血清酸化溶血试验(Ham试验)
HA实验检验2
•
温抗体型AIHA
由于引起红细胞破坏的自身抗体在37℃温 度下对红细胞膜抗原的亲和力最强而得名， 这种自身抗体主要是IgG型，其次为非凝集性
IgM，偶有IgA型。
温抗体型是AIHA中最常见的类型，可见于
任何年龄，以中青年女性多见。病因原发性：病因不明继发性：淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、 SLE、感染、肿瘤、药物（药物与血浆蛋白 形成免疫复合物，产生抗体，非特异性吸 附于红细胞表面，激活补体）常见的药物： 利福平
血红蛋白 间接胆红素 循环血液 红细胞
与葡萄糖醛酸结合
直接胆红素
门静脉
尿胆原 尿胆素
尿胆原 粪胆原
• 溶血性贫血的临床表现： • 贫血、黄疸（以间胆高为主）、
脾大、血网织红细胞比例明显增高、 血涂片观察可见破碎、球形、椭圆 形、口形、靶形等异常形态红细胞， 甚至可见幼红细胞，血清结合珠蛋 白降低或消失，LDH(主要LDH2) 增高，尿胆原增高，甚至可见血红 蛋白尿或含铁血黄素尿，红细胞寿 命缩短等。
•
Howell-Jolly小体
cabot环
红细胞碎片
2.溶血部位的依据
血管内溶血的检查： 血红蛋白血症和血红蛋白尿，大量 溶血时可检测血浆中游离血红蛋白。血 红蛋白尿的出现提示有严重的血管内溶 血，血红蛋白尿应与肌红蛋白尿鉴别。
含铁血黄素尿，Rous试验阳性多见 于慢性血管内溶血，如PNH
3.确定溶血的病因依据： HA的确证实验
抗人球蛋白试验：不完全抗体无法 架接量个邻近的红细胞，而只能和一个 红细胞抗原相结合。抗人球蛋白抗体是 完全抗体，可与多个不完全抗体的Fc段 相结合，导致红细胞凝集现象，称为抗 人球蛋白试验阳性。 直接抗人球蛋白试验阳性说明病人 红细胞表面上包被有不完全抗体。而间 接Coombs试验阳性则说明病人血清中存 在着不完全抗体。
溶血性贫血的诊断
溶⾎性贫⾎的诊断溶⾎性贫⾎的诊断可分成两步：①⾸先明确有⽆溶⾎，应寻找红细胞破坏增加的证据；②查明溶⾎的原因，则须经过病史、症状、体征以及实验室等资料的综合分析来作判断。
⼀、病史除询问发病缓急，主要症状以及病情进程外还应着重询问以下各项：（⼀）地区性强调家庭籍贯，如地中海贫⾎多见于⼴东、⼴西及浙江等沿海地区。
（⼆）家族史近亲中如有贫⾎、黄疸、脾肿⼤者，则有先天性溶⾎性贫⾎可能。
（三）药物接触史药物可诱发免疫性溶⾎性贫⾎，氧化性药物可使不稳定⾎红蛋⽩病及G6PD缺乏症发⽣溶⾎。
（四）引起溶⾎性贫⾎的原发病史如淋巴瘤可伴有免疫性溶⾎性贫⾎。
（五）诱发因素如过劳、寒冷刺激及服蚕⾖等。
⼆、体征应注意贫⾎、黄疽、肝脾肿⼤等。
三、实验室检查检查⽬的和步骤有：（⼀）确定是否为溶⾎性贫⾎可根据红细胞破坏增加和⾻髓代偿功能增强⽽确定。
1.红细胞破坏增加的证据（1）红细胞计数下降，⼀般呈正细胞正⾊素性贫⾎。
（2）⾎清间接胆红素增多。
⾎清胆红素浓度不仅决定于溶⾎的程度，还决定于肝脏清除间接胆红素的能⼒，故黄疸为轻度或中度，⾎清胆红素⼀般在17.1-51.3ukmol/L（1-3mg/dl）左右，很少超过136.8umol/L（8mg/dl），当黄疸不显时，并不能排除溶⾎性贫⾎。
（3）尿内尿胆原的排泄量增多。
尿内尿胆原和尿胆素常增加。
在肝功能减退时，肝脏⽆能重复处理从肠内吸收来的尿胆原，尿中尿胆原也会增加，故对溶⾎性贫⾎的诊断，价值不是很⼤。
粪内尿胆原是增加的，但粪内尿胆原的定量测定现在已不在⽤作诊断⽅法之⼀。
尿内胆红素阴性，除⾮同时有阻塞性黄疸。
（4）⾎浆结合珠蛋⽩明显减少或消失。
结合珠蛋⽩是在肝脏产⽣能与⾎红蛋⽩结合的清糖蛋⽩，正常值为0.7-1.5g/L（70-150mg/dl）。
⾎管内和⾎管外溶⾎结合珠蛋⽩含量均降低。
在感染、炎症、恶性肿瘤或⽪质类固醇治疗时可以增多。
因此，在解释结果时须考虑其他因素的影响。
（5）⾎浆游离⾎红蛋⽩浓度增⾼。
实验诊断名词解释5
尿沉渣检查: 用显微镜对尿沉淀物进行检查， 识别尿中细胞、管型、结晶、细菌、寄生虫等，对泌尿系疾病的诊断、定位、鉴别诊断、预后具重要意义。
尿胆原（urobilinogen）：尿胆红素结合胆红素排入肠道转化为尿胆原，正常人尿胆原定性为阴性或弱阳性 。
尿渗量 ：肾脏排泄尿液内全部溶质微粒的数量，能较准确的反映肾脏深缩功能。
糖尿(glycosuria）： 尿糖定性试验阳性，称为糖尿，一般指葡萄糖
结晶体 (crystal)： 尿液经离心沉淀后，在显微镜下观察到形态各异的盐类结晶。结晶体 (crystal)
凝血共同途径：指激活FX 到纤维蛋白形成的过程。
抗凝血系统：指抗凝血酶，蛋白C，蛋白S 等，它们对血液中被激活凝血因子能进行灭活。
DIC：弥散性血管内凝血：是由多种致病因素，导致全身血管内微血栓形成和多脏器功能衰竭，消耗了大量的血小板和凝血因子，并引起继发性纤溶亢进，造成临床血栓-出血综合征
，存在于机体的血液、体液、外分泌液和某些细胞的膜上。
血小板聚集试验(platelet aggregation test，PAgT)是在富血小板血浆中加入诱聚剂(ADP、肾上腺素、凝血酶、花生四烯酸等)，血小板由于发生聚集反应其血浆的浊度减低，透光度增加。
血块退缩:血液凝固后，血小板释放出血块回缩酶，使血块退缩。
血清总胆红素：结合胆红素与非结合胆红素的总和.
亚铁血红素: 血红蛋白色素部分，由铁原子及原卟啉区组成。
糖化血红蛋白（GHb）：是血红蛋白合成后用其β链末端氨基酸与葡萄糖类进行缩合反应形成酮氨化合物，其中HbA1c 含量最高，是最常检测的部分。
原位溶血：幼红细胞未成熟未释放到外周血中之前就在骨髓中破坏，这种现象叫原位溶血。又称为红细胞无效性生成。
临床检验技师血液检验考试复习资料-急性髓性白血病分型
临床检验技师血液检验考试复习资料：急性髓性白血病分型1.急性粒细胞白血病未分化型（M1）：骨髓原始细胞（I型卡H型）占C的比例大于／等于90％，原始细胞过氧化酶或苏丹黑染色阳性率大于／等于3％，早幼粒及以下阶段粒细胞、单核细胞小于10％。
2.急性粒细胞白血病部分分化型（M2）：骨髓ＮＥＣ中，原始细胞（Ⅰ型＋Ⅱ型）30－89％，早幼粒及以下阶段粒细胞大于10％，单核细胞小于20％。
3.急性早幼粒细胞白血病（M3）：含大量的异常早幼粒细胞。
异常早幼粒细胞的特征是核常为肾形或双叶，胞浆完全被密集甚至融合的粗大颗粒占据，常掩盖胞核，用Romanowsky染色，这些颗粒为亮粉红色、红色或紫色。
有些异常早幼粒细胞的胞浆充满灰尘详细小颗粒。
典型的细胞含束状的ａｕｅｒ小体，散乱分布在胞浆。
变异型急性早幼粒细胞白血病（M3ｖ）：其特点是周围血几乎每一早幼粒细胞核均为双叶、多叶或肾形，大多数细胞无或仅含少许嗜天青颗粒，但至少部分细胞具典型M3的胞浆特征。
骨髓细胞形态更接近典型M3的特征。
与典型M3不同，M3V的白细胞计数常明显升高（可达200 X 109／L），而典型M3的白细胞计数常略高于正常或低于正常。
与典型M3一样，M3V易出现DIC并发症，染色体多有t（15：17）异常。
4.急性粒单核细胞白血病（M4）：符合下列条件之一：①骨髓NEC中，原始细胞大于／等于30％，骨髓原粒及原粒以下阶段的粒细胞大于／等于30％至小于80％；不同分化程度的单核细胞大于20％；周围血单核细胞大于／等于5 X 109／L。
②骨髓检查同上，血斗核细胞系小于SX10’／L，但血或尿溶菌酶高于正常值3倍以L，或单核细胞酯酶染色证实单核细胞系大于20％。
③骨髓细胞形态检查符合MZ，但有下列条件之一：a。
血单核细胞大于／等于sxlo’／L。
b。
血或尿溶菌酶大于正常值3倍。
b。
单核细胞酯酶染色证实骨髓NEC中，单核细胞大于20％。
伴嗜酸性粒细胞增多的粒单核细胞白血病（M4EO）：符合上述M4的条件，但骨髓异常嗜酸性粒细胞增多，常大于／等于5％（NEC）。
溶血性贫血的实验室检查
减低
• Hp增加，提示急慢性感染、恶性肿瘤、创伤、
风湿性关节炎、SLE等 • 鉴别肝内外阻塞性黄疸
– 肝内阻塞性黄疸显著减少或缺乏 – 肝外阻塞性黄疸正常或增高
4.尿含铁血黄素试验 （Rous test）
【意义】 脆性增高 遗传性球形红细胞增多症 脆性减低 缺铁性贫血 珠蛋白生成障碍性贫血
阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)
• 一种后天获得性血细胞膜缺陷的克隆性疾病，临床上可表 现血管内溶血、栓塞、全血细胞减少等，有时可出现骨髓 衰竭。
• 大多数PNH患者异常克隆与正常造血并存，使本病的诊断 和发病机制的研究受到限制。
【原理】膜蛋白缺陷的红细胞对补体敏感增 加，在弱酸血清（pH6.6~6.8）中，经37℃ 孵育后红细胞发生溶血。
【临床意义】正常人阴性，阳性见于阵发性 睡眠性血红蛋白尿（PNH）。该法敏感性较 高。特异性高。
Ham试验
PNH不同时间尿样
4.蔗糖水溶血试验
【原理】 蔗糖离子浓度低，增强补体与红细 胞结合，使红细胞膜上形成小孔，蔗糖进 入红细胞而致溶血。
【结果判定】阴性 【临床意义】溶血时阳性
6.血浆高铁血红素白蛋白试验 （methemalbumin test）
血浆中游离血红蛋白氧化成高铁血红蛋白，接着分 解为高铁血红素，后者与白蛋白结合形成高铁血 红素白蛋白
【结果判定】阴性
【临床意义】见于各种原因所致的严重血管 内溶血
7. 外周血红细胞形态改变
【临床意义】正常阴性。PNH本试验常为阳 性。可作为PNH筛选试验，阴性可排除，阳 性应作Ham 试验。
5.蛇毒溶血试验
临床血液学检验：10红细胞疾病应用1
氨 苯 砜 (dapsone,diaminodiphenyl
sulfone) 硫氧二砜(sulfoxone)
6．其他 萘(naphthalene) 苯肼(phenylhydrazine) 水扬酰胺(salicylamide) 二巯基丙醇(2,3-mercaptopropanol) 氯霉素(chloramphenicol) 维生素 K（vitamin K） 蚕豆素(favisin)
2．骨髓象 骨髓象随病情变化不一(IDA、AA) ；
诊断疑难者需同时作病理活检。
3.溶血试验
Thomas Hale Ham (1905-1987)
① 酸 化 血 清 溶 血 试 验 （ Ham test ） 、 蔗 糖 溶 血 试 验 、 蛇 毒溶血试验、尿潜血、尿含 铁血黄素试验等；
②排除其它需鉴别的溶血性疾 病；
红细胞能量代谢和功能、ADCC、激 活补体使其存活期缩短进而破坏所致 的溶血性贫血。
分类
自身免疫性溶贫(AIHA) 同种免疫性溶贫 药物免疫性溶贫
分类 疾病
• 是目前诊断PNH最敏感、特异的方法；
• FLAER对PNH克隆检出的敏感性为0.1%，其它靶向 标记检出率的敏感性为1%；
• 目前FLAER一般用于有核细胞的检测，不能评价红 细胞的PNH克隆。
PNH克隆的筛选/PNH诊断
（一） 红细胞
Ham 试验 糖水实验 蛇毒因子试验 微量补体敏感
试验
（二） 红细胞 粒细胞
CD55、 CD59
（三） 粒细胞 单核细胞
FLAER (reagent fluorescent aerolysin)
红细胞酶缺陷性溶血性贫血
RBC的能力代谢途径
2015年临床医学检验技术(师)考试(专业实践能力)真题及详解
2015年临床医学检验技术（师）考试（专业实践能⼒）真题及详解⼀、A1/A2型题（以下每⼀道考题下⾯有ABCDE五个选项。
请从中选择最佳答案，并在答题卡上将相应题号的相应字母所属的⽅框涂⿊。
）1. ⾎尿酸可作为何种疾病的辅助诊断指标？（ ）A. 糖尿病B. ⼼肌梗死C. 痛风D. 肝硬化E. 急性胰腺炎【答案】 C【解析】尿酸主要⽤作痛风的诊断指标。
痛风是嘌呤代谢失调所致，⾎清尿酸可明显升⾼（可⾼达800～1500μmol/L）。
2. WHO将“精⼦快速前向运动”活⼒定为（ ）。
A. 0级B. Ⅰ级C. Ⅱ级D. Ⅲ级E. Ⅳ级【答案】 D【解析】WHO建议将精⼦活动⼒分为4级：①快速前向运动（Ⅲ级：直线运动）；②慢或呆滞的前向运动（Ⅱ级：运动缓慢）；③⾮前向运动（Ⅰ级：原地运动）；④不动（0级：不活动）。
3. 下列可引起胎⼉畸形的寄⽣⾍是（ ）。
A. 蛔⾍B. 肝吸⾍C. ⼸形⾍D. 疟原⾍E. 肺吸⾍【答案】 C⼸形⾍可以通过胎盘引起胎⼉畸形，蛔⾍、肝吸⾍、疟原⾍、肺吸⾍均为普通的寄⽣⾍，不可通过胎盘，也不会引起胎⼉畸形。
4. 溶⾎空斑试验检测的是何种细胞的功能？（ ）A. T淋巴细胞B. 巨噬细胞C. NK细胞D. B淋巴细胞E. LAK细胞【答案】 D【解析】溶⾎空斑试验的原理是将绵⽺红细胞免疫的⼩⿏脾脏（或家兔淋巴结）制成单个细胞悬液，与绵⽺红细胞在琼脂糖凝胶内混合后倾注于⼩平⽫或玻⽚上。
脾细胞中的抗体⽣成细胞（B淋巴细胞）释放抗绵⽺红细胞抗体，使其周围的绵⽺红细胞致敏，在补体参与下可将绵⽺红细胞溶解，形成⾁眼可见的溶⾎空斑。
每⼀个空斑中央含⼀个抗体形成细胞，空斑数⽬即为抗体形成细胞数。
空斑⼤⼩表⽰抗体形成细胞产⽣抗体的多少。
因此溶⾎空斑试验检测的是B淋巴细胞功能。
5. SS琼脂平板培养基是属于（ ）。
A. 基础培养基B. 营养培养基C. 鉴别培养基D. 选择培养基E. 特殊培养基【答案】 D【解析】选择培养基是指在培养基中加⼊抑制剂，抑制标本中的杂菌⽣长，有助于所选择的细菌种类的⽣长。
临床检验技术中级《专业知识》试题及答案解析一
临床检验技术中级《专业知识》试题及答案解析一[单选题]1.在电阻抗型血液分析仪中，下列血细胞的（江南博哥）参数与产生的脉冲信号大小成正比的是()。
A.通过计数孔血细胞的数量B.血细胞在计数孔的移动速度C.血细胞的比密D.血细胞的体积大小E.血细胞是否有核参考答案：D参考解析：在电阻抗型血液分析仪中，血细胞的体积大小与产生的脉冲信号大小成正比。
[单选题]2.关于中性粒细胞核象左移，下列说法正确的是()。
A.中性粒细胞杆状核以上阶段的细胞增多称核左移B.核左移说明骨髓造血功能低下C.中性粒细胞细胞核分叶5叶以上比例增多称核左移D.分类中发现许多中性粒细胞核偏于左侧称核左移E.中性粒细胞核象左移常提示预后不良参考答案：A参考解析：核左移：外周血中杆状核粒细胞增多或（和）出现晚幼粒、中幼粒、早幼粒等细胞时（＞5%）称为核左移。
表示机体反应性强、骨髓造血功能旺盛，预后较好，见于感染（尤其急性化脓性感染）、急性中毒、急性溶血、急性失血等。
核右移：中性粒细胞核分叶5叶以上者超过3%则称为核右移，常伴白细胞总数减低，为造血物质缺乏、脱氧核糖核酸减低、骨髓造血功能减退所致。
[单选题]4.患儿男，12岁。
因腹泻1天来门诊求治。
粪常规示：暗红色果酱样、镜检红细胞满视野，少量白细胞，患者可能的诊断是()。
A.溃疡性结肠炎B.急性细菌性痢疾C.急性阿米巴痢疾D.消化道出血E.肠易激综合征参考答案：C参考解析：阿米巴痢疾的大便性状为暗红色果酱样，红细胞多；细菌性痢疾以黏液和脓细胞为主，可见巨噬细胞。
[单选题]5.脑脊液静置12～24小时后出现薄膜见于()。
A.化脓性脑膜炎B.结核性脑膜炎C.蛛网膜下腔梗阻D.流行性乙型脑炎E.脑脊髓梅毒参考答案：B参考解析：正常脑脊液放置12～24h后不会形成薄膜、凝块或沉淀，脑脊液形成凝块或薄膜与其所含的蛋白质，特别是与纤维蛋白原的含量有关，当脑脊液蛋白质含量超过10g/L时，可出现薄膜、凝块或沉淀。
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血清酸化溶血试验(Ham试验)
[原理]
阵发性睡眠性血红蛋白尿症的患者，因其红细胞本身有缺陷，故对补体敏感性增高，在酸化的自身血清中，经37℃孵育，易破坏产生溶血。
此法比较敏感，特异性也高。
[试剂]
(1)0．2mol儿盐酸(盐酸1．4m1，蒸馏水加至100m1即成，应新鲜配制)。
(2)8．5g/L儿氯化钠溶液。
(3)50％红细胞悬液制备，用10ml离心管1支，加入8．5g／L氯化钠溶液
4—5ml，再直接加入患者血液3—4滴，混匀后离心，弃去上清液。
如此反复洗涤红细胞2次，配成50％红细胞悬液。
(4)抽取思考静脉血3—5ml，待其自然凝固；分离出血清。
[操作]
(1)取2支清洁干燥小试管，编号,按表1—3—4步骤进行操作。
表1-3—4 酸化血清溶血试验操作
(2)轻轻混匀，加塞，置于37℃水浴中24小时。
[结果观察]
第1管溶血，第2管不溶血者为阳性。
[临床意义]
阳性见于阵发性睡眠性血红蛋白尿症和某些严重发作的自身免疫性溶血性贫血。
[附注]
(1)所用器皿必须清洁干燥，操作过程要避免发生溶血，否则可导致假阳性。
(2)血清酸化后，试管必须塞紧，否则二氧化碳逸出，可使血清酸度下降。
编写：谢平制定日期：2011.12.1
审核：伍海波
核准：周可成修订日期：2012.6.1。