超高效液相色谱系统简介

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2013.6 杨三东
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发展背景
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理论基础
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仪器组成
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实际应用及展望
20世纪90年代,高效液相色谱发展的目标应该是 降低成本、走向更低的价格以获得更广泛的应用 实际上,高效液相色谱的技术没有到达极限,用 户对HPLC有更高的要求 超高效液相色谱是用高效液相色谱的极限 作为自己的起点
UPLC(Ultra Performance Liquid Charomatography) UHPLC(Ultra High Performance Liquid Charomatography) UFLC(Ultra Fast Liquid Charomatography) …………
BEH(Ethylene Bridge Hybrid)
应用 与传统的HPLC相比,UPLC的速度、灵敏度及分离
度分别是HPLC的9倍、3倍及1.7倍。因此UPLC在代谢 组学分析、天然产物的分析及其他一些生化领域有较 多应用。
使用UPLC与质谱检测器连接,会对天然产物分析, 特别是中药研究领域的发展是一个极大的促进。
因此,建立UPLC系统需要解决的主要问题: 1、提高色谱柱的性能; 2、高压溶剂输送单元(超过15,000psi,约103MPa); 3、高速检测器;优化流动池以解决高速检测及扩散问 题; 4、完善的系统整体性设计。
输液泵压力: 6,000psi(42MPa)→15,000psi(103MPa) 色谱柱填料粒径: 5μm → 1.7μm 检测器流动池体积: 10μL→500nL 其他
氨基酸分析
HPLC 40min
UPLC 10min
来自百度文库
天然产物分析
展望 发展更小粒径填料 与质谱仪联用 痕量及复杂天然产物、代谢产物的分析 发展国产超高效液相色谱
van Deemter方程简化形式:
H=a(dp)+b/u+c(dp)²u 理论塔板高度(H)与流速(线速度;u)及填 料颗粒度(dp)之间的关系,其中,a项代表了 颗粒度和柱床填装的优良程度;b项代表了轴向 扩散;而c项则代表了传质
由曲线可以看出: 颗粒度越小柱效越高 其次每个颗粒度尺寸有自己的最佳柱效的流速 最后,更小的颗粒度使最高柱效点向更高流速(线 速度)方向移动,而且有更宽的线速度范围
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