．０６ｍｇ・ｍＬ的溶液，０．４５ｍ微孔滤膜滤过即得。２．２供试品溶液的制备：取姜黄色素粉末（过３号筛）约０．１ｇ，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇：ｌＯｍｌ，称定重量，加热回流３０分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，离心，精密量取上清液ｌｍｌ，置２０ｍｌ量瓶中，加甲醇稀释至

多指标综合评分法研究姜黄色素的提取工艺

ＫＵＡＮＧｕｔｏ，ＬＩＸｉｎｚｏＣｈｎ—ａａｇ—ｈｕ，ＺＨＡＮＧｈｎＳｅｇ，ＸＵＥｉｐｎＨａ — ｅｇ，ＷＵＸｕｅ
（ｏｌｅｏｔｒｌｃｅｃｎｎｉｅｒｇＣｎｒｌｏｔｎｖｒｔｏｏｅｔｎｅｈｏｏｙＣａｇｈ１０，ｈｎ）ＣｌｇｆｅａＳｉｎｅａｄＥｇｅｉ，ｅｔｕｈＵｉｓｙｆｒｓｙａｄＴｃｎｌｇ，ｈｎｓａ４００ＣｉａｅＭａｉｎｎａＳｅｉＦｒ４
ｙｅｄｏｕｃｍｉｏｄｓ３ｉｌｆｃｒｕｎｉｓｉ７％，ａｄｔｅｓａｅｇｎａｅｆＤＰＨ・ａｄ・４．ｎｈｃｖｎｉｇｒｔｓｏＰｎＯＨｅ８５ｔａ．８％ａｄ２６ｎ０．７％，ｒｓｅｔｅｙｅｐｃｉｌ．ｖＫｅｒｓｍｕｔｉｄｘｓｃｍｐｅｅｓｖｖｕｔｎｍｅｈｄ；ｕｃｍｉｅｔａｔｎ；ｉｈｎｌｐｅｙｙｒｚｌｒｅｒｄｃ；ｙｒｘｌｙｗｏｄ：ｌ —ｎｅｅｏｒｈｎｉｅｅａａｉｔｏｃｒｕｎ；ｘｒｃｉｄｐｅｙｉｒｌｈｄａｙｅａｉａｈｄｏｙｉｌｏｏｆｌ
Ｓｕｙｏｔａｔｎｏｒｕｎｉｓｂｌ —ｎｅｅｔｄｎＥｘｒｃｉｆＣｕｃｍｉｏｄｙＭｕｔｉｄｘｓｏｉＣｏ３ｅ１ｎｌｅＥｖｌａｉｎＭｅｏｒｈ，ｖａｕｔｏｅｈｄｎ１ｅ＂ｍｐ１ｓｔｏＯ
分数９０％、取时间１５ｈ料液比１８ｇｍＬ，提．、：（：）该工艺条件下姜黄色素得率为４３．７％，ＰＨ・ＤＰ清除率８５．８％，Ｏ・Ｈ清

生姜多糖的提取及抗氧化作用研究

生姜多糖的提取及抗氧化作用研究作者：孟宪伟罗亮孙源赵志刚王世会张瑞郭坤来源：《安徽农业科学》2024年第11期摘要采用超声辅助提取法从生姜中提取多糖，采用单因素和正交试验对生姜多糖提取工艺进行优化，结果发现：生姜多糖最佳提取工艺为液料比1∶20，匀浆时间5 min，匀浆温度70 ℃，超声时间80 min为宜，超声温度80 ℃，超声波功率为100 W，在该条件下多糖得率为12.56%。

抗氧化活性测定结果表明，生姜多糖在5 mg/mL时对羟基自由基的清除能力可达到90.96%，且还原力最强。

关键词生姜多糖；提取；结构表征；抗氧化作用中图分类号 R284 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2024）11-0149-05doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2024.11.032Study on Extraction and Antioxidant Effect of Polysaccharide from Zingiber officinale Roscoe MENG Xian-wei1，2， LUO Liang2， SUN Yuan1 et al（1. Research Center of Pharmaceutical Engineering， Harbin University of Commerce，Harbin， Heilongjiang 150076；2.Heilongjiang River Fisheries Research Institute， Chinese Academy of Fishery Sciences， Harbin， Heilongjiang 150070）Abstract Ultrasonic assisted extraction method was used to extract polysaccharide from Zingiber officinale Roscoe. First， single factor and orthogonal test were used to optimize the extraction process of Zingiber officinale Roscoe polysaccharide. The experimental results showed that the optimal extraction process of Zingiber officinale Roscoe polysaccharide was as follows： liquid to material ratio 1∶20， homogenization time 5 min， homogenization temperature 70 ℃， ultrasonic time 80 min and ultrasonic temperature 80 ℃. Under the condition of ultrasonic power of 100 W，the yield of polysaccharide was 12.56%. Then， the antioxidant activity of the extracted Zingiber officinale Roscoe polysaccharide was determined. The experimental results showed that the hydroxyl radical scavenging ability of Zingiber officinale Roscoe polysaccharide reached 90.96% at 5mg/mL， and the reducing power was the strongest.Key words Zingiber officinale Roscoe polysaccharide;Extraction;Structural characterization;Antioxidation基金項目哈尔滨商业大学青年学术骨干支持计划项目（2020CX10）；黑龙江省省属高等学校基本科研业务费科研项目（2023-KYYWF-1036）；黑龙江省博士后科研启动金项目（BS0062）。

姜黄属多糖的提取分离和含量测定研究进展

2019年第12期综述姜黄属植物应用价值广泛，不仅在染料、化妆品等化工领域表现突出，在医药领域也表现出重要的药用价值[1]。

常用中药姜黄、郁金和莪术均来源于该属植物，研究表明姜黄素和挥发油是姜黄属的主要成分，较少涉及对多糖的研究，随着近年来研究者对多糖的关注，发现多糖在抗肿瘤、抗氧化、抗炎和降血脂等方面表现突出[2-4]，多糖的生物活性与其提取分离和纯化有着重要的关系，因此，本文就多糖的提取工艺、分离纯化和含量测定进行系统论述，以期为姜黄属多糖的利用和开发提供参考。

1提取工艺1.1溶剂提取法多糖，极性大分子化合物，溶于水，水是最常用的提取多糖的溶剂，不仅可以用冷水提取，还可以用热水提取，一般提取植物多糖多采用热水提取法，再通过高浓度的乙醇醇沉得到多糖。

杨海玲[5]采用热水提取的方法，分别对料液比、粉碎目数、提取温度、提取时间4个因素进行考察，通过正交试验筛选条件，最终确定100目粉末，在料液比为1∶40（g·mL-1）和100℃水浴加热提取4h条件下，提取率为13.86%，提取效率高。

不仅可以用传统的水提法，还可以用稀碱、稀醇等溶液提取。

葛青[6]用稀碱溶液对姜黄水溶性多糖进行提取，将响应面法应用到对提取因素的考察中，通过对提取时间、料液比、提取温度和碱液浓度影响因素进行考察，确定了最佳工艺条件，在料液比1∶40，提取时间2.4h，提取温度65℃，1mol·L-1NaOH条件下，多糖提取率高可达1.33%，药理研究表明该糖具有较强的抗氧化野津，张文森，王知斌，孟永海，孙延平，匡海学（黑龙江中医药大学，教育部北药基础与应用研究重点实验室，黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室，黑龙江哈尔滨150040）摘要：姜黄属植物因其独特的活性成分广泛的应用于化工、医药领域，除了姜黄素和挥发油是其主要药效成分外，多糖因具有多种生物活性而受到关注，所以本文就姜黄属多糖的提取工艺、分离纯化和含量测定进行系统论述，以期为姜黄属多糖的相关研究提供参考。

罗平小黄姜多糖提取工艺的优化及抗氧化活性测定

ｓｏｌｉｄ — ｌｉｑｕｉｄｒａｔｉｏｉｓ１：２０，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｉｓ９０ ℃ ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅｉｓ１６０ｍｉｎ．Ｕｎｄｅｒｔｈｅ
摘要：采用水提醇沉法提取罗平小黄姜中的多糖，正交试验显示最佳提取工艺为料液比１ｔ２Ｏ、提取温度
９Ｏ℃、提取时间１６０ｍｉｎ，在此条件下罗平小黄姜多糖的得率达到６．１６。此外，当多糖浓度达到１．０ｍｇ／ｍＬ
ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓａｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｔｅｓｔａｓｆｏｌｌｏｗｓ：
溶性多糖、姜酚和黄酮等有效成分，具有降血脂、抗氧
化、降胆固醇、治疗心血管疾病等功效［１］。生姜具有重要的药用价值及广阔的发展前景［５］，但对罗平小
黄姜的研究甚少，本文利用水提醇沉法提取罗平小黄
ＺＨＡＯＣｏｎｇ－ｃｏｎｇ。ＰＥＮＧＣｈｕｎ－ｙａｎ
（ＱｕｊｉｎｇＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｑｕｊｉｎｇ６５５０１１，Ｃｈｉｎａ）

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６９０．ｉｓｓｎ．１００５－６５２１．２０１５．１０．００７
食品研究与开发
ＦｏｏｄＲｅｓｅａｒｃｈＡｎｄＤｅｖｅｌｏ
２０１５年５月
１００ｏＣｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅａｎｄｏｒｆ４ｈ．Ｉｎｔｈｉｓｃｏｎｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｉｎＣｕｒｃｕｍａｌｏｎｇａＬ．ｃｏｕｌｄｂｅｅｘｔｒａｃｔｅｄｍｏｒｅｃｏｍｐｌｅｔｅａｎｄｔｈｅｒａｔｉｏｏｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｗａｓ１３．８６％．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＣｕｒｃｕｍａｌｏｎｇａＬ．ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ：；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｄｅｓｉｇｎ
５３２２００，Ｇｕａｎｇｘｉ，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｉｓｅｘｐｅｉｍｅｒｎｔｗａｓｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｉｎＣＩｘｒｃｕｒｒｔａｌｏｎｇａＬ．．ｈｅＴｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｗｅｒｅｕｓｅｄｏｎｓｉｎｇｌｅｆａｃｔｏｒｓａｎｄｏｔｈｒｏｇｏｎａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．ｈｅＴｐａｒｔｉｃｌｅｓｉｅｖｅｓｉｚｅｏｆｐｏｗｄｅｒｓ，ｍａｔｅｉａｒｌｔｏｓｏｌｖｅｎｔ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅａｎｄｈｏｕｒｓｗａｓｅｘａｍｉｎｅｄ．ｈｅＴｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｂｅｓｔ
（１．ＣｈｅｎｇｄｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴＣＭ，Ｃｈｅｎｇｄｕ６１００７２，Ｓｉｃｈｕａｎ，Ｃｈｉｎａ；２．ＧｕａｎｇｘｉＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃａｌ
ｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｗｅｒｅａｓｆｏｌｌｏｗｓ：１００ｐａｒｔｉｃｌｅｓｉｅｖｅｓｉｚｅｏｆｐｏｗｄｅｒｓ，ｍａｔｅｒｉａｌｔｏｓｏｌｖｅｎｔ１：４０（ｇ／ｍＬ），
第３６卷第１０期
２３＝＝Ｉ
姜黄多糖提取工艺优化研究
杨海玲－，一，黄文男，林婕。许丹妮－ ‘ （１．成都中医药大学，四川成都６１００７２；２．广西中医药大学，广西南宁５３０００１；３．广西民族师范学院，
ＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅＯｐｔｉｍａｌＥｘｔｒａｃｔｉｏｎＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｉｎＣｕｒｃｕｍａｌｏｎｇａＬ．
ＹＡＮＧＨａｉ — ｌｉｎｇ。－一，ＨＵＡＮＧＷｅｎ — ｎａｎ，ＬＩＮＪｉｅ，ＸＵＤａｎ — ｎｉ。，
广西崇左５３２２００）
摘要：探讨姜黄多糖提取最佳工艺。采用单因素与正交实验设计法，对料液比、粉碎目数、提取温度、提取时间４个
因素进行考查。结果姜黄多糖的最佳工艺条件为：１００目粉末在料液比为１：４０（ｇ／ｍＬ）条件下，１００℃水浴加热提取４ｈ。在该条件下，姜黄多糖更加完全，提取率为１３．８６％。关键词：姜黄；多糖；正交试验
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｎｉｎｇ５３０００１，Ｇｕａｎｇｘｉ，Ｃｈｉｎａ；３．ＧｕａｎｇｘｉＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｆｏｒＮａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ，Ｃｈｏｎｇｚｕｏ