食品中四环素类抗生素金标快速检测试剂条的研究

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高效液相色谱法测定猪肉中土霉素、四环素和金霉素

高效液相色谱法测定猪肉中土霉素、四环素和金霉素

高效液相色谱法测定猪肉中土霉素、四环素和金霉素范露,靖涵之(武汉设计工程学院食品与生物科技学院,武汉 430205)摘要:对高效液相色谱法测定猪肉中土霉素、四环素和金霉素残留方法进行了优化,样品经0.1 mol/L Na2EDTA-Mcllvaine缓冲溶液(pH=3.5)提取,选用ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱,以乙腈+0.01 mol/L NaH2PO4作为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长365 nm,进样量10 μL,外标法定量。

三种抗生素在0.01 mg/mL~1 mg/mL范围内线性关系良好,土霉素和四环素检出限为0.125 mg/kg,金霉素检出限为0.4 mg/kg,相对标准偏差在5%以内,三种抗生素加标回收率在72.1%~101.5%之间。

该方法操作简便,能够较好地满足四环素类抗生素残留现行检测标准要求。

关键词:高效液相色谱法;猪肉;土霉素;四环素;金霉素;测定中图分类号:O657.72/TS251.5+1文献标识码:A 文章编号:1006-2513(2019)03-0162-07 Determination of oxytetracycline,tetracycline and aureomycin in pork by high performance liquid chromatographyFAN Lu,JING Han-zhi(College of Food & Biology Science and Technology,Wuhan institute of design and sciences,430205)Abstract:The method for determination of oxytetracycline,tetracycline and aureomycin in pork by high performance liquid chromatography was optimized. The sample was extracted with 0.1 mol/L Na2EDTA-Mcllvaine buffer solution (pH=3.5),the ZORBAX Eclipse XDB-C18 column was used to separate three antibiotics,and mobile phase was gradient eluted with acetonitrile+0.01 mol/L NaH2PO4,the flow rate was 1.0 mL/min and the column temperature was 30℃,detection wavelength was 365 nm,injection volume was 10 μL,external standard method was selected to quantitative analysis. The linearity of three antibiotics was good in the range of 0.01 mg/mL~1 mg/mL,the detection limit of oxytetracycline and tetracycline was 0.125 mg/kg,the detection limit of aureomycin was 0.4 mg/kg,and relative standard deviation was within 5%,the recoveries of three antibiotics were between 72.1% and 101.5%. The method is simple and convenient,and meets the requirements of current detection standards for tetracycline antibiotic residues.Key words:high performance liquid chromatography;pork;oxytetracycline;tetracycline;aureomycin;determination收稿日期:2018-11-26作者简介:范露(1982-),女,副教授,研究方向:食品加工与安全。

免疫分析法测定食品中四环素类药物残留

免疫分析法测定食品中四环素类药物残留

免疫分析法测定食品中四环素类药物残留作者:李依孜韩宣怡来源:《食品安全导刊》2021年第08期摘要:四环素类药物在动物疾病的防治中有重要的作用,但随着四环素类药物的广泛使用,出现了滥用、用药不规范等情况,使食品及环境中产生了大量药物残留,食用含四环素类药物残留的食物会对人体健康产生危害。

本文对免疫分析法测定食品中四环素类药物残留进行了研究,主要讨论现今仍在广泛使用的检测方法,并对其性质进行分析,最后对四环素类药物检测的发展趋势进行展望。

关键词:四环素类药物;药物残留;免疫分析法随着畜牧业的发展,兽药残留问题得到了越来越多的关注。

其中四环素类药物价格便宜、抗菌效果好,常用于预防或治疗畜禽等的肠道感染[1]。

合理的使用药物可以使畜禽的患病概率和饲养成本降低。

但在用药过程中,部分养殖人员相关知识储备不足,过量使用药物,或未经过一定周期使药物完全排出,使生产的食品中存留药物或者其代谢产物。

四环素类药物的普遍使用给养殖者提供了很多的便利,但也可能会产生兽药残留问题。

经过长期的摄入,在体内不断蓄积。

过多的抗菌药物作用于人体甚至有致癌、致畸、致突变的危害,尤其对发育不完全的婴幼儿有极大的危害。

四环素类药物遍布体内各处,极易在牙齿和身体骨骼处沉积,与钙元素发生反应,生成难溶物质,不利于青少年的发育,还会导致牙齿发生不可逆的染色,且可对肝脏造成损害。

1 免疫分析法测定目前,测定动物性食品中的四环素类药物有很多种不同的方法,如微生物检测法、免疫分析法、仪器分析法等。

其中仪器分析法虽然具有较高的准确度,但仪器价格昂贵,对操作人员要求较高,并且检测时间长,因此其应用受到了限制。

微生物法样品前处理以及操作步骤简单,但需要二次确证,常用于定性分析。

而免疫分析法是以抗原抗体的结合反应作为基础的一种综合性检验技术。

这种方法具有敏感性高、特异性强的优势,当样品中抗菌药物残留量大于10 μg/kg时即可使用,广泛应用于四环素类药物的定性和定量分析。

四环素类抗生素检测方法研究进展

四环素类抗生素检测方法研究进展

四环素类抗生素检测方法研究进展 栗慧;李佳仪;彭伟 【期刊名称】《河北北方学院学报(自然科学版)》 【年(卷),期】2018(034)002 【摘 要】青霉素的发现开启了抗生素时代,四环素类抗生素发现于20世纪40年代,是最常用的抗生素之一.四环素类抗生素应用广泛,在人类医学中可用于治疗各种囊肿,辅助诊断胃、肺、膀胱、口腔黏膜等部位的恶性肿瘤;在畜禽领域可用于预防和治疗动物疾病,促进动物生长,提高饲料转化率.但四环素类抗生素也存在一些副作用,会造成菌群失调症和四环素牙等.综述了四环素类抗生素的结构与性质、用途与危害及检测方法的研究进展.四环素类抗生素对环境和食品安全都有一定的危害,基于现有检测方法的不足,检测涵盖的样品范围较窄等问题,仍需要科技工作者和政府相关职能部门高度重视.

【总页数】6页(P41-45,48) 【作 者】栗慧;李佳仪;彭伟 【作者单位】河北北方学院研究生部,河北 张家口075000;河北北方学院研究生部,河北 张家口075000;河北北方学院,河北 张家口075000

【正文语种】中 文 【中图分类】S859.84 【相关文献】 1.牛奶中β-内酰胺类和四环素类抗生素检测方法 [J], 扶胜;杜祥乐 2.大肠杆菌四环素类抗生素主要耐药基因PCR检测方法的建立 [J], 李井春 3.四环素类抗生素残留检测方法研究进展 [J], 闫小峰 4.四环素类抗生素残留的检测方法及其对渔业环境的影响研究进展 [J], 孟丽华;史艳伟;时兵;孟娟;蒋帮铜;吴广州 5.母乳中四环素类抗生素及其代谢产物的检测方法研究进展 [J], 徐斯琦;李强;苗萌

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分子印迹光子晶体传感器检测四环素类抗生素的研究

分子印迹光子晶体传感器检测四环素类抗生素的研究

分子印迹光子晶体传感器检测四环素类抗生素的研究分子印迹光子晶体传感器检测四环素类抗生素的研究摘要:本研究基于分子印迹技术和光子晶体传感器原理,研制了一种能够快速、高效、精准检测四环素类抗生素的光子晶体传感器。

首先使用亚甲基双丙烯酸甲酯为功能单体,在硅基底片上构筑了分子印迹聚合物薄膜。

特异性吸附四环素类分子后,分子印迹聚合物薄膜形成了一种光子晶体结构,使得传感器对于四环素类抗生素具有高度响应性和专一性。

通过光谱分析和电化学测试探究了光子晶体结构的制备条件和响应机制。

实验结果表明,该光子晶体传感器对于常见的四环素类抗生素均具有较高的灵敏度和特异性,检测下限可达到ng/mL级,同时具有极高的稳定性、再现性和重复性。

因此,本研究所开发的分子印迹光子晶体传感器有望成为一种高效、低成本的药物检测和分析工具。

关键词:光子晶体;分子印迹技术;四环素类抗生素;传感器;检引言四环素类抗生素是广泛应用于人畜兽医领域的一类抗生素,其历史悠久、疗效确切,但也存在一定的副作用和药物耐受性问题。

因此,对于四环素类抗生素的检测和分析至关重要。

传统的检测方法包括高效液相色谱、气相色谱-质谱联用等技术,但这些方法存在着操作复杂、昂贵、操作时间长等缺点,限制了其在药品检测领域的应用。

光子晶体传感器作为一种新兴的药物检测手段,由于具有实时、不需标记、操作简单等优势,成为了一种具有发展潜力的方法。

分子印迹技术是一种可精确复制分子空间结构和识别分子的技术。

通过分子印迹技术可以制备出一种特定分子的选择性识别体——分子印迹聚合物。

将分子印迹聚合物作为传感材料,具有高度选择性和特异性的优势,可以用于制备传感器材料,实现对目标分子的高灵敏性识别和检测。

光子晶体传感器以光子晶体作为传感元件,通过监测其在不同介质中反射光谱的变化,实现对目标分子的检测和定量分析。

光子晶体本身具有周期性结构,具有明显的Bragg衍射效应,使得其在反射光谱上呈现出有序、清晰的干涉条纹。

基于荧光碳点建立乳制品中四环素的快速检测方法

基于荧光碳点建立乳制品中四环素的快速检测方法

基于荧光碳点建立乳制品中四环素的快速检测方法文/何智燕 王蓓蓓(扬州大学旅游烹饪学院)摘要:以五氧化二磷、L-半胱氨酸和水为原料,采用水热法合成荧光性能好的碳点,并基于四环素对荧光碳点的猝灭作用,建立乳制品中四环素的定量快速检测方法。

试验优化了pH值、温度、时间因素,在最优化条件下得出四环素的检测线性范围宽(10-3~10-7 mol/L),检出限低至4.3×10-7 mol/L,其相关系数高达0.9728。

该试验方法已应用在牛奶样品的检测中,充分说明该荧光分析方法具有一定的实际应用性。

关键词:荧光碳点;荧光猝灭法;四环素;乳制品乳制品安全是关乎健康的重大民生问题。

四环素类抗生素是养殖业中常用的兽药和饲料添加剂,具有抑菌业达到先进的生产水平。

C作者简介:吴正红,从事洁净管路系统质量管理工作17年,重点研究不锈钢管路焊接对乳制品质量的影响。

图17 美国焊接氧化的允收标准范围广、杀菌能力强、成本低廉等优点,作为牛奶中常用的添加抗生素,其残留问题受到人们的日益关注。

长期食用含有四环素类抗生素的乳制品容易造成肝和肾脏的损伤,引发过敏和中毒反应,还会使牙齿变黄,严重影响人类的身体健康[1,2]。

检测四环素有很多种方法,但是大多数都比较繁琐,其中ELISA可以对样品进行直接检测,但需要多次洗涤、加液、显色等操作步骤;而胶体金免疫层析法检测灵敏度只能达到50~100 μg/L [3]。

碳点是一种新型的碳基零维材料,具有优秀的光学性质、良好的水溶性、低毒性、环境友好、原料来源广、成本低、生物相容性好等诸多优点。

碳点大多具有sp2杂化碳的骨架结构,其表面带有大量碳的含氧基团[4~7](如羟基、羧基等),表现出优良的荧光性能,如耐光漂、非闪烁、发射波长可调、上转换性能等。

因此,可以和其他碳纳米材料(碳纳米管、石墨烯、富勒烯、纳米金刚石等)在材料科学、生物化学、电子器件以及生物医学等方面发挥同等重要的作用[8~10]。

一种检测鱼肉中四环素类抗生素的高效方法

一种检测鱼肉中四环素类抗生素的高效方法

摘要 / Abstract[目的]建立超高效液相色谱- 串联质谱同时测定鱼肉中4 种四环素类抗生素(四环素、金霉素、土霉素、强力霉素)的方法。

[方法]样品经Na2EDTA-Mcllvaine 缓冲溶液提取,正己烷除油脂,经Oasis HLB 固相萃取小柱净化,采用ACQUITY UPLC®BEH C18 色谱柱(2.1 mm × 50 mm, 1.7 μm) 分离。

[结果]四环素、金霉素、土霉素、强力霉素4 种四环素类抗生素在0~100 ng/mL 范围内线性关系良好,相关系数 (R) 均大于0.999;在5.0~50.0 μg/kg 添加水平下,回收率均在70%~120%;相对偏差(RSD) 均小于10%;检出限为5.0 μg/kg,定量限为10.0 μg/kg。

[结论]超高效液相色谱- 串联质谱法可用于鱼肉中四环素类抗生素的测定。

研究背景 / Introduction四环素类(tetracyclines, TCs)药物是由放线菌产生的一类基本骨架为并四苯环的广谱抗生素。

四环素类药物在水产养殖领域具有广泛的应用,它对病原菌有抑制作用,也能促进水产动物快速生长。

由于缺乏科学指导,导致滥用现象十分严重,在水产养殖过程中会有20%~30%的四环素类药物被鱼类吸收,从而诱导体内致病微生物产生抗性基因(antibiotic resistance genes, ARG),当抗性基因通过食物链方式进入人体后会对健康构成威胁。

四环素类抗生素是保障动物和人类健康的重要武器,如果长期食用含四环素类抗生素残留的水产品,可能会产生致癌致畸致突变、过敏反应和降低人体免疫能力的危害等。

因此,世界各国对水产品中的兽药残留限量做了严格规定,我国规定鱼组织(皮和肉)中土霉素、金霉素和四环素的最大残留量为200 μg/kg。

四环素类抗生素的检测方法有:微生物法、免疫分析法、分光光度法、高效液相色谱法和液质联用法等。

食品中四环素类残留的酶联免疫检测试剂盒的研制

食品中四环素类残留的酶联免疫检测试剂盒的研制

矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。

如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。

㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。

(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。

如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。

对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。

二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。

2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。

㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。

2、矿产品价格稳定性及变化趋势。

三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。

2、矿区矿产资源概况。

3、该设计与矿区总体开发的关系。

㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。

2、矿床开采技术条件及水文地质条件。

胶体金免疫层析法快速检测肉类中恩诺沙星、四环素、头孢氨苄残留的应用验证研究

胶体金免疫层析法快速检测肉类中恩诺沙星、四环素、头孢氨苄残留的应用验证研究

胶体金免疫层析法快速检测肉类中恩诺沙星、四环素、头孢氨
苄残留的应用验证研究
邓波;朱卫芳;周雨璊;张维谊;宋宇迎;王敏;朱春燕;詹定生;詹林;丰东升
【期刊名称】《农产品质量与安全》
【年(卷),期】2023()1
【摘要】为满足基层人员开展肉类产品中兽药残留快速检测的需求,本研究利用胶体金快速检测卡检测不同肉类基质中恩诺沙星、四环素、头孢氨苄残留量,测试其检测灵敏度,并将该方法与液相色谱-串联质谱法比较,分析其检测结果的假阴性率和假阳性率。

研究结果表明,胶体金免疫层析法检测肉类基质中恩诺沙星、四环素、头孢氨苄的检出限分别为0.05、0.08、 0.02 mg/kg;该方法检测结果与参比方法检测结果无显著性差异。

同时,胶体金快速检测卡对恩诺沙星、四环素、头孢氨苄的检测与其他常见兽药均无交叉反应。

该方法操作简便、快捷,结果准确、稳定,可作为肉类上市前兽药残留检测的一种有效手段。

【总页数】5页(P89-93)
【作者】邓波;朱卫芳;周雨璊;张维谊;宋宇迎;王敏;朱春燕;詹定生;詹林;丰东升【作者单位】上海市农产品质量安全中心(上海);上海市青浦区农产品质量安全中心;上海北锦实业有限公司
【正文语种】中文
【中图分类】S85
【相关文献】
1.水产品中恩诺沙星残留胶体金免疫层析技术的研究
2.水产品中恩诺沙星胶体金免疫层析毛细管检测及其前处理
3.胶体金免疫层析法快速检测水产品中四环素类药物残留
4.多重胶体金免疫层析法检测乳品中β-内酰胺类、四环素类、头孢氨苄抗生素残留
5.磁性微球免疫层析试纸快速检测牛奶中恩诺沙星和环丙沙星
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食品中四环素类抗生素金标快速检测试剂条的研究张银志1,肖利文2,杨燕2,孙秀兰1,23 (1.江南大学食品科学与技术国家重点实验室,江苏无锡214036;2.江南大学食品学院,江苏无锡214036)摘要 [目的]建立一种检测四环素类抗生素的新方法。

[方法]四环素通过两步衍生化后,与氨基化的BS A 上的表位氨基反应,合成T C 2BS A 偶联物。

以四环素多克隆抗体-胶体金复合物作为分析探针,四环素完全抗原作为竞争抗原,构建分析体系。

[结果]紫外吸收光谱、凝胶色谱图和红外光谱均表明人工完全抗原偶联成功。

选择柠檬酸三钠加入量1.5m l 生成的胶体金作为该试验继续合成胶体金检测探针的金溶胶。

当抗体稀释倍数为1∶100、pH 值为8.70时,金标灵敏度好。

金标试纸条检测样品中四环素的检测限量是200μg/L ,检测时间不超过15.0m in 。

与E LIS A 法检测样品作对比,采用新法的准确率达100%。

探针溶液中加入10%(V/V )保护剂后,试剂条稳定性明显提高。

[结论]该研究为四环素的快速检测提供了依据。

关键词 四环素;纳米金;检测方法中图分类号 T S207.3 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2008)27-11637-03Study of R apid Detection on T etracycline A ntibiotics in Food by U sing G old 2labeled R eagent Strip ZH ANG Yin 2zhi et al (National K ey Lab of F ood Science and T echn ology ,S outhern Y angtze University ,W uxi ,Jiangsu 214036)Abstract [Objective]T he study was to establish a new m eth od for the rapid detection on tetracycline antibiotics.[M eth od]T hrough tw o step derivatiza 2tion ,the tetracycline reacted w ith epitope am in o in am ination BS A to synthesize into T C 2BS A conjugate.W ith the com pound of tetracycline polyclonal anti 2b ody 2colloidal g old as the analysis probe and the com plete antigen of tetracycline as the com petitive antigen ,the analysis system was constructed.[Result ]Ultraviolet abs orption spectrum ,gel chrom atogram and in frared spectrum all sh owed that the artificial com plete antigen was success fully coupled.T he col 2loidal g old generated by adding 1.5m l tris odium citrate was selected as the colloidal g old s olution in the ex perim ent of continu ously synthesizing the col 2loidal g old detection probe of g old s olution.W hen the dilution multiple of antib ody was 1∶100and pH was 8.70,the sensitivity of g old labeled strip wasg ood T he detection lim it of g old 2labeled reagent strip on tetracycline in detected sam ple was 200μg/L and the detection tim e was less than 15.0m in.C om 2pared w ith result of detecting sam ples by E LIS A the accurate rate by using new m eth od was 100%.A fter 10%(V/V )protective agent was added into probe s olution ,the stability of reagent strip was im proved obviously.[C onclusion]T he study provided a base for the rapid detection on tetracycline.K ey w ords T etracycline ;Nan o 2g old ;Detection m eth od基金项目 国家质监总局立项资助项目(2007IK 136);江南大学211师资基金资助项目。

作者简介 张银志(1975-),男,陕西汉中人,工程师,从事食品安全检测方面的研究。

3通讯作者。

收稿日期 2008206230 四环素类药物是一种广谱抗菌药物[1],可直接作为一种饲料添加剂投放到饲料中,曾以价格低、抗菌谱广等优点而在养殖业、畜禽业、水生生物等领域中广泛应用[2-5]。

在欧盟,四环素类抗生素的使用量占了整个禽畜业中抗生素使用量的65%[6]。

1990年,欧盟因我国畜禽产品中抗生素残留超标而停止进口我国畜禽产品[7]。

目前关于四环素类抗生素的检测方法有酶联免疫法、薄层色谱法、毛细管电泳法、质谱连用法和高效液相色谱法等[8],但这些方法都需要大型的仪器,价格昂贵,还需要专人管理。

近年来也有进口的用于四环素检测的E LIS A 试剂盒面世,但是保存期限短,价格高,远不能满足检测需要。

笔者在前人的研究基础上[9-10],建立了用金标免疫层析检测法检测四环素类抗生素的方法,为四环素的快速检测提供了可能。

1 材料与方法1.1 材料与仪器 供试材料:A BA 2BAS 抗血清、C DI 2BS A 抗血清(江苏省苏微微生物研究所提供);氯金酸(上海化学试剂厂),950m l/L 盐酸四环素标准品(T C.HC l )(购于中国药品生物制品检定所);丁二酸酐、N2氯丁二酰亚胺(NCS )、水合肼、碳二亚胺盐酸盐E DC (S igma 公司);0.01m ol/L 羊抗鼠二抗P BS 缓冲液,pH 7.4,所用水均为无锡华晶公司超纯水;牛血清白蛋白BS A 、卵清蛋白OV A (华美公司);四环素多克隆抗体(实验室自制),纤维膜,金标垫,样品吸收垫,吸水纸。

供试仪器:UV22100紫外扫描仪(北京瑞利公司产品),磁力搅拌器(IK A 公司),冷冻离心机5840R (eppend orf 德国);微量移液器PIPET M AN (G I LS ON 法国),DE LT A 2320pH 计(梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司),H 21微型混合器(上海沪西仪器厂)。

1.2 方法1.2.1 四环素完全抗原的合成[2-5]。

(1)称取20mg A BA ,溶解于2.2m l 浓度0.2m ol/L HC l 溶液中。

避光条件下缓慢滴加3.5m l 0.49m ol/L 亚硝酸钠水溶液,4℃下恒速搅拌1h 。

(2)称取27mg 四环素,溶解于10m l 0.05m ol/L 的硼酸钠溶液(pH 值8.5,溶有0.15m ol/L 的氯化钠)中。

向其中缓慢滴加1.5m l 制备好的重氮化A BA 溶液。

4℃下避光反应2h ,用H 3BO 3溶液将pH 值调至7.4。

(3)称取120mg E DC 、36mg NHS 和100mg OV A ,加入上述反应液中,室温下恒速搅拌3h 。

(4)将上述反应液转移到透析袋中,以0.01m ol/L 磷酸缓冲液透析3d ,每天换透析液3次,冷冻干燥,所得粉末保存于-20℃冰箱中备用[9]。

1.2.2 胶体金溶胶的合成[6]。

取50.0m l 氯金酸溶液(1.0×10-4g/m l )置于250m l 的锥形瓶中,在磁力搅拌的同时加热至沸腾,沸腾后迅速加入柠檬酸钠水溶液(浓度为0.01g/m l )1.50m l ,继续保持沸腾至溶液为清亮橘红色时停止加热,继续搅拌1m in 停止。

用紫外-可见光分光光度仪对金溶胶在紫外-可见光范围内(200~700nm )进行扫描,获得金溶胶紫外-可见光吸收光谱,测定最大吸收波长、吸光值和峰宽。

1.2.3 胶体金溶胶标记四环素抗体探针的制备[7]。

用Na 2C O 3溶液将金溶胶液体pH 调至9.00,取20.0m l 2.4×10-5m ol/L 的金溶胶溶液,磁力搅拌的同时,缓慢滴加10μg/m l 多克隆抗体溶液2.0m l ,静置1h 后,在4℃7500r/m in安徽农业科学,Journal of Anhui Agri.Sci.2008,36(27):11637-11639 责任编辑 李占东 责任校对 傅真治冷冻高速离心机中离心40m in,弃上清液,沉淀用0.5m l50.0 mg/m l BS A溶液溶解[8]。

1.2.4 四环素胶体金快速试剂条的组装[9-12]。

测试条由金标垫、硝酸纤维膜和样品吸收垫3部分组成。

将硝酸纤维素膜与金标垫、样品吸收垫依次相互叠加粘贴于试剂板上。

将制备好的金标抗体探针用微量移液器吸取5μl点于玻璃纤维滤膜上端靠近硝酸纤维膜处,自然干燥后备用。

活化处理后,微量移液器对硝酸纤维膜进行检测试剂线性包被,下端横线包被完全抗原,检测线浓度为原反应溶液;上端横线包被羊抗兔IgG,浓度为3.3mg/m l,干燥后备用。

以宽3.0 mm/条切条后备用。

1.2.5 纳米金快速试剂条的使用方法[13-14]。

将纳米金快速试剂条前端直接插入样品提取液中,或者将试纸条平放在桌面上,直接滴入4滴样品提取液。

如果样品液中含有四环素,将在C线处出现红色,表示阳性;反之,在T线处出现红色,表示阴性;如T线和C线均出现浅红色线条,表示弱阳性;如T线和C线均无颜色,则说明检测试纸条失效。

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