水中大肠杆菌的检测方法
水中总大肠菌群检测方法

水中总大肠菌群检测方法
水中总大肠菌群检测一般采用以下方法:
1. 高级培养基方法:将取样的水样加入适当的营养培养基中,培养出细菌,并计数大肠菌群的数量。
常用的培养基有大肠杆菌培养基、MacConkey培养基等。
2. 荧光定量PCR方法:通过PCR技术检测水中大肠菌群的DNA,使用荧光探针结构标记大肠杆菌特异性基因,通过测定荧光信号进行定量分析。
3. 流式细胞仪方法:将水样进行染色,然后通过流式细胞仪分析计数大肠菌群的数量。
常用的染色方法有DAPI染色法、荧光活菌染色法等。
4. 基于微生物生物传感器的方法:利用微生物细胞对特定细菌的识别和响应能力,设计合成生物传感器来监测水中大肠菌群的存在和数量。
以上方法可根据实际需要选择使用,各自具有不同的优缺点。
在进行水环境监测时,可以结合多种方法进行检测,以获得准确和可靠的结果。
水中大肠杆菌的检测方法

附件水中大肠杆菌群检测方法-多管发酵法NIEA 一、方法概要本方法系用以检测水中革兰氏染色阴性,不产生内生孢子之杆状好氧或兼性厌氧菌,且能在35 ±1 ℃、48 ± 3小时发酵乳糖并产生酸及气体之大肠杆菌群(Coliform group);在不同体积或不同稀释度之水样所产生之结果,以「100 mL水中最大可能数(MPN/100 mL)」表示 100 mL水中存在之大肠杆菌群数目。
二、适用范围本方法适用地面水体、地下水体、废水、污水及水源水质水样中大肠杆菌群之检验。
三、干扰(一) 水样中含有抑制或促进大肠杆菌群细菌生长之物质。
(二) 检测使用的玻璃器皿及设备含有抑制或促进大肠杆菌群细菌生长的物质。
四、设备(一) 量筒:100至1000 mL之量筒。
(二) 吸管:有刻度之10 mL灭菌玻璃吸管或市售无菌塑料吸管,或无菌微量吸管(micropipet)。
(三) 试管:大小约150 × 15 mm之试管或有盖螺旋试管。
(四) 发酵管(fermentation tube):大小约22 × 9 mm之玻璃管。
(五) 稀释瓶:容量约100 mL可灭菌之硼硅玻璃制品。
(六) 锥形瓶:200至2000 mL之可灭菌硼硅玻璃制品。
(七) 采样容器:容量120 mL以上无菌之硼硅玻璃瓶或无菌塑料有盖容器,或市售无菌袋。
(八) 冰箱:温度能保持在4 ± 2℃者。
(九) 天平:待测物重量大于2 g时,须能精秤至 g;待测物重量不大于2 g时,须能精秤至 g。
(十) 培养箱:温度能保持在35 ± 1℃者。
(十一) 高压灭菌釜:温度能维持在121℃(压力约15 lb/in2或 Kg/cm2)灭菌15分钟以上者。
(十二) 高温干热烘箱:如用于玻璃器皿等用具之灭菌,温度须能保持在 160℃达2小时或170℃达1小时以上者。
(十三) 接种环:为白金或镍铬合金制,适用于细菌接种或移植,亦可使用无菌塑料制品。
水中大肠杆菌的检测方法终审稿)

水中大肠杆菌的检测方法文稿归稿存档编号:[KKUY-KKIO69-OTM243-OLUI129-G00I-FDQS58-附件水中大肠杆菌群检测方法-多管发酵法NIEA E201.54B一、方法概要本方法系用以检测水中革兰氏染色阴性,不产生内生孢子之杆状好氧或兼性厌氧菌,且能在35 ± 1 ℃、48 ± 3小时发酵乳糖并产生酸及气体之大肠杆菌群(Coliform group);在不同体积或不同稀释度之水样所产生之结果,以「100 mL水中最大可能数(MPN/100 mL)」表示 100 mL水中存在之大肠杆菌群数目。
二、适用范围本方法适用地面水体、地下水体、废水、污水及水源水质水样中大肠杆菌群之检验。
三、干扰(一) 水样中含有抑制或促进大肠杆菌群细菌生长之物质。
(二) 检测使用的玻璃器皿及设备含有抑制或促进大肠杆菌群细菌生长的物质。
四、设备(一) 量筒:100至1000 mL之量筒。
(二) 吸管:有0.1刻度之10 mL灭菌玻璃吸管或市售无菌塑料吸管,或无菌微量吸管(micropipet)。
(三) 试管:大小约150 × 15 mm之试管或有盖螺旋试管。
(四) 发酵管(fermentation tube):大小约22 × 9 mm之玻璃管。
(五) 稀释瓶:容量约100 mL可灭菌之硼硅玻璃制品。
(六) 锥形瓶:200至2000 mL之可灭菌硼硅玻璃制品。
(七) 采样容器:容量120 mL以上无菌之硼硅玻璃瓶或无菌塑料有盖容器,或市售无菌袋。
(八) 冰箱:温度能保持在4 ± 2℃者。
(九) 天平:待测物重量大于2 g时,须能精秤至0.01 g;待测物重量不大于2 g时,须能精秤至0.001 g。
(十) 培养箱:温度能保持在35 ± 1℃者。
(十一) 高压灭菌釜:温度能维持在121℃(压力约15 lb/in2或 1.1 Kg/cm2)灭菌15分钟以上者。
★水中大肠杆菌群检测方法-滤膜法

附件水中大腸桿菌群檢測方法-濾膜法NIEA E202.53B一、方法概要本方法係用濾膜檢測水中好氧或兼性厭氧、革蘭氏染色陰性、不產芽孢之大腸桿菌群(Coliform group)細菌。
該群細菌在含有乳糖的Endo培養基上,於35 ± 1℃ 培養24 ± 2小時會產生紅色色系具金屬光澤菌落。
所有缺乏金屬光澤的菌落,均判定為非大腸桿菌群。
二、適用範圍本方法適用於地面水體、地下水體、廢水、污水及海域水質及水源水質水樣中大腸桿菌群之檢測。
三、干擾(一) 水樣中含有抑制或促進大腸桿菌群細菌生長之物質。
(二) 檢測使用的玻璃器皿及設備含有抑制或促進大腸桿菌群細菌生長的物質。
(三) 濁度過高之水樣易造成濾膜孔隙阻塞,或造成細菌菌落瀰漫生長(spreading)而影響水樣檢驗的觀察及結果的判讀。
四、設備(一) 量筒:100至1000 mL之量筒。
(二) 吸管:有0.1 mL刻度之10 mL之無菌玻璃吸管或無菌塑膠製吸管,或無菌微量吸管(micropipet)。
(三) 稀釋瓶:100至1000 mL可滅菌、具螺旋蓋之硼矽玻璃製品。
(四) 錐形瓶:200至1000 mL可滅菌之硼矽玻璃製品。
(五) 採樣容器:容量100 mL以上無菌之硼矽玻璃或塑膠製有蓋容器,使用市售無菌袋亦可。
(六) 培養皿:硼矽玻璃製或可拋棄式塑膠製培養皿,大小為60 × 15 mm、50 × 12 mm 或其他適當大小。
(七) 過濾裝置:能耐高溫高壓滅菌的玻璃、塑膠、陶瓷或不鏽鋼等材質構成之無縫隙漏斗,以鎖定裝置、磁力或重力固定於底部。
(八) 抽氣幫浦:水壓式或吸氣式,壓力差最好在138至207 kPa者。
(九) 濾膜:使用材質為混合纖維素酯(mixed cellulose esters),直徑47 mm、孔徑0.45 μm且有格子記號的無菌濾膜。
(十) 鑷子:前端平滑、內側無波紋,使用前浸泡於95% 酒精再以火燄燃燒滅菌。
水质大肠杆菌检测标准

水质大肠杆菌检测标准水质大肠杆菌是一种常见的水污染指标微生物,其存在往往代表着水体受到了粪便污染,可能存在病原微生物,对人体健康构成潜在威胁。
因此,对水质中的大肠杆菌进行检测具有重要意义。
本文将介绍水质大肠杆菌检测的标准及相关内容。
一、样品采集。
1. 采样地点。
样品采集应根据实际情况选择合适的采样点,通常应选择水流平缓、水深适中的采样点,避免选择有明显污染源的地方进行采样。
2. 采样容器。
采样容器应为无菌容器,避免使用含有抗菌剂的容器,避免对样品造成影响。
3. 采样方法。
在采样时,应尽量避免接触手部或其他物体,避免污染样品。
采样时应尽量避开表层水体,直接将容器浸入水中采集样品。
二、样品保存与运输。
1. 样品保存。
采集后的样品应尽快送至实验室进行检测,若无法立即送检,应在4℃条件下保存,避免样品中微生物的生长。
2. 样品运输。
样品在运输过程中应避免剧烈晃动和温度变化,以免对样品造成影响。
三、检测方法。
1. 培养法。
培养法是一种常见的大肠杆菌检测方法,通过在含有培养基的平板上培养样品中的微生物,并通过特定的培养条件,观察培养基上是否有大肠杆菌的生长。
2. PCR法。
PCR法是一种分子生物学方法,通过特定的引物扩增样品中的DNA,再通过特定的检测手段,判断样品中是否存在大肠杆菌。
四、检测标准。
根据《水质污染物排放标准》(GB 3838-2002)的规定,水体中大肠杆菌的限量标准为每100毫升不得超过500个。
若水样中大肠杆菌数量超过此标准,则代表水质受到了污染。
五、检测结果的解读。
当检测结果显示水样中的大肠杆菌数量超过标准限量时,应立即采取相应的水质改善措施,避免对周围环境和人体健康造成潜在威胁。
同时,应对水源进行全面排查,找出污染源并进行治理。
六、结论。
水质大肠杆菌的检测标准对于保障水质安全具有重要意义,正确的采样和检测方法能够有效地保障水质的监测工作。
同时,检测结果的解读和后续处理也是非常重要的环节,需要引起足够的重视和关注。
水中大肠杆菌的检测实验报告

1. 掌握水中大肠杆菌检测的基本原理和方法。
2. 了解水中大肠杆菌污染的严重性及预防措施。
3. 培养实验操作技能,提高对水质监测的认识。
二、实验原理大肠杆菌(Escherichia coli)是一种条件致病菌,广泛存在于人和动物的肠道中。
在水质监测中,大肠杆菌常作为粪便污染的指示菌。
本实验采用伊红美蓝培养基进行大肠杆菌的检测,通过观察菌落特征,确定水中大肠杆菌的存在。
三、实验材料1. 实验器材:无菌试管、移液器、培养箱、酒精灯、无菌棉签、试管架、培养皿、显微镜等。
2. 实验试剂:伊红美蓝培养基、无菌水、水样、氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠等。
四、实验步骤1. 水样采集:采集待检测水样,用无菌容器盛装,避免污染。
2. 水样稀释:将水样进行适当的稀释,以便在培养基上形成单菌落。
3. 接种:取适量稀释后的水样,用无菌棉签均匀涂布于伊红美蓝培养基表面。
4. 培养:将接种后的培养基放入培养箱中,在37℃条件下培养24小时。
5. 观察:观察培养基上的菌落特征,如菌落大小、形状、颜色等,判断是否存在大肠杆菌。
6. 鉴定:对疑似大肠杆菌的菌落进行进一步的鉴定,如革兰氏染色、生化试验等。
五、实验结果与分析1. 菌落观察:在伊红美蓝培养基上,大肠杆菌菌落呈深紫色(黑色),边缘整齐,有金属光泽。
2. 鉴定结果:经革兰氏染色和生化试验,证实所观察到的菌落为大肠杆菌。
1. 大肠杆菌是水质监测中的重要指标,其存在表明水质可能受到粪便污染,存在健康风险。
2. 本实验采用伊红美蓝培养基进行大肠杆菌检测,操作简便,结果准确。
3. 在实际水质监测中,还需结合其他指标,如粪大肠菌群、耐热大肠菌群等,全面评估水质状况。
七、实验总结1. 本实验成功检测了水中大肠杆菌,掌握了水中大肠杆菌检测的基本原理和方法。
2. 通过实验,提高了对水质监测的认识,增强了环保意识。
3. 在今后的学习和工作中,将继续关注水质问题,为保护水资源、保障人民群众健康贡献力量。
饮用水中大肠杆菌标准

饮用水中大肠杆菌标准1.检测方法大肠杆菌的检测采用国家标准方法(GB5750.10∙2006)。
检测大肠杆菌的仪器和试剂包括显微镜、培养基、加热设备、无菌采样器等。
检测步骤包括采样、培养、显微镜观察和计数等。
2.卫生指标饮用水中的大肠杆菌数量是反映水质卫生状况的重要指标。
根据国家标准(GB5749-2006),生活饮用水中的大肠杆菌数量应不超过100CF∪∕m1o如超过此标准,表明水质存在污染,需要采取相应措施。
3.水质标准根据国家相关法规和标准,饮用水水质应满足以下要求:(1)水质清澈,无异臭、异味;(2)水中不含病原体,如大肠杆菌、病毒等;(3)水中营养物质含量符合要求;(4)水质稳定,不易受外界污染。
4.水处理过程为了保证饮用水的水质,需要进行水处理。
水处理过程包括沉淀、过滤、消毒等步骤。
沉淀过程去除水中的悬浮物和沉淀物;过滤过程去除更小的颗粒物和微生物;消毒过程杀死病原体,保证出水水质符合标准。
5.监测计划为了保证饮用水的水质,需要制定监测计划。
监测计划包括采样点、采样频率、采样方法、检测方法等内容。
采样点应覆盖整个供水区域,采样频率应根据季节和污染情况进行调整。
检测结果应及时向公众公开,同时存档备查。
6.违规处罚对于违反饮用水大肠杆菌标准的单位或个人,应进行相应的违规处罚。
违规处罚的方式包括罚款、责令停产整改、吊销证照等。
同时,应加强对违规行为的监督和管理,确保处罚的有效执行。
7.信息公开政府和相关部门应定期公开饮用水水质信息,包括大肠杆菌数量等指标,以便公众了解水质状况。
信息公开应通过官方网站、媒体等多渠道进行传播,确保公众能够及时获取相关信息。
信息公开不仅可以保障公众的知情权,还可以促进社会的监督和共同参与,提高饮用水水质。
8.科学研究为了更好地保障饮用水水质,需要对大肠杆菌标准和监测技术进行持续的深入研究。
科学研究可以包括新型检测方法的研究、水质标准的研究、水处理工艺的研究等。
通过科学研究,可以不断提高对大肠杆菌的认识,优化监测技术和方法,为保障饮用水水质提供更加科学和有效的支持。
大肠杆菌检测实验报告

大肠杆菌检测实验报告一、实验目的掌握大肠杆菌的检测方法,了解其在水质检验中的重要性。
二、实验原理1. 大肠杆菌大肠杆菌是一种常见的肠道杆菌,是一类嗜热性、厌氧性以及革兰阴性杆菌。
该菌种常常是肠道菌群的组成部分,同时也是水污染的重要指示菌之一。
(1)标准培养基法经过富营养培养基的生长,大肠杆菌会形成显性和隐性的群体。
这种检测方法适用于水质样本、地球样品以及饮用水。
(2)膜过滤法样品通过过滤器滤过后,将过滤后的膜放入培养基上培养。
这种方法既适合于生物质量较小的样品,也适用于分析浓度高的样品。
(3)MPN法通过使用3组不同浓度的小管,并观察哪个浓度的小管有生长曲线的所有格子都被满足,来计算菌落形成单位的浓度。
可以适用于样品浓度较低的环境。
三、实验操作1. 实验材料大肠杆菌标准菌株、优化阳性对照菌株、培养基、蒸馏水、实验器材、滤纸、吸管、离心机、洗涤液和细胞硬度试剂。
2. 实验步骤(1)制备纯菌液:将大肠杆菌基配合缓冲液跳接种到营养琼脂平板上,并在37℃的恒温培养箱中培养过夜。
将菌落划入脱色水中,通过洗涤和离心的方式,获得纯化的细胞菌悬液。
(2)制备样品:将需要检测的水样分别过滤,过滤膜使用巨孔滤纸。
滤膜被慢慢放在脱色水上U型板中间的孔里,然后浸泡(3)培养过程: 将U型板接入温度为37℃的有氧培养箱内,在24 - 48小时内观察细菌进行生长,并做出相应的计数和检测。
四、实验结果与分析按照实验操作规程进行样品处理和培养后,确认样品中是否存在大肠杆菌。
如果在实验中产生的试样中出现了大肠杆菌生长,且其生长优于阳性对照;或者在某些水样中不能检测出大肠杆菌,说明该水质品质不满足相关规范的要求。
五、实验结论本实验通过不同的大肠杆菌检测方法,较为全面地了解了大肠杆菌的检测方法及其在水质检验中的重要性。
在实验的基础上,我们有理由相信,通过科学准确的操作,人们可以更好地保证饮用水的健全和安全。
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水中大肠杆菌的检测方法一、方法概要本方法系用以检测水中革兰氏染色阴性,不产生内生孢子之杆状好氧或兼性厌氧菌,且能在351 ℃、483小时发酵乳糖并产生酸及气体之大肠杆菌群(Coliform group);在不同体积或不同稀释度之水样所产生之结果,以「100 mL水中最大可能数(MPN/100 mL)」表示100 mL水中存在之大肠杆菌群数目。
二、适用范围本方法适用地面水体、地下水体、废水、污水及水源水质水样中大肠杆菌群之检验。
三、干扰(一)水样中含有抑制或促进大肠杆菌群细菌生长之物质。
(二)检测使用的玻璃器皿及设备含有抑制或促进大肠杆菌群细菌生长的物质。
四、设备(一)量筒:100至1000 mL之量筒。
(二)吸管:有0、1刻度之10 mL灭菌玻璃吸管或市售无菌塑料吸管,或无菌微量吸管(micropipet)。
(三)试管:大小约15015 mm之试管或有盖螺旋试管。
(四)发酵管(fermentation tube):大小约229 mm 之玻璃管。
(五)稀释瓶:容量约100 mL可灭菌之硼硅玻璃制品。
(六)锥形瓶:200至2000 mL之可灭菌硼硅玻璃制品。
(七)采样容器:容量120 mL以上无菌之硼硅玻璃瓶或无菌塑料有盖容器,或市售无菌袋。
(八)冰箱:温度能保持在42℃者。
(九)天平:待测物重量大于2 g时,须能精秤至0、01 g;待测物重量不大于2 g时,须能精秤至0、001 g。
()培养箱:温度能保持在351℃者。
(一)高压灭菌釜:温度能维持在121℃(压力约15 lb/in2 或1、1 Kg/cm2)灭菌15分钟以上者。
(二)高温干热烘箱:如用于玻璃器皿等用具之灭菌,温度须能保持在160℃达2小时或170℃达1小时以上者。
(三)接种环:为白金或镍铬合金制,适用于细菌接种或移植,亦可使用无菌塑料制品。
(四)pH计:精确度达0、1 pH单位。
五、试剂(一)试剂水:蒸馏水或去离子水,导电度在25 ℃时小于2 μ mho / cm(μS / cm)。
(二)培养基,应使用市售商品化培养基。
1、硫酸月桂酸胰化蛋白胨培养基(Lauryl sulfate tryptose broth,简称LST)1倍浓度LST培养基含有下列成份:胰化蛋白胨(Tryptose)20、0g乳糖(Lactose)5、0g氯化钠(NaCl)5、0g磷酸氢二钾(K2HPO4)2、75g磷酸二氢钾(KH2PO4)2、75g硫酸月桂酸钠(Sodium lauryl sulfate)0、1g试剂水1L配成2倍浓度(取71、2 g LST培养基粉末溶于1 L试剂水),完全溶解后,分取10 mL注入装有倒置发酵管之试管内,经121℃灭菌15分钟,冷却后备用,灭菌后培养基之pH值应在6、8 0、2。
灭菌后培养基若未当日使用,应保存在42℃,保存期限为14天。
可根据检验需求量,依配方配制培养基。
2、煌绿乳糖胆汁培养基(Brilliant green lactose bile broth,简称BGLB)1公升的BGLB 培养基中含有下列成份:蛋白胨(Peptone)10、0g乳糖(Lactose)10、0g牛胆粉(Oxgall Powder)20、0g煌绿色试剂(Brilliant Green)0、0133g试剂水1L取40 g BGLB培养基粉末溶于1 L试剂水,完全溶解后,分取5至10 mL注入装有倒置发酵管之试管内,经121℃灭菌15分钟,冷却后备用,其pH值应在7、2 0、2。
灭菌后培养基若未当日使用,应保存在42℃,保存期限为14天。
可根据检验需求量,依配方配制培养基。
(三)无菌稀释液1、磷酸二氢钾储备溶液取3、4 g磷酸二氢钾(KH2PO4)溶于50 mL的试剂水中,俟完全溶解后,以1、0 N NaOH 溶液调节其pH值为7、2 0、1,然后加试剂水至100 mL,灭菌(过滤灭菌或121 ℃高温高压灭菌15分钟)后储存于冰箱中备用。
42 ℃下保存期限为3个月。
2、氯化镁储备溶液取8、1 g氯化镁(MgCl2‧6H2O),先溶于少量试剂水,俟完全溶解后,再加试剂水至全量为100 mL,灭菌(过滤灭菌或121℃高温高压灭菌15分钟)后,储存于冰箱中备用。
42 ℃下保存期限为3个月。
3、无菌稀释液分别取10 mL氯化镁储备溶液和2、5 mL磷酸二氢钾储备溶液再加入试剂水至2,000 mL,混摇均匀后,分装于稀释瓶中,经121℃灭菌15分钟,作为无菌稀释液备用。
如欲用于水样稀释,分装之无菌稀释液灭菌后体积须为902、0 mL。
42 ℃下保存期限为3个月。
六、采样与保存(一)盛装水样检验微生物之容器,应使用清洁并经灭菌之玻璃瓶或无菌塑料容器或市售无菌采样袋,且于采样时应避免受到污染。
水样若含有余氯时,无菌容器中应加入适量之无菌硫代硫酸钠(采取加氯之废水时,每100 mL水样中加入0、1 mL、10%硫代硫酸钠可还原15 mg/L余氯。
采取含氯之饮用水水样时,每100 mL之水样如加入0、1 mL之3%硫代硫酸钠,可中和之余氯量约为5 mg / L。
)。
(二)采样前应清洁手部,再行采水样,所采水样应具有代表性。
(三)运送时水样温度应维持在小于10 ℃且不得冻结,而实验室内保存温度应维持在42 ℃。
(四)水样应于采样后24小时内完成推定实验之水样添加步骤(七、步骤(一)4、),并置入培养箱中培养。
(五)水样量须以能做完所需检验为度,但不得少于120 mL。
七、步骤试验分两阶段进行。
首先进行推定试验,若推定试验结果为阳性反应,则继续进行第二阶段之确定试验,如结果仍是阳性反应则显示有大肠杆菌群存在。
各试验步骤如下述:(一)推定试验1、慎选发酵管中没有气泡且未污染之10 mL、2倍浓度LST试管。
2、水样在进行检测或稀释之前必须剧烈摇晃25次以上,以使样品充分混摇均匀。
3、视水样中微生物可能浓度范围进行水样稀释步骤,使用无菌吸管吸取10 mL水样至90 mL无菌稀释液中,形成10倍稀释度水样,混合均匀,而后自10倍稀释度水样以相同操作方式进行一系列适当之100、1000、10000倍等稀释水样,进行稀释步骤时,均需更换无菌稀释吸管,水样稀释步骤如图一所示(注1)。
4、以无菌吸管分别取各稀释度10 mL水样至内含10 mL2倍浓度的LST试管中,每一稀释度各作5支,小心混合均匀,混合后发酵管内不可产生气泡。
5、在351℃培养箱中培养483小时,观察并记录发酵情形,若有气体产生则推定试验为阳性反应,若无气体产生则推定试验为阴性反应,但若培养液呈混浊状态,虽无产气,亦应进行确定试验。
(二)确定试验若推定试验之发酵管中有气体或混浊产生时,则使用BGLB进行确定试验:1、慎选发酵管中没有气泡且未污染之BGLB试管。
2、利用无菌接种环自产生气体以及混浊之LST培养基试管中,接种一圈培养液至BGLB培养基试管中。
3、在351℃培养箱中培养483小时。
4、在483小时内,BGLB 培养基试管如有气体产生,则确定试验为阳性反应。
八、结果处理(一)经确定试验确认BGLB试管为阳性反应后,应以「100 mL水中最大可能数(MPN/100 mL)」计算及记录。
5支发酵管连续三种稀释度之MPN可查表一。
(二)表一所示接种之水样量为10 mL、1、0 mL 及0、1 mL,若所用之稀释度有三种以上时,采用最具意义之三种稀释度,查表后再计算100 mL水中大肠杆菌群最大可能数。
稀释度之选取方式如下:1、先选取5管均呈阳性反应的最高稀释度(此时稀释度较低之各组试管必须全部呈阳性反应),再选取下两个稀释度(如表二水样别a)。
2、如果稀释度最低的一组并非5管均呈阳性反应,则选取稀释度最低的一组,再选取下两个稀释度(如表二水样别b、c)。
3、如果依据上述原则(1、及2、)选取3个稀释度后,下一稀释度试管组仍有阳性反应试管,则舍弃原先3组中稀释度最低的一组,纳入下一稀释度的数据(如表二水样别d)。
4、如果依据上述原则(1、至3、)选取3个稀释度后,更高稀释度之试管组仍有阳性反应试管,则把更高稀释度之阳性反应试管数加至原先3组中稀释度最高的一组(如表二水样别e)。
(三)100 mL水中大肠杆菌群最大可能数(MPN/100 mL)之计算公式如下:结果小于100时,以整数表示(小数字数四舍五入),菌落数大于100以上时,只取两位有效数字:例如110以1、1102表示,16,000以1、6104表示。
(四)检测纪录须注明采样时间、培养起始及终了时间、培养基名称、培养温度及各稀释度的数据等相关数据。
九、质量管理(一)微生物采样人员及检测人员应具备微生物基本训练及知识。
(二)每批次采样时应进行运送空白。
(三)每批次或每10个水样需进行试剂空白实验。
(四)新购入之培养基,每批号均须以大肠杆菌群阳性控制菌株(如E、 coli、Enterobacter aerogenes、Citrobacter freundii)进行测试,以确保数据质量。
(五)若一季期间水样均未检出大肠杆菌群,则须以大肠杆菌群菌株进行培养基测试,以确保数据质量。
(六)本方法培养所得之细菌可能具有感染性,检测后之培养基及器皿应经高温高压灭菌处理。
、精密度及准确度略一、参考数据(一)APHA、全文结束》》、 Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater,21st Edition,Section9221、 American Public Health Association, Washington,D、C、(二)Difco & BBL Manual: Manual of Microbiological Culture Media、2003、 BD Diagnostic Systems、注1:水样如须稀释,建议于稀释后30分钟内完成检测步骤,以免造成细菌死亡或增生,影响实验结果。
图一水样稀释步骤表一三连续稀释度(10 mL、1 mL、0、1 mL)五试管重复测试时,阳性结果组合之MPN指数及95%信赖区间阳性反应组合 MPN/100 mL95%信赖区间阳性反应组合 MPN/100 mL95%信赖区间下限上限下限上限 0-0-0 <1、8 4-0-2216、840 表二判读说明水样别水样体积(mL)阳性反应组合结果(MPN/100mL)1010、10、010、001a5/55/52/50/50/55-2-04、9102b4/55/51/50/50/54-5-148c0/51/50/50/50/50-1-02d5/54/54/51/50/54-4-14、0102e5/54/54/50/51/54-4-14、0102。