细胞培养发展历史
细胞工程-7 细胞培养的基本概念及培养细胞的生物学特征
一、细胞培养发展简史
• 动物细胞（组织）培养技术起源于1885年，德国人 Roux 用温生理盐水在体外培养鸡胚髓板，并使之 存活了数月之久。 • 动物细胞（组织）培养的奠基人是美国生物学家 Harrison。在1907年采用盖玻片覆盖凹窝玻璃悬滴 培养法将蛙胚的神经组织培养在淋巴液中，保持存 活了几周时间，并观察到细胞突起的生长过程。 Harrison - - isolated pieces of frog embryonic tissue known to give rise to nerve fibres - grew them in frog lymph - observed outgrowth of axons over period of weeks in 1907.
5，由于细胞培养有可能在同一时期、相同条 件、相似性状的条件下提供大量的实验样 本，所以相对耗资较少，因而也就成为生物 制品、单克隆抗体和基因工程制品生产的 重要手段。
6，细胞和组织生长在人工培养环境中，与体 内环境相比仍然存在一定的差异，培养的 细胞或组织，其形态或功能会发生不同程 度的改变。因此再利用培养细胞做实验对 象时，不能将其与体内细胞完全一样看 待，只能把它们视作一种既保持动物体内 原细胞一定的性状、结构和功能又发生某 些改变的特定的细胞群体。
四、体外培养细胞的分型
根据离体细胞在体外生长时是否贴壁的性 质，将其分为贴壁型与悬浮型两类
正常体内组织细胞类型
四、体外培养细胞的分型
贴壁型(anchorage-dependent cell)
按照培养细胞的主要形态，可分为几大类型
1)成纤维细胞型 （fibroblast） 2)上皮细胞型 （epithelium） 3) 游走细胞型 （wandering） 4)多形型细胞 （polymorphic）
细胞生物学中的组织培养技术
细胞生物学中的组织培养技术随着科技的不断发展，细胞生物学中的组织培养技术也在不断更新优化。
组织培养技术是一种将细胞从其自然环境中剥离出来，并在人工环境下为其提供营养和生长条件的技术。
这项技术可以被应用于各个领域，如生物医学、生物物理学和生态学等。
一、组织培养技术的历史组织培养技术最早起源于19世纪晚期。
当时的细胞学家们通过组织培养技术，成功地将细胞从组织中分离出来并且保持其存活状态。
后来，随着研究的深入，组织培养技术不断发展壮大，发展成为今天广泛应用的一项生物技术。
二、组织培养技术的基本原理组织培养技术是将细胞从其自然环境中分离出来，然后在密闭的培养器中培养，为其提供营养和生长条件的一项技术。
其基本原理是培养细胞所需的必备条件是营养物质、温度、湿度、氧气、二氧化碳和细胞增殖激素等。
目前，主要的组织培养技术包括原代细胞培养和细胞系培养。
三、组织培养技术的应用组织培养技术可以被广泛地应用于医学研究、药物研发、生物学研究等领域。
在医学研究方面，组织培养技术可以用于研究肿瘤细胞发生和进化、研究细胞生长、发育和再生、研究免疫学和感染病毒学等。
在药物研发方面，组织培养技术可以用于筛选化合物，评估药物毒性以及研究药物代谢和毒性机制。
在生物学研究方面，组织培养技术可以用于研究细胞生命周期、细胞的基本结构和功能以及遗传学和生态学等方面。
四、组织培养技术的优势组织培养技术有着很多优势。
首先，组织培养技术可以让细胞摆脱自然环境中的干扰，让其处于一种理想的状态下，并进行特定的实验。
其次，组织培养技术可以控制实验条件，让实验结果更加准确。
最后，组织培养技术可以为科研人员提供更多的研究方法和工具，从而更好的解决问题。
五、组织培养技术的挑战在利用组织培养技术进行研究的过程中，科研人员也会面临着一些挑战。
首先，组织培养技术不同于自然环境，存在一定的局限性。
其次，细胞在培养的过程中容易失去其原有的形态和功能。
最后，组织培养技术也需要大量的专业知识和技术，如果应用不当则可能导致实验失败或者数据不准确。
细胞培养定义-概述说明以及解释
细胞培养定义-概述说明以及解释1.引言1.1 概述细胞培养是一种重要的科学技术，用于在控制的实验室条件下，培养细胞体外生长和增殖。
通过提供合适的生长环境，包括适当的培养基、细胞状态维持剂和温度、湿度等因素的控制，细胞可以持续生长和繁殖。
细胞培养可以在无菌环境下进行，以保证培养过程中没有污染物的引入。
细胞培养的主要目的是研究细胞的特性和功能。
通过细胞培养，科学家可以观察和研究细胞在不同条件下的行为，进一步了解细胞的基本生理过程、信号转导途径和分化过程。
此外，细胞培养还被广泛应用于药物筛选、生物技术研究、生物工程和医药领域等。
细胞培养的发展历史可以追溯到19世纪末。
当时，人们开始尝试培养动物细胞，最早成功地实现了培养培养出鸟胚细胞。
经过长期的努力和技术改进，细胞培养的技术逐渐成熟，并被广泛应用于各个领域。
综上所述，细胞培养是一种重要的科学技术，通过在受控的实验室条件下培养细胞，可以研究细胞的特性和功能。
随着细胞培养技术的不断发展和完善，它在生物学研究、生物技术和医药领域的应用将会更加广泛。
1.2文章结构1.2 文章结构本文旨在探讨细胞培养的定义、历史、重要性以及应用领域。
为了更好地展示这些内容，本文将按照以下结构进行组织和展示：第一部分是引言部分，引言部分将对细胞培养进行概述。
我们将介绍细胞培养的基本概念，其在生物科学中的重要性以及本文的目的。
第二部分是正文部分，正文部分将分为两个小节。
首先，我们将详细介绍细胞培养的定义。
我们将解释什么是细胞培养，如何进行细胞培养以及细胞培养的目的和意义。
其次，我们将回顾细胞培养的历史，探讨细胞培养技术的发展和重要里程碑，以及这些里程碑对现代细胞培养的影响。
第三部分是结论部分，结论部分将总结细胞培养的重要性和应用领域。
我们将强调细胞培养在生命科学研究中的关键作用，并讨论细胞培养在医学、药物研发、生物工程等领域的广泛应用。
通过以上的文章结构，我们将全面、系统地介绍细胞培养的定义、历史、重要性和应用领域。
1.4植物细胞工程发展史
细胞工程杨慈清生命学院植物细胞工程的发展历史细胞工程1.探索阶段（1902-1929）1902年，德国植物学家哈伯兰特(Haberlandt )提出了高等植物的器官和组织可以不断分割，直至分到单个细胞的观点。
他认为，如果每个细胞都有植物个体一样的性质和能力，那么可以通过植物细胞培养，把单个细胞培养成一个新个体。
1922年，克努森(Knudson )对兰花幼胚进行培养获得幼苗，克服了兰花种子发芽难的困难。
1922，考特(Kotte)和罗宾斯(Robbins)对豌豆、玉米、棉花等的茎尖、根尖进行了离体培养。
发现了培养的分生组织只能进行有限的生长。
1925年，莱巴赫(Laibach )进行亚麻种间杂种幼胚培养，成功地得到了杂种植物。
证明了胚培养在植物远源杂交中利用的可能性2.培养技术建立阶段（1930-1959）作为一门技术，它必须具有一定的程序性。
也就是说，它应该具有一定的技术模式。
在这一阶段，植物组织培养建立了两个与培养技术有关的重要模式，一、是培养基模式，二、是激素调控模式。
1934年，怀特(White )等用番茄根尖的组织培养，建立了第一个活跃生长的无性繁殖系。
1934年，高特里特(Gautheret )培养山毛柳、黑杨的形成层组织，获得愈伤组织形成。
1937年，怀特 (White )和温特(Went) 等分别发现B族维生素和吲哚乙酸（IAA）对培养的离体根生长具有重要作用。
1937-1938年，高特里特 (Gautheret )在1934年培养山毛柳、黑杨成功获得愈伤组织的基础上，在培养柳树的培养基中，加入IAA 和B族维生素等，使形成层的生长大为增加。
1937-1938年，诺比考特(Nobecourt )培养胡萝卜根和马铃薯的块茎薄壁组织，获得愈伤组织。
将愈伤组织置于琼脂培养基上继续培养，可无限发生细胞增殖，形成愈伤组织。
首次从液泡化的薄壁细胞建立愈伤组织培养物。
1957年斯库格(Skoog)和米勒(Miller)提出了植物激素控制器官形成的概念，指出通过改变培养基中生长素和细胞分裂素的比率，可以控制器官的分化，即生长素和细胞分裂素高促进根的分化，低促进茎和芽的分。
细胞培养技术
细胞培养重要名词
核型(Karyotype)：一个细胞全部染色体的组成和 所有特征。 合核体(Synkaryon)：两个细胞融合后形成的单核 杂种细胞。 活力(Viability)：以100个细胞中存活细胞数表示。
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细胞培养重要名词
接触抑制(Contact inhibition)：指细胞相互接触后 失去运动(移动)的现象。
上世纪初（1907年）美国科学家Harrison和Carrel创建 的、以淋巴液为培养基在试管内成功地培养了蛙胚神经 组织。50年代在培养容器、培养液及技术操作上都进行 了大的改进，使细胞培养进入一个突飞猛进的发展阶段。
70年代，随着遗传缺陷细胞株的培育，杂交瘤技术制备 单克隆抗体，癌基因转染及基因工程出现，使细胞培养 技术不仅用于研究生命科学，也成为生物工程、基因工 程和组织工程等学科的生产手段。
溶酶原激活剂；激素：EPO和促黄体生成素等；杀虫剂：杆状病 毒；肿瘤特异抗原；癌胚抗原；通过杂交瘤生产的各种单克隆 抗体；细胞本身（如干细胞）；皮肤重植等。
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三、对细胞培养的评价
（三）细胞培养技术的商业化 对于生物技术所使用的各种细胞株的价值，现 尚难作出评价。1998年，美国市场就达3.5-4亿美 元，而且每年还以6-8%的速度增长。美国细胞株供 应公司和机构及国内供应单位可在网上查询 。
Expession Systems 杆病毒细胞株的主要供应者
Life Tech
供应基础研究用的特异化细胞株
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三、对细胞培养的评价
（四）组织（细胞）培养的局限性 细胞（组织） 培养 ，包括器官培养终归是离体
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三、对细胞培养的评价
invitrogan 有关不同细胞株的用户 论坛ATCC 各种细胞株的主要供应者 提供 有关细胞株的筛选
动物细胞培养及应用发展史
动物细胞培养及应用发展史动物细胞培养是指将动物组织或细胞从体内取出，通过提供适宜的培养条件（如温度、营养物质和氧气浓度等）使其在体外继续生长和繁殖的过程。
动物细胞培养的发展历史可以追溯到20世纪初，随着生物技术的发展，动物细胞培养的应用范围也日益扩大。
20世纪初，动物细胞培养主要用于基础研究，如细胞分裂、细胞形态学和细胞功能等研究。
在这个时期，细胞培养的主要障碍在于细胞的污染和细胞生长的不可控制性，限制了研究的进展。
到了20世纪50年代，细胞培养技术取得了重大突破。
1951年，斯特里克（George G. Striker）首次成功地培养了卵白细胞，为细胞培养技术的发展奠定了基础。
此后，赫尼格（Theodore Puck）等人发展了一种名为“Puck的液体”（Puck's Fluid）的细胞培养基，成为细胞培养研究的标准培养基。
此外，1962年，史威弗（Hayflick）与穆尔（Moore）使用小鼠胚胎细胞建立了第一个动物细胞系，被称为WI-38，为后来的细胞株的建立奠定了基础。
20世纪60年代，细胞培养技术开始应用于生物制药领域。
1961年，人类胚胎肾细胞株HEK293被成功建立，成为重要的生物制药细胞株。
此后，越来越多的细胞株被建立，并用于生产各种重要药物和疫苗，如乙型肝炎疫苗、白喉疫苗和重组蛋白等。
到了20世纪70年代，进一步发展了细胞培养技术。
1970年，人类组织因子（HLA）细胞系的建立使得人类组织移植的研究得以推进。
此外，渐渐出现了将细胞培养技术应用于基因工程的趋势。
1973年，科恩（Cohen）和博伊尔（Boyer）成功构建了第一个重组蛋白的表达系统，奠定了现代基因工程的基础。
从此以后，细胞培养技术与基因工程相结合，推动了生物制药的快速发展。
总而言之，动物细胞培养的发展历史经历了从基础研究到生物制药再到基因工程和生物技术领域的转变。
不断改进的细胞培养技术为了疾病治疗、药物研发和基础生物学研究等方面提供了有力的工具和方法，为人类社会的发展做出了重要贡献。
第六章 动植物细胞培养
第一节
动植物细胞培养的特性
一、动物细胞培养的特性
技术发展历史：
1907年，美国，Harrison首次将蛙的神经组织在试管内培养 成功。 1950年，Enders及同事发表第一篇在培养细胞中生长病毒的 报告。 1972年，Knazek等创立中空纤维细胞培养技术，使细胞体外 培养扩展为大规模培养。 1986年，Demo生物公司用微囊化技术大规模培养杂交瘤细胞 生产单克隆抗体获得成功。 随后，动物细胞培养技术日趋完善。
维生素：是维持细胞生长的一种生物活性物质，它 们在细胞中大多形成酶的辅基或辅酶，对细胞的代 谢有重大的影响。 糖类：多数合成培养基都含有葡萄糖，它主要由糖 酵解作用代谢形成丙酮酸，并可转化乳酸或乙酰乙 酸进入柠檬酸循环形成CO2。对胚胎细胞和转化细胞， 乳酸在培养基中的积累特别明显。 无机离子：是细胞的重要组成部分之一，参与了细 胞的代谢活动。培养基中的无机离子除K+、Na+等外， 还含有Fe2+、Zn2+、Cu2+等微量离子。
生物反应工程原理
李艳 教授
生物科学与工程学院 lymdh5885@ ly5885@
第六章 动植物细胞培养
动植物细胞培养技术：将动植物组织、器官在适当 的培养基上进行离体培养的技术。 组织：指由结构和功能相似的细胞和细胞间质组成， 具有一定形态和生理功能的聚集体。 器官：指机体中具有特殊结构和完成特殊功能的分 化部分。 组织与器官培养：在人工条件下，使它们得以继续 生存或发展的一种培养方法。
1、动物细胞培养的环境要求 2、培养基组成 3、常用的合成培养基 4、培养基制备应考虑的因素
简述植物细胞培养的发展简史。
简述植物细胞培养的发展简史。
植物细胞培养是一种通过体外组织培养技术，将植物细胞、组织或器官在无菌条件下进行生长和繁殖的方法。
这一技术的发展可以追溯到20世纪初，随着科学研究的不断深入，植物细胞培养逐渐成为现代植物学和生物技术的重要工具。
下面将简要介绍植物细胞培养的发展简史。
20世纪初，植物细胞培养的基础工作由美国植物学家Haberlandt 首先提出。
他在1902年发表的论文中提出了植物组织培养的理论基础，并成功地培养出了玉米愈伤组织。
这标志着植物细胞培养的起步阶段。
随后，20世纪40年代至50年代，研究人员开始探索植物细胞培养的应用领域，并在植物育种和病毒研究方面取得了一些重要进展。
例如，1950年代，美国科学家White成功地利用细胞培养技术培养出了大规模的胡萝卜愈伤组织，为后来的植物遗传转化技术奠定了基础。
到了20世纪60年代，植物细胞培养进入了一个快速发展的阶段。
随着组织培养基的改进和生长因子的发现，研究人员可以更好地控制培养条件，大大提高了培养效率。
此外，还出现了一些重要的技术，如悬浮细胞培养和原生质体培养，为植物细胞培养的进一步研究和应用提供了更多的选择。
在20世纪70年代和80年代，植物细胞培养的应用范围进一步扩大。
研究人员开始利用细胞培养技术进行植物病毒的快速检测和繁殖，为病毒学研究提供了重要手段。
此外，植物细胞培养还被广泛应用于植物栽培、植物生理学和植物基因工程等领域。
到了20世纪90年代以后，植物细胞培养进一步发展为植物组织培养和植物器官培养。
研究人员可以通过培养植物的不同组织和器官，如根、茎、叶、花和种子等，来研究其生长发育和代谢过程。
此外，还发展出了一些新的技术，如胚胎培养、胚胎愈伤组织培养和植物胚胎移植等，为植物繁殖和育种提供了新的途径。
近年来，植物细胞培养的研究也得到了进一步的推动。
随着分子生物学和基因工程技术的发展，植物细胞培养被广泛应用于植物基因转化和基因功能研究。
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1856年，实现红豆杉细胞培养生产紫杉醇的突破。
1885年，Roux温生理盐水培育鸡胚组织；1887年，培养皿（英文：Petri dish）由在德国生物学家罗伯特·科赫手下工作的细菌学家朱利斯·理查德·佩特里（Julius Richard Petri，1852－1921）于1887年设计，故也称为“佩特里皿”。
是一种用于细胞培养的实验室器皿，由一个平面圆盘状的底和一个盖组成，一般用玻璃或塑料制成。
1902年，植物细胞培养是在植物组织培养技术基础上发展起来的。
1902年Haberlandt 确定了植物的单个细胞内存在其生命体的全部能力(全能性)，使成为植物组织培养的开端。
其后，为了实现分裂组织的无限生长，对外植体的选择及培养基等方面进行了探索。
1906年，Beebe和Ewing用盖片悬滴培养法，以动物血清做培养基，培养狗淋巴细胞存活了72 小时。
现代细胞培养是从Harrison(1907)和Carrel(1912)两人开始的。
Harrison参考前人经验，创建了盖片覆盖凹窝玻璃悬滴培养法。
1907年，哈里森(Harrison)在无菌条件下用淋巴液作培养基，培养蛙胚神经组织存活数周，并观察到神经细胞突起的生长过程，由此创建了盖片覆盖凹窝玻璃悬滴培养法，奠定了动物组织体外培养的基础。
1910-1912年，Carrel采用无菌操作、更新培养基、传代，完善了悬滴培养法；1912年，Haberlandt的学生Kotte和美国的Robins在根尖培养中获得了组织培养的成功。
Kotte采用了无机盐、葡萄糖、蛋白胨、天冬酰胺，及添加各种氨基酸的培养基。
1915年，昆虫细胞培养的鼻祖是德国人forhardBendict（1878—1958），发表了有关昆虫细胞培养的第一篇文章。
1923年，Carral设计创立了卡氏瓶培养法，用此法可根据需要随时更换培养液，既有利于组织不断生长，又可以运用不同种类的营养液培养不同的细胞，极大地推动了当时组织培养研究。
在培养基方面，Earle在1948年设计了含有碳酸氢钠等盐类的Earle氏盐溶液，Hank’s在1949年设计了Hank’s氏盐溶液。
Earle、Dulbecco等于1943年创建单层细胞培养法，首建长期传代的L-细胞系；1948年Sanford创建单细胞分离培养法，获L-细胞纯系。
1948年，体外细胞毒性试验细胞毒性实验它是利用体外细胞培养的方法，测定细胞溶解，抵制细胞生长的毒性作用来评价生物材料的潜在细胞毒性。
1948年，RosenBluth等首次报道利用鼠成纤维细胞培养来筛选聚合物，开始了细胞毒性试验评价生物材料的生物相容性的研究与应用工作。
1950年，Enders及其同事发表了第一篇关于在培养细胞中生长病毒的报告，开拓了以动物病毒为研究对象的新领域。
作为大规模细胞培养，Copsik等人成功的进行了有关仓鼠肾细胞（BHK）的悬浮培养。
1951年，Dulbecco等采用胰蛋白酶消化组织培养法，获得了单层细胞培养，并开始应用人工合成培养液。
随着抗生素的普遍应用，体外培养细胞已经是分离、鉴定和大量培养病毒的简便而又十分有效的工具。
1951年，Gey首建人肿瘤细胞——Hela细胞系。
1952年，水痘—带状疱疹是由一种DNA病毒即水痘—带状疱疹病毒（varicella-zoster virus，VZV）感染引起，该病毒1952年由Weller等首先通过细胞培养获得。
1954年，Peebles采自麻疹病人的材料进行人的肾脏细胞培养，从而成功地分离到病毒。
乙醚易使病毒钝化。
用人细胞、猴肾等作为第一代培养的细胞，再以FL．Hela细胞等的株细胞进一步增殖，并可在鸡胚的羊膜和绒毛尿囊膜上进行减毒增殖。
1955年，恩德斯（J．H．Enders）发表了用组织细胞培养分离麻疹病毒成功的报告。
中国第一代医学病毒学家汤飞凡认为这是病毒方法学的一个突破，必须尽快掌握它。
1955年，他就领导闻仲权开始建立了人胚和猴肾细胞的组织培养。
1956年，支原体是一种能营独立生活的最小微生物,它没有坚韧的细胞壁,故其形态有较大的可塑性, 容易通过细菌滤器,是动物细胞系长期培养中常见的污染源。
1956年由Robison['〕首次从体外细胞培养物中分离出支原体。
1957年，各种培养瓶、培养基孕育而生。
1957年Dulbecco实验室采用胰蛋白酶消化处理，使成块的组织分散成单个细胞，进行悬液培养，从而开创了细胞培养技术。
用单层细胞培养法可以建立很多细胞系(cell line)，通过单细胞分离培养法又可建立克隆细胞株(clone或cell strain)。
1958年，狂犬病毒适应于在细胞培养中增殖，随后利用该技术生产的细胞培养疫苗在安全性和效力上都日臻完善。
1958年，陈善明先生等老一辈科学家带领科研人员根据新疆地区的资源特点，首先开展了动物病毒学的研究，为新疆生物化学的研究开创了局。
利用兔肾、牛肾、羊肾和鸡脾等原代单层细胞，进行口蹄疫病毒的研究。
采用兔肾细胞培养出的A型III系口蹄疫苗，深受牧区广大牧民的欢迎。
1958年，日本科学家岗田用灭活的仙台病毒诱导人的腹水癌细胞融合成功。
后来科学家们又成功地诱导了不同种动物的体细胞融合，并且能将杂种细胞培养成活。
随着细胞融合技术的不断改进，现在这项技术已经广泛应用于细胞学、遗传学、免疫学、病毒学等多种学科的研究工作中。
1959年，美国M.Klein 等用牛肾细胞培养物最先分离到腺病毒(命名为“10”系腺病毒)，其抗原结构类似于人腺病毒。
1960年1960年，人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead 提出来的。
正常情况下，人外周血小淋巴细胞都处在G1期（或G0期），但在体外给予一定的条件，进行培养，经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。
这种取材简易、用血量少的培养方法已被广泛采用。
1961年，Hayflick首建人二倍体细胞系25种，开辟了应用新方向。
1962年，由Murashige和Skoog为烟草细胞培养设计的MS培养基，其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，它的硝酸盐含量高，其养分的数量和比例合适，能满足植物细胞的营养和生理需要，因而适用范围比较广，多数植物组织培养快速繁殖用。
1963年，进行了单细胞克隆。
原始的细胞株是成纤维细胞，贴壁依赖性。
但后来经无数次传代后细胞可悬浮生长，它广泛用于增殖各种病毒，生产兽用疫苗。
1964年，我国就开始进行人参细胞培养。
1965年，有学者在进行鱼类细胞培养时，首次发现鱼类细胞能够分泌类似哺乳类IFN的抗病毒活性物质，之后陆续发现多种鱼类机体和体外培养细胞均能诱生出IFN。
1966年，Steele和Breg成功的进行了羊水细胞培养及胎儿核型分析之后，使羊膜腔穿刺术广泛地应用于胎儿染色体疾病及先天性代谢病的产前... Cordocentesis），随后此方法开始广泛应用于胎儿疾病的产前诊断。
1967年，Mancini和Yates在鸡胚脑细胞培养中首次成功繁殖了AEV的VR株。
随后鸡胚成纤维细胞、肾细胞、神经胶质细胞和雏鸡胰细胞也被用于病毒适应株和野毒株的培养，病毒滴度，特别是自然毒株，一般较低，且未见细胞病变。
1967年，HyClone实验室创建于1967年，从为美国大学基础研究中的细胞培养开发高质量的胎牛血清做起，HyClone最先使用科学的收集方法和生产工艺生产出了内毒素和血红蛋白含量极低的高品质血清。
第一个使用了高效过滤方法，大大的提高了FBS的质量和促生长特性。
1969年，烟草的单个单倍体孢子培养成了完整的单倍体植株。
1970年，Melchers 在金鱼草悬浮细胞培养中获得了温度突变体。
1970年,PSCarlson 、H.Binding 和YM Heimer 等人分别分离出烟草营养缺陷型细胞、矮牵牛抗链霉素细胞系及烟草抗苏氨酸细胞系。
1971年，地鼠肾细胞疫苗（PHKCV）：原代地鼠肾细胞培养疫苗，加拿大、前苏联于1971年开始使用。
1972年，中空纤维细胞培养是由RA Knazek于1972年模拟体内微循环，设计了小型中空纤维细胞培养装置，中空纤维是用聚砜或丙烯的聚合物制成。
培养细胞在中空纤维上能不断从流动培养液获得营养物质，细胞代谢产物和分泌物又可随培养液的流动运走。
1973年，红豆杉细胞大量培养在我国也获得初步成功，从细胞培养物中得到了贵重的抗癌药物紫杉醇，但产率还有待提高。
1975年，角质形成细胞体外培养技术是在Rheinwald 和Green于1975 年创立的饲养层细胞培养方法的基础上逐渐发展起来的。
1975年，Sato成功地用无血清培养基培养了垂体细胞株CH4，还有人用HamF12无血清细胞培养基成功地克隆了CHO细胞。
1976年，Van Wezel首次报道使用微载体培养动物细胞，创立了生物反应器微载体培养细胞工艺，使动物细胞培养进入高密度培养阶段。
1977年，Dexter创立了骨髓细胞长期培养，可支持粒系血细胞的分化和成熟。
1978年，植物细胞培养技术的应用范围得到了迅速发展，利用体细胞无性系产生的大量变异，再结合人工诱变方法对植物组织或细胞进行突变体筛选，已经获得了许多抗病,抗虫,抗除草剂、矮秆、高蛋白等新品种。
1979年，Provost首次在体外培养成功后，HAV 可用多种原代及传代细胞株分离培养，如非洲绿猴肾细胞、人胚肾细胞、传代猴肾细胞（Vero、BSC- 1、FRhK-4）以及人2倍体肺细胞株（MRC5、KMB17）等。
1981年，Larkin等系统地论述了在植物体细胞培养再生植株的无性系变异以来，利用无性系进行突变体筛选来改良农作物品种。
1982年，Fridenshtein等发现并建立了以贴壁培养法为主要手段的分离扩增方法。
1983年，英国Wellcome公司就能够利用5000L的细胞罐进行大规模细胞培养生产口蹄疫疫苗；美国Genentech公司应用SV40为载体，将乙型肝炎病毒表面抗原基因插入哺乳动物细胞内进行高效表达生产出乙型肝炎疫苗；1987年，国外有人把培养的黑素细胞开始用于临床。
利用黑素细胞培养技术，可以把少量皮肤组织扩增培养出大量黑素细胞。
有人用来治疗白癜风等疾病，疗效满意，前景很好。
但是由于黑素细胞常用培养基中含佛波醇酯（TPA），存在致瘤危险，影响了这种方法在临床的应用。
1988年，Hofmann 等首次在培养基含胰酶的Vero 细胞上成功繁殖出PEDV，此后，该方法在PEDV 的分离、细胞培养和疫苗的研究中广泛应用。
1996年，Cha等发现在临床低传代分离株Toledo等病毒株中有一个包含19个开放阅读框（ORF，UL133～UL151）的区域，该区域是实验室株AD169所不具有的。