乳与乳制品病原微生物检验方法单增李斯特菌的检验
乳粉中单核细胞增生李斯特氏菌能力验证结果与分析
乳粉中单核细胞增生李斯特氏菌能力验证结果与分析樊惠华，侯磊磊，方 莹，柴梅梅（榆林市食品检验检测中心，陕西榆林 719000）摘 要：为了提升食品检验检测机构对食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检验能力，提高微生物实验室外部质量控制水平。
本实验室参加中国检验检疫科学研究院测试评估中心组织的ACAS-PT1108（2021）乳粉中单核细胞增生李斯特氏菌检测能力验证，参考参试指导书、《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》（GB 4789.30—2016）、海博单增李斯特氏菌成套生化鉴定管和MicroScan WalkAway 40 Plus全自动微生物生化鉴定仪。
结果表明，参试样品编号21-T031为单核细胞增生李斯特氏菌，样品编号21-U887未检出单核细胞增生李斯特氏菌，经鉴定为伊氏李斯特氏菌，最终能力验证结果评价为满意，可见本实验室具有成熟的单核细胞增生李斯特氏菌检验能力。
关键词：乳粉；单核细胞增生李斯特氏菌；能力验证Results and Analysis of the Proficiency Testing of ListeriaMonocytogenes in Milk PowderFAN Huihua, HOU Leilei, FANG Ying, CHAI Meimei(Yulin Food Inspection and Testing Center, Yulin 719000, China)Abstract: In order to improve the ability of food inspection and testing institutions to detect Listeria monocytogenes in food and to improve the external quality control level of microbiology laboratory. The laboratory participated in the proficiency testing of Listeria monocytogenes in ACAS-PT1108 (2021) milk powder organized by the Testing and Evaluation Center of the Chinese Academy of Inspection and Quarantine Sciences. Reference was made to the test guidelines, the GB 4789.30—2016, the complete biochemical identification tubes of Listeria monocytogenes in Haibo and the MicroScan WalkAway 40 Plus automatic microbial biochemical identification instrument. The results showed that the sample number 21-T031 was detected as Listeria monocytogenes, and the sample number 21-U887 was not detected as Listeria monocytogenes, which was identified as Listeria.ivanovii. The final proficiency test results were satisfactory. It can be seen that the laboratory has a mature ability to test Listeria monocytogenes.Keywords: milk powder; Listeria monocytogenes; proficiency test李斯特菌属目前包括17种公认的短杆状革兰氏阳性菌，其中单核细胞增生李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌被认为是病原体[1]。
单增李斯特氏菌及其检测方法
单增李斯特氏菌及其检测方法一、单增李斯特氏菌单增李斯特氏菌，学名Listeria monocytogenes，一种革兰氏阳性菌，是李斯特菌属。
李斯特菌属(Listeria)共分为2个群，7个种：第一群包括单核细胞增生性李斯特菌(L monocytogenes，LM)(亦称产单核细胞李斯特菌)、伊氏李斯特菌(L ivanovii)(亦称绵羊李斯特菌)、英诺克李斯特菌(L innocua)(亦称无害李斯特菌)、韦氏李斯特菌(L welshimei)、塞氏李斯特菌(L seeligeri)，第二群包括格氏李斯特菌(L grayi)和莫氏李斯特菌(L mulTayi)。
其中，单增李斯特菌是唯一能引起疾病的人畜共患病的病原菌。
它能引起人、畜的李氏特菌病，感染后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多。
二、单增李斯特氏菌检测方法1.细菌培养法该菌营养要求不高，兼性厌氧，最适在含有CO2的微需氧环境中生长，生长温度范围-1.5℃-45℃，最适温度为30℃-37℃，能在普通冰箱冷藏室生长，是一种典型的耐冷性细菌，同时还具有耐盐性。
LM在普通琼脂平板上呈细小直径约0.2-0.4μm、半透明露水样菌落。
在血琼脂平板上有β溶血环。
在显色培养基上呈蓝绿色。
2.生化鉴定法该菌主要生化特性如下：①触酶阳性；②氧化酶阴性；③发酵多种糖类；④产酸不产气；⑤不发酵木糖、甘露醇、肌醇、阿拉伯糖、侧金盏花醇、棉子糖、卫矛醇和纤维二塘；⑥不利用枸橼酸盐，40%胆汁不溶解；⑦吲哚、硫化氢、尿素、明胶液化、硝酸盐还原、赖氨酸、鸟氨酸均阴性；⑧VP、甲基红试验和精氨酸水解试验阳性；⑨对碱和盐抵抗力强，60-70℃经5-20分钟可杀死，70%酒精5min、2.5%石碳酸、2.5%氢氧化钠、2.5%福尔马林20min可杀死此菌。
⑩该菌对青霉素、氨苄青霉素、四环素、磺胺均敏感。
3.血清凝集法根据菌体抗原和鞭毛抗原，LM分为16个血清型：1／2a、1／2b、1／2c、3a、3b、3c、4a、4ab、4b、4c、4d、4e、5、6a、6b、7。
乳与乳制品检验方法汇编
乳与乳制品检验方法汇编1.物理性质检验：-外观检验：观察乳与乳制品的外观，如颜色、气味、质地等，以判断是否符合标准要求。
-pH值测定：通过测定乳与乳制品中的酸碱度，了解其酸度和稳定性。
-脂肪含量测定：采用脂肪测定仪器，测定乳和乳制品中的脂肪含量，以评估其营养价值。
2.化学成分检验：- 蛋白质含量测定：使用含氮柱的色谱仪或Kjeldahl法，测定乳制品中的蛋白质含量。
-脂肪酸组成分析：使用气相色谱仪，分析乳与乳制品中脂肪酸的种类和含量。
-糖含量测定：采用光度计、高效液相色谱仪等方法，测定乳与乳制品中的糖含量。
3.微生物检验：-总菌落计数：采用平板计数法，将样品接种在培养基上，通过菌落的形成计数，评估样品的微生物质量。
-大肠菌群检验：采用MPN法、膜过滤法等，检测样品中的大肠菌群数量，判断是否符合卫生标准。
-酸奶发酵能力检验：将酸奶样品接种在特定的培养基中，观察培养过程中是否产生酸味和凝结物。
4.成分添加物检验：-防腐剂检测：采用色谱仪等仪器，分析乳与乳制品中的防腐剂种类和含量，判断是否符合标准。
-添加剂检测：例如甜味剂、食用色素等，使用色谱仪等仪器，测定其含量，确保在安全范围内使用。
5.食品安全检验：-重金属检测：使用原子吸收光谱仪等仪器，测定乳与乳制品中的重金属含量，以评估样品的安全性。
-农药残留检测：采用气相色谱仪、液相色谱仪等仪器，测定样品中的农药残留量。
-食品添加剂检测：例如苯甲酸钠、亚硝酸盐等，采用色谱仪等仪器，测定其含量，确保在安全使用范围内。
综上所述，乳与乳制品的检验方法包括物理性质检验、化学成分检验、微生物检验、成分添加物检验以及食品安全检验等多个方面的内容。
通过这些检验方法的应用，可以保证乳与乳制品的安全和质量，确保消费者的健康。
而为了确保检验的准确性和公正性，相关的检验机构和实验室需要制定相应的检验标准和操作规范，并进行检验结果的合格判定。
乳与乳制品微生物检验方法
乳与乳制品微生物检验方法1.菌群总数测定方法：菌群总数测定方法是衡量乳制品中微生物质量的基础方法之一、目前常用的菌群总数测定方法有总计数平板法、液体培养法和荧光素酶法。
总计数平板法是将样品分别接种在琼脂平板上，通过平板上菌落的形成来计数。
液体培养法是将样品接种在适当的培养基中，通过测量培养液的浑浊度或菌液悬浮液中的细菌数量来计数。
荧光素酶法是通过加入荧光素酶底物，菌落会释放出荧光，通过测量荧光强度来计数。
这些方法可以快速、准确地测定样品中菌落总数，从而确定乳制品的微生物质量。
2.根据德国奶酪乳制品行业协会VDF指南的要求，共有500多种病原菌可以检测，包括沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及其他致病菌。
这些方法多是PCR技术、荧光定量PCR技术等。
以沙门氏菌检测为例，主要有传统培养法、分子生物学培养法、酶免的葡萄糖酸盐液体培养基、黄金标准法等多种方法。
其中，PCR技术可以通过扩增沙门氏菌的DNA序列，快速、准确地检测样品中的沙门氏菌。
3.酸奶产品中乳酸菌数量的测定：乳酸菌是酸奶中的一类重要菌群，其数量多少直接影响酸奶的质量。
常用的测定乳酸菌数量的方法有直接显微法、涂布法、测定菌落数量法等。
直接显微法是将样品显微镜下直接观察和计数乳酸菌的数量。
涂布法是将样品涂于适当的培养基上，通过菌落的形成来计数。
菌落数量法是将样品稀释后均匀涂布在琼脂平板上，通过菌落的形成来计数。
这些方法可以可靠地测定乳酸菌的数量，从而评估酸奶的质量。
4.冷藏和储存条件检验方法：乳制品的储存条件对其微生物质量有着至关重要的影响。
常用的储存条件检验方法包括温度检测、湿度检测、pH值检测等。
温度检测可以通过温度计或温度记录器来测量乳制品的储存温度，确保其符合相关标准。
湿度、pH值等的检测可以通过仪器设备进行测量和监控。
这些方法能够及时发现和纠正乳制品储存条件的问题，保证乳制品的微生物质量稳定。
总结起来，乳与乳制品微生物检验方法包括菌群总数测定方法、病原菌检测方法、乳酸菌数量测定方法和储存条件检验方法等。
单核细胞增生李斯特菌检验
血清学分型:
Lm是根据O抗原和H抗原的差异进行血清 学分型.虽然Lm有16种血清型,1/2a、1/2b 、1/2c、3a、3b、3c、4a、4ab、4b、4c、 4d、4e、5、6a、6b和7,但只有3种血清型 <1/2a、1/2b、4b>可引起疾病.从食品和患 者中分离的菌株95％以上是1/2a,1/2b,1/2c 和4b等血清型,而3a、3b、3c、4a、4c、4e 、4d和7等血清型在食品中非常少见,也没 有引起李斯特菌病的报道.
溶血反应 ＋ － ＋ － ＋ －
协同溶血
葡萄糖
麦芽糖
MR-VP
甘露醇
鼠李糖
木糖
七叶苷
＋
＋
＋
＋/＋
－
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V
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－
V
－
＋
动力试验
将TSA-YE平板上的疑似菌落穿刺接种到SIM培 养基中,于30℃培养24h-48h,李斯特菌有动力, 呈伞状生长.
PCR检测方法：〔1取1ml被检样李斯特氏 菌增菌肉汤用于提取DNA的,模板DNA的 制备, 根据试剂盒说明书进行；〔2PCR反 应体系：20μl .
H2O<二馏灭菌水>12.8μl,
10×buffer2.0μl,
Mg2+<25mol/l> 2.0μl,4×dNTP<10mmol/ml> 1.6μl,Primer<30pmol/μl>各0.25μl,
单增李斯特菌的检验方法
单增李斯特菌的检验方法
一.增菌：
1.EB肉汤
2.LB肉汤（根据我的实验结果和请教其他老师的说法，LB增菌
效果优于EB）
LB分为LB1和LB2，两者基础培养基相同，区别在于添加辅助试剂丫啶黄、萘啶酮酸的量（基础培养基--杭州天河生物试剂公司；丫、萘—上海疾控中心。
上海的辅助试剂已按一定浓度配置成溶液，使用起来比较方便）
25g样品加入到225mlLB1增菌液中，30℃培养24h，吸0.1mlLB1增菌液到LB2增菌液中，30℃培养24h。
二.选择分离
挑一环LB2增菌液划线接种到科玛嘉选择性培养基上，37℃培养24h，观察现象，可疑菌落在此培养基上为兰色，周围有白晕的菌落。
（国标上使用的选择性培养基是MMA，但是其选择性不强，科玛嘉选择性培养基是法国制造，选择性比MMA强的多，而且现象明显，许多发达国家使用。
此培养基是国标编委白萍女士向我推荐的）三.生化实验
挑可疑菌落穿刺接种到SIM，25℃培养3---5d，观察伞状生长情况、TSI（三糖铁）斜面30℃培养24h—48h，观察，单增李斯特菌在TSI上应该是底面、斜面均产酸，不产H2S，不产气的培养物.
这是单增李斯特菌落在SIM动力培养基上的伞状情形再挑取TSI上培养物接种其他生化管。
七叶苷鼠李糖木糖甘露醇尿
素
硝
酸
盐
还
原
VP MR H2O2
++----+++。
单增李斯特氏菌能力验证结果与分析
单增李斯特氏菌能力验证结果与分析作者：白雯静王艳炜王海峰来源：《食品界》2022年第10期引言单核细胞增生李斯特氏菌是普遍存在于自然环境中的革兰氏阳性、嗜冷、兼性厌氧细菌。
同时，也是一种食源性的人畜共患病的病原菌，欧美国家曾多次暴发由于食用了受单增李斯特氏菌污染的肉制品、奶制品、蔬菜及水果等而引发的严重的食物中毒事件。
在《GB 29921-2021 食品安全国家标准食品中致病菌限量》中，对乳制品、肉制品（包括熟肉制品和即食生肉制品）、水产制品、即食果蔬制品、冷冻饮品均有五份样品中均不得检出单增李斯特氏菌（n=5，c=0，m=0）的规定;同样，在2022年3月7日实施的《GB 31607-2021 食品安全国家标准散装即食食品中致病菌限量》中“部分或未经热处理散装即食食品”：单核细胞增生李斯特氏菌限量为0/25g（mL）。
由此类标准可见，国家对于食品中“单核细胞增生李斯特氏菌”的管理是十分严格的。
目前，国内单核增生李斯特氏菌的检验方法主要有：分子生物学检测技术（结合等温扩增技术、结合聚合酶链式反应技术）、免疫学检测技术、生物传感器检测技术、光谱学检测技术、其它检测技术（除了基于核酸檢测、特有蛋白检测之外，还可以与色谱、核磁等多项技术技术相结合对单增李斯特氏菌进行检测）。
《GB 4789. 30-2016食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌》与旧版标准相比较，主要增加了“第二法单核细胞增生李斯特氏菌平板计数法”和“第三法单核细胞增生李斯特氏菌MPN计数法”。
目前，对单核细胞增生李斯特氏菌的检验方法是比较成熟的。
而且，随着检验检测技术日新月异的发展，使得较短时间内完成精准检测成为可能。
另外，对于实验室而言，质量控制具有十分重要的意义。
质量控制的工作包括很多方面。
比如，实验室内部控制和实验室间控制等等。
实验室内部控制工作可通过多种工作方式来展开。
比如，内部质量监督以及通过购买质控样品开展相关检验检测工作等等。
单增李斯特菌的检验方法
单增李斯特菌的检验方法
一. 增菌：
1. EB肉汤
2. LB 肉汤（根据我的实验结果和请教其他老师的说法，LB 增菌效
果优于EB）
LB分为LB和LR,两者基础培养基相同，区别在于添加辅助试剂丫啶黄、萘啶酮酸的量（基础培养基-- 杭州天河生物试剂公司；丫、萘—上海疾控中心。
上海的辅助试剂已按一定浓度配置成溶液, 使用起来比较方便）
25g样品加入到225mlLB增菌液中，30C培养24h，吸O.lmlLB i
增菌液到LR增菌液中，30C培养24h。
二.选择分离
挑一环LB2增菌液划线接种到科玛嘉选择性培养基上，37 C培养24h,观察现象，可疑菌落在此培养基上为兰色，周围有白晕的菌落。
（国标上使用的选择性培养基是MM,A 但是其选择性不强,科玛嘉选择性培养基是法国制造，选择性比MMA强的多，而且现象明显，许多发达国家使用。
此培养基是国标编委白萍女士向我推荐的）
三.生化实验
挑可疑菌落穿刺接种到SIM, 25C培养3---5d ,观察伞状生长情况、TSI （三糖铁）斜面30C培养24h—48h,观察，单增李斯特菌在TSI上应该是底面、斜面均产酸，不产H2S不产气的培养物•
这是单增李斯特菌落在SIM动力培养基上的伞状情形再挑取TSI上培养物接种其他生化管。
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乳与乳制品病原微生物检验方法单增李斯特菌的检验
YLNB 4.6 1. 仪器及器材
1.1 恒温培养箱：30±1℃、24±1℃
1.2 恒温水浴锅：46±1℃。
1.3 显微镜：10×～100×
1.4 离心机：4000 r/min
1.5 均质器或灭菌乳钵。
1.6 灭菌平皿：直径90mm。
1.7 灭菌试管： 16mm×160mm
1.8 灭菌吸管：1mL（具有0.01mL刻度）、10mL（具有0.1mL 刻度）。
1.9 冰箱：0－4℃
1.10 锥形瓶：100mL、500mL。
1.11 架盘药物天平：0g～500g,精确至0.5g。
1.12 离心管：30mm×300mm。
1.13 灭菌注射器：1
1.14 单核细胞增生李斯特氏菌标准株。
1.15 马红球菌。
1.16 小白鼠：16g～18g。
2. 培养基和试剂
2.1含0.6%酵母浸膏的胰酪大豆肉汤(TSB－YE)：见附录
A1。
2.2含0.6%酵母浸膏的胰酪大豆琼脂(TSA－YE)：见附录
A2。
2.3 EB增菌液：见附录A3。
2.4 LB增菌液(LB1，LB2)：见附录A4。
2.5 三糖铁(TSI)琼脂：GB/T4789.28中4.26，4.27。
2.6 SIM动力培养基：见附录A5。
2.7 血琼脂：GB/T4789.28中4.6。
2.8 改良的Mc Bride(MMA)琼脂：见附录A5。
2.9 硝酸盐培养基：GB/T 4789.28中
3.17。
2.10 缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)：GB/T4789.28中
3.4。
2.11 糖发酵培养基：GB/T4789.28中
3.2。
2.12 过氧化氢酶试验：GB/T4789.28中4.38。
2.13 盐酸吖啶黄(AcriflavineHCl)(Sigma)。
2.14 萘啶酮酸钠盐(Naladixicacid)(Sigma)。
3. 检验程序
单核细胞增生李斯特氏菌检验程序如下：
检样25g(ml)
EB增菌液225ml LB1增菌液225ml
30
℃,48h 30℃,24h
3
0℃,24h
30℃,24
～48h
25℃ 2d ～5d(伞状)
30℃,24h
30℃,24h
LB2增菌液225ml
选择性培养基(MMA)
SIM 动力培养基 TSI 琼脂
TSA-YE 培养基
显微镜下观察
运动
硝酸盐还原实验 过氧化氢酶实验 甘露醇 木醇 鼠李糖 七叶苷 溶血实验
协同溶血实验 小鼠致病力实验 革
兰
氏染
色 MR-VP 实验
4. 方法
4.1 样品的收集及处理
无菌取样品25g(mL)放灭菌均质器中加225mLEB和LB增菌液中，充分搅拌成均质。
如不能及时检验，可暂存4℃冰箱。
4.2 增菌培养
EB增菌液放30±1℃培养48h，LB1增菌液225mL放30±1℃，培养24h，吸取0.1mL，加入10mL LB2增菌液中二次增菌。
4.3 分离培养
将EB增菌液和LB2二次增菌液分离于选择培养基MMA琼脂平板上，培养30±1℃ 48h，挑选可疑菌落，用白炽灯45°角斜光照射平板，李斯特氏菌的菌落为灰蓝或蓝色，小的圆形的菌落。
4.4 选5个以上的上述可疑菌落接种三糖铁(TSI)琼脂和SIM 动力培养基，培养于25±1℃，观察是否有动力，且成伞状或月芽状生长。
一般观察2～7d，阳性者可做下一步鉴定。
4.5 纯培养
将上述有动力、形成伞状者并在三糖铁琼脂培基上层、下层的产酸而不产硫化氢的可疑培养物接种于胰酪胨大豆琼脂培养基(TSA－YE)上，做纯培养供做以下鉴定。
4.6 染色镜检
将上述可疑纯培养物做革兰氏染色并做湿片检查；李斯特氏菌为革兰氏阳性小杆菌，大小为0.4～0.5μm×0.5～
2.0μm；用生理盐水制成菌悬液，在油镜或相差显微镜下观
察，该菌出现轻微旋转或翻滚样的运动。
4.7 生化特性
将上述可疑菌做进一步的生化试验，单核细胞增生李斯特氏菌的主要生化特性及有关菌的区别见表1。
表1单核细胞增生李斯特氏菌生化性状与有关菌的区别
菌种溶血反应硝酸盐还原尿素酶 MR-VP 甘露醇
鼠李糖木糖七叶苷
单核细胞增生李斯特氏菌
+ - - +/+ - + - +
绵羊李斯特氏菌+ - - +/+ -
- - +
英诺克李斯特氏菌 - - - +/+ - V - +
威尔斯李斯特氏菌 - - - +/+ - V + +
西尔李斯特氏菌 + - - +/+ -
- + +
格式李斯特氏菌 - - - +/+ +
- - +
默氏李斯特氏菌 - + - +/+ +
V - +
注：V反应不定；+阳性；-阴性。
4.8 对小鼠的致病力试验
将符合上述特性的纯培养物接种于TSB－YE中，在30℃培
养24h，离心，浓缩，使浓缩液每毫升1010/mL个细菌，取0.5mL
浓缩菌液注射小白鼠腹腔，3～5只，观察小鼠死亡情况。
致病
株于2～5d内死亡。
试验时可用已知菌作对照。
单核细胞增生
李斯特氏菌、绵羊李斯特氏菌对小鼠有致病性。
4.9 协同溶血试验(cAMP)
在血平板上平行接种金黄色葡萄球菌和马红球菌
(R.equi)，在它们中间垂直接种可疑李斯特氏菌，但不要触及
它们，在30℃培养24～48h，检查平板中垂直接种点对溶血环
的影响。
靠近金黄色葡萄球菌接种点的单核细胞增生李斯特菌
的溶血增强，西尔李斯特氏菌的溶血也增强，而绵羊李斯特氏
菌在马红球菌附近的溶血增强，有助于鉴别。
附录A
培养基
(补充件)
A1 含0.6%酵母漫膏的胰酪胨大豆肉汤(TSB－YE)
A1.1 成分
胰胨17g
多价胨3g
酵母膏6g
氯化钠5g
磷酸氢二钾 2.5g
葡萄糖 2.5g
蒸馏水1000mL
A1.2 制法
将上述各成分加热搅拌溶解，调至pH7.2～7.4，分装，121℃灭菌15min，备用。
A2 含0.6%酵母膏胰酪胨大豆琼脂(TSA－YE)
A2.1 成分
胰胨17g
多价胨3g
酵母膏6g
氯化钠5g
磷酸氢二钾 2.5g
葡萄糖 2.5g
琼脂15g
蒸馏水1000mL
A2.2 制法
将上述各成分加热搅拌溶解，调pH至7.2～7.4，分装，121℃高压灭菌,备用。
A3 EB增菌液
A3.1 成分
胰胨17g
多价胨3g
酵母膏6g
氯化钠5g
磷酸氢二钾 2.5g
葡萄糖 2.5g
蒸馏水1000mL
盐酸吖啶黄15mg/L
萘啶酮酸40mg/L
A3.2 制法
除吖啶黄和萘啶酮酸外，其余成分加热混合调pH至7.2～7.4，121℃15min高压灭菌。
使用前加吖啶黄溶液15mg/L和萘啶酮酸溶液40mg/L，此两种成分要无菌配制或过滤除菌。
A4 李氏增菌肉汤(LB1，LB2)
A4.1 成分
胰胨5g
多价胨5g
酵母膏5g
氯化钠5g
磷酸二氢钾 1.35g
磷酸氢二钠12g
七叶苷1g
蒸馏水1000mL
A4.2 制法
将上述成分加热溶解，调pH至7.2～7.4，分装，121℃15min 高压灭菌。
A4.2.1 李氏I液(LB1)225mL中加入：
1%萘啶酮酸(用0.05mol/L氢氧化钠溶液配制) 0.45mL
1%吖啶黄(用灭菌蒸馏水配制) 0.27mL
A4.2.2 李氏Ⅱ液(LB2)200mL中加入：
1%萘啶酮酸 0.40mL
1%吖啶黄 0.50mL
无菌分装于10mL大试管中。
A5 改良的Mc Bride琼脂(MMA)
A5.1 成分
胰胨5g
多价胨5g
牛肉膏3g
葡萄糖1g
氯化钠5g
磷酸氢二钠1g
苯乙醇 2.5mL
无水甘氨酸10g
氯化锂0.5g
琼脂15g
蒸馏水1000mL
A5.2 制法
将上述成分加热搅拌混匀，调pH至7.2～7.4，分装，121℃15min高压灭菌，备用。
A6 SIM动力培养基
A6.1 成分
胰胨20g
多价胨6g
硫酸铁铵0.2g
硫代硫酸钠0.2g
琼脂 3.5g
蒸馏水1000mL
A6.2 制法
将上述各成分加热混匀，调pH7.2，分装小试管，高压灭菌121℃ 15min。