第四组氢化可的松、黄体酮、雌二醇的鉴别和区分
药物分析鉴别题
1、如何用化学方法鉴别：①巴比妥、②苯巴比妥、③司可巴比妥、④异戊巴比妥、⑤含硫巴比妥①巴比妥巴比妥分子结构因其含有酰亚胺结构，可以与碱共沸，释放氨气，可使红色石蕊试纸变蓝。
有氨臭②苯巴比妥：苯巴比妥与甲醛-硫酸试液反应，生成玫瑰红色的产物。
③司可巴比妥：司可巴比妥钠中的不饱和取代基（烯丙基）具有还原性，可在碱液中与高锰酸钾反应，将紫色的高锰酸钾还原为棕色的二氧化锰。
④异戊巴比妥：巴比妥分子结构因其含有酰亚胺结构，可以与碱共沸，释放氨气，可使红色石蕊试纸变蓝。
没有氨臭⑤含硫巴比妥：与铜盐反应，巴比妥类药物在吡啶溶液中生成的烯醇式异构体与铜吡啶试液反应，形成了稳定的配位化合物，显绿色。
2、用化学方法区别下列药物：①盐酸普鲁卡因、②盐酸丁卡因、③对乙酰氨基酚、④肾上腺素、⑤盐酸利多卡因、⑥盐酸普鲁卡因胺①盐酸普鲁卡因：其分子结构中有芳伯胺基，在酸性条件下与亚硝酸钠发生重氮化反应，生成重氮盐，再与碱性β萘酚反应生成红色沉淀。
②盐酸丁卡因：其分子结构中有芳伯仲胺，在酸性溶液中与亚硝酸钠反应，生成N-亚硝基化合物的乳白色沉淀。
③对乙酰氨基酚：分子结构中有苯环羟基，可以与三氯化铁反应显蓝紫色。
④肾上腺素：肾上腺素与甲醛-硫酸发那样，生成具有醌式结构的红色配位化合物。
⑤盐酸利多卡因：在酸性条件下，与氯化钴试液反应生成草绿色细小钴盐沉淀。
⑥盐酸普鲁卡因胺：分子结构中有芳酰胺结构，可被浓过氧化氢氧化成羟肟酸，再与三氯化铁作用形成配位化合物羟肟酸铁，溶液由紫红色随即变为暗棕色或者棕黑色。
3、鉴别下列药物：①氢化可的松、②黄体酮、③雌二醇、④炔雌醇①氢化可的松：其结构中有C-17-α-醇酮基，具有还原性，蓝四氮唑具有氧化性。
使氢化可的松氧化为具有颜色的甲儹。
溶于浓硫酸呈强烈绿色荧光，后渐变为橙红色。
②黄体酮：其结构中的甲酮基与亚硝基铁氰化钠反应生成蓝紫色的产物。
③雌二醇：其结构中有苯环羟基，可以与重氮苯磺酸钠反应，产生红色的偶氮染料。
《药物分析》期末复习题(第十二章至第十三章)
《药物分析》期末复习题（第十二章至第十三章）第十二章甾体激素类药物分析一、单项选择题1.四氮唑比色法可用于下列哪个药物的含量测定( )A. 可的松B. 睾丸素C. 雌二醇D. 炔雌醇E. 黄体酮2.Kober反应用于定量测定的药物为( )A. 口服避孕药B. 雌激素C. 雄性激素D. 皮质激素E. 孕激素3.氢化可的松因保管不当，C17-α-醇酮基有部分被分解，欲测定未被分解的氢化可的松的含量应采用( )A. 三氯化铁比色法B. 紫外分光光度法C. 异烟肼比色法D. 四氮唑比色法E. 酸性染料比色法4.分别有可的松、黄体酮、地塞米松磷酸钠三种制剂，要进行含量测定，可采用( )A. 四氮唑法测定可的松、黄体酮、异烟肼法测定地塞米松磷酸钠B. 异烟肼法测定该三种药物C. 四氮唑法测定黄体酮、地塞米松磷酸钠，二硝基苯肼法测定可的松D. 铁酚试剂法测定地塞米松磷酸钠，四氮唑法测定可的松，异烟肼法测定黄体酮E. 芳香醛比色法测定黄体酮、可的松，HPLC测定地塞米松磷酸钠5.四氮唑比色法测定皮质激素时，下列哪一个药物反应最快( )A. 地塞米松磷酸钠B. 可的松C. 氢化可的松D. 醋酸氢化可的松E. 醋酸泼尼松龙6. 用TLC法检查甾体激素类药物中其他甾体，常用的方法是( )A.对照药物法B.杂质对照法C.比色法D.外标法E.供试品自身稀释对照法7.下列哪个药物具有盐酸苯肼反应( )A. 黄体酮B. 苯甲酸雌二醇C. 雌二醇D. 甲睾酮E. 氢化可的松8.下面哪一种说法不正确？( )A. Kober反应用于雌激素测定B. 紫外光谱法用于所有甾体激素测定C. 四氮唑法用于皮质激素测定D. 异烟肼法用于所有甾体激素测定E. 盐酸苯肼法用于皮质激素测定9.氢化可的松鉴别不可以采用的方法为( )A.与硫酸反应B.与四氮唑试液反应C.红外吸收图谱法D.紫外吸收系数法E.重氮化-偶合反应F.与硫酸苯肼试液反应10.雌二醇的专属化学鉴别试验是( )A.三氯化铁反应B.茚三酮反应C. 硫酸-乙醇的呈色反应(Kober反应)D.与异烟肼反应E. 与2,6-二氯靛酚反应F.与三氯化锑反应11.下列具有环戊烷并多氢菲母核的药物是( )A.维生素类B.巴比妥类C.芳胺类D.甾体激素类E.吡啶类12.下列具有△4-3-酮基结构的药物为( )A.氢化可的松B.雌二醇C.庆大霉素D.盐酸普鲁卡因E.维生素C13.醋酸地塞米松加碱性酒石酸铜，产生红色沉淀是基于分子结构中( )A. △4-3-酮基B.C17炔基 C. C17甲酮基 D. C17羟基E.C17α-醇酮基反应14.下列可与2,4-二硝基苯肼、硫酸苯肼、异烟肼等反应，形成黄色棕的药物是( )A.庆大霉素B.硫酸奎宁C.黄体酮D.炔雌醇E. 维生素B115.下列可与硝酸银试液反应生成白色沉淀的药物是( )A.醋酸泼尼松B.炔雌醇C.庆大霉素D.阿莫西林E. 雌二醇16.Kober反应比色法可用于下列哪个药物的含量测定( )A.炔雌醇片剂B.丙酸睾酮注射液C.维生素A口服液D.醋酸地塞米松片剂E. 黄体酮注射液17.各国药典测定甾体激素类药物的含量，最常用的方法是( )A.紫外分光光度法B.比色法C.荧光法D.高效液相色谱法E. 薄层色谱法18.异烟肼比色法测定地塞米松时，所用盐酸和异烟肼的物质的量之比为( )A.1:1B.2:1C.1:2D. 3:1E. 1:419.可用异烟肼比色法测定含量的药物是( )A.倍他米松软膏B.庆大霉素C.雌二醇D.头孢氨苄E. 炔雌醇二、多选题1.具有酚羟基的药物有( )A.苯丙酸诺龙B.炔雌醇C.戊烯雌二醇D.雌二醇E.泼尼松2.黄体酮的鉴别试验方法有( )A.红外光谱法B.Vitali反应C.与异烟肼反应D.氯元素反应E.与亚硝基铁氰化钾3.甾体激素类药物应检查的特殊杂质应包括( )A.硒B.游离磷酸盐C.聚合物D.甲醇和丙酮E.其他甾体4.甾体激素类药物中其他甾体常用的方法是( )A.TLC法测定B. 比色法测定C.GC法D.多采用硫酸-乙醇或四氮唑盐显色E.以高低浓度控制杂质限量5.四氮唑比色法测定皮质激素药物含量时常用的四氮唑盐是( )A.BTPC.BGCD.TTCE.YWG6.测定黄体酮含量可采取的方法是( )A.HPLC法B.UV法C.四氮唑蓝比色法D.异烟肼比色法E.Kober反应比色法7.雌二醇含量可采用的方法是( )A.HPLC法B.UV法C.四氮唑蓝比色法D.异烟肼比色法E.Kober反应比色法三、配伍选择题1-5题共用备选答案A.黄体酮B.苯丙酸诺龙C.炔雌醇D.氟轻松E. 醋酸地塞米松1.与菲林试剂反应生成橙红色沉淀( )2.与亚硝基铁氰化钠作用产生蓝紫色( )3.与硝酸银生成白色银盐沉淀( )4.与重氮苯磺酸反应生成红色重氮燃料( )5.与茜素氟蓝反应呈色( )6-10题共用备选答案A.α-醇酮基B.甲酮基C.酚羟基D.氨基嘧啶环E.内酯6.雌二醇分子结构中具有( )7.维生素C分子结构中具有( )8.氢化可的松分子结构中具有( )9.盐酸硫胺分子结构中具有( )10.黄体酮分子结构中具有( )四、综合设计题根据氢化可的松的结构(C21H30O5, 分子量362.5) 设计：其原料药质量标准中的主要内容：性状指标、鉴别方法、检查项目、含量测定方法。
氢化可的松鉴别方法
氢化可的松鉴别方法氢化可的松是一种重要的药物，那怎么鉴别它呢？这可真是个关键问题！咱先说说颜色反应法。
把氢化可的松溶解在乙醇中，再加入硫酸，哇塞，那颜色瞬间就变了，变成棕黄色甚至更深的颜色。
这就像变魔术一样神奇，难道不是吗？你想想，就这么简单的操作，就能初步判断是不是氢化可的松。
但这里可得注意啦，溶液的浓度要控制好，不然颜色变化可能不明显，那可就麻烦了。
而且操作的时候一定要小心，别弄洒了，不然多浪费呀！还有红外光谱法，这就好比给氢化可的松做个“指纹识别”。
每一种物质都有独特的红外光谱，氢化可的松也不例外。
通过仪器分析它的红外光谱，和标准图谱一对比，嘿，就能确定是不是它了。
这多靠谱呀！不过呢，仪器得校准好，不然得出的结果可就不准确了。
这就像你拿一把不准的尺子去量东西，那能行吗？肯定不行呀！在鉴别过程中的安全性和稳定性也很重要呢。
首先，这些鉴别方法一般都是在实验室里进行的，所以实验室的安全措施一定要做好。
像那些化学试剂，可不能随便乱放，万一弄混了或者不小心碰到了，那可不得了。
这就像走在钢丝上，得小心翼翼的。
稳定性方面呢，不同的鉴别方法可能会受到一些因素的影响，比如温度、湿度啥的。
就好比天气不好的时候，人的心情也会受到影响一样。
所以在进行鉴别时，要尽量控制好这些因素，确保结果的准确性。
那氢化可的松的鉴别方法都有哪些应用场景和优势呢？在制药行业，那可是大有用处。
可以用来检测药品的质量，确保患者用到的是安全有效的药物。
这就像给病人吃了一颗定心丸，多好呀！优势嘛，操作相对简单，不需要太复杂的设备。
就像你在家里做个简单的手工一样，容易上手。
而且结果比较准确可靠，能让人放心。
咱再来看看实际案例。
有一家制药厂，在生产过程中怀疑有一批原料有问题。
他们就用了这些鉴别方法，一检测，果然发现不是氢化可的松。
哎呀，这要是没检测出来，生产出来的药可就出大问题了。
这就像在战场上，及时发现了敌人的陷阱，避免了一场灾难。
所以说，这些鉴别方法的实际应用效果那是杠杠的。
药物分析重点总结
药物分析重点总结全国医药院校⼴东药学院粉姐作业研究会“七⼆零”规划教材----------------------------------------------------------------------------------------------------------⼀册在⼿，作业⽆忧药学⽣不可错过的学习好帮⼿！总主编⽅泽蘅药物分析之我与59分的战争·供药物分析专业⽤·主编⽅泽蘅副主编范国芳⽅艺何锦霞⼴药9栋720出版社·版权所有侵权必究·⽬录问答题 0第⼀章 0第⼆章 (1)第三章 (2)第四章 (3)第五章 (3)第⼗⼆章 (4)第⼗五章 (5)区分题 (5)设计题 (10)⼀、苯巴⽐妥 (11)⼆、司可巴⽐妥钠 (15)三、注射⽤硫喷妥钠 (17)四、阿司匹林 (19)五、盐酸普鲁卡因 (23)六、异烟肼 (25)七、重酒⽯酸间羟胺 (27)⼋、盐酸氯丙嗪 (28)九、对⼄酰氨基酚 (29)⼗、硫酸奎宁 (30)⼗⼀、硫酸阿托品 (32)⼗⼆、硫酸庆⼤霉素 (34)⼗三、维⽣素B1（盐酸硫胺） (36)⼗四、维⽣素C (38)计算题 (40)药物的特殊杂质检查 (50)药物的含量测定 (52)专有名词英汉互译 (57)选择题 (57)问答题第⼀章1、药物分析是什么答：药物分析是⼀门研究和发展药品全⾯质量控制的“⽅法学科”，是运⽤化学、物理化学或⽣物化学等⽅法和技术研究化学结构已经明确的合成药物或天然药物及其制剂的质量控制⽅法，也研究中药制剂和⽣化药物及其制剂有代表性的质量控制⽅法。
2、药物分析的任务是什么答：①药物成品的检验⼯作②药物⽣产过程的质量控制③药物贮存过程的质量考察④临床药物分析⼯作；药物分析学科还应为相关学科的研究开发提供必要的配合和服务。
3、如何学好药物分析（本题500字）答：要学好药物分析，要做到三点：⼀是拥有扎实的理论基础；⼆是有熟练的实验操作技能；三是要有实事求是的科学态度。
药物分析简答题
药物分析简答题甾体1、分类：可的松、黄体酮、睾丸素、雌二醇2、鉴别：一般反应＊显色反应⊕与强酸反应⊕官能团反应＊TLC＊衍生化反应IR 法：炔雌醇和黄体酮IR(p.249～250)衍生化反应COCl+KOH OCHO O雌激素H2SO4乙醇呈黄色H2O or 稀H2 SO4桃红色共热稀释再加热加水max maxλ 465nm溶解 +第一步第二步硫酸亚铁铵中国药典采用本法测定炔雌醇片及复方炔诺酮片、复方炔诺孕酮滴丸、复方左炔诺孕酮片中的炔雌醇的含量抗生素类药物1、抗生素（ antibiotics ）在低微浓度下即可对某些生物（病原微生物）的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称2、分类：β –内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类、多烯大环类、多肽类+KCl+H 2O3、来源：生物合成、半合成、化学合成炔雌醇m.p.201℃CH3CH3CO CNOH+2HO NH 2+2H O2O N黄体酮HO双肟m.p.238℃3、杂质检查：“乙炔基”的检查：采用 AgNO3-NaOH 滴定法电位滴定法指示电极：玻璃电极参比电极：饱和甘汞电极 (玻璃套管内装饱和 KNO3 液 )药典附录中表示： C CH 中氢置换法电极系统：玻璃 -KNO3 盐桥 -饱和甘汞4、含量测定：（1）、 UV 法（2）、四氮唑比色法异烟肼法4、抗生素的特点：化学纯度较低、活性组分易发生变异、稳定性差原因：生产工艺复杂，发酵过程不易控制，易受污染5、抗生素的质量分析：采用生物学法与物理化学法鉴别：理化方法、微生物法检查：水分、异常毒性、热原、细菌内毒素、降压物质等含量 / 效价测定：微生物法：与临床疗效吻合，灵敏度高，但操作复杂费时；理化方法：准确度与专属性较高，且操作简便，但与临床疗效有偏差（一）β –内酰胺类1、化学结构O NHNH 2O H N NC C+N O NINH △4-3- 酮I s onicotinicacid HydrazideKober 反应比色法青霉素类： 6-APA 为母核头孢菌素类：7-ACA 为母核2、主要理化性质酸性 (羧基 )：酸性较强（ pKa 2.5-2.8）临床常用其碱金属盐（水溶性好）UV（共轭）：青霉素类：苯环取代基头孢菌素类：母核有共轭结构旋光性：有多个手性碳稳定性 (内酰胺 )：干燥条件较稳定，溶液不稳定氧化剂、酸、碱青霉素酶、金属离子降解失效3、鉴别1）羟肟酸铁反应：β–内酰胺类羟肟酸显色2）茚三酮反应α- 氨基蓝紫色3）双缩脲反应β–内酰胺类紫色4）光谱法（ U V、NMR）5）色谱法（ H PLC、TLC）头孢利定的NMR 鉴别法(JP14)取本品 50mg 溶于 0.5ml 重水中，测定 NMR 光谱时，应显示δ= 3.8 附近单峰信号δ= 6.9～ 7.5 多重峰信号δ=7.9～9.0 多重峰信号头孢氨苄鉴别的 TLC条件CHP（ 2000 ）5mg/ml 2μ l硅胶G0.1mol/L枸橼酸液-0.2mol/LNa2HPO4- 丙酮 (120:80:3) 0.1% 茚三酮溶液显色BP（ 1999）0.4%(W/V) 1μ 硅l烷化硅胶HF25415.4% NH4Ac(pH6.2)-丙酮 (85:15)254nm 检出4、特殊杂质检查：聚合物、有关物质、异构体等举例：头孢他啶中聚合物测定-------- 色谱条件与系统适用性试验流动相A：含 3.5%硫酸铵的0.01mol/L 磷酸盐缓冲液蓝色葡聚糖2000理论板数应不低于900，拖尾因子在0.75～1.5，葡聚糖凝胶G-10， 254nm检测头孢他啶中聚合物测定----------- 色谱条件与系统适用性试验流动相 B： 0.01%十二烷基硫酸钠溶液峰面积的 RSD应小于 5.0%，葡聚糖凝胶G-10，254nm 检测头孢呋辛酯中有关物质和异构体的检查色谱条件：ODS分析柱；0.2mol/L 磷酸二氢铵 -甲醇（ 62:38）为流动相；流速 1ml/min ；检测波长278 nm 。
雌二醇和孕酮的用途和用法
雌二醇和孕酮的用途和用法雌二醇（Estradiol）和孕酮（Progesterone）是两种与女性激素有关的物质，分别属于雌激素和黄体酮的一种。
它们在女性生理和疾病治疗中有着广泛的应用。
首先，让我们先了解一下雌二醇和孕酮的基本特点和功能。
雌二醇是一种重要的雌激素，主要由卵巢发挥作用，对女性的生理和心理健康起着至关重要的作用。
它在女性的生理过程中起着重要的调节作用，包括月经周期、卵巢发育和排卵等。
此外，雌二醇还参与调节骨骼发育、心血管功能、代谢、性欲和皮肤健康等多个系统。
孕酮是一种黄体酮类激素，主要由黄体细胞和胎盘产生，是维持和促进妊娠过程的关键激素。
它在女性的生理过程中起着重要的作用，包括协调月经周期、准备子宫内膜、维持妊娠、调节乳腺发育等。
此外，孕酮还对中枢神经系统和心血管系统具有调节作用，能够影响情绪、睡眠和体温等。
那么，我们来看一下雌二醇和孕酮在临床上的应用。
雌二醇的应用：1. 替代治疗：在女性更年期，由于卵巢功能减退，雌激素水平下降，可引起一系列不适症状，如潮热、失眠、情绪波动等。
雌二醇可以通过外源补充，缓解更年期不适症状，改善患者的生活质量。
2. 卵巢功能不全：对于卵巢功能不全或早早绝经的女性，雌二醇可以用于维持输卵管和子宫健康，预防骨质疏松等相关情况的发生。
3. 男性转女性治疗：对于希望性别转变为女性的男性，雌二醇可以促进女性第二性征的发育，如乳房增大、皮肤变薄等。
4. 乳腺癌治疗：某些乳腺癌患者需要通过雌激素受体阻断来治疗。
然而，在此类治疗中，雌二醇的应用被限制。
孕酮的应用：1. 促进妊娠：孕酮参与调节子宫内膜的准备和胚胎着床等过程，对于卵巢功能不全或其他原因引起的不孕症患者，补充孕酮可以增加成功妊娠的几率。
2. 维持妊娠：对于有习惯性流产或因黄体功能不全引起的反复流产的妇女，孕酮可以起到维持妊娠的作用，减少流产的发生。
3. 黄体功能不全：某些患者由于黄体功能不全，导致子宫内膜无法正常发育，影响受孕和妊娠的进行，此时可以补充孕酮以纠正黄体功能不全。
甾体激素类药物鉴别框架图
甾体激素类药物鉴别框架图反应生成白色↓尼尔雌醇片紫红色与 AgNO3TLC己烯雌酚片橘红至深红色 TLC结合雌激素片深棕红色，在254nm有暗绿色荧光，异烟肼反应显黄色奶黄色荧光；稀释后366nm亮绿色荧光 TLC苯甲酸雌二醇注射液浅红色 TLC（油状澄明液体）反应生成白色↓复方炔诺酮片微玫瑰红色，在366nm有粉红荧光，与 AgNO3（炔诺酮、炔雌醇）稀释后有橙黄色荧光 TLC黄体酮注射液负反应异烟肼反应显黄色，放置，分层，上层为黄色 TLC（油状澄明液体）醋酸甲羟孕酮片负反应异烟肼反应显黄色 TLC氢化可的松注射液界面处应显亮黄绿色，振摇，应为黄绿色，碱性酒石酸酮反应生成红色沉淀（无色澄明液体）稀释后，在366nm荧光有亮绿色荧光 TLC醋酸可的松滴眼液366nm 碱性酒石酸酮反应生成红色沉淀（乳白色混悬剂）有蓝绿色荧光，稀释后呈亮绿色荧光 TLC醋酸泼尼松龙注射液显黄色，渐变为橘红至红色碱性酒石酸酮反应生成红色沉淀（乳白色混悬剂） TLC醋酸泼尼松片显黄色至棕黄色，在366nm有淡蓝碱性酒石酸酮反应生成红色沉淀色荧光，稀释后荧光不消失。
TLC[H-001，0.84]醋酸地塞米松片负反应碱性酒石酸酮反应生成砖红色沉淀TLC[0.95]（Rf：醋酸地塞米松＞倍他米松）倍他米松片负反应碱性酒石酸酮反应生成少量红色沉淀 TLC地塞米松磷酸钠负反应与异烟肼反应显浅黄色或黄色与钼酸铵反应生成黄色注射液（无色澄明液体） TLC复方地塞米松乳膏负反应与氯代三苯基四氮唑的反应生成红色 TLC（有樟脑的特异芳香）醋酸氟轻松软膏负反应与异烟肼反应显黄色 TLC（Rf：醋酸氟轻松0.87＞曲安奈德0.45）醋酸氟轻松冰片乳膏负反应与异烟肼反应显黄色 TLC（有冰片气味）曲安奈德注射液负反应异烟肼反应显黄色 TLC（乳白色混悬剂）甲睾酮片黄绿色，在366nm有亮绿色荧光，与异烟肼反应显黄色稀释后仍有亮绿色荧光 TLC丙酸睾酮注射液负反应与异烟肼反应显黄色 TLC（油状澄明液体）。
氢化可的松
题目氢化可的松质量标准编码：SM-STP-ZL-1006-00共 2 页制定审核批准制定日期审核日期批准日期颁发部门质量保证部颁发数量2份生效日期分发单位质量保证部、化验室目的：建立一个规范的氢化可的松质量标准。
适用范围：氢化可的松质量标准。
责任人：QA、QC相关检验人员标准依据：《中国兽药典》（2000版一部）正文：本品为11β，17α,21-三羟基孕甾-4-烯-3,20-二酮。
按干燥品计算，含C21H30 O5应为97.0％～103.0 ％。
【性状】本品为白色或几乎白色的结晶性粉末；无臭，初无味，随后有持续的苦味；遇光渐变质。
本品在乙醇或丙酮中略溶，在氯仿中微溶，在乙醚中几乎不溶，在水中不溶。
熔点本品的熔点（附录34页）为212 ～222 ℃，熔融同时分解。
比旋度取本品，精密称定，加无水乙醇溶解并定量稀释制成每1ml 中含10mg的溶液，依法测定（附录36页），比旋度＋162°至＋169°。
吸收系数取本品，精密称定，加无水乙醇溶解并定量稀释制成每1ml 中约含10 μg 的溶液，照分光光度法（附录17页），在242nm 的波长处测定吸收度，吸收系数（）为422～448 。
【鉴别】 (1) 取本品约0.1mg,加乙醇1ml 溶解后，加新制的硫酸苯肼试液8ml ，在70℃加热15分钟，即显黄色。
(2) 取本品约2mg ，加硫酸2ml 使溶解，放置5 分钟，显棕黄色至红色，并显绿色荧光；将此溶液倾入10ml水中，即变成黄色至橙黄色，并微带绿色荧光，同时生成少量絮状沉淀。
(3) 本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致。
【检查】其他甾体取本品，加氯仿－甲醇(9:1) 制成每1ml 中含3.0mg 的溶液，作为供试品溶液；精密量取适量，加氯仿－甲醇(9:1) 稀释制成每1ml 中含60μg 的溶液，作为对照溶液。
照薄层色谱法（附录23页）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶Ｇ薄层板上，以二氯甲烷－乙醚－甲醇－水(385:60:30:2) 为展开剂，展开后，晾干，在105 ℃干燥10分钟，放冷，喷以碱性四氮唑蓝试液，立即检视。
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用异烟肼比色法测定甾体激素药 物含量时，其溶液的环境是
A．强酸性 B．中性 C．强碱性 D．弱碱性 E．以上都不对
可用于氢化可的松鉴别的试剂有 A．氨制硝酸银 B．异烟肼 C．红四氮唑 D．硫酸 E．重氮苯磺酸
可用于甾体激体类药物的测定方法有 A．高效液相色谱法 B．四氮唑盐法 C．紫外分光光度法 D．异烟肼比色法 E．Kober反应比色法
△
△
λmax=465
λmax=515
反应条件
A环是芳环，在C2或C3有含氧取代 D环的C17有含氧取代（－OH,-C=O） C13必须有角甲基
存在的问题
双变色，测定结果重现性不好 杂质干扰（赋型剂、稳定剂有干扰）
解决方法
用该法测定雌激素类药物制剂的
含量时比色测定前采用分离提取 严格控制反应条件 消除背景干扰
按药理作用分类：
肾上腺皮质激素- 氢化可的松 甾体激素
雄性激素及蛋 白同化激素
性激素 孕激素—黄体酮 雌激素-雌二醇
一、结构与性质
肾上腺皮质激素
O HO H OH CH2OH
H O
H
氢化可的松 1.有21个碳原子
2. A环△4-3-酮基, UV、与羰基试剂反应
3.C17位上有a-醇酮基,具还原性
Kober反应是 A. 雌性激素与硫酸乙醇共热呈色 B. 皮质激素与硫酸一乙醇共热呈色 C. 雌性激素与硫酸－乙醇共热呈色， 用水或稀硫酸稀释后加热颜色改变 D. 维生素A与无水三氯化锑的无醇氯 仿溶液呈色 E. 异丙嗪于酸性条件下与钯离子呈色
黄体酮在酸性溶液中可与下 列哪些试剂反应呈色 A. 2,4-二硝基苯肼 B. 三氯化铁 C. 硫酸苯肼 D. 异烟肼 E. 四氮唑盐
C17 –甲酮基
与亚硝基铁氰 化钠反应
黄体酮
CH 3 C O
2
CONHNH 2
N HCl
CH 3
O
C NHNOC
N CONHN
异烟双腙（黄色）
N
含有 甲酮基
具有甲酮基 亚硝基铁氰化纳 或活泼亚甲 间二硝基酚 基的甾体激 芳香醛 素类药物
呈色
亚硝基铁氰化钠是黄体酮专属而灵敏的反应
黄体酮
亚硝基铁氰化纳
知识点回顾
环上双键的表示方法： 用“”表示 ,双键的位置写在的右 上角。双键位置
4
5 4
5 6
5
1 2
1,4
5 4
10
5(10)
5
环上取代基构型表示方法：
＊构型： 与母核连接的取代基,指向环平面的前 面时,为构型.用实线表示“———” ＊构型： 与母核连接的取代基,指向环平面的背 面时,为构型.用虚线表示“”
与硫酸显色反应 显 色 荧光 醋酸可的松 黄或微 无 带橙色 加水稀释 褪色并澄 清
鉴别方法
1、用UV法区分雌二醇和氢化可的松、 黄体酮 规定最大吸收波长
最大吸收波长处的吸收度
某两个吸收波长处吸收度的比值
C CC O
△４-3-酮 约240nm
C CC CC C
苯环 约280nm
2、用异烟肼比色法区分雌二醇和氢 化可的松、黄体酮 原理 ：C3－酮基及某些其他位置上 的酮基能在酸性条件下与羰基试剂 异烟肼缩合，形成黄色的异烟棕， 在一定波长处具有最大吸收
Kober反应适用于哪一药物的 含量测定 A. 黄体酮 B. 雌二醇 C. 甲基睾丸素 D. 甲基炔诺酮 E. 氢化可的松
用四氮唑比色法测定皮质激素 类药物，是利用 C17 –α醇酮基 的何种性质 A．氧化性 B．还原性 C．可加成性 D．酸性 E．碱性
可与重氮苯磺酸作用生成红色 偶氮染料的甾体激素类药物是 A. 醋酸可的松 B. 睾酮 C. 黄体酮 D. 雌二醇 E. 炔诺酮
共同点
与强酸的呈色反应
甾体激素 H2SO4 H3PO4 呈色 HClO4 HCl 类药物
与硫酸呈色操作简便，依 颜色与荧光可区别，反应灵敏， 为各国药典所用。 如中国药典：氢化可的松， 取本品2 mg，加硫酸2 ml溶解， 放置5分钟，显棕黄至红，并显 绿色荧光，将此溶液倾入10ml 水中，即变黄色至红色，同时 有少量絮状沉淀生成。
雄性激素及蛋白同化激素
主要活性基团 △4 – 3–酮 性 质
UV、与羰基 试剂反应
可成酯
C17 – β – 羟基
官能团的反应
1 C17 – α – 醇酮基还原性
A. 呈色反应
肾上腺皮质 激素药物
四氮唑盐
OHˉ
呈色
B. 沉淀反应
肾上 腺皮 质激 素药 物
氨制硝酸银
多伦试剂
Ag↓黑色
碱性
酒石酸铜
斐林试剂
氢化可的松、黄体酮、雌二醇 药物的鉴别与区分
CH3
O HO H OH CH2OH
C O H H H
HO
18
OH
17
H O
H
O
氢化可的松、黄体酮、雌二醇
三种药物同属于甾体激素类药物
C21
11
1
2
19
18 C20 12 17 13 16
C
D
3
A
4
10 9 5
B
6
8 7
14
15
基本结构：环戊烷骈多氢菲
C3－酮基 异烟肼
HCl （缩合）
异烟棕（黄色）
OH
CONHN
N
异烟腙（黄色）
3、区分氢化可的松和黄体酮
亚硝基铁氰化钠是黄体酮专属而灵敏的反应
黄体酮
其他甾体
亚硝基铁氰化纳
蓝紫色
亚硝基铁氰化纳
淡橙色
不显色
Kober反应比色法
1. 原理 雌激素（如雌二醇）与硫酸 乙醇反应呈色
雌激素 黄色 桃红 H SO 乙醇 H O
能与亚硝基铁氰化钠反应生成兰 紫色的药物是 A．雌二醇 B．黄体酮 C．醋酸可的松 D．苯丙酸诺龙 E．以上都不对
各国药典对甾体激素类药物常用 HPLC 或 GC 法 测定其含量，主要原因是 A. 它们没有特征紫外吸收，不能用 紫外分光光度法 B. 不能用滴定分析法进行测定 C. 由于“其它甾体”的存在，色谱法 可消除它们的干扰 D. 色谱法比较简单，精密度好 E. 色谱法准确度优于滴定分析法
Cu2O↓橙红色
2. C3–酮基和C20–酮基
甾酮类激 素药物
羰基试剂
呈色
＃常用的羰基试剂：
2,4-二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼
孕激素
CH3 C O H H H
O
黄体酮
1.母核有ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ1个碳原子
2. A环△4-3-酮基
3.C17位上有甲酮基
孕激素
主要活性基团 △4 – 3–酮 性 质
UV、与羰基试 剂反应
蓝紫色
亚硝基铁氰化纳
其他甾体
淡橙色
不显色
CH 3 C O
O
[Fe CN NO ]
OH
CH
黄体酮
NO CN 5 Fe
4 -
C O
+ 2 H 2O
O
蓝紫色
雌性激素
18
OH
17
HO
雌二醇
1.母核有18个碳原子,C10无角甲基
2. A环为苯环, C3位上有酚羟基
3.C17位上有β-羟基
异烟肼比色法测定甾体激素类药物时， 药物的呈色基团是 A. 酮基 B. 酚羟基 C. 活泼次甲基 D. 炔基 E. 甾体母核
可适用的药物： A. 可的松 B. 雌二醇 C. 两者均可 D. 两者均不可 亚硝酸钠滴定法 D 高效液相色谱法 C 能与羰基试剂缩合 A 可用铁酚试剂比色法测定 B 可用四氮唑比色法测定 A
铁酚试剂比色法
铁－酚试剂替代硫酸－乙醇
Fe 3+的作用：
①促进黄色的呈色速度和强度
②促进黄色变成红色
③加强红色的稳定性
苯酚的作用：
①消除反应过程中产生的荧光 ②加速红色的生成
4、TLC法
主要用于甾体激素类药物制剂的鉴别
方法：对照品法
要求供试品溶液所显主斑点的颜 色和位置与对照品溶液的主斑点相同。
雌激素
主要活性基团 性 质
UV、与重氮苯 A环为3–OH 苯环 磺酸盐反应 C17 –乙炔基 C17 –羟基 与AgNO3反应 可成酯
酚羟基 雌激素 重氮苯磺酸 类药物 红色偶 氮染料
小结
甾体激素 肾上腺皮质 激素 雄性激素 孕激素 雌激素 碳原子 数 21 19 21 18 A环 4-3-酮 4-3-酮 4-3-酮 苯 环 C3- 酚 OH 17位取代基 -醇酮基 -OH -CH3 甲酮基 -OH -C≡CH