实验室常用液体配制标准操作规程
配置标准溶液
配置标准溶液一、概述。
标准溶液是实验室常用的一种溶液，用来确定分析物质的浓度，进行定量分析和质量控制。
正确配置标准溶液对实验结果的准确性和可靠性至关重要。
本文将介绍配置标准溶液的方法和注意事项，希望能帮助大家正确、高效地进行实验。
二、材料准备。
1. 分析纯试剂，用于配置标准溶液的试剂必须是分析纯级别的，确保溶液的纯度和稳定性。
2. 纯水，配置溶液所需的水应当是经过蒸馏或者离子交换处理的纯水，以避免杂质对溶液浓度的影响。
3. 称量仪器，需要准确称量试剂和水的质量仪器，例如电子天平。
4. 容器，配置溶液需要使用干净的容器，最好是玻璃容器，以避免其他材料对溶液的污染。
5. PH计、电导率计等辅助仪器，根据需要可以准备PH计、电导率计等辅助仪器，以确保溶液的质量。
三、配置方法。
1. 确定溶液浓度，根据实验需要，确定所需的标准溶液的浓度，通常可以根据实验方法或者质量标准来确定。
2. 称量试剂，根据所需溶液的浓度，准确称量所需的试剂，注意称量时要使用准确的称量仪器，并严格按照配比称量。
3. 溶解试剂，将称量好的试剂加入容器中，加入适量的纯水，搅拌溶解，直至试剂完全溶解。
4. 定容，将溶解好的试剂溶液转移到容量瓶中，加入适量的纯水，至刻度线，摇匀，即得到所需的标准溶液。
四、注意事项。
1. 清洁，容器和仪器要保持干净，避免杂质对溶液的影响。
2. 精确，称量试剂时要尽量精确，以确保溶液的浓度准确。
3. 搅拌，溶解试剂时要充分搅拌，以确保试剂完全溶解。
4. 校准，配置好的标准溶液需要进行校准，确保溶液的浓度符合要求。
五、总结。
配置标准溶液是实验室工作中常见的操作，正确的配置方法和注意事项对实验结果的准确性和可靠性至关重要。
希望本文所介绍的方法和注意事项能够帮助大家更好地进行实验工作，确保实验结果的准确性和可靠性。
溶液配置
实验常用试剂配置1.铜标准贮备溶液：称取1.000±0.005g金属铜(纯度99.9%)置于150ml烧杯中，加入20ml1+1硝酸，加溶解后，加入10ml1-1硫酸并加热至冒白烟，冷却后，加水溶解并转入1L容量瓶中，用水稀释至标缓。
此溶液每毫升含1.00mg铜。
2.铜标准溶液：吸取5.00ml铜标准贮备溶液于1L容量瓶中，用水稀至标线。
此溶液每毫升含5.0μg铜。
3.二乙基二硫代氨基甲酸钠0.2%(m/v)溶液：称取0.2克二乙基二硫代氨基甲酸钠三水合物(C5H10NS2Na •3H2O，或称铜试剂cupral)溶于水中并稀释至100ml，用棕色玻璃瓶贮存，放于暗处可用两星期。
4.EDTA-柠檬酸铵-氨性溶液：取12g乙二胺四乙酸二钠二水合物(Na-EDTA•2H2O)、2.5g柠檬酸铵[(NH4)3•C6H5O7]，加入100ml水和200ml浓氨水中溶解，用水稀释至1L，加入少量0.2%二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液，用四氯化碳萃取提纯。
4.1EDTA-柠檬酸铵溶液：将5g乙二胺四乙酸二钠二水合物(Na2-EDTA•2H2O)20g柠檬酸铵[(NH4)3•C6H5O7]溶于水中并稀释至100ml，加入4滴甲酚红指示液，用1+1氨水调至PH=8～8.5(由黄色变为浅紫色)，加入少量0.2%二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液，用四氯化碳萃取提纯。
5.氯化铵-氢氧化铵缓冲溶液将70g氯化铵(NH4Cl)溶于适量水中，加入570ml浓氨水，用水稀释至1L。
6.甲酚红指示液0.4g/L：称取0.02克甲酚红(C21H18O5S)溶于50ml195%(v/v)乙醇中。
7.碘溶液C=0.05mol／L：称12.7g碘片，加到含有25g碘化钾+少量水中，研磨溶解后用水稀释至1000mL。
8.丁二酮肟[(CH3)2C2(NOH)2]溶液5g／L：称取0.5g丁二酮肟溶解于50mL浓氨水中，用水稀释至100mL9.丁二酮肟乙醇溶液，10g／L：称取1g丁二酮肟，溶解于100mL乙醇(3.4)中。
实验室无菌生理盐水配制操作规程
实验室无菌生理盐水配制操作规程引言实验室无菌生理盐水配制是实验室常见的操作之一。
生理盐水是一种无菌、无毒、呈中性的溶液，可用于多种实验操作和生物培养。
本文将详细介绍无菌生理盐水配制的操作规程。
无菌生理盐水的定义无菌生理盐水是一种含有生理盐类的溶液，主要成分为氯化钠（NaCl）。
它的浓度和温度与人体体液相似，可用于配制细胞培养基、冲洗组织、稀释药物等操作。
实验室无菌生理盐水配制器材和试剂准备在进行无菌生理盐水配制之前，需要准备以下器材和试剂： 1.生理盐水：购买含有氯化钠的生理盐水或自制含有氯化钠的溶液； 2.蒸馏水：用于配制无菌液体的基础溶剂； 3.滤器：为了确保溶液的无菌性，建议使用0.22μm的无菌滤器。
实验室无菌生理盐水配制操作步骤步骤一：准备实验室环境在进行任何实验操作之前，必须确保实验室环境是干净、整洁、无菌的。
可以通过以下步骤来准备实验室环境： 1.将操作台面进行清洁，并喷洒含有消毒酒精的溶液； 2.戴上实验手套，确保手部的清洁和无菌。
步骤二：准备无菌容器和无菌液体1.将所需的无菌容器（如无菌注射器、培养皿等）放入高压蒸汽灭菌器中进行高压灭菌；2.将所需的生理盐水倒入高压灭菌器中，并进行高压灭菌，确保无菌液体的无菌性；3.待无菌容器和无菌液体冷却后，将其移入实验操作区。
步骤三：无菌操作1.戴好实验手套，并通过消毒酒精喷洒工具和操作台面，保持操作无菌；2.打开高压灭菌器，将无菌液体倒入无菌容器中；3.将无菌容器密封，放置在实验操作区内，准备后续实验操作。
步骤四：验证无菌性1.在无菌工作台上进行菌落计数，评估无菌生理盐水的无菌性；2.如发现菌落生长，表示无菌液体不合格，应重新进行无菌生理盐水配制。
实验室无菌生理盐水配制的注意事项1.所有实验操作必须在无菌条件下进行，避免污染；2.高压灭菌器的选择和操作应符合实验要求；3.使用无菌容器和无菌液体前，必须进行无菌性验证；4.避免使用已经过期的生理盐水和无菌容器。
实验室常用液体配制标准操作规程
常用液体配制标准操作规程（SOP）国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心二〇〇八年九月修订目录一、细菌培养系统（责任人：郑子峥）二、DNA操作系统（责任人：罗文新、陈瑛炜）三、蛋白质操作系统（责任人：李少伟、顾颖、潘晖榕）四、细胞培养相关（责任人：程通、张涛）五、单克隆抗体制备系统（责任人：陈毅歆、）六、EIA系统（责任人：葛胜祥、熊君辉）一、细菌培养系统1、LB培养基:每1000mL加分析纯NaCl 10g ，蛋白胨10g，酵母粉5g，用ddH2O 配制，再用10M NaOH调pH至7.4(1000mL一般加450ul)，高压蒸汽灭菌15min冷却后使用。
2、固体培养基:LB培养基中加入琼脂至1.5％，高压蒸汽灭菌15min后使用。
3、10%(g/V) 氨苄青霉素钠（Ap）：注射用氨苄青霉素钠（粉末）50g溶于500ml无菌去离子水中，溶解后分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。
注：如果购买的氨苄青霉素粉末不是无菌包装的，溶解后需用0.22滤膜过滤除菌后再分装。
4、2.5%(g/V)硫酸卡那霉素（Kan）注射用硫酸卡那霉素（液体）通常是2ml/支，内含0.5g卡那霉素。
取25支药剂（50ml），加入450ml无菌去离子水中，分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。
注：如果购买的卡那霉素是粉末状的非无菌包装，溶解后需用0.22滤膜过滤除菌后再分装。
5、细菌培养：配制相应抗性培养基，每试管倒入3~4ml培养基（卡那霉素抗性培养采用标记试管），无菌牙签挑取单克隆至试管中，于37℃，220rpm 培养。
剩余培养基做好抗性和日期标记，置于4℃保存。
6、化学感受态制备：1）原理:：细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态，这时的菌细胞称为感受态细胞（Competent cell）。
实验室常用液体配制标准操作规程
v1.0 可编辑可修改常用液体配制标准操作规程（SOP）国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心二〇〇八年九月修订目录一、细菌培养系统（责任人：郑子峥）二、DNA操作系统（责任人：罗文新、陈瑛炜）三、蛋白质操作系统（责任人：李少伟、顾颖、潘晖榕）四、细胞培养相关（责任人：程通、张涛）五、单克隆抗体制备系统（责任人：陈毅歆、）六、EIA系统（责任人：葛胜祥、熊君辉）一、细菌培养系统1、LB培养基:每1000mL加分析纯NaCl 10g ，蛋白胨 10g，酵母粉5g，用ddH2O 配制，再用10M NaOH调pH至(1000mL一般加450ul)，高压蒸汽灭菌15min冷却后使用。
2、固体培养基:LB培养基中加入琼脂至％，高压蒸汽灭菌15min后使用。
3、10%(g/V) 氨苄青霉素钠（Ap）：注射用氨苄青霉素钠（粉末）50g溶于500ml无菌去离子水中，溶解后分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。
注：如果购买的氨苄青霉素粉末不是无菌包装的，溶解后需用滤膜过滤除菌后再分装。
4、%(g/V)硫酸卡那霉素（Kan）注射用硫酸卡那霉素（液体）通常是2ml/支，内含卡那霉素。
取25支药剂（50ml），加入450ml无菌去离子水中，分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。
注：如果购买的卡那霉素是粉末状的非无菌包装，溶解后需用滤膜过滤除菌后再分装。
5、细菌培养：配制相应抗性培养基，每试管倒入3~4ml培养基（卡那霉素抗性培养采用标记试管），无菌牙签挑取单克隆至试管中，于37℃，220rpm 培养。
剩余培养基做好抗性和日期标记，置于4℃保存。
6、化学感受态制备：1）原理:：细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态，这时的菌细胞称为感受态细胞（Competent cell）。
滴定液(标准液)配制、标定、使用管理规程
滴定液(标准液)配制、标定、使用管理规程.doc滴定液（标准液）配制、标定、使用管理规程第一章总则第一条目的为确保实验室滴定液（标准液）的准确性和稳定性，特制定本管理规程。
第二条适用范围本规程适用于实验室内所有滴定液（标准液）的配制、标定及使用管理。
第三条管理原则滴定液（标准液）的配制、标定及使用应遵循准确性、稳定性、安全性和可追溯性原则。
第二章配制管理第四条配制环境配制滴定液（标准液）应在清洁、干燥、无尘的实验室环境中进行。
第五条配制设备使用校准合格的量器、天平、磁力搅拌器等设备进行配制。
第六条配制材料使用分析纯或更高纯度的化学试剂，去离子水或蒸馏水。
第七条配制方法按照标准操作程序（SOP）进行配制，确保配制过程的准确性。
第八条配制记录详细记录配制日期、试剂批号、配制浓度、配制人等信息。
第三章标定管理第九条标定目的通过标定确保滴定液（标准液）的准确浓度。
第十条标定方法采用标准物质或已知浓度的标准液进行标定。
第十一条标定频率根据使用频率和稳定性要求，定期进行标定。
第十二条标定记录记录标定日期、标定结果、标定人等信息，并进行数据分析。
第四章使用管理第十三条使用条件滴定液（标准液）应在规定的条件下储存和使用。
第十四条使用方法严格按照操作规程使用滴定液（标准液），避免污染和误差。
第十五条使用记录记录使用日期、使用量、使用人等信息。
第十六条异常处理发现滴定液（标准液）异常时，应立即停止使用，并进行调查处理。
第五章储存管理第十七条储存条件滴定液（标准液）应储存在干燥、阴凉、避光的环境中。
第十八条储存期限根据滴定液（标准液）的稳定性，设定合理的储存期限。
第十九条储存记录记录储存日期、储存条件、有效期等信息。
第六章质量控制第二十条质量标准制定滴定液（标准液）的质量标准，并进行定期审核。
第二十一条质量检测定期对滴定液（标准液）进行质量检测，确保其稳定性和准确性。
第二十二条质量记录记录质量检测结果，并进行数据分析。
单克隆抗体制备系统常用液体配制标准SOP操作规程样本
单克隆抗体制备系统常用液体配制标准SOP操作规程样本
1、PRMI 1640HT培养基（10L）:
PRMI 1640干粉10包（103.9g/10L），称取丙酮酸钠（Sodium Pyruvate，S）1.1g/10L，适量ddH2O溶解后加入。
称取黄嘌呤(hypoxanthn，H) 136.1mg/10L＋胸腺嘧啶核苷（thymidine，T）38.8mg/10L +谷氨酰胺（L-Glutamine,L-Glu）3.48g/10L，置适量ddH2O 中在45～50℃条件下溶解后加入。
加ddH2O至10L，补加NaHCO3 20g/10L。
用1mol/L HCl调节pH至6.8～7.0(经验值是3ml/10L)。
过滤除菌。
取少量的培养液置培养瓶中并放入CO2培养箱中，一周后，如培养中未长菌，同一期配制的基础培养液方可使用。
2、PRMI 1640培养基:
PRMI 1640HT培养基配制时不加H（黄嘌呤）和T （胸腺嘧啶核苷）即可。
3、过氧乙酸：
100ml的H2O2加入到200ml的乙酸中，再加入6ml浓H2SO4，放置过夜即可。
4、细胞冻存液：
90mL胎牛血清＋10mL DMSO（二甲亚砜）,4℃冻存。
EIA系统。
细胞培养相关常用液体配制标准SOP操作规程样本
细胞培养相关常用液体配制标准SOP操作规程样本（一）胰酶的配制：（浓度为1‰，1L）1、认真清洗配制容器，自来水20遍，去离子水5遍，超纯水润洗3遍。
2、称取牛胰蛋白酶1.0g；EDTA 2 g；3、用超纯水溶解；4、磁力搅拌器搅拌至胰酶完全溶解，溶液变得澄清；5、超纯水定容至1L；6、不锈钢滤器加0.22um滤纸两张高温灭菌后，在超净工作台过滤；7、在血清瓶中加入少量滤好的胰酶，置于细胞培养箱中检测是否染菌，其余置于4℃待用；8、过滤后洗净滤器再次灭菌，避免残留的胰酶降解蛋白。
（二）DMEM配制：1、所需试剂及材料：试剂：DMEM干粉（GIBCO 10L）、超纯水（Milli-Q）、Na2CO3 （Sigma）材料：10L玻璃瓶、500ml盐水瓶（灭菌）、0.22um滤膜、滤器（事先放好两层滤膜并高压灭菌）、磁力搅拌器大号搅拌子蠕动泵胶塞2、操作步骤：(1)10L玻璃瓶洗涤，自来水20遍，去离子水5遍，超纯水润洗3遍。
(2)在10L玻璃瓶中加入超纯水9.5L，将DMEM干粉倒入，在磁力搅拌器上搅拌溶解。
(3)按照3.7g/L 加入Na2CO3 。
(4)调节pH值至7.2~7.4。
(5)过滤分装，并注明名称及配制日期。
此过程注意无菌操作！(6)最后用血清瓶取10ml左右置于细胞培养箱中检测是否染菌。
(7)清洗滤器，10L玻璃瓶，软管，将所有实验器具归位。
（三）1640、MEM培养基的配制同上，Na2CO3的用量见包装说明（四）细胞间100×双抗（青霉素、链霉素）的配制青霉素及链霉素配制的终浓度为1万单位/毫升。
配制的步骤以400ml为例：1.认真清洗配制容器，自来水20遍，去离子水5遍，超纯水润洗3遍。
2.准备5瓶青霉素（80万单位/瓶）、4瓶链霉素（100万单位/瓶）。
3.加入1-2ml细胞间专用PBS进入青霉素、链霉素的瓶子内，浸泡后吹吸数次至全部溶解，溶解后的液体吸入配制容器内。
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常用液体配制标准操作规程（SOP）国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心二〇〇八年九月修订目录一、细菌培养系统（责任人：郑子峥）二、DNA操作系统（责任人：罗文新、陈瑛炜）三、蛋白质操作系统（责任人：李少伟、顾颖、潘晖榕）四、细胞培养相关（责任人：程通、张涛）五、单克隆抗体制备系统（责任人：陈毅歆、）六、EIA系统（责任人：葛胜祥、熊君辉）一、细菌培养系统1、LB培养基:每1000mL加分析纯NaCl 10g ，蛋白胨 10g，酵母粉5g，用ddH2O 配制，再用10M NaOH调pH至(1000mL一般加450ul)，高压蒸汽灭菌15min冷却后使用。
2、固体培养基:LB培养基中加入琼脂至％，高压蒸汽灭菌15min后使用。
3、10%(g/V) 氨苄青霉素钠（Ap）：注射用氨苄青霉素钠（粉末）50g溶于500ml无菌去离子水中，溶解后分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。
注：如果购买的氨苄青霉素粉末不是无菌包装的，溶解后需用滤膜过滤除菌后再分装。
4、%(g/V)硫酸卡那霉素（Kan）注射用硫酸卡那霉素（液体）通常是2ml/支，内含卡那霉素。
取25支药剂（50ml），加入450ml无菌去离子水中，分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。
注：如果购买的卡那霉素是粉末状的非无菌包装，溶解后需用滤膜过滤除菌后再分装。
5、细菌培养：配制相应抗性培养基，每试管倒入3~4ml培养基（卡那霉素抗性培养采用标记试管），无菌牙签挑取单克隆至试管中，于37℃，220rpm 培养。
剩余培养基做好抗性和日期标记，置于4℃保存。
6、化学感受态制备：1）原理:：细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态，这时的菌细胞称为感受态细胞（Competent cell）。
将细菌置于0℃，低渗CaCl2 溶液中时，菌细胞壁和膜的通透性增强，菌体膨胀成球型。
外源DNA与Ca2+形成抗DNase的羟基-钙磷酸复合物黏附于细胞表面，在经42℃短暂的热冲击处理（一般热休克90s）后能促进细胞吸收外源DNA复合物。
2）仪器、材料与试剂：①超净工作台、低温离心机、摇床、-80℃冰箱，装液氮的泡沫盒及液氮、50ml的离心管2个，50ml的注射器及小过滤器各1个。
高压灭菌的纸张、透气膜、的EP管约350-500个，两块10cm的平皿板及接种环。
②TB缓冲液：每200ml液体中含、、Kcl、PIPES。
（注：在电子天平上的误差<50mg,因在PH=易溶故先将其它药品用超纯水溶解,并用KOH及HCL调PH至。
在加入溶解后用超纯水定溶至相应的量，采用50ml的注射器及小过滤器过滤,一般储存在-20℃,时间<25天,否则易被氧化颜色呈粉红。
）③LB液体培养基：参见前面介绍。
④LB固体培养基：参见前面介绍。
⑤1管DH5α的菌种3）步骤：①倒无抗性的固体培养板，用接种环沾取感受态甘油菌画线,置于37℃恒温培养箱中培养过夜。
②在超净台里采用小枪尖挑取培养板中的单克隆菌(菌落的大小约2~3mm)转接于200~250ml的LB液体培养基中,盖上透气膜。
③置于摇床上，18℃、200- 250rpm速度摇约需3~5天，使OD600=~（对数生长期或对数生长前期）时开始制备。
④取出TB缓冲液及无菌的50ml离心管置于4℃冰浴中，预冷低温高速离心机（4℃、2500rpm、10min）。
⑤在50ml的离心管中加入约35ml-45ml的菌液，在4℃中冰浴10min。
⑥取出后放置于离心机上离心4℃、2500rpm、10min。
⑦弃上清液，在灭过菌的吸水纸上扣干（可重复多次收集菌体），先用约5~15ml的TB缓冲液重悬，再加至35ml的量（在冰上操作）冰浴10min。
⑧重复⑥+⑦的步骤一次。
⑨在35ml的TB缓冲液重悬后缓慢加入终浓度为7%的DMSO，混匀后在冰上冰浴10min。
⑩分装成100-150ul/管（的EP管）浸入液氮中速冻，分装约300多管后转移放置于-80℃冰箱保存。
4）转化效率的评估：①采用小量质粒快转（冰浴10min→42℃热休克90s→冰浴2min→加无抗性LB液体培养基200ul→37℃摇床复温培养30min）。
②涂Kn、AP抗性板并做阴性对照（采用ddH20代替鉴定用的大提标准质粒），可以评价出是否有染菌、突变、转化效率。
③可以用Er2566等感受态做平行对照，评估其的生长快慢情况及转化效率的高低。
转化效率=转化子总数/质粒DNA加入量（1ug/ul）,标准质粒为大提用的N31-EGFP。
5）注意事项：①严格按照标准操作步骤，整个操作过程要注意温度（4℃冰上操作）且洁净的超净台环境防止污染。
②直接从-80℃取出的菌株培养致敏后比连续使用或4℃短期保存的细菌的转化率要高，一般是受体菌应处于对数生长期或生长前期即OD600=~。
③转化鉴定时，42℃准确热休克90s不要振荡，迅速置于冰上2min,按照标准操作步骤进行评估。
一般是感受态制备好在-80℃冰箱冻存2天后再做鉴定，更准确评估。
④质粒分子量的大小对转化效率也有影响，一般来说，随着质粒分子量的增大，其转化效率会相应地降低。
但当质粒在~时，所得的转化率基本一致。
7、电转感受态制备：1）准备工作：（提前一天）1、250ml LB液体盛于1L三角瓶中；2、1L超纯水；500mL离心管两支；10%甘油400mL；3、离心管和200ul枪头若干以上物品，120℃灭菌20分钟后置于4℃保存备用4、电转杯经纯水洗净后这置于75%乙醇浸泡5、挑ER2738菌单克隆，接种于4mlTet抗性的LB中，于37℃190rpm过夜振荡培养。
2）感受态制备：1、取前一夜扩增的菌液3ml接种于 250mlTet抗性LB中，37℃240rpm振荡培养，约2-3小时OD值可达(其间每1小时测一次OD，其值在之间均可，但在时效率最好)；2、将菌液置于冰水混合物中冷浴30分钟。
同时将前一夜置于4℃保存的物品取出，置于冰水混合物中冷浴30分钟，同时将离心机预冷到4℃；3、将菌液全部转入500ml离心管中，2500rpm，4℃离心10分钟；4、弃上清，向离心管中加入约100ml预冷的无菌水，在冰水混合物中摇晃瓶身，使沉淀充分悬起，然后再补加200ml无菌水，与离心机中4000rpm，4℃下离心10分钟；5、重复步骤4两次；6、以10%甘油代替无菌水重复步骤4一次；在离心的过程中将离心管插入冰中预冷；7、充分弃上清，加入200ul10%甘油，要换瓶身，使沉淀充分悬起，用预冷的枪头按100ul/支分装细胞于离心管中；8、将分装好的细胞放入-80℃保存。
3）质量控制：将电转杯从乙醇中取出，置于超净台中，用无菌风吹4小时从-80℃取出一支感受态，立即放入冰盒里；取1ul标准质粒（1ug/ml）加入感受态中，混匀后，加入预冷的电转杯中；将电转条件设为，电击2-3秒，立即加入1mlSOC培养基并混匀；将混合物转入离心管中于37℃，200rpm振荡恢复半小时；用LB将培养物稀释至103涂于Amp固体培养基上，倒置于37℃温箱中，过夜培养。
计算效率：效率=菌落数×103×103。
二、DNA操作系统1、溶液 I:葡萄糖50mmol/L，EDTA 10mmol/L，Tris-HCl 25mmol/L，。
2、溶液 II:NaOH L，SDS 1%，用ddH2O现配现用。
3、溶液Ⅲ:取5mol/L NaAc 60mL，冰乙酸，混合后加ddH2O至100mL。
4、酚-氯仿-异戊醇(25:24:1)以25：24：1的比例混匀平衡酚、氯仿、异戊醇，保存于棕色玻璃瓶中，上覆一层Tris-Cl水相，4℃储存备用。
5、TE缓冲液:10mmol/L Tris-Cl ，1mmol/L EDTA ，灭菌后使用。
实验室中配有100×的TE母液，用时可用ddH2O稀释成1×使用液，灭菌后使用。
6、L CaCl2:在适量纯水中溶解54g ，定容至100mL，高压除菌后保存于4℃备用。
7、10×DNA上样buffer：母液：以500ml为例：蔗糖：200g，溴酚蓝：，取去离子水定容至500ml，完全溶解后放置于4℃保存。
*该母液配制完正常颜色为棕红色，颜色与pH值有关；存储时间较长，每次使用时需摇匀，并注意是否长菌。
染料：SYBER Green I（Molecular Probe）10,000×每次取50ul染料加入50ml母液中，充分摇匀。
分装于避光管中，即为10×DNA上样buffer，配制好的buffer均需避光4℃保存。
*配制者需督促使用者及时将避光管放回4℃，并经常检查溶液存量，染料需提前订购。
8、RNase A（DNase free）：RNase A干粉（Ameresco）溶解于L的CH3COONa（pH ）中，使终浓度为1mg/ml，加热至100℃，15min，室温冷却。
用体积的1M Tris-Cl 调pH至后，分装，于-20℃冻存。
*500ul/管分装，供分子克隆实验使用；3ml/管分装，供大提质粒使用。
RNase A干粉需提前订购，及时检查使用情况。
三、蛋白质操作系统（一）、电泳1、30%丙烯酰胺将29g丙烯酰胺和1g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml 的水中，于磁力搅拌器上搅拌至完全溶解。
补加水至终体积为100ml。
以μm孔径过滤溶液，去除不溶性杂质。
查证该溶液的pH值应不大于，置棕色瓶中保存于室温。
注意事项：丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。
称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。
可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。
2、 Tris-HCl400ml 水中溶解Tris-Base , 浓盐酸调PH至后定容至500ml3、 Tris-HCI400ml 水中溶解Tris-Base , 浓盐酸调PH至后定容至500ml4、10%SDS900ml水中溶解100g电泳级SDS，加热至68℃助溶，加入几滴浓盐酸调节pH值至，加水定容至1L，分装备用。
5、10％过硫酸铵称取过硫酸铵2g，适量水溶解后，定容至20mL，分装成1mL/管，于-20℃保存备用。
6、蛋白上样Buffer（6×蛋白加样缓冲液）称取十二烷基硫酸钠12g、溴酚蓝，1M Tris-Cl (pH= 30ml、甘油60ml、β－巯基乙醇5ml，定容至100ml。
7、蛋白质电泳buffer（5×）称取三羟甲基氨基甲烷、甘氨酸、十二烷基硫酸钠, 在水中溶解并定容至1L。