rmhTRAIL诱导耐阿霉素细胞株K562／A02凋亡及作用机制的实验研究
三氧化二砷对K562及其多药耐药细胞系K562／A02细胞的诱导凋亡研究
Ｐ７ Ｉ０表达阳性 的 白血病 细胞 往往对 多种不 同化学 结 构 和作用靶点的药物 同时 发生而 药 。我们 观察 了三 氧化二 砷 寸 （ Ｏ ） Ａ ３ 对体外 培养 的人 急性红 白血病细 胞 系 Ｋ ６ ５２及其 多 药耐药细胞 系 Ｋ ６１０ ５２Ａ ２细胞 的凋亡诱 导作 用 ， 以探 讨 Ａ 是嘎 对多药耐药 白血病细胞 的作用
８ 流式细胞 术检测 Ｐ７ １０表达 取经 Ａ
作用后 的各 组
验前无药传代 ３改
３ 哪 作用 法测定 Ａ 对 Ｋ６ ５ ２及 Ｋ ６／０ 细胞 的生 长抑 制 ５ ２Ａ ２
Ｋ ６Ｊ ０ 细胞 ｌ ，０ｇＬ多聚甲醛溶 液固定 细胞 ， ５ ２Ａ ２ １ ／ 与小 鼠抗 Ｍ Ｋ１ Ｒ一 ６单抗和藻红蛋 白（ Ｅ 标记兔 抗 鼠二抗 ３ Ｐ） ７℃作用 ３ ０
维普资讯
２０ ０ ２年 １月第 ２ ３
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研 究 报 告 ・
三氧化二砷对 Ｋ ６ ５２及其 多药耐 药细胞 系 Ｋ６ｔ０ ５ ２Ａ ２细胞 的诱 导 凋 亡研 究
邹俊 晖 潘祥 林 冯 长伟 郭娟娟
公 司提供 ） 要求 操作。
１ 药 品
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公 司 干 Ｈ ｎｓ 冲液 中 ， ， ／ ２ 细 胞 株及 细胞 培 捧 Ｋ ６ ５ ２受 其 多药 耐药 细 胞 系 Ｋ ６ ／ ５２
（ Ｈ ７５ ， ｐ ）体积分数 为 ９ ％的甘油 ， ￣ ｌ ｙ ｒ ９０ ，７ － ， ０ ４ｎ ／ ｒ ］ ｏ ３ Ｌｌ ℃水浴 １ｈ 。在 ３Ｏ岫 激 发波 长和 ４０岫 发散波 长下 用荧 ６ ４
ｒｎｌ 焦磷 酸钠 ］０ ， 复用 嗳头 吹打并 振荡 ， ｍ ｏＬ ／ １０ 反 室温 作 用 ３ ｉ， 心 取 上 清 液 ， 后 加 人半 咣 无冬 酶 ３底 物 Ａ － ０ｍｔ 离 ｔ 而 Ｃ
鬼臼毒素衍生物LN-13诱导多药耐药细胞K562／A02凋亡及其机制
鬼臼毒素衍生物LN-13诱导多药耐药细胞K562／A02凋亡及其机制高晨光;张猜;赵安妮;李楠;陈虹;曹波【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2017(033)001【摘要】目的：研究新型鬼臼毒素衍生物LN-13对多药耐药肿瘤细胞株K562／A02产生的凋亡作用及潜在机制。
方法MTT法测定LN-13和阳性对照药VP-16抑制K562／A02细胞48 h后的生长情况及其IC50值，Hoechst 33342、PI双染色观察LN-13作用K562／A02细胞48 h后的形态变化，流式细胞术测定LN-13作用K562／A02细胞48 h的凋亡情况，RT-PCR检测LN-13作用K562／A02细胞后Bcl-2、Bax、Caspase-3、mdr-1基因表达的影响，Western blot检测 LN-13作用K562／A02细胞后P-gp的表达情况。
结果 LN-13对K562／A02细胞生长有显著地抑制，IC50值3.32μmol · L－1，Ho-echst 33342、PI双染色观察到LN-13作用后，K562／A02细胞发生明显凋亡形态。
流式细胞术检测LN-13（2、4、8μmol· L－1）作用K562／A02细胞48 h后，出现剂量递增趋势的凋亡比例，分别达到15.0％、48.0％、68.96％。
另外，随着LN-13剂量增加，K562／A02细胞的Bax、Caspase-3基因表达增加，mdr-1基因表达减少，另外也下调了P-gp表达，差异有统计学意义。
结论 LN-13可诱导多药耐药肿瘤细胞K562／A02产生凋亡作用，其机制可能是通过抑制P-gp蛋白表达及凋亡相关基因表达。
%Aim To study the mechanism of action of the new derivative of podophyllotoxin(LN-13)in indu-cing the apoptosis of K562/A02cells.Methods The MTT method was taken to detect the inhibition of LN-13and VP-16 on K562/A02 proliferation and inhibi-tion rate and IC50 values were obtained 48 hours later. The K562/A02 cell morphological change induced by LN-13 were observed through Hochest33342 and PI staining after 48 hours later.Flow cytometry was taken to detect the apoptosis ofK562/A02 cells induced by LN-13.The reverse transcription-polymerase chain re-action was taken to detect the Bcl-2,Bax,caspase-3 and mdr-1 mRNA expression.The expression of P-gp was detected by Western blot.Results The growth of K562 /A02 cells was obviously inhibited by LN-13 when IC50 value was 3.32 μmol · L-1 .LN-13 could obviously induced cell apoptosis observed by Ho-chest33342 and PI staining.Flow cytometry detection showed that LN-13(2,4,8 μmol·L-1 )could induce cell apoptosis and apoptosis ratio reached 15.0%, 48.0%,68.96%,respectively.The reverse transcrip-tion-polymerase chain reaction showed that LN-13 in-creased the Bax and Caspase-3 mRNA expression,and meanwhile the expression of mdr-1 mRNA decreased. Western blot showed that P-gp expression was de-creased as the LN-13 dose increased.The data were significantly different from those of control group.Con-clusion Podophyllotoxin derivative LN-13 can induce the apoptosis of K562 /A02 cells,which may be close-ly-related to regulating P-gp expression and apoptosis related gene mRNA expression.【总页数】5页(P100-104)【作者】高晨光;张猜;赵安妮;李楠;陈虹;曹波【作者单位】武警后勤学院研究生管理大队，天津 300309;武警后勤学院学员二旅，天津 300309;锦州医科大学研究生学院，辽宁锦州 121000;武警后勤学院研究生管理大队，天津 300309;武警后勤学院研究生管理大队，天津 300309;武警后勤学院研究生管理大队，天津 300309【正文语种】中文【相关文献】1.rmhTRAIL诱导耐阿霉素细胞株K562/A02凋亡及作用机制的实验研究 [J], 王雅茹;王福旭;温树鹏;杜行严;杨渤彦;张学军;杨世方2.新鬼臼毒素衍生物ZM-16诱导K562/A02细胞凋亡及其机制 [J], 杨再鑫;陈虹;曹波;赵明;毕文超;谢文利3.冬凌草甲素诱导多药耐药细胞系K562/A02凋亡、逆转耐药性的研究 [J], 郭娟娟;潘祥林;冯长伟;邹俊晖4.中华眼镜蛇毒组分CⅡ诱导多药耐药白血病细胞K562/A02凋亡 [J], 左长清;林振桃;孔天翰5.鬼臼毒素衍生物Z-26-2诱导K562/A02细胞凋亡实验研究 [J], 高洁;吕晶晶;张元;陈虹因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
毒胡萝卜素诱导K562细胞凋亡及其调控机制的研究
毒胡萝卜素诱导K562细胞凋亡及其调控机制的研究冯献启;聂淑敏;苏湛;肖娟;邹萍【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2006(046)028【摘要】目的探讨毒胡萝卜素(TG)对K562细胞凋亡诱导作用及其调控机制.方法Hoechst 33258染色荧光显微镜观察凋亡细胞形态改变;AnnexinⅤ-FITC/PI双染检测细胞凋亡率变化;RT-PCR检测bcl-2、bax、bcl-XL、XIAP、survivin基因表达变化并通过免疫组织化学技术检测其在蛋白质水平的表达.结果 TG作用后,K562细胞呈典型的凋亡细胞形态;细胞凋亡率均明显升高(P＜0.05),且在一定范围内呈浓度和时间依赖性;bax、bcl-XL、XIAP mRNA和蛋白质表达上调,survivin mRNA 和蛋白质表达下调,bcl-2/bax比率降低.结论 TG可诱导K562细胞发生内质网应激反应性凋亡,其机制可能与Bax表达上调、survivin表达下调有关,bcl-XL、XIAP 表达上调可能发挥拮抗凋亡的作用.【总页数】3页(P18-20)【作者】冯献启;聂淑敏;苏湛;肖娟;邹萍【作者单位】青岛大学医学院附属医院,山东青岛,266003;滨州医学院附属医院;青岛大学医学院附属医院,山东青岛,266003;华中科技大学同济医学院附属协和医院;华中科技大学同济医学院附属协和医院【正文语种】中文【中图分类】R3【相关文献】1.复方君子汤诱导白血病K562细胞凋亡的机制研究 [J], 陈毅宁;梁春灵;廖斌;皇甫真萍;齐彦;陈佳薇2.夜香树花甾体皂苷诱导K562细胞凋亡机制研究 [J], 赵世元;黄之虎;叶海洪;钟振国;张明艳;李彩萍3.SU11248诱导K562白血病细胞凋亡的分子机制研究 [J], 林东红;崔兆磊;孔令英;林振兴;胡建达4.索拉非尼诱导K562细胞凋亡机制的研究 [J], 肖若芝;陈琰;王立琳;何程明;阮星星;熊慕珺n;林东军5.2-甲氧基雌二醇诱导K562细胞凋亡的机制研究 [J], 郑敏翠;旷文勇;李睿娟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
新乌头碱对K562细胞及耐柔红霉素的K562细胞凋亡的诱导作用及其机制
新乌头碱对K562细胞及耐柔红霉素的K562细胞凋亡的诱导作用及其机制关心;杨同华;张超然;冯帅【摘要】Objective To observe inhibitory effect of mesaconitine in WenYang herbs on leukemia K562 cells and K562 resistant daunorubicin cell line(K562/DNR)and possible molecular mechanism.Methods Effect of different concentrations of mesaconitine on proliferation and apoptosis of K562 and K562/DNR cells was detected by using MTT and flow cytometry.After treatment for 72 h,effect of different concentrations of mesaconitine on C/EBPα,Caspase-3 and p53 in K562 and K562/DNR cells was detected by real-time PCR.Results The proliferation of K562 andK562/DNR cells was significantly inhibited by mesaconitine in concentration-and time-dependent manner(P＜0.05).Mesaconitine significantly induced apoptosis of K562 and K562/DNR cells,and the apoptosis rate was increased with increasing of mesaconitine concentration(P＜0.05).Real-time PCR results showed that after treatment with 50 μmol/L mesaconitine for 72 h,C/EBPα was significantly decreased,Caspase-3 and p53 were significantly increased in K562 andK562/DNR cells as compared with the normal control group(P＜0.05).Conclusion Mesaconitine can induce apoptosis of K562 cells andK562/DNR cells,and the underlying mechanism is related with downregulation of C/EBPα and upregulati on of Caspase-3 and p53.%目的观察温阳药新乌头碱对白血病细胞K562和K562耐柔红霉素细胞株(K562/DNR)的抑制作用及可能的分子机制.方法应用MTT法,结合流式细胞术检测不同浓度新乌头碱对K562和K562/DNR增殖和凋亡的影响.通过Real-time PCR检测不同浓度新乌头碱作用72 h对K562和K562/DNR细胞C/EBPα、Caspase-3、p53凋亡相关基因表达的影响.结果 K562和K562/DNR细胞的增殖抑制率随着新乌头碱浓度增加及作用时间延长而上升,呈浓度、时间依赖性(均P＜0.05).新乌头碱能引起K562和K562/DNR细胞凋亡,且随着药物浓度增加,凋亡率也逐渐升高,差异均有统计学意义(均P＜0.05).Real-time PCR结果显示,经50μmol/L新乌头碱作用72 h,K562和K562/DNR细胞的C/EBPα表达下调,Caspase-3、p53表达上调,与正常对照组相比差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论新乌头碱能够引起K562和K562/DNR细胞发生凋亡,并且凋亡机制可能与下调C/EBPa基因及上调Caspase-3、p53基因有关.【期刊名称】《华中科技大学学报（医学版）》【年(卷),期】2017(046)003【总页数】4页(P281-284)【关键词】新乌头碱;白血病;细胞凋亡;C/EBPα基因;Caspase-3基因;p53基因【作者】关心;杨同华;张超然;冯帅【作者单位】云南省第一人民医院血液科,昆明 650032;云南省第一人民医院血液科,昆明 650032;云南省第一人民医院血液科,昆明 650032;云南省第一人民医院血液科,昆明 650032【正文语种】中文【中图分类】R285.5;R979.14近年来，世界各国的恶性肿瘤发病情况呈上升趋势，其中白血病的死亡率在恶性肿瘤中排名第6，在青少年肿瘤患者中死亡率排第1。
A02作用的研究的开题报告
寡霉素对白血病多药耐药细胞株K562/A02作用的研
究的开题报告
摘要：
白血病是一种造血系统恶性肿瘤，其治疗通常采用多药联合化疗，但多药耐药细胞的出现限制了化疗的效果。
寡霉素是一种天然产物，其具有广谱的抗肿瘤活性，但其对多药耐药细胞的作用尚不明确。
本研究旨在探究寡霉素对多药耐药白血病细胞株K562/A02的作用及机制。
研究内容：
1.收集K562/A02细胞株，建立细胞株的稳定传代。
2.利用MTT法检测不同浓度寡霉素对K562/A02细胞的抑制作用，并计算IC50值。
3.采用流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期分布变化。
4.采用Western blot检测寡霉素对多药耐药相关基因和线粒体相关基因表达的影响。
预期结果：
1.建立K562/A02稳定细胞株。
2.寡霉素对K562/A02细胞有抑制作用，IC50值为X μg/mL。
3.寡霉素能够诱导K562/A02细胞凋亡，并影响细胞周期。
Western blot检测发现，寡霉素作用下，P-gp、MDR-1等多药耐药相关基因及Bcl-2等凋亡抑制相关基因的表达水平显著下调，线粒体相关基因的表达水平显著上调。
意义和价值：
本研究对于探索多药耐药白血病的治疗新途径具有重要意义。
结果可以为进一步研制针对多药耐药白血病的治疗药物提供基础数据。
金雀异黄素诱导K562和K562／ADM细胞的凋亡作用
金雀异黄素诱导K562和K562／ADM细胞的凋亡作用刘润;郭超;赵英【期刊名称】《中国老年学杂志》【年(卷),期】2014(000)009【摘要】目的：探讨金雀异黄素（ GS）对人红白血病细胞系K562与其多药耐药细胞系K562/ADM的生长抑制、诱导凋亡作用及其可能的作用机制。
方法不同浓度的GS处理K562与K562/ADM细胞后，用MTT比色法检测生长增殖作用，流式细胞术检测凋亡，免疫细胞化学 ABC 法分析Bcl-2和Bax蛋白的表达。
结果GS对 K562及K562/ADM细胞均有很强的生长抑制作用。
同一浓度下 GS诱导K562/ADM细胞凋亡率明显低于K562细胞。
不同浓度GS对K562细胞的Bax 蛋白呈强阳性表达，Bcl-2蛋白实验组同对照组比较颜色无明显变化；而在K562/ADM细胞中，Bcl-2在实验组和对照组中均强表达，但Bax的表达均无明显变化。
结论 K562细胞对GS的反应比K562/ADM细胞敏感；GS诱导K562细胞Bax蛋白高表达可能是GS诱导K562细胞凋亡的机制之一，而K562/ADM细胞的耐药性和凋亡抑制可能与Bcl-2蛋白高表达有关。
【总页数】3页(P2516-2518)【作者】刘润;郭超;赵英【作者单位】甘肃中医学院解剖教研室，甘肃兰州 730000;甘肃中医学院解剖教研室，甘肃兰州 730000;甘肃中医学院解剖教研室，甘肃兰州 730000【正文语种】中文【中图分类】R285【相关文献】1.MnSOD模拟化合物诱导人白血病多药耐药K562/ADM细胞凋亡 [J], 安娴;魏虎来;祁萍;窦伟;刘伟生2.饥饿诱导K562/ADM细胞自噬及其与凋亡的关系 [J], 成娟;薛明明;马海珍;张豪;赵龙3.3-MA对阿霉素诱导K562、K562/ADM细胞凋亡及其相关基因mRNA表达的影响 [J], 王莉;刘春艳;张炜;赵丽4.三氧化二砷诱导K562/ADM细胞凋亡的作用机制研究 [J], 王东海;魏虎来;苏永宏;郝春燕;刘建民5.三氧化二砷诱导K562／ADM细胞凋亡过程中对bcl-2、survivin、ROS表达的影响 [J], 张亚莉;魏虎来;孙利军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
毒胡萝卜素诱导K562细胞凋亡及其机制的实验研究
毒胡萝卜素诱导K562细胞凋亡及其机制的实验研究【摘要】本研究旨在探讨毒胡萝卜素对K562细胞的凋亡诱导作用及其可能机制。
采用荧光显微镜观察凋亡细胞的形态变化，annexinⅤ-FITC/PI双染法FCM 检测凋亡率的变化，Ca2+荧光指示剂Fura-2/AM法荧光分光光度计测定细胞内Ca2+浓度（〖Ca2+］i）的改变，Rh123单染法FCM检测线粒体ΔΨm的变化，Western blot检测caspase-3，-7，-9，-12、细胞色素 C和GRP78蛋白的改变。
结果显示：4 μmol/L 毒胡萝卜素作用K562细胞48小时后，荧光显微镜观察到细胞呈典型的凋亡形态变化，早期凋亡细胞核染色质呈固缩状、圆珠状或斑块状；晚期凋亡细胞核染色质呈固缩状或斑块状。
1、2、4、8 μmol/L 毒胡萝卜素作用K562细胞24和 48小时后细胞凋亡率分别为7.51％、11.65％、23.22％、30.56％和12.85％、20.27％、31.51％、44.16％，在一定范围内呈剂量和时间依赖性，与对照组比较，均有统计学意义（P<0.05）。
毒胡萝卜素诱导K562细胞〖Ca2+］i升高以及线粒体ΔΨm下降，并均呈一定的浓度依赖性，与对照组比较，均有统计学意义（P<0.05）。
Western blot检测显示，毒胡萝卜素诱导K562细胞caspase-3，-7，-9，-12剪切活化、细胞色素C释放、GRP78表达上调。
结论:毒胡萝卜素可诱导K562细胞发生内质网应激反应性凋亡，内质网是细胞内诱导凋亡的一个重要新场所；caspase-3，-7，-9，-12剪切和活化、线粒体ΔΨm破坏和细胞色素C释放是毒胡萝卜素诱导K562细胞凋亡的重要机制之一，线粒体参与内质网应激反应性凋亡途径并发挥重要作用。
【关键词】毒胡萝卜素Thapsigargin-induced apoptosis of K562 cells and its mechanismAbstract The aim was to study the apoptotic induction effect of thapsigargin on leukemia cell line K562 and its possible mechanism.After the treatment of leukemia cell line K562 by thapsigargin，morphological change of apoptotic cells was investigated by AO/EB fluorescent staining under fluorescent microscope；apoptosis rate was determined with annexinⅤ-FITC/PI double staining by flow cytometry；intracellular calcium concentrations (〖Ca2+］i) were measured by fluorescence spectrophotometer with calcium sensitive fluorescence indicator Fura-2/AM；mitochondrial transmembrance potentials (ΔΨm) was detected on flow cytometry through staining of Rhodamine (Rh123)；the changes of caspase-3，-7，-9，-12、cytochrome C、GRP78 proteins were detected by Western blot. The results showed that K562 cells cultured in 4 μmol/L thapsigargin for 48 hours exhibited typical morphological changes of apoptotic cells under fluorescent microscope，includingshrinkage of cell，condensation of chromatin，breakage of nuclear，formation of apoptotic bodies，fluorescence of yellow green and pellet observed in early apoptoyic cells and hyacinth fluorescence of chromatin showed in late apoptotic cells. 24 and 48 hours after exposure to 1，2，4，8 μmol/L thapsigargin，the apoptotic rates of K562 were respectively 7.51%，11.65%，23.22%，30.56% and 12.85%，20.27%，31.51%，44.16%，in dose- dependent manner，and were statistically significant when compared with the controls (P<0.05). The apoptotic rate of K562 was dose- and time-dependent in experiment range. The enhancement of 〖Ca2+］i and the decrease of the ΔΨm in K562 cells were induced by thapsigargin and were dose-depend ent in experiment range，compared with control，P<0.05. Western blot results indicated that cleavage and activation of caspase-3，-7，-9，-12，releasing of cytochrome C from mitochondria，upregulation of GRP78 expression at the endoplasmic reticulum were induced in K562 cells after 24 hours exposure of 4 μmol/L thapsigargin. It is concluded that thapsigargin induces endoplasmic reticulum stress-induced apoptosis in K562 cells. Endoplasmic reticulum is a novel important initiatory site of apoptosis in cells；the cleavage and activation of caspase-3，-7， -9，-12 play very important role in endoplasmic reticulum stress-induced apoptosis of K562 cells and is one of the important mechanisms for thapsigargin-induced apoptosis. Thapsigargin-induced apoptosis in K562 cells isassociated closely with the disruption of the ΔΨm and the release of cytochrome C from mitochondria，mitochondria participates in endoplasmic reticulum stress-induced apoptosis in K562 cells.Key words thapsigargin；leukemia cell line；K562 cell；apoptosis；endoplasmic reticulum；caspase化疗是目前治疗白血病的主要手段。
Salirasib诱导K562细胞凋亡及其作用机制的研究的开题报告
Salirasib诱导K562细胞凋亡及其作用机制的研究
的开题报告
一、选题背景与意义：
Salirasib是一种新型的Ras特异性抑制剂，已被证明在多种人类癌
症中具有细胞凋亡的效应。
K562细胞是一种人类慢性髓性白血病细胞系，其抗肿瘤治疗研究受到广泛关注。
因此，本研究旨在探讨Salirasib对
K562细胞凋亡的诱导作用以及其作用机制。
二、研究内容：
本研究将采用体外细胞培养技术，通过MTT法测定不同浓度的Salirasib对K562细胞生长的影响，并利用荧光显微镜观察其对K562细
胞凋亡的影响。
同时，运用Western Blot法检测Salirasib对K562细胞
凋亡相关蛋白Caspase-3和PARP的影响，并通过实验验证其在Salirasib 诱导凋亡中的作用。
三、研究预期成果及其意义：
预计本研究的预期成果为探究Salirasib对K562细胞的凋亡诱导作
用及其作用机制。
此外，将为寻找新型抗癌药物提供新思路和药物研发
方向，同时为深入研究人类慢性髓性白血病的治疗以及肿瘤凋亡的精细
机制研究提供新的理论基础。