几种抗氧化剂含量的测定
抗氧化剂
5．抗氧化剂包括亚硫酸类、抗坏血酸衍生物、硫代衍生物、氨基酸类、有机酸类、酚类、胺类、油溶性抗氧化剂等。
5.1．亚硫酸类5.1.1．无水亚硫酸钠Anhydrous Sodium Sulfite Na2SO3126.04 [7757-83-7]含Na2SO3应为95.0％～100.5％。
【性状】白色结晶或粉末；无臭。
在水中易溶，在乙醇中极微溶解，在乙醚中几乎不溶。
【鉴别】（1）本品的水溶液（1→10）显碱性，并且溶液显亚硫酸盐的鉴别反应（附录Ⅲ）。
（2）本品的水溶液显钠盐的鉴别反应（附录Ⅲ）。
【检查】溶液的澄清度与颜色取本品1.0g，加水20ml使溶解，溶液应澄清无色。
硫代硫酸盐取本品2.0g，加水100ml，振摇使溶解，加甲醛溶液10ml、醋酸10ml，摇匀，静置5分钟，加淀粉指示液0.5ml，用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，记录消耗的体积，扣除空白试验消耗的体积，不得过0.15ml（0.1%）。
铁盐取本品1.0g，加盐酸2ml，置水浴上蒸干，加水适量溶解，依法检查（附录ⅧG），与标准铁溶液1.0ml制成的对照液比较，不得更深（0.001％）。
重金属取本品1.0g，依法检查（附录ⅧH 第一法），含重金属不得过百万分之十。
硒取本品3.0g，加甲醛溶液10ml，缓缓加入盐酸2ml，水浴加热20分钟，溶液所显粉红色，与另取本品1.0g，精密加硒标准溶液（精密称取硒0.100g，加硝酸2ml，蒸干，残渣加水2ml 使溶解，蒸干，重复操作3次，残渣用稀盐酸溶解并定量转移至1000ml量瓶中，加稀盐酸稀释至刻度，摇匀，即得）0.2ml，加甲醛溶液10ml，缓缓加入盐酸2ml，水浴加热20分钟，制得的对照溶液的颜色比较，不得更深（0.001%）。
砷盐取本品0.5g，加水10ml溶解后，加硫酸1ml，置砂浴上蒸至白烟冒出，放冷，加水21ml 与盐酸5ml，依法检查（附录ⅧJ 第二法），应符合规定（0.0004%）。
绝缘油中T501抗氧化剂含量检测细则(红外光谱法)
绝缘油中T501抗氧化剂含量检测细则（红外光谱法）1检测条件1.1环境要求除非另有规定，检测均在当地大气条件下进行，且检测期间，大气环境条件应相对稳定。
a)取样应在良好的天气下进行。
b)环境温度不宜低于5℃。
c)环境相对湿度不大于80%。
1.2待试样品要求a)用洁净的500mL 磨口具塞试剂瓶，从设备下部取样口采样500mL。
b)油样在运输、保管过程中要注意样品的防尘、防震、避光和干燥等。
1.3人员要求试验人员需具备如下基本知识与能力：a)熟悉绝缘油抗氧化剂含量检测技术的基本原理和标准。
b)了解红外光谱仪的技术参数和性能。
c)掌握绝缘油抗氧化剂含量检测操作方法和影响因素。
d)了解被测样品取样基本要求。
e)熟悉电力生产和化学相关安全管理规定。
f)经过上岗培训并考试合格。
1.4安全要求a)执行国家电网公司《电力安全工作规程（变电部分）》相关要求。
b)现场取样至少由2人进行。
c)应在良好的天气下进行取样工作。
d)按照化学药品安全使用规定进行操作，注意防火防毒。
e)测试仪器确保良好接地。
1.5试验仪器及材料要求1.5.1主要仪器设备a)红外分光光度计：波长涵盖3800cm -1～3500cm -1，分辨率不低于4cm -1。
b)液体吸收池：在3800cm -1～3500cm -1范围内透明、具有无选择性吸收的任何材料的池窗(常用池窗有KBr，NaCl)、光程长0.3mm～1.0mm（也可根据不同的仪器状况，选择合适程长)的吸收池。
c)吸耳球。
d)玻璃注射器：1mL～2mL。
e)搅拌器。
f)分析天平，精度为0.0001g。
冷月无声1.5.2试剂与材料要求a)四氯化碳：分析纯。
b)浓硫酸：密度1.84g/cm 3，98%，分析纯。
c)2，6二叔丁基对甲酚：化学纯。
d)干燥白土：细度小于200目的白土约500g ，在120℃下烘干1h ，保存于干燥器内。
2检测准备2.1环境、人员、仪器准备检查环境、人员、仪器满足检测要求。
抗氧化剂抗氧化活性的测定方法_一_
利用脂质氧化测定抗氧化活性时 ,在常温下添加 完抗氧化剂后 ,脂质氧化变慢 ,抗氧化活性的测定往 往需要几个月甚至更长的时间 。因此常使用各种加 速氧化的方法 , 如烘箱法 、活性氧法 、Rancimat 法 、 OSI 法 。这些方法是通过升温或增加氧浓度加速氧 化的 。上述加速氧化所使用的温度与食品体系中氧 化变质的条件不同 ,而且高温加速试验造成氧化机理 的改变 ,有可能导致错误的结果 。
法和 DPPH 法 。 311 以抗氧化剂抑制脂质氧化为基础的方法
在食品中 ,以抑制脂质氧化降解为基础的方法是 测定抗氧化活性最方便也是最常用的方法 。脂质中 的不饱和脂肪酸自动氧化 ,生成不稳定的氢过氧化 物 ,氢过氧化物继续分解形成短碳链的醛 、酮 、酸等小 分子化合物 。抗氧化剂的加入可以延缓氢过氧化物 及其分解产物的形成 ,由此可测得抗氧化活性 。由于 氧化的底物 、引发或加速氧化的方法以及脂质氧化检 测方法的不同 ,该法又可分为以下几种情况 。 31111 氧化的底物或使用的体系
为了得到重复性的结果 ,选择底物时应优先考虑 单一的物质 ,如亚油酸或亚油酸甲酯 。不推荐使用植 物油或血浆等生物试样作为底物 ,因为它们是混合 物 ,提供完全相同的底物是不可能的 。此外 ,底物中 含有的抗氧化剂 (如植物油中常含有 VE) 也能参与测 试过程 ,干扰测定 。但是实际测定中常使用植物油等 脂质混合物 ,因为它们是与真实食品有关的脂质成 分 。实际操作中应根据具体的测试方法选择合适的 底物和测试体系 。 31112 引发或加速氧化的方法
抗氧化活性测定方法
抗氧化活性测定方法抗氧化活性测定方法在食品、药物、化妆品以及生物学研究中具有重要的应用价值。
抗氧化活性是指物质对自由基的清除能力，其测定方法可以评估物质的抗氧化性能和保护细胞免受氧化损伤的能力。
本文将介绍一些常用的抗氧化活性测定方法。
一、DPPH自由基清除法DPPH自由基清除法是目前应用最广泛的抗氧化活性测定方法之一、该方法基于DPPH自由基的紫色溶液，在受到氧化损伤时会褪色。
通过测定样品对DPPH自由基的清除能力，可以评估其抗氧化活性。
实验步骤：1.准备0.1mM的DPPH溶液。
2.取一定量的样品，加入适量的溶剂溶解。
3.取不同浓度的样品溶液，加入相同量的DPPH溶液。
4.静置反应一定时间后，通过测量溶液的吸光度变化，计算出样品的抗氧化活性。
二、还原能力测定法还原能力测定法是一种常用的抗氧化活性测定方法。
该方法基于物质对氧化剂的还原能力，通过测定还原剂浓度与吸光度之间的关系，评估样品的抗氧化活性。
实验步骤：1.准备一系列不同浓度的还原剂溶液。
2.取一定量的还原剂溶液，加入适量的氧化剂溶液。
3.静置反应一定时间后，通过测量溶液的吸光度变化，计算出还原剂的浓度与吸光度之间的关系。
4.根据吸光度与还原剂浓度的关系，评估样品的抗氧化活性。
三、总抗氧化能力测定法总抗氧化能力测定法是一种综合评估样品抗氧化活性的方法。
该方法基于样品的抗氧化剂含量和抗氧化活性，通过测定样品对氧自由基的清除能力，评估其总抗氧化能力。
实验步骤：1.准备一定浓度的氧自由基溶液。
2.取一定量的样品，加入适量的溶剂溶解。
3.取不同浓度的样品溶液，加入相同量的氧自由基溶液。
4.静置反应一定时间后，通过测量溶液的吸光度变化，计算出样品的抗氧化活性。
以上是常用的抗氧化活性测定方法，还有其他一些方法如ORAC法、TEAC法等也被广泛应用。
不同的方法适用于不同的样品和测定目的，选择适合的方法进行测定可以更准确地评估样品的抗氧化活性。
抗氧化物活性测定方法总结
抗氧化物活性测定方法（倾向于考虑DPPH法和ORAC法）1.FRAP法:铁离子还原抗氧化能力测定法[1]FRAP(ferric ion reducing antioxidant power)方法，在低pH值的溶液中，Fe3+-TPTz(Fe3+-三吡啶三嗪)被抗氧化剂还原成有色的Fe2+-TPTZ。
反应的结果常以Fe2+当量或标准物质的抗氧化能力表示。
该法快速简便、易于操作、重复性好，但FRAP反应属于电子转移(SET)反应，因此FRAP方法不能够测定氢转移反应(HAT)起作用的物质。
而且该法实际测定的是待测生物活性物质将Fe3+还原为Fe2+的能力，因此没有抗氧化能力的生物学相关性。
2.TEAC法(trolox equivalent antioxidant capacity)ABTS(2,2'-amino-di(2-ethyl-benzothiazoline sulphonic acid-6)ammonium salt,2,2'氨基-二(3-乙基-苯并噻唑啉磺酸-6)铵盐)与过氧化物酶和氢过氧化物在一起形成ABTS+阳离子自由基。
在抗氧化剂存在时，这种自由基混合物的光吸收值下降，下降程度取决于抗氧化剂的抗氧化能力，测得的结果以TEAC表示，即被测抗氧化剂清除ABTS·+的能力(吸光度大小的变化)与标准抗氧化剂trolox(VE的水溶性类似物)清除ABTS·+的能力的比值。
TEAC法十分简单，适用于大量样品的分析检测。
但是，ABTS·+并非生理自由基，缺乏生理相关性，而且与FRAP方法相似，ABTS·+与不同抗氧化剂问的氧化反应时间不同，因此，只能定性不能定量评价样品的抗氧化能力。
3.DPPH法[2，3](2，2-diphenyt-l-picrylhydrazyl radical scavenging capacity)DPPH·(二苯代苦味肼基自由基)法是较常用的方法之一。
气质联用法同时测定肉制品中的抗氧化剂和防腐剂
气质联用法同时测定肉制品中的抗氧化剂和防腐剂唐双双【摘要】要：建立气质联用法同时测定肉制品中3种抗氧化剂和7种防腐剂的方法.肉制品经6mol/L盐酸酸化后，乙醚提取，最后用甲醇浓缩定容，以气质联用色谱仪(电子轰击源)测定.结果表明10种物质在2~1000mg/L质量浓度范围内有良好的线性关系，相关系数都在0.999以上，其中3种抗氧化剂的最低质量浓度可以达到0.5mg/L.10种物质的最低检出限在0.2~0.8mg/kg之间，回收率范围是89.6%~97.8%.该方法快速简单，检出限低，线性范围宽，实用性强，为肉制品中多种常见防腐剂和抗氧化剂的同时测定提供了一种快速灵敏的方法.%A GC-MS method has been established for the simultaneous determination of three antioxidants and seven preservatives in meat products. Samples were acidified with 6 mol/L hydrochloric acid and extracted with ethyl ether. The resulting extract was rotary evaporated to dryness and redissolved in methanol prior to GC-MS analysis (electron impact ion source). A good linear relationship in the concentration range of 2 to 1000 mg/L with correlation coefficient above 0.999 was found for all 10 analytes. Three antioxidants showed the widest linear range with the lowest concentration of 0.5 mg/L. The limits of detection for all 10 analytes ranged from 0.2 to 0.8 mg/kg, and their average recoveries from spiked samples varied from 89.6%to 97.8%. This method was rapid, simple and practical and had low detection limit and wide liner range, thus providing an effective method for the simultaneous determination of preservatives and antioxidants in meat products.【期刊名称】《肉类研究》【年(卷),期】2013(000)002【总页数】3页(P18-20)【关键词】气相色谱-质谱法(GC-MS);肉制品;抗氧化剂;防腐剂【作者】唐双双【作者单位】镇江市产品质量监督检验中心，江苏镇江 212132【正文语种】中文【中图分类】TS251.4在食品中加入防腐剂可以延长保存期，防止腐烂变质，而食物中的油脂极易氧化发生酸败，并产生有毒物质，加入抗氧化剂可以预防这一过程的发生。
高效液相色谱法测定抗氧化剂乙氧基喹啉含量
摘
要： 通 过 用 高 效 液相 色谱 法 测 定饲 料 添加 剂 乙氧 基 喹 啉 含 量 ， 建 立 了一 种 简单 、 快速 、 准确 评 价 饲 料 添 加 剂 乙
氧 基 喹 啉 品 质 的 方 法 。 选取 典 型 乙氧 基 喹 啉 产 品 （ 主 要 包括 ９ ５ 原 油、 ６ Ｏ 粉 剂和 ３ Ｏ ％粉 剂 ） ， 用 乙腈 超 声 提 取 ， 外 标 法定 量 。在 １ Ｏ ～１ ０ ０＃ ｇ ／ ｍｌ 范 围 内， 乙氧 喹 的 峰 面 积 与 其 质 量 浓 度 间 有 良好 的 线 性 关 系 ， 相 关 系数 为 ０ ． ９ ９ ９ ６ 。 精 密 度 实验 ， 相 对标 准偏 差 均 小 于 ２ ， 能 够 满 足 饲料 添加 剂 乙氧 基 喹 啉 检 测 的要 求 。
２ ． Ｔｈ ｉ ｓ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｃ ｏ ｕ ｌ ｄ ｂ ｅ ｕ ｓ ｅ ｄ ｔ ｏ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｔ ｈ ｅ ｃ ｏ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ ｏ ｆ ｆ ｅ ｅ ｄ ａ ｄ ｄ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅ ｅ ｔ ｈ ｏ ｘ ｙ ｑ ｕ ｉ ｎ ．
６ Ｏ ｅ ｔ ｈ ｏ ｘ ｙ ｑ ｕ ｉ ｎ ｄ ｒ ｙ ｐ ｏ ｗｄ ｅ ｒ ａ ｎ ｄ ３ ０
ｅ ｔ ｈ ｏ ｘ ｙ ｑ ｕ ｉ ｎ ｏ ｎ，
ｅ ｔ ｈ ｏ ｘ ｙ ｑ ｕ ｉ ｎ ｄ ｒ ｙ ｐ ｏ ｗｄ ｅ ｒ ）ｗｅ ｒ ｅ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｅ ｄ ｗｉ ｔ ｈ ａ ｃ ｅ ｔ ｏ ｎ ｉ ｔ ｒ ｉ ｌ ｅ ｂ ｙ ｕ ｌ ｔ ｒ ａ ｓ ｏ ｎ ｉ ｃ ． Ｔｈ ｅ ｌ ｉ ｎ ｅ ａ ｒ ｒ ａ ｎ ｇ ｅ
关键词 ： 乙氧基 喹 啉 ； 饲料添加 剂； 高效 液 相 色谱 法 中图分类号 ： ＴＳ ２ １ ０ ． ７ 文献 标 志码 ： Ａ 文章 编 号 ： １ ０ ０ ３ —６ ２ ０ ２ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ２ —０ ０ ５ ９ —０ ４
食品中抗氧化剂的限量标准及检测方法探讨
害 和肝癌 有关 系 ， 这样 Ｓ Ａｓ 食 品 中使 用 是 被政 Ｐ 在
府 严 格 控 制 的。 例 如 ， Ｂ Ｔ ＨＱ 在 欧 盟 是 被 禁 止 的 。一 般 国家 通 常 １ ０ｍｇ ｋ ～ ２ ０ ｍｇ ｋ ０ ／ ｇ ０ ， ｇ的 ／
脂 酸败 ， 防止 油 脂 酸 败 的关 键 在 于 防 止 其 自身 氧
研 究 与 探 讨
中国标准导报
ＣＨＩ ＮＡ ＴＡＮＤ ＡＲＤＳ ＲＥＶ Ｉ Ｓ ＥＷ
食品中抗氧化剂的限量标准及检测方法探讨
罗 成 玉 赵 全 明 张 耀 明 金 建 国 张 宇 王 锋 瞿 春 芳
摘 要 ： 本 文 阐述 了世界 各 国对食 品 中抗 氧化 剂 的 限量 规 定 ， 中对 我 国规 定 其 的限量 标准 的不 完善 地 方进行 了探 讨 ； 另外 对 国 内外 的检 测 方 法进 行
化反 应 。
和合 成类抗 氧化 剂 ， 由于 天然 抗 氧化 剂 的稳 定 性一
般较 差 ， 品生 产 商 都愿 意选 择 如 ＴＢ 食 ＨＱ、 ＨＡ、 Ｂ
Ｂ ＨＴ、 Ｇ 等 的 合 成 酚 类 抗 氧 化 剂 （ Ｐ ） 为 了 阻 Ｐ Ｓ Ａｓ 。
而油 炸食 品等应 以脂肪 计 ， 样在 实 际 判定 中容易 这
甘油、 双甘油 酯和游 离脂肪酸 ， 通 过加热、 单 可 精 练， 以破 坏或 消除脂 肪 酶而 达 到保 护作 用 。更 普 遍
和重要 的是 油脂 的氧 化 ， 是 一个 复 杂 的 过 程 ， 它 也
是 使 用 抗 氧 化 剂 的 主 要 目的 。
效益 ， 消费 者 的 利 益 于不 顾 ， 量使 用 抗 氧化 剂 置 超
中国标准导报
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几种抗氧化剂含量的测定
一、实验目的
1.掌握抗坏血酸（AsA）含量的测定。
二、实验原理
抗坏血酸（AsA）测定的原理：
（1）AsA生理生化作用
抗坏血酸是植物细胞重要的抗氧化剂，通过清除体内的自由基和活性氧（H2O2）等，使机体免受氧化损伤。
（2）AsA含量的测定方法
a、2, 6-二氯靛酚滴定法
b、2, 4-二硝基苯肼分光光度法
c、荧光分光光度法
d、近红外分光光度法
e、电位滴定法
f、钼蓝比色法
g、2,2-联吡啶分光光度法
（3）二联吡啶法测定AsA含量的原理
三、实验材料和主要试剂
实验材料：菠菜叶片
实验试剂：5%TCA溶液、150mmol/L NaH2PO4(PH7.4)溶液、10%TCA溶液、44% H3PO4、4% 2, 2-二联吡啶；3% FeCl3。
四、实验步骤
（一）AsA含量的测定
1、标准曲线的制作
配制浓度为1mmol/L的AsA标准母液，分别配制成0、0.1、0.2 、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7mmol/L 的AsA标准液。
分别取0.2ml AsA标准液，分别加入0.2ml NaH2PO4（PH7.4）溶液、0.2ml H2O，混匀，30s后，分别加入0.4ml 10% TCA溶液、0.4ml H3PO4溶液、0.4ml 2, 2-二联吡啶溶液，0.2ml 3%FeCl3溶液，37℃，60min，测A525nm。
以AsA浓度为横坐标，
以OD值为纵坐标，制作标准曲线。
2、提取
称2.5g菠菜叶片1份，将样品剪碎加入10ml 5% TCA, 研磨，15000xg离心10min，上清液定容至25ml。
3、测定
分别取0.2ml上述制备的上清液和去离子水，分别加入0.2ml NaH2PO4（PH7.4）溶液、0.2ml H2O，混匀，30s后，分别加入0.4ml 10% TCA溶液、0.4ml H3PO4溶液、0.4ml 2, 2-二联吡啶溶液，0.2ml 3%FeCl3溶液，37 ℃，60min，在525nm下测定OD值。
根据标准曲线计算样品中AsA的含量。
五、实验结果
抗氧化剂含量（ug/gFW）＝抗氧化剂浓度（ug/ml）*提取液体积（ml）/样品的重量（g）抗氧化剂浓度（ug/ml）=（3.214*17.613+0.0012）/1.3095=43.23ug/ml
抗氧化剂含量（ug/gFW）43.23*25ml/2.500g=432.3（ug/gFW）
六、分析和讨论
1.抗氧化剂由植物体合成，待植物被破坏易被氧化，在实验中需迅速操作，防止抗氧化剂
被氧化。
2.还原型谷胱甘肽是植物细胞内另一种重要的抗氧化剂。
它含有活性的巯基，极易被氧化。
GSH可以预知不饱和脂肪酸生物膜组分及其他敏感部位的氧化分解，防止膜脂过氧化，
从而保持细胞膜系统的完整性，延缓细胞的衰老和增强植物抗逆性。
3.活性氧对许多生物功能分子有破坏作用，包括引起膜的过氧化作用。
其中，植物体中也
有防御系统，降低或消除活性氧对膜脂的攻击能力，即为抗氧化剂。
这些抗氧化剂是天然的非酶自由基清除剂。