2018届 二轮 酶的应用和DNA的提取与鉴定 专题卷(江苏专用)
2018年高考江苏卷生物(含答案)
绝密★启用前2018年普通高等学校招生全国统一考试（江苏卷)一、单项选择题：本部分包括20题，每题2分,共计40分.每题只有一个选项最符合题意.1．下列关于糖类的叙述，正确的是A．单糖可以被进一步水解为更简单的化合物B．构成淀粉、糖原和纤维素的单体均为果糖C．细胞识别与糖蛋白中蛋白质有关,与糖链无关D．糖类是大多数植物体干重中含量最多的化合物2．脂质与人体健康息息相关，下列叙述错误的是A．分布在内脏器官周围的脂肪具有缓冲作用B．蛇毒中的磷脂酶因水解红细胞膜蛋白而导致溶血C．摄入过多的反式脂肪酸会增加动脉硬化的风险D．胆固醇既是细胞膜的重要组分，又参与血液中脂质的运输3．下列关于DNA和RNA的叙述，正确的是A．原核细胞内DNA的合成都需要DNA片段作为引物B．真核细胞内DNA和RNA的合成都在细胞核内完成C．肺炎双球菌转化实验证实了细胞内的DNA和RNA都是遗传物质D．原核细胞和真核细胞中基因表达出蛋白质都需要DNA和RNA的参与4．下列关于生物进化的叙述,正确的是A．群体中近亲繁殖可提高纯合体的比例B．有害突变不能成为生物进化的原材料C．某种生物产生新基因并稳定遗传后，则形成了新物种D．若没有其他因素影响，一个随机交配小群体的基因频率在各代保持不变5．哺乳动物的催产素具有催产和排乳的作用，加压素具有升高血压和减少排尿的作用。
两者结构简式如下图，各氨基酸残基用3个字母缩写表示。
下列叙述正确的是A．两种激素都是由八肽环和三肽侧链构成的多肽类化合物B．氨基酸之间脱水缩合形成的水分子中氢全部来自氨基C．肽链中游离氨基的数目与参与构成肽链的氨基酸种类无关D．两种激素间因2个氨基酸种类不同导致生理功能不同6．一对相对性状的遗传实验中，会导致子二代不符合3∶1性状分离比的情况是A．显性基因相对于隐性基因为完全显性B．子一代产生的雌配子中2种类型配子数目相等,雄配子中也相等C．子一代产生的雄配子中2种类型配子活力有差异，雌配子无差异D．统计时子二代3种基因型个体的存活率相等7．如图为一种植物扦插枝条经不同浓度IAA浸泡30 min后的生根结果（新生根粗细相近），对照组为不加IAA 的清水.下列叙述正确的是A．对照组生根数量少是因为枝条中没有IAAB．四组实验中，300 mg/LIAA诱导茎细胞分化出根原基最有效C．100与300 mg/LIAA处理获得的根生物量相近D．本实验结果体现了IAA对根生长作用的两重性8．花药离体培养是重要的育种手段.下图是某二倍体植物花药育种过程的示意图，下列叙述正确的是A．为了防止微生物污染，过程①所用的花药需在70％乙醇中浸泡30 min B．过程②的培养基中需添加较高浓度的细胞分裂素以利于根的分化C．过程③逐步分化的植株中可筛选获得纯合的二倍体D．过程④应将炼苗后的植株移栽到含有蔗糖和多种植物激素的基质上9．下列关于特异性免疫及其相关应用的叙述，正确的是A．效应T细胞都是在胸腺中由造血干细胞分裂分化产生B．细胞免疫和体液免疫的二次免疫应答都与记忆细胞有关C．健康人的T细胞直接移植给肿瘤患者可提高患者的免疫力D．大量制备一种单克隆抗体时需要大量的B细胞和骨髓瘤细胞10．下列关于采用胚胎工程技术实现某良种肉用牛快速繁殖的叙述，正确的是A．采取激素注射等方法对良种母牛作超数排卵处理B．体外培养发育到原肠胚期的胚胎即可进行移植C．使用免疫抑制剂以避免代孕牛对植入胚胎的排斥反应D．利用胚胎分割技术，同卵多胎较同卵双胎成功率更高11．如图是某神经纤维动作电位的模式图，下列叙述正确的是A．K+的大量内流是神经纤维形成静息电位的主要原因B．bc段Na+大量内流,需要载体蛋白的协助，并消耗能量C．cd段Na+通道多处于关闭状态,K+通道多处于开放状态D．动作电位大小随有效刺激的增强而不断加大12．通过羊膜穿刺术等对胎儿细胞进行检查,是产前诊断的有效方法.下列情形一般不需要进行细胞检查的是A．孕妇妊娠初期因细菌感染引起发热B．夫妇中有核型异常者C．夫妇中有先天性代谢异常者D．夫妇中有明显先天性肢体畸形者13．下图是某处沙丘发生自然演替过程中的三个阶段，下列叙述正确的是A．从形成沙丘开始发生的演替是次生演替B．阶段Ⅰ的沙丘上草本植物占优势,群落尚未形成垂直结构C．阶段Ⅰ与阶段Ⅱ的沙丘上生长的植物种类完全不同D．阶段Ⅲ沙丘上的群落对外界干扰的抵抗力稳定性最强14．下列关于酵母细胞固定化实验的叙述,正确的是A．用温水使海藻酸钠迅速溶解，待其冷却到室温后用于包埋细胞B．进行包埋时，用于悬浮细胞的CaCl2溶液浓度要适宜C．注射器(或滴管)出口应尽量贴近液面以保证凝胶珠成为球状D．包埋酵母细胞的凝胶珠为淡黄色半透明状，并具有一定的弹性15．下列过程不涉及基因突变的是A．经紫外线照射后，获得红色素产量更高的红酵母B．运用CRISPR/Cas9技术替换某个基因中的特定碱基C．黄瓜开花阶段用2，4—D诱导产生更多雌花，提高产量D．香烟中的苯并芘使抑癌基因中的碱基发生替换，增加患癌风险16．某高校采用如图所示的发酵罐进行葡萄酒主发酵过程的研究，下列叙述错误的是A．夏季生产果酒时,常需对罐体进行降温处理B．乙醇为挥发性物质，故发酵过程中空气的进气量不宜太大C．正常发酵过程中罐内的压力不会低于大气压D．可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵17．关于还原糖、蛋白质和DNA的鉴定实验，下列叙述正确的是A．在甘蔗茎的组织样液中加入双缩脲试剂，温水浴后液体由蓝色变成砖红色B．在大豆种子匀浆液中加入斐林试剂，液体由蓝色变成紫色C．提取DNA时，在切碎的洋葱中加入适量洗涤剂和食盐，充分研磨，过滤并弃去滤液D．将DNA粗提物溶解在2 mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂，沸水浴后液体由无色变成蓝色18．如图为某一植物在不同实验条件下测得的净光合速率，下列假设条件中能使图中结果成立的是A．横坐标是CO2浓度,甲表示较高温度，乙表示较低温度B．横坐标是温度，甲表示较高CO2浓度，乙表示较低CO2浓度C．横坐标是光波长,甲表示较高温度,乙表示较低温度D．横坐标是光照强度,甲表示较高CO2浓度，乙表示较低CO2浓度19．由于农田的存在，某种松鼠被分隔在若干森林斑块中。
高三生物二轮复习专题五DNA的粗提取与鉴定
③测定并计算
取DNA稀释液100µL至比色杯中，测定260nm处 的光吸收值
DNA含量（g/mL）＝50×(260nm的读数)×稀释倍数
课堂小结
多 聚
PCR原理
DNA的复制需要酶、原料、能量、引物 DNA的变性和复性受温度影响
可以通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质。 第二次过滤，除
去蛋白质沉淀
在滤液中加入NaCl，使NaCl溶液浓度为2mol/L，过滤除去不溶
的杂质，再加入蒸馏水，调节NaCl溶液浓度为0.14mol/L，析
出DNA，过滤除去溶液中的杂质，再用2mol/L的NaCl溶液溶
解DNA。 第三次过滤，除去蛋白质滤液
二、 PCR实验操作
（一）设备及用具
1、PCR仪 实质上是能够自动调控温度的仪器
2、微量离心管 一种薄壁塑料管，总容积为0.5mL
3、微量移液器 用于定量转移PCR配方中的液体，其 上的一次性吸液枪头用一次更换一次 4、离心机 一种通过高速转动产生离心现象， 能将固体与液体分开的设备。
（二）操作步骤：
DNA不溶于酒精，但细胞质中某些蛋白质溶于酒精。
专题5课题2
《多聚酶链式反应扩增DNA片断》
基础知识
1.元素组成： C、H、O、N、P
2.基本单位: 脱氧核苷酸
脱氧核 苷酸
磷酸 脱氧核苷
脱氧核糖
含氮 嘌呤 碱基
嘧啶
腺嘌呤（A） 鸟嘌呤（G） 胞嘧啶（C）
胸腺嘧啶（T）
3.脱氧核苷酸链的形成
脱氧核苷酸链结构简图
3、原理：当不同的蛋白质通过凝胶时，相 对（相对分子质量较小）的蛋白质容易进入 凝胶内部的通道，路程（ 较长 ），移动速 度（ 较慢），而（相对分子质量较大）的蛋 白质无法进入凝胶内部的通道，只能在 （凝胶外部）移动，路程（较短），移动速 度（较快），相对分子质量不同的蛋白质因 此得以分离。
五年2018-2022高考生物真题按知识点分类汇编89-生物技术工程-酶的研究及应用(含解析)
五年2018-2022高考生物真题按知识点分类汇编89-生物技术工程-酶的研究及应用（含解析）一、单选题1．（2022·湖南·高考真题）洗涤剂中的碱性蛋白酶受到其他成分的影响而改变构象，部分解折叠后可被正常碱性蛋白酶特异性识别并降解（自溶）失活。
此外，加热也能使碱性蛋白酶失活，如图所示。
下列叙述错误的是（）A．碱性蛋白酶在一定条件下可发生自溶失活B．加热导致碱性蛋白酶构象改变是不可逆的C．添加酶稳定剂可提高加碱性蛋白酶洗涤剂的去污效果D．添加碱性蛋白酶可降低洗涤剂使用量，减少环境污染2．（2022·浙江·统考高考真题）用果胶酶处理草莓，可以得到比较澄清的草莓汁；而利用稀盐酸处理草莓可以制得糊状的草莓酱。
果胶酶和盐酸催化果胶水解的不同点在于（）A．两者催化果胶水解得到的产物片段长度不同B．两者催化果胶水解得到的单糖不同C．两者催化果胶主链水解断裂的化学键不同D．酶催化需要最适温度，盐酸水解果胶不需要最适温度3．（2020·江苏·统考高考真题）甲、乙两个实验小组分别进行了“酵母细胞固定化技术”的实验，结果如下图所示。
出现乙组实验结果的原因可能为（）A．CaCl2溶液浓度过高B．海藻酸钠溶液浓度过高C．注射器滴加速度过慢D．滴加时注射器出口浸入到CaCl2溶液4．（2020·浙江·统考高考真题）下列关于淀粉酶的叙述，错误的是A．植物、动物和微生物能产生淀粉酶B．固相淀粉酶比水溶液中的淀粉酶稳定性更高C．枯草杆菌α-淀粉酶的最适温度比唾液淀粉酶的高D．淀粉被淀粉酶水解形成的糊精遇碘-碘化钾溶液不显色5．（2018·江苏·统考高考真题）下列关于酵母细胞固定化实验的叙述，正确的是A．用温水使海藻酸钠迅速溶解，待其冷却到室温后用于包埋细胞B．进行包埋时，用于悬浮细胞的CaCl2溶液浓度要适宜C．注射器(或滴管)出口应尽量贴近液面以保证凝胶珠成为球状D．包埋酵母细胞的凝胶珠为淡黄色半透明状，并具有一定的弹性6．（2019·江苏·统考高考真题）下列关于加酶洗涤剂的叙述，错误．．的是A．加酶洗衣粉中一般都含有酸性脂肪酶B．用加酶洗涤剂能减少洗涤时间并节约用水C．含纤维素酶洗涤剂可以洗涤印花棉织物D．加酶洗衣粉中的蛋白酶是相对耐高温的二、多选题7．（2018·江苏·统考高考真题）下列关于加酶洗衣粉的叙述，错误的是A．洗衣粉中添加的酶通常是由微生物发酵生产而来B．洗衣粉中的蛋白酶通常会将添加的其他酶迅速分解C．在50 ℃热水中用加酶洗衣粉洗衣时，其中的酶会迅速失活D．加酶洗衣粉受潮后重新晾干保存，不会影响其中酶的活性三、综合题8．（2022·湖南·高考真题）黄酒源于中国，与啤酒、葡萄酒并称世界三大发酵酒。
专题21(押江苏卷非选择题) 基因工程(解析版)
专题21（押江苏卷非选择题）基因工程从近几年的新课标卷的考查知识点来看，第23题主要考查基因工程知识。
基因工程的流程和应用是高考的必考点，且常考常新，预计2022年高考也不例外，依然会对其进行考查，有可能与新的科研实事结合，综合考查基因工程的流程和应用，比如新冠病毒疫苗的研发，还可能与细胞工程、胚胎工程等综合起来考查。
能准确识记课本内容，会正确分析图形，并从题干中摘取关键信息，规范答题。
能够结合背景材料分析问题、解决问题。
从题图中提取有效信息并结合这些信息，运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确结论。
把握知识间的内在联系，要求能运用所学知识解决生活中的一些实际问题，或运用所学知识解释生活中的一些现象1．（2021江苏高考真题）某小组为研究真菌基因m的功能，构建了融合表达蛋白M和tag 标签的质粒，请结合实验流程回答下列问题：(1)目的基因的扩增①提取真菌细胞______，经逆转录获得cDNA，进一步获得基因m片段。
②为了获得融合tag标签的蛋白M，设计引物P2时，不能包含基因m终止密码子的编码序列，否则将导致______。
③热启动PCR可提高扩增效率，方法之一是：先将除TaqDNA聚合酶（Taq酶）以外的各成分混合后，加热到80℃以上再混入酶，然后直接从94℃开始PCR扩增，下列叙述正确的有______A．Taq酶最适催化温度范围为50～60℃B．与常规PCR相比，热启动PCR可减少反应起始时引物错配形成的产物C．两条子链的合成一定都是从5′端向3′端延伸D．PCR产物DNA碱基序列的特异性体现了Taq酶的特异性(2)重组质粒的构建①将Sma I切开的载体A与添加同源序列的m混合，用特定DNA酶处理形成黏性末端，然后降温以促进______，形成A-m结合体。
将A-m结合体导入大肠杆菌，利用大肠杆菌中的DNA聚合酶及______酶等，完成质粒的环化。
高考生物二轮专题课件：专题五 遗传的分子基础、变异与进化
4.用体外实验的方法可合成多肽链。已知苯丙氨酸的密码子是UUU，若要在体
外合成同位素标记的多肽链，所需的材料除了人工合成的多聚尿嘧啶核苷酸
外还有 同位素标记的苯丙氨酸
、 除去了DNA和mRNA的细胞提取液 。
5.人体不同组织细胞的相同DNA分子，进行转录过程时启用的起始点不完全相同
(填“都相同”“都不同”或“不完全相同”)，其原因是
不同组织细胞中
基因进行选择性表达 。
6.下图为某生物遗传信息传递过程：
图中A表示 RNA聚合酶 。某同学判断该图表示的遗传信息传递过程发生在原 核细胞中，他判断的依据是 转录和翻译在同一场所进行 。
7.已知某植物的宽叶对窄叶为显性，纯种宽叶植株与窄叶植株杂交的后代中， 偶然发现一株窄叶个体，原因： 可能是纯种宽叶个体在产生配子时发 生了基因突变，也可能是纯种宽叶个体产生的配子中含宽叶基因的染色体片
DNA聚合酶 解旋酶
减数分裂
四种脱氧核苷酸
(2)转录：DNA→RNA
五碳糖
Hale Waihona Puke 苷酸四种核糖核(3)翻译：mRNA→蛋白质
直接模板
多肽链或蛋白质
(4)快速确认原核细胞与真核细胞中的基因表达 ①原核细胞：转录、翻译同时进行
②真核细胞：先转录后翻译
细胞核 核孔
①遗传信息位于DNA上，密码子位于mRNA，反密码子位于tRNA上。 ②mRNA、tRNA和rRNA都是转录的产物，也都参与翻译过程。 ③起点问题：在一个细胞周期中，DNA复制一次，每个复制起点只起始一次； 而在一个细胞周期中，基因可多次转录，因此转录起点可多次起始。 ④翻译过程中mRNA并不移动，而是核糖体沿着mRNA移动，进而依次读取密 码子，最终因为模板mRNA相同，合成的多个多肽的氨基酸序列一般是相同的。
高考生物二轮、三轮复习课件 专题九第二讲
二、植物的组织培养技术
重温高考经典
2.下列有关植物的组织培养技术的叙述，正确的是 ①外植体可以来自于植物的任何细胞 ②愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞 (2011· 江苏， 16A) ③ 二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株 (2011· 江苏， 16B) ④以花粉作为外植体可得到单倍体植株 (2011· 上海，22C) ( ) (2011· 上海卷 22A)
解析 (1)探究温度对酶活性的影响时，自变量应为温度。由
表格可知，清除不同污染物时所需的最适温度不同，因此洗 涤含不同污染物的衣物时应选用不同温度的水。 (2)只有酶 具有活性才能将酶应用于实践。 (3)固定化酶需要把酶固定 在一定载体上，使酶既能与反应物接触，又能与产物分离， 可以反复利用，本题中未运用固定化酶技术。
A．①，②⑧⑥⑦③⑨，④ B．①，②⑧⑥⑦③⑨，⑤ C．①，⑥②⑨⑧③⑦，⑤ D．①，②⑨⑧⑥⑦③，④
解析
植物组织培养依据的原理是细胞的全能性。培养过程
是：离体的植物器官、组织或细胞经脱分化形成愈伤组织， 然后再分化成根、芽，最终形成植物体。影响植物细胞脱分 化产生愈伤组织的一个重要因素是植物激素，当细胞分裂素 与生长素比例适中时，能强烈地刺激愈伤组织的形成。
答案
①⑤⑧
回归命题本源 1． 酶对强酸、 强碱、 高温和有机溶剂等条件反应敏感， 容易 失活 。 2．蛋白酶催化水解 蛋白质 ，而油渍属于 脂质 ，用含该蛋白酶 的洗衣粉无法去除油渍。 3． 固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固 定在一定空间内的技术，包括 包埋法 、 化学结合法 吸附法。 4．采用固定化酶(固定化细胞)技术可使酶能够被 反复利用 、 和物理
温馨提示 ①植物组织培养常用 MS 培养基。 ②植物激素(生长素、细胞分裂素)对培养有较大影响。
2016届高考生物第二轮复习专题训练40
第一部分专题十(一)一、选择题1．(2015·江苏，24)右图为苹果酒的发酵装置示意图，下列叙述错误的是()A．发酵过程中酒精的产生速率越来越快B．集气管中的气体是酵母菌无氧呼吸产生的CO2C．发酵过程中酵母种群呈“J”型增长D．若发酵液表面出现菌膜，最可能原因是发酵瓶漏气[答案]ABC[解析]发酵过程中随着发酵装置底物的减少，酒精的产生速率会越来越慢，A错误；集气管中的气体是酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸产生的CO2，B错误；发酵过程中装置中酵母菌基本不进行增殖，其种群数量基本不发生变化，C错误；发酵液表面出现的菌膜应该是酵母菌繁殖形成的，说明装置中进入了O2，最可能原因是发酵瓶漏气，D正确。
2．下列叙述错误的是()A．醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸B．酵母菌在无氧条件下利用葡萄糖汁产生酒精C．泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸发酵D．腐乳制作利用了毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶[答案] A[解析]通过醋酸发酵、酒精发酵、乳酸发酵和腐乳制作，考查发酵技术在生产实践中的应用。
醋酸菌是严格的好氧菌，无氧条件下不能存活，因此醋酸菌将乙醇氧化为乙酸必需持续通氧；酵母菌可以在无氧条件下进行酒精发酵，产生酒精；泡菜腌制的原理是乳酸菌在无氧条件下进行乳酸发酵；腐乳主要利用毛霉等真菌中的蛋白酶和脂肪酶将蛋白质和脂肪分解为多种氨基酸和甘油与脂肪酸。
3．下列关于微生物分离和培养的叙述，错误的是()A．微生物培养前，需对培养基进行消毒B．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法C．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中的唯一氮源[答案] A[解析]微生物培养前，需对培养基进行灭菌，而不是消毒。
二、非选择题4．(2015·新课标Ⅰ，39)已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。
脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。
回答有关问题：(1)显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用________染色。
课题1DNA的粗提取与鉴定
课题地粗提取与鉴定一、课题目标本课题通过尝试对植物或动物组织中地进行粗提取，了解地物理化学性质，理解粗提取以及鉴定地原理.文档收集自网络，仅用于个人学习二、课题重点与难点课题重点：地粗提取和鉴定方法.课题难点：地粗提取和鉴定方法.三、课题背景分析生物体地性状之所以能够遗传给后代，是由于生物体内具有或这些遗传物质.通过必修《遗传与进化》地学习，学生已经学习了证明是主要地遗传物质地实验证据.那么究竟是什么样地呢？本课题通过实验操作，使学生对有一定地感性认识.文档收集自网络，仅用于个人学习四、基础知识分析与教学建议知识要点：地物理化学性质，尤其是地溶解性；.二苯胺法鉴定地方法和原理.教学建议．在教学过程中，教师要引导学生分析插图“在溶液中地溶解度曲线”，使学生理解：在溶液浓度低于时，地溶解度随溶液浓度地增加而逐渐降低；在时，溶解度最小；当溶液浓度继续增加时，地溶解度又逐渐增大.利用上述原理，可以将溶于高浓度地溶液中，使其与其他物质分开.文档收集自网络，仅用于个人学习．教师要注意引导学生认识和蛋白质对酶、高温和洗涤剂地耐受性地不同.教材在实验设计中关于去除滤液中杂质地第二、第三个方案，正是利用了上述不同地特性，从而达到分离和蛋白质地目地. 文档收集自网络，仅用于个人学习．教材中介绍了用二苯胺法鉴定地方法，教师可以引导学生结合教材中地资料，利用所学地知识，采用其他地方法鉴定，如电泳法、紫外灯照射法等.文档收集自网络，仅用于个人学习五、实验案例案例一以鸡血为实验材料进行地粗提取课前准备本实验用鸡血细胞做实验材料有两个原因.一是因为鸡血细胞核地含量丰富，材料易得；二是鸡血细胞极易吸水胀破，而用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和离心，对设备要求较高，操作繁琐，历时较长.文档收集自网络，仅用于个人学习教师可以到市场售活鸡处索取鸡血，所带烧杯中必须提前放入抗凝剂柠檬酸钠溶液.具体制备方法如下.取质量浓度为地柠檬酸钠溶液，置于烧杯中，注入新鲜地鸡血（约），同时用玻璃棒搅拌，使血液与柠檬酸钠溶液充分混合，以免血液凝结.将烧杯中地血液置于冰箱内，静置，使血细胞自行沉淀.有条件地学校也可以将血液倒入离心管内进行离心，用或地转速，离心，使血细胞沉淀于离心管底部，这样可以使血细胞沉淀更完全.用吸管除去上部地澄清液，就可以得到鸡血细胞液.值得注意地是鸡血细胞破碎以后释放出地，容易被玻璃容器吸附，所以在提取过程中为了减少地损失，最好使用塑料地烧杯和试管盛放鸡血细胞液.文档收集自网络，仅用于个人学习提取地具体步骤.破碎细胞，释放鸡血细胞中地与核蛋白结合，位于鸡血细胞地细胞核中，正常情况下是不会释放出来地.为了使从细胞核中释放出来，需要向鸡血细胞液中加入蒸馏水，并且搅拌，从而使血细胞膜和核膜胀破.用玻璃棒搅拌可以加速细胞地破裂.注意应沿一个方向快速搅拌，但也不能太快太猛，防止打碎.一般～地鸡血细胞液加入蒸馏水搅拌.释放出来地大量和往往与蛋白质结合在一起，应用～层纱布进行过滤，除去一些颗粒较大地杂质.文档收集自网络，仅用于个人学习．溶解细胞核内地在浓度较高地溶液中核蛋白容易解聚，游离出地溶解在溶液中.在溶液中加入两倍体积地浓度为地溶液，搅拌.注意应沿一个方向搅拌，使充分溶解.文档收集自网络，仅用于个人学习．地析出将溶液中地与其他杂质分离，这一步骤是实验成败地关键.教材中列举了提取地三种方案，本案例选取方案一.加蒸馏水降低溶液浓度，使析出.实验中应该缓慢贴壁加入蒸馏水，并轻轻地沿一个方向不停地均匀搅拌，以利于分子地附着和缠绕.同时应注意控制加水量，使溶液地终浓度为～.加水过程一般分三次进行，当总加水量为左右时，已基本析出.加水太多、溶液过稀，会使分子又重新溶解.文档收集自网络，仅用于个人学习用～层纱布对稀释液进行过滤，滤去蛋白质，收集地黏稠物.如果采用离心法，效果更好.用转速地离心机，离心，除去上清液(含有蛋白质)，留下地沉淀物中含有.此时注意观察黏稠物地颜色.文档收集自网络，仅用于个人学习地初步纯化如果提取地量不够多且其中含有较多杂质，或者加入溶液和搅拌等操作过程不规范，都会导致实验现象不明显，常常使制取地粗制品不能显示出地本色──白色.为了增进实验效果，需要对粗制品进行简单地提纯，下面地方案可供参考.文档收集自网络，仅用于个人学习将黏稠物再溶解，继续用地溶液溶解黏稠物，仍旧沿一个方向不停搅拌，使充分溶解，以免损失.用～层纱布进行过滤（或离心），滤去杂质，收集含有地滤液.向滤液中贴壁缓慢加入预冷地体积分数为％地乙醇，并用玻璃棒朝一个方向缓慢、均匀地搅拌，溶液中会出现丝状物.文档收集自网络，仅用于个人学习实验一般要求采用预冷地％地乙醇，但对比结果显示，常温下地乙醇溶液也可产生明显效果.从理论上分析，预冷地乙醇溶液具有以下优点.一是抑制核酸水解酶活性，防止降解；二是降低分子运动，易于形成沉淀析出；三是低温有利于增加分子柔韧性，减少断裂.此时悬浮于溶液中地丝状物相对含杂质较少，如果出现地丝状物较少，可以将此混合液再放入冰箱中冷却几分钟.浓缩后地丝状物，可以用缓缓旋转玻璃棒地方法卷起(因为玻璃棒有吸附地作用).如果丝状物较少，不易吸附在玻璃棒上，也可以用筷子等表面粗糙地用具来帮助分子缠绕.文档收集自网络，仅用于个人学习地纯化还有许多其他方法.例如，添加质量分数为％地十二烷基磺酸钠()溶液，使蛋白质变性后与分开.随后，加入氯仿—异丙醇混合液（体积比为∶），通过离心将蛋白质及其他杂质除去,取上清液.可重复上述操作几次，直至上清液变成透明地黏稠液体.此外苯酚可以迅速使蛋白质变性，抑制核酸酶地活性.利用苯酚处理后，离心分层，溶于上层水相，蛋白质变性存在于酚层中，这时可用分液漏斗或吸管等仪器将二者分开.教师可以根据学校地条件让学生自己设计实验方案，比较实验结果.文档收集自网络，仅用于个人学习．地鉴定二苯胺法二苯胺试剂地配制及鉴定地方法参见教科书.需要注意地是，二苯胺试剂在冰箱内可保存个月，使用前需摇匀.文档收集自网络，仅用于个人学习紫外灯照射法用蒸馏水配制质量分数为地溴化乙锭()溶液，将玻璃棒上缠绕地白色絮状物抹到蜡纸上，再滴滴溶液染色.将蜡纸放在紫外灯( )下照射(暗室中)，可呈现橙红色地萤光(地紫外吸收高峰在处).文档收集自网络，仅用于个人学习电泳法此方法适合鉴定纯度较高地.有条件地学校可以参考本专题课题地实验案例和参考资料部分.案例二以菜花为实验材料进行地粗提取课前准备将新鲜菜花和体积分数为％地乙醇溶液放入冰箱冷冻室.提取地具体步骤.取材称取菜花，去梗取花，切碎..研磨将碎菜花放入研钵中，倒入研磨液，充分研磨.研磨液地配制方法如下.将加入到蒸馏水中，使其溶解，然后，用地溶液调节至，再加入、、.待上述药品全部溶解后，再用蒸馏水定容至.文档收集自网络，仅用于个人学习教材中建议采用洗发香波、洗涤剂等一些去污剂，使植物细胞膜破碎，释放.学生可以设置对照实验，比较哪一种方法可以提取到纯度更高地.一般实验室提取高纯度地都采用一种阳离子去污剂──十六烷三甲基溴化铵分离缓冲液，使细胞膜破碎，同时将与植物中多糖等杂质分开，再用氯仿—异丙醇混合液（体积比为∶）抽提去除杂质蛋白，得到高纯度地.文档收集自网络，仅用于个人学习.过滤在漏斗中垫上尼龙纱布，将菜花研磨液过滤到烧杯中(有条件地学校可将滤液倒入塑料离心管中进行离心，用地转速，离心～，取上清液放入烧杯中).在℃冰箱中放置几分钟后，再取上清液.文档收集自网络，仅用于个人学习.沉淀将一倍体积地上清液倒入两倍体积地体积分数为％地预冷乙醇溶液中，并用玻璃棒缓缓、轻轻地搅拌溶液(玻璃棒不要直插到烧杯底部).沉淀～后，可见白色地絮状物出现.用玻璃棒缓缓旋转，将絮状物缠绕在玻璃棒上.文档收集自网络，仅用于个人学习六、课题成果评价（一）是否提取出了观察你提取地颜色，如果不是白色丝状物，说明中地杂质较多；二苯胺鉴定出现蓝色说明实验基本成功，如果不呈现蓝色，可能所提取地含量低，或是实验操作中出现错误，需要重新制备.文档收集自网络，仅用于个人学习（二）分析中地杂质本实验提取地粗制品有可能仍然含有核蛋白、多糖等杂质.（三）不同实验方法地比较对于不同地实验方法，本课题可以采用分组地方法进行研究.首先选取不同地实验材料，其次同种材料还可以采用不同方法，从多方面比较实验结果，如地纯度、地颜色、二苯胺显色地深浅等，看看哪种实验材料、哪种提取方法地效果更好.文档收集自网络，仅用于个人学习七、答案和提示（一）旁栏思考题．为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？答：蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体，水分可以大量进入血细胞内，使血细胞胀裂，再加上搅拌地机械作用，就加速了鸡血细胞地破裂(细胞膜和核膜地破裂)，从而释放出.文档收集自网络，仅用于个人学习．加入洗涤剂和食盐地作用分别是什么？答：洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于地释放；食盐地主要成分是，有利于地溶解.文档收集自网络，仅用于个人学习．如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样地影响？答：研磨不充分会使细胞核内地释放不完全，提取地量变少，影响实验结果，导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等.文档收集自网络，仅用于个人学习．此步骤获得地滤液中可能含有哪些细胞成分？答：可能含有核蛋白、多糖和等杂质.．为什么反复地溶解与析出，能够去除杂质？答：用高盐浓度地溶液溶解，能除去在高盐中不能溶解地杂质；用低盐浓度使析出，能除去溶解在低盐溶液中地杂质.因此，通过反复溶解与析出，就能够除去与溶解度不同地多种杂质.文档收集自网络，仅用于个人学习．方案二与方案三地原理有什么不同？答：方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取地与蛋白质分开；方案三利用地是和蛋白质对高温耐受性地不同，从而使蛋白质变性，与分离.文档收集自网络，仅用于个人学习（二）练习．答：提取地第一步是材料地选取，其目地是一定要选取含量较高地生物材料，否则会由于实验过程中或多或少地损失而造成检测地困难；第二步是地释放和溶解，这一步是实验成功与否地关键，要尽可能使细胞内地全部溶解；第三步是地纯化，即根据地溶解特性、对酶及高温地耐受性地不同等特性，最大限度地将与杂质分开；最后一步是对进行鉴定，这是对整个实验地结果地检测.文档收集自网络，仅用于个人学习．答：提取蛋白质比提取地难度大.这是因为，与相比，蛋白质对温度、盐浓度、等条件要敏感得多，很容易失活；并且蛋白质地空间结构多种多样，理化性质各不相同，使得蛋白质地提取没有一种统一地方法，只能根据特定蛋白质地特性摸索提取地条件，设计特定地方法.文档收集自网络，仅用于个人学习八、参考资料.二苯胺鉴定地化学原理中嘌呤核苷酸上地脱氧核糖遇酸生成ω羟基γ酮基戊醛，它再和二苯胺作用而呈现蓝色(溶液呈浅蓝色).鉴定时溶液蓝色地深浅，与溶液中含量地多少有关.文档收集自网络，仅用于个人学习.研磨液中几种药品地作用:提供缓冲体系，在这一体系中呈稳定态（为三羟甲基氨基甲烷）.（乙二胺四乙酸二钠）：是酶地抑制剂，可以防止细胞破碎后酶降解.（十二烷基磺酸钠）：可以使蛋白质变性，与分离.。
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2018届二轮酶的应用和DNA的提取与鉴定专题卷一、选择题1．下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是()A．反应产物对固定化酶的活性没有影响B．实验室常用吸附法制备固定化酵母细胞C．若发酵底物是大分子，则固定化细胞优于固定化酶D．固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显解析：选D某些产物可以与酶结合，使酶的结构发生变化，从而影响酶的活性；固定化技术包括包埋法、物理吸附法和化学结合法(交联法)，由于细胞较大，故多采用包埋法；由于大分子难以通过细胞膜，无法与细胞内的酶接触，所以底物是大分子时，用固定化酶优于固定化细胞；固定化细胞固定的是一系列酶，所以在多步连续催化反应方面优势明显。
2．(2017·南通二模)在探究某品牌加酶洗衣粉适宜的洗涤温度时，不必考虑()A．实验设计的温度范围是否符合生活实际B．洗涤衣物的大小、质地、污渍类型和污染程度C．洗衣粉用量、洗涤方式及时间、洗涤后漂洗方式D．使用普通洗衣粉和不加洗衣粉进行同样方式的洗涤解析：选D探究加酶洗衣粉适宜的洗涤温度实验中，自变量是温度，实验设计的温度范围要符合生活实际；洗涤衣物的大小、质地、污渍类型和污染程度、洗衣粉用量、洗涤方式及时间、洗涤后漂洗方式都属于无关变量，必须要考虑，否则会影响实验结果；由于探究温度对加酶洗衣粉的影响，所以不需要设置其他洗衣粉的对照。
3．下列关于固定化酶技术的说法正确的是()A．固定化酶技术就是固定反应物，让酶依附着载体围绕反应物旋转的技术B．固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反应C．固定化酶中的酶无法重复利用D．固定化酶是将酶固定在一定空间内的技术解析：选D固定化酶是指通过物理或化学的方法，将水溶性的酶与不溶性的载体结合，使酶固定在载体上，并在一定的空间范围内进行反应的酶，所以固定化酶技术固定的不是反应物而是酶。
因为被固定的只是一种酶，所以不能催化一系列的酶促反应，但固定的酶可以重复利用。
4．在DNA粗提取与鉴定实验中，将获得的含有DNA的黏稠物分别按下表处理三次，则DNA主要集中在()AC．①④⑥D．②④⑥解析：选B DNA在2 mol·L－1的NaCl溶液中溶解度较大，过滤后DNA存在于滤液中；在0.14 mol·L－1的NaCl溶液中DNA的溶解度最低，搅拌过滤后存在于黏稠物中；DNA 不溶于95%的冷酒精，搅拌过滤后存在于黏稠物中。
5．(2017·苏州一模)某兴趣小组为了探究不同金属离子对加酶洗衣粉中的碱性蛋白酶活性的影响，进行了系列实验，结果如下表。
下列有关叙述错误的是() 金属离子对酶活力的影响A．碱性蛋白酶不能将反应液中各种蛋白质彻底水解B．Mn2＋、Mg2＋、Ca2＋能激活碱性蛋白酶的活性C．Cu2＋、Zn2＋、Fe2＋、Hg2＋等能抑制碱性蛋白酶的活性D．反应液中离子浓度与其抑制或激活碱性蛋白酶活性作用呈正相关解析：选D碱性蛋白酶可以将蛋白质水解成肽，但不能将肽水解为氨基酸；根据与对照组结果的比较，可以得出Mn2＋、Mg2＋、Ca2＋等能激活碱性蛋白酶的活性，Cu2＋、Zn2＋、Fe2＋、Hg2＋等能抑制碱性蛋白酶的活性；反应液中各金属离子浓度一样，抑制或激活碱性蛋白酶活性作用与离子浓度无直接关系。
6．(2017·南通一模)下图是“DNA粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图，下列相关叙述正确的是()A．图1中溶液a是0.14 mol·L－1的NaCl溶液B．图1所示操作的原理是DNA能溶于酒精，而蛋白质等杂质不溶C．图2所示实验操作中有一处明显错误，可能导致试管2中蓝色变化不明显D．图2试管1的作用是证明2 mol·L－1 NaCl溶液遇二苯胺出现蓝色解析：选C图1中是将丝状物溶解，溶液a是2 mol·L－1的NaCl溶液；加入冷却的酒精的目的是除杂，原理是DNA不溶于冷酒精，而蛋白质等杂质溶于酒精；图2操作中的错误是试管2中的液面高于水浴的液面，导致试管受热不均匀；图2试管1的作用是对照。
7.小球藻可用于污水净化，其繁殖能力(生长量)在一定程度上可以反映藻细胞消耗N、P等的能力。
科研人员比较游离小球藻和用海藻酸钠固定化后的小球藻生长量变化，结果见右图。
下列相关叙述错误的是()A．本研究中固定化小球藻采用的方法是包埋法B．实验中可用CaCl2溶液浸泡凝胶珠使其形成稳定结构C．结果表明固定化小球藻的生长期较短、生长速率低D．使用固定化小球藻有利于重复使用且可避免水体二次污染解析：选C据曲线可知，固定化小球藻生长速率低、生长期较长。
8．下列有关生物技术实践的叙述，错误的是()A．制备凝胶珠时，CaCl2溶液的作用是使胶体聚沉B．固定化酵母细胞分解葡萄糖速度要比游离酵母细胞快C．制作腐乳时，加盐腌制可使豆腐块变硬且能抑制杂菌生长D．微生物平板培养需倒置平板，目的是防止冷凝水珠污染培养基解析：选B制备凝胶珠时，Ca2＋与海藻酸根离子形成沉淀，从而使胶体聚沉；葡萄糖更容易进入游离酵母细胞，分解速度比固定化酵母细胞快；制作腐乳时，加盐腌制可以析出水分，使豆腐块变硬，且能抑制杂菌生长；微生物平板培养需倒置平板，防止冷凝水珠污染培养基或杂菌污染。
9．(多选)下列有关酶的叙述，正确的是()A．在腐乳制作过程中必须有能产生蛋白酶的微生物参与B．洗衣粉中表面活性剂对碱性蛋白酶的活性有一定的促进作用C．固定化酶的主要目的是实现酶的重复利用，也有利于产物的纯化D．原代培养的动物细胞出现接触抑制后可用胃蛋白酶处理转入新瓶继续培养解析：选AC蛋白酶可将豆腐中的蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸，在腐乳制作过程中必须有能产生蛋白酶的微生物参与；洗衣粉中的表面活性剂可以产生泡沫，将油脂分子分散开，但对碱性蛋白酶活性没有促进作用；固定化酶是将酶固定在水不溶性载体上，可以实现酶的重复利用，也可避免酶进入产物，有利于产物的纯化；原代培养的动物细胞出现接触抑制后可用胰蛋白酶处理后转入新瓶继续培养，不能用胃蛋白酶。
10．(多选)在蛋白质和DNA的混合液中，要想得到较纯的DNA，可采用的方法有() A．向混合液中加入足量的蒸馏水B．向混合液中加入DNA水解酶C．向混合液中加入冷的95%的酒精D．向混合液中加入蛋白酶解析：选CD DNA分子在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，在冷的酒精中可析出，据此可将DNA和蛋白质分离；DNA水解酶能将DNA水解成脱氧核苷酸，会破坏DNA 分子，而蛋白酶则将蛋白质水解成可溶性的多肽，从而将蛋白质与DNA分离。
二、非选择题11．利用固定化藻处理生活污水是近几年发展起来的新技术。
原绿球藻是海洋中的一种光合自养型原核生物，科研人员进行了固定化原绿球藻的生长情况及除氮效果的实验，实验中的人工污水是在无氮培养基中添加NH4Cl配制而成，结果如下。
请分析回答：(1)原绿球藻固定化的方法是________，固定形成的凝胶珠颜色为________。
若实验中海藻酸钠的浓度过高，则________________。
(2)分析图1,7 d内悬浮藻的种群数量变化为________；与悬浮藻相比，13 d内固定化藻生长、增殖速率较慢，原因是______________________________________________________ ________________________________________________________________________。
(3)分析图2，对人工污水除氮效率较高的是__________；从环境保护看，固定化原绿球藻的优势表现在______________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
解析：(1)原绿球藻固定化的方法是包埋法。
因为包埋的是原绿球藻，所以固定形成的凝胶珠颜色应为绿色。
若实验中海藻酸钠的浓度过高，则凝胶珠不易成形，过低则包埋的球藻数量较少。
(2)根据图1,7 d内悬浮藻的增长速率始终是正值，所以种群数量变化为增长。
由于固定化载体遮光，固定化形成的藻球内原绿球藻生长空间小，藻球内外物质交换速率受限制等原因，固定化藻生长、增殖速率较慢。
(3)从环境保护看，悬浮原绿球藻易于与污水分离，有利于减少二次污染等。
答案：(1)包埋法绿色凝胶珠不易成形(2)增长固定化载体遮光，固定化形成的藻球内原绿球藻生长空间小，藻球内外物质交换速率受限制(合理即可)(3)悬浮原绿球藻藻球易于与污水分离，有利于减少二次污染12．如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验过程中的一些重要操作示意图，请分析回答有关问题：(1)正确的操作顺序是____________________(用字母和箭头表示)。
(2)如图C、E步骤都加入蒸馏水，但其目的不同，分别是__________________和________________________。
(3)如图A步骤中所用酒精必须是经过______________才能使用，该步骤的目的是_______________________________________________________。
(4)为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA，可滴加__________试剂后沸水浴，如果出现____________，则证明该丝状物的主要成分为DNA。
解析：(1)DNA的粗提取和鉴定步骤是：加入蒸馏水，破碎细胞→过滤，获取含DNA 的滤液→去除滤液中杂质→DNA的析出→鉴定。
所以正确的操作顺序是C→B→E→D→A。
(2)C加蒸馏水是使血细胞吸水破裂，E加蒸馏水是使NaCl溶液的浓度降低，析出DNA。
(3)DNA不溶于酒精，95%的冷酒精凝集效果最佳，所以A步骤中所用酒精必须是经过充分预冷的，以便除去溶于酒精的杂质，提取含杂质较少(或较纯净)的DNA。
(4)DNA鉴定用二苯胺沸水浴加热，呈蓝色。
答案：(1)C→B→E→D→A(2)加速细胞的破裂降低NaCl溶液的浓度，使DNA析出(3)充分预冷提取含杂质较少(或较纯净)的DNA(4)二苯胺蓝色13．(2017·南通三模)生物兴趣小组以苹果为材料开展细胞中DNA含量测定研究，主要实验流程如下图，其中SDS(十二烷基硫酸钠)具有破坏细胞膜和核膜、使蛋白质变性等作用，苯酚和氯仿不溶或微溶于水。
它们的密度均大于水。
请分析回答：(1)步骤①中苹果组织研磨前先经液氮冷冻处理的主要优点是________________。
在常温条件下，也可向切碎的组织材料中加入一定量的____________，再进行充分搅拌和研磨。