液相色谱仪
液相色谱仪操作流程

液相色谱仪操作流程液相色谱仪(Liquid Chromatography, LC)是一种常见的分析仪器,被广泛应用于化学、生物化学、制药、环境监测等领域。
正确的操作流程对于获得准确的分析结果至关重要。
本文将介绍液相色谱仪的基本操作流程。
1. 仪器设置在开始操作液相色谱仪之前,首先需要进行仪器设置。
操作人员需要将色谱柱与色谱仪连接好,并确保连接处密封良好,以避免泄漏。
接下来,调整色谱柱的工作温度和流速,根据实验需求选择合适的检测波长和检测器类型。
确保仪器处于正常工作状态后,即可进行样品的准备与进样操作。
2. 样品准备液相色谱仪需要对待分析物进行溶解、过滤等预处理步骤。
首先,称取适量的待分析样品,然后加入适量的溶剂,将待分析物充分溶解。
溶解后,使用0.22μm的微孔滤膜过滤液体,以去除悬浮物和微粒。
确保样品无杂质后,即可进行进样操作。
3. 进样操作将经过处理的样品注射进液相色谱仪中,可以通过手动进样或自动进样方式进行。
手动进样需要使用微量注射器,将适量的样品吸入注射器,然后注射到进样口;自动进样则通过液相色谱仪的自动进样器完成。
确保样品进样完全后,即可开始进行分析。
4. 色谱条件设定根据待分析物的性质和分析目的,需要设定好液相色谱的参数。
这些参数包括:流动相的组成和流速、柱温、梯度程序等。
调整这些参数可以影响分析结果的分离效果和分析时间。
合理设定色谱条件可以提高分析的准确性和灵敏度。
5. 数据采集与解析启动液相色谱仪,开始采集数据。
液相色谱仪会根据设定的方法进行数据采集,并将采集到的数据保存在计算机中。
数据采集完成后,可以使用相应的色谱软件对数据进行解析和处理,包括峰面积计算、定量分析、峰识别等。
6. 仪器维护与保养操作结束后,需要对液相色谱仪进行适当的维护与保养工作。
包括清洗进样口和色谱柱,检查各部件的密封性能,并及时更换损坏的零部件。
定期进行系统的校准和液相色谱针对性保养,确保仪器的正常工作状态和精确性。
液相色谱仪工作原理

液相色谱仪工作原理液相色谱仪(HPLC)是一种高效的分离和分析技术,它通过将混合物中的化合物分离并检测其成分,从而在化学、生物、制药等领域得到广泛应用。
其工作原理基于样品在流动相中的分配行为,通过固定相与流动相之间的相互作用来实现化合物的分离和检测。
1. 流动相在液相色谱仪中,流动相是指用于将样品从进样口输送到检测器的溶剂。
流动相的选择对色谱分离至关重要,通常根据样品的性质和分离的要求来选择。
流动相可以是单一的溶剂,也可以是多种溶剂的混合物。
流动相的选择需要考虑到其对样品的溶解度、分离效果和检测器的适应性。
2. 固定相固定相是液相色谱仪中的另一个重要组成部分,它通常是一种固定在色谱柱内壁上的吸附剂或离子交换树脂。
固定相的选择取决于分析的目的和样品的性质。
固定相可以通过其对化合物的亲和性来实现色谱分离,不同的固定相对化合物的亲和性不同,从而实现对样品的分离。
3. 进样样品通过进样口进入色谱柱,然后被流动相带到固定相上,开始进行分离。
进样的方式包括手动进样和自动进样两种。
手动进样需要操作人员将样品手动注入色谱柱中,而自动进样则是通过自动进样器实现的,可以实现定量和连续的进样。
4. 色谱柱色谱柱是液相色谱仪中的核心部件,它是由固定相填充的管状容器。
色谱柱的选择取决于样品的性质和分离的要求,不同的色谱柱具有不同的分离效果和分离速度。
5. 检测器检测器是用于检测样品在色谱柱中分离出来的化合物的仪器,常见的检测器包括紫外-可见吸收检测器(UV-VIS)、荧光检测器、电化学检测器等。
不同的检测器对化合物的检测灵敏度和选择性不同,需要根据样品的性质和检测的要求来选择合适的检测器。
6. 数据处理液相色谱仪通常配备有数据处理系统,用于对检测到的信号进行处理和分析。
数据处理系统可以实现对色谱峰的识别、峰面积的计算、峰高的测量等功能,从而实现对样品成分的定量和定性分析。
综上所述,液相色谱仪工作原理是基于样品在流动相中的分配行为,通过固定相与流动相之间的相互作用来实现化合物的分离和检测。
液相色谱仪操作规程

液相色谱仪操作规程一、仪器介绍1.液相色谱仪是一种利用固定相和流动相对样品中的化合物进行分离和检测的仪器。
2.仪器包括主要部件:进样系统、色谱柱、检测器、数据处理系统等。
3.操作人员需要熟悉仪器的基本原理和结构。
二、实验前准备1.检查液相色谱仪是否正常工作,如有故障需要及时报修。
2.准备好所需的试剂、标准品、溶剂等。
3.安全操作,穿戴实验室必需的防护设备。
三、进样系统的使用1.打开试剂瓶盖前,先进行试剂瓶标识确认,避免误用。
2.根据实验需要,选择进样方式(自动或手动)。
3.对于自动进样方式,需要设置样品体积、流速等参数。
4.使用手动进样方式时,注意避免气泡进入进样器中。
四、色谱柱的使用1.色谱柱的选择需要根据样品的性质和分离效果进行合理选择。
2.在进行柱操作前应检查柱头是否完好,柱温是否正常。
3.进样之前应先进行空白试样,记录基线值。
五、检测器的操作1.根据实验需要选择合适的检测器类型(如紫外检测器、荧光检测器等)。
2.设置检测器的波长、增益等参数。
3.进行检测之前先对检测器进行暗噪声调零。
六、数据处理系统的使用1.打开数据处理系统前需要先进行登录和用户验证。
2.设置分析方法,包括样品名称、浓度范围等信息。
3.分析数据时对峰面积、峰高等进行计算和记录。
七、实验操作注意事项1.实验操作过程中需注意实验室卫生和个人安全,如佩戴实验手套、护目镜等。
2.严格按照实验操作步骤进行操作,不可随意更改实验参数。
3.禁止将未知物质试样直接注入色谱柱,应遵循进样规程。
八、实验后处理1.完成实验后关闭仪器电源和气源,并及时清理仪器和实验台面。
2.将试剂瓶盖盖好,防止蒸发和污染。
3.检查实验记录,整理数据和结果,制作实验报告。
九、仪器维护和保养1.定期对液相色谱仪进行维护和保养,包括清洁仪器表面、更换耗材等。
2.仪器异常时应及时报修,并配合维修人员进行维修操作。
以上为液相色谱仪操作规程,操作人员在使用液相色谱仪时需严格按照规程进行操作,确保实验的准确性和安全性。
高效液相色谱仪的五大组成部分

高效液相色谱仪的五大组成部分
高效液相色谱仪(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)的五大组成部分包括:
1. 液相分离部分:液相分离部分由色谱柱和液相泵组成。
色谱柱是分离和分析样品的地方,其中填充有固定相,可以根据其化学特性选择不同的色谱柱。
液相泵则通过压力将试样和溶剂混合并推送进入色谱柱。
2. 采样和进样系统:采样和进样系统用于将待分析的样品引入到色谱柱中。
这包括样品的准备、进样量的控制和溶剂的混合等操作。
3. 检测器:检测器用于检测分离出的化合物,并将其转化为可观察的信号。
常见的HPLC检测器包括紫外-可见吸收光谱检
测器、荧光检测器、折射率检测器和质谱检测器等。
4. 数据处理系统:数据处理系统用于记录和分析检测到的信号,并进行数据的整理、处理和解释。
这些系统可以包括计算机软件和数据处理设备。
5. 溶剂系统:溶剂系统由溶剂储罐、混合器、进样泵和排泄器等组成,用于准备溶剂,并将其送入色谱柱中。
溶剂系统需要保持恒定的压力和流量,以确保色谱分离的准确性和重现性。
液相色谱质谱仪操作及原理

液相色谱质谱仪操作及原理一、液相色谱仪简介液相色谱仪,作为现代分析化学的重要工具,广泛应用于生物、医药、环境、食品等多个领域。
它根据固定相的不同,可分为液-液色谱(LLC)和液-固色谱(LSC)。
液相色谱仪主要由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器和信号记录系统等部分组成,具有高效、快速、灵敏等特点。
二、液相色谱仪的特点高压:液相色谱法使用液体作为流动相,为了迅速通过色谱柱,需要对载液施加高压,通常可达150~300×10^5Pa。
高速:流动相在柱内的流速远超经典色谱,一般可达1~10ml/min,因此分析时间大大缩短,通常少于1小时。
高灵敏度:液相色谱广泛采用高灵敏度的检测器,如荧光检测器,其灵敏度可达10^-11g。
此外,样品用量小,通常只需几个微升。
适应范围宽:与气相色谱法相比,液相色谱法不受试样挥发性的限制,只要试样能制成溶液,就可以进行分析。
三、液相色谱仪操作五步骤准备:准备好所需流动相并过滤、脱气,更换合适的色谱柱和定量环,配制样品标准溶液并过滤,检查仪器各部件连接情况。
开机:接通电源,依次打开检测器、输液泵等,更换流动相并排气泡,设定流速等参数。
设计参数:根据实验需求设定流速、波长等参数,启动数据采集系统,确保基线稳定后进行进样。
进样:将样品注入进样阀,进行在线工作站自动采集数据。
系统清洗:分析结束后,使用适当的溶剂清洗系统,关闭仪器。
四、液相色谱仪工作原理在液相色谱仪中,流动相被高压泵打入系统,携带样品溶液进入色谱柱。
由于各组分在固定相和流动相之间的分配系数不同,在移动过程中会产生速度差异,从而实现组分的分离。
分离后的组分依次从柱内流出,通过检测器时转换为电信号,记录并打印出图谱。
高效液相色谱仪主要由进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统组成,可根据工作原理分为吸附柱色谱法、分配柱色谱法、离子交换柱色谱法和凝胶柱色谱法等。
五、质谱仪简介及工作原理质谱仪是一种测量离子质荷比(质量-电荷比)的分析仪器,广泛应用于化学、生物学、医学等领域。
液相色谱仪内部结构

液相色谱仪内部结构
液相色谱仪是一种常用的分析仪器,其内部结构包括以下几个主要部分:
1. 进样系统:进样系统是液相色谱仪的入口,它负责将待测样品引入到色谱柱中。
进样系统通常包括进样针、进样口和进样泵等部件。
2. 色谱柱:色谱柱是液相色谱仪的核心部件,它是由一根装填有固定相的管子组成。
固定相是色谱柱中的主要组成部分,它能够根据不同物质的分子结构和性质进行分离。
3. 检测器:检测器是液相色谱仪的出口,它负责检测色谱柱中流出的组分。
检测器通常包括紫外-可见光检测器、荧光检测器、电导检测器等。
4. 流动相:流动相是液相色谱仪中流动的液体,它负责将待测样品带入色谱柱中进行分离。
流动相通常是由水和有机溶剂组成的混合物。
5. 控制系统:控制系统是液相色谱仪的指挥中心,它负责控制整个实验过程,包括进样、分离、检测等环节。
控制系统通常包括电脑、软件和硬件等部件。
以上是液相色谱仪内部结构的主要部分,当然还包括其他一些辅助部件,例如真空泵、空气泵、输液泵等。
在使用液相色谱仪时,需要正确地操作和维护这些部件,以确保仪器的稳定性和准确性。
液相色谱仪的使用方法说明书

液相色谱仪的使用方法说明书1. 引言液相色谱仪(Liquid Chromatography, LC)是一种广泛应用于化学、生物、环境等领域的分析技术。
本说明书旨在介绍液相色谱仪的基本使用方法,以便用户能够正确、高效地操作仪器。
2. 仪器概述液相色谱仪主要由以下几个部分组成:a. 快速进样器:用于将待测样品注入进色谱仪系统。
b. 柱温箱:稳定色谱柱的温度,以提高分离效果。
c. 电泳液输送系统:通过压力将电泳液从溶液储液器运送至柱部。
d. 柱部:色谱柱进行色谱分离的关键部分。
e. 检测器:用于检测待测物,并输出相应的信号。
f. 数据处理系统:将检测到的信号转化为图谱、峰图等结果。
3. 准备工作a. 色谱柱的准备:根据样品性质选择合适的色谱柱,并根据说明书装配。
b. 样品准备:将待测样品按照要求进行前处理,如稀释、过滤等。
c. 仪器准备:确保液相色谱仪的各个部件完好并连接稳固。
4. 操作步骤a. 开机:插入电源,按下电源按钮,待液相色谱仪自检完成后,屏幕将显示主界面。
b. 参数设置:根据样品特性,在主界面上进行方法设置,包括流速、柱温、检测器波长等参数。
c. 样品进样:将待测样品置于进样器中,选择合适的进样模式,并设置进样体积。
d. 开始运行:点击运行按钮,液相色谱仪将根据设定参数开始分析过程。
e. 数据采集:实时监控色谱峰出现情况,并将数据传输至数据处理系统。
f. 数据处理:对采集到的数据进行处理,如峰面积计算、峰识别等。
g. 关机:实验结束后,关闭仪器及其附属设备,并进行必要的清洗和维护工作。
5. 注意事项a. 安全操作:在使用液相色谱仪时,需遵守实验室的相关安全操作规范,如佩戴实验手套、护目镜等。
b. 柱使用寿命:根据实验要求和柱的性能要求,及时更换色谱柱,以保证测试结果的准确性。
c. 样品浓度:确保待测样品浓度在仪器检测范围内,避免浓度过高或过低造成检测信号异常。
d. 仪器维护:定期进行液相色谱仪的维护保养,如清洗柱部、更换耗材等。
液相色谱仪操作步骤

液相色谱仪操作步骤1.准备工作-检查和清洁仪器以确保其正常运行。
-检查并校准流量计,以确保它们读数准确。
-检查并准备所需的溶剂和样品。
2.设置仪器参数-打开仪器并设置所需的温度和流速。
-设置检测器以选择适当的检测方式(如紫外线检测器、荧光检测器等)。
-根据样品的性质选择适当的波长或选择合适的检测器。
3.校准系统-使用标准品或混合物进行系统校准。
根据需要选择适当的标准品。
-执行系统检漏以确保系统没有泄漏。
-进行系统的质量控制,以确保仪器的准确性和稳定性。
4.准备样品-准备样品溶液并确保其在操作过程中稳定。
-使用过滤器过滤样品以去除悬浮物和杂质。
-根据需要进行样品的预处理,如稀释、洗涤等。
5.填装柱和样品进样-选择合适的柱,并根据需要填充柱。
-连接柱与仪器,并确保其紧固和密封。
-使用进样针将样品引入柱中,并控制进样量。
6.运行色谱仪-开始运行仪器并监控色谱图的生成。
-根据需要调整流速、温度和其他参数。
-定期检查流速计和检测器的读数,并记录结果。
7.数据分析和结果评估-分析和解释色谱图以确定化合物的保留时间和峰形。
-根据峰的面积计算化合物的浓度或相对含量。
-使用标准曲线将峰面积转换为浓度或含量。
8.清洗和维护-在使用完毕后,及时清洗仪器以防止残留物的积累。
-维护仪器,包括更换柱和消耗品,以确保其长期正常运行。
以上是液相色谱仪的操作步骤。
通过正确操作仪器和遵循标准程序,可以获得准确和可靠的分析结果。
请注意,实际操作步骤可能因仪器型号和分析需求的不同而有所不同。
因此,在操作前请仔细阅读和了解所使用液相色谱仪的操作手册和相关文献。
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现代液相色谱法摘要:本文简要回顾了液相色谱的发展和历程,介绍了现代液相色谱的基本方法和发展概貌,以期现代液相色谱技术得到更广泛的应用和突破性的进展。
关键词:液相色谱,方法,进展引言世界上第一个意识到色谱法是一种有效的分离手段的科学家是俄国的植物学家Tswett。
1903年他发表了吸附色谱分离植物色素的论文。
从此,色谱法就像一个呱呱落地的婴儿,开始了它的漫长的发展历程。
现代液相色谱法的概念是1969年初第五届色谱进展国际讨论会组织的液相色谱专门会议上开始引起与会者的广泛重视与肯定。
现代液相色谱法的特点是高速化与高效化,因此在当时也叫高速液相色谱(又叫高压液相色谱),或叫高效液相色谱。
从上世纪六十年代末到八十年代末期,经过几十年的发展,现代液相色谱技术已经相当成熟,并应用于相当广泛领域中,成就斐然。
当然,现代液相色谱又受到了日新月异的新科技革命的更高的挑战,暴露了一些新的弱点,然而这些不足,又成为现代液相色谱发展的动力。
本文旨在回顾现代液相色谱的发展,给出现代液相色谱的概貌与特点,同时又展望了在新技术革命的挑战下,现代液相色谱的发展方向。
现代液相色谱与经典的液相色谱技术(如纸层析、薄层层析、柱层析等)没有本质区别,不同点仅仅是现代液相色谱比经典液相色谱有较高的效率和实现了自动化操作。
因而在此有必要对经典液相色谱作一简单的回顾。
1经典的液相色谱第一个进行色谱实践的俄国植物学家Tswett用最原始的液—固色谱分离和鉴别了各种植物色素。
这种分离的结果是在吸附床上产生色带,色谱即由此得名。
凡是利用流动相和固定相进行分离的方法统称为色谱法。
1938年,Izmailov和Shraiher第一次使用了薄层色谱法,同年,Taylor和Uray用离子交换色谱法分离了钾和锂的同位素;1941年,Martin和Synge发展了分配色谱,1944年,Martin等发展了纸色谱,1952年Martin和James发展了气—液分配色谱,1959年,Cordon Conference发表了凝胶过滤色谱的报告;1969年,亲合色谱出现,现代液相色谱开始受到重视。
值得一提的是由于气相色谱的发展,建立了诸如塔板理论和速率理沦,这些关键性的基础理论的突破,反过来应用到液相色谱中,才使其迅猛发展起来的。
VanDeemter等人在1956年发表了关于色谱效率的速率理论。
今天我们使用的微粒注等都是在这些基础理沦的指导下出现的。
2现代液相色谱作为色谱技术的基础,诸如色谱参数(如保留参数、柱效参数、分离参数等),色谱热力学基础,色谱功力学基础、定性定量方法等是相当重要的。
幸而其与其它类型色谱几乎是通用的,限于本文的篇幅等因素,不再赘述。
下面仅将分离方法作一简述。
依据分离机制的不同,可以将液相色谱分离方法分为:液—固及附色谱、液—液分配色谱、离子交换色谱和排阻色谱。
对液—液分配色谱进行改进得到另外两冲液相色谱方法:键合相色谱和离子对色谱。
液—固吸附色谱是用具有高比表面积的吸附剂颗粒作为固定相,样品分子的保留是由于颗粒表面的吸附作用的结果。
高效液—固吸附色谱与经典吸附色谱相比仅在色谱动力学性质上进行改进和提高。
如采用粒度小(5或10u m),筛分狭(±1~2um)的吸附剂,以及采用高压匀浆装柱技术,,提高了层析柱内填充床的致密均匀性,从而获得很高的柱效。
目前,微粒型已逐渐取代薄壳型填料。
化学键合相色谱是由液—液分配色谱发展起来的,为了克服液—液色谱过程中固定相流失,人们将各种不同的有机基团通过化学反应共价键键合到硅胶(载体)表面的游离经基上,代替机械涂覆的液体固定相,从而产生了化学键合相色谱,依键合基团极性不同,可分为非极性键合色谱(固定相表面都是极性很小的烃基,如十八烷基、辛烷基、甲基、苯基等),极性键合相色谱(固定相表面为极性基团,如氰基、氮基、双羟基等)和离子键合相色谱(表面键合各种离子交换基团)。
其中非极性键合色谱中由于使用强极性洗脱液(极性小的化合物不易洗脱),洗脱次序与正相色谱相反,所以又称为反相色谱。
极性键合相色谱填料以和液—固色谱中的吸附剂(如硅胶填料)大体相同的方式被用于正相分离。
由于选用的键合相填料和用于这些填料的流动相十分充足,因此用键合相色谱法几乎能完成任何分离工作。
近年来反相键合相色谱技术得到了巨大的发展,几乎已成为现代液相色谱中的通用系统。
上世纪七十年代前期,Eksborg首先将离子对萃取技术引用到色谱分析的领域,即在固定相上涂渍对离子或直接将对离子加入流动相中与被分析的样品离子生成中性离子对,然后用分配色谱的方法分离,叫做离子对色谱。
现代离子对色谱的应用大多都采用微粒(5~10um)多孔填料,反相分离通常使用键合相色谱填料,如ZorboxODS等,而离子对的加入方式也多采用向流动相中引入的方式,如waters公司出售的离子对试剂:PICA(四丁基铵磷酸盐)系列和PICB(四烷基磺酸盐)系列。
离子对色谱波广泛地用于分折极性样品,如碱离子型化合物等:现代液相色谱法化合物以及带有多个可电离基团的化合物。
离子对色谱只是次级化学平衡应用的一个例子,在其它类型的色谱中,色谱过程仅涉及到物理平衡过程,而把化学平衡引入色谱领域将会极大地丰富色谱分离技术。
预计在这一领域将会有较大的发展,原因之一是人们感兴趣的具有生理活性的物质往往都是强极性的。
离子交换色谱法是各种液相色谱法中最先得到广泛应用的现代液相色谱方法。
离子交换色谱以离子交换剂为固定相,借相于试样中电离组分对固定在交换剂基体上带相反电荷的离解部位亲合力的不同,使其彼此分离,除离子交换机理外,溶质也可能与交换剂的基体部分相互作用,Donnan平衡也对溶质保留有影响,目前柱填料以键合相填料为主。
即以硅胶为基体,然后在上面覆盖一层聚合物涂层(如聚苯乙烯、硅酮等),但是其效率低、稳定性差和重现性差是其难以克服的不足。
值得注意的新的发展是离子色谱的出现,即用离子交换树脂柱扣除电解质背景,用电导检测器测定洗脱物中留下的欲测离子,离子色谱已成为对各种各样为阴、阳离子进行常量或痕量测定的强有力的方法。
非阻色谱是几种液相色谱方法中最新的一种,也称为凝胶色谱。
分子排阻色谱的分离机理是立体排阻,样品组分与固定相之间不存在相互作用的现象,色谱柱的填料是多孔性的凝胶。
3现代液相色谱的发展与展望3.1仪器商品化发展图一是现代化液相色谱仪基本结构的方框图。
图1现代液相色谱仪示意图进入上世纪七十年代,高效液相色谱仪的研制和生产获得了蓬勃的发展。
人们主要探索仪器中各关键部件的最佳设计方案和实施途径。
例如:高压输液泵,除了早期出现的小流量往复泵外,又发展了气动泵和注射泵,以及能够做多元梯度淋洗的二元、三元以至四元泵。
在检测器方面,紫外检测器经历了光度计、分光光度计、二极管矩阵检测器,Focus检测器的发展历程,示差折光,萤光和电化学等新型检测器也相继得到了较大的发展。
上世纪七十年代中期,由于引入了微处理机技术,使现代液相色谱仪的面貌焕然一新,极大地提高了仪器的自动化水平和分析精度。
当然,仪器的发展过程中也遇到许多难题,典型的例子是:由于柱内分离效率日益提高,柱外效应显得格外重要,一直是薄弱环节的检测器方面仍有待进一步突破。
值得单独介绍的一个新产品是美国光谱物理公司于1989年开发成功的新一代紫外检测器一一Focus检测器,其基本原理与紫外分光光度计相同,但单色器却采用全息凹面光栅在强磁场中作高速偏转(2000次/秒),光的传导也一改传统的镜面技术而采用光导纤维技术,用微机对得到的信息作处理,从而可以得到以时间一波长一吸收值为坐标的三维图谱,提供关于图谱分离,定性定量的丰富信息,这种检测器除完全具备二极管阵列检测器的功能外,克服了其灵敏度低,故障率高的缺点,可以说是紫外检测技术中的高峰。
另一个值得注意的研究动向是由于色谱数据处理系统评价。
随着各种色谱数据处理系统的广泛应用,人们已经发现同一样品在不同型号的色谱数据处理系统中会得出不同的结果,这些差异以及产生这些差异的色谱数据处理系统的准确性和精确性,在至今公开发表过的文献中还没有评价过。
美国FDA在1984年9月提出一个叫做SARAP的提案,这个计划具体由波士顿大学和FDA属下的温彻温特工程和分析中心实施,其目的是建立一个标准化的程序,借助这个程序和运行这个程序的装置,客观地评价各种数据处理系统。
为了有效地分析分离混合物,人们发展了各种色谱与光谱联用技术。
二极管阵列检测器以及Focus检测器是色谱峰随机做出紫外吸收谱图的一种成功应用;液—质联用由于去除溶剂的难题尚未能彻底解决,因此限制了一些应用。
但人们通过设计各种去除溶剂的结日装置也制作了各种类型的LC—MS仪;LC—NMR的联用由于尚缺乏灵敏的核磁共振仪而难以进入实用阶段,虽然傅里叶变换技术可使灵敏度有所提高,但仍未达到要求;LC—IR的联用同样由于红外光谱仪灵敏度低和去除溶剂的困难而困准。
但是,随着各种仪器性能的不断完善,分离仪器与鉴定仪器联用仍将是人们越来越高的追求目标。
3.2现代液相色谱的展望现代液相色谱技术在上世纪七十年代里发展的主要特色是技术上和商业上进一步巩固。
尤其是应用了比较高级的计算机控制和数据处理系统,进入上世纪八十年代,现代液相色谱显得更加成熟和无所不能了。
在这个时期出现了两个比较重要的技术应用:多维液相色谱和化学衍生法。
所谓多维液相色谱即为柱切换技术。
在色谱系统中利用阀的切换改变溶剂的流向,以及色谱柱与进样器或检测器之间的连接,以满足各种不同的应用。
如试样的净化和痕量富集,样品制备和分段切割,溶剂的选择和梯度洗脱,色谱柱的选择和色谱分离,色谱检测器的选择等。
现代液相色谱的发展不足之一是缺乏通用型的高灵敏检测器。
示差检测器虽然是一个通用型检测器,但由于其灵敏度低和干扰因素太多,因而其应用很受限制。
紫外吸收检测器和荧光检测器虽然灵敏度较高,但却要求样品有紫外吸收或能波激发荧光,故属选择性检测器。
安培检测器则要求样品在电极上能发生氧化还原反应。
为了扩大高效液相色谱的应用范围,提高检测灵敏度和改善分离效果,采用化学衍生法是一个行之有效的途径。
化学衍生法是指借助化学反应给样品化合物接上某个特定基团,从而改善样品混合物的检测性能和分离效果。
目前,新的衍生试剂和衍生方法正在不断出现,应用的范围也在不断扩大,越来越受到人们的关注。
预计今后,化学衍生法在探索迅速反应,特异性强和简单方便等方面必将具有广阔的发展前景。
在这个时期还出现了许多有待继续完善的技术,如智能化色谱、超临界流体色谱、场流分级法等技术。
所谓智能色谱,就是根据色谱基础研究,利用计算机技术,来解决目前色谱分析中主要技术关键,即最佳操作条件的选择和色谱定性定量问题,从而能自动发展出色谱分析方法。