定量检验的分析性能验证
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最新定量项目的性能验证.
值。 ➢ 比较稀释后的样本检测值的均值和其预期值，计算R值
（R＝检测值的均值/预期值）
临床可报告范围
可接受标准
以80％≤R≤120％为可接受限 ➢ R＜80％或者R＞120％时，按厂商推荐的次高的稀释
倍数进行稀释，以80％≤R≤120％为可接受限，依次 类推。 结果计算 ➢ CRR上限值 ＝最大稀释倍数×对应标本的AMR上限 浓度 ➢ CRR的下限值 ＝AMR的下限值
定量项目的性能验证.
定量项目性能验证指标有哪些
正确度 精密度 线性范围（可报告范围） 参考范围 抗干扰 分析灵敏度/检测限
ISO15189的相关要求
CNAS-CL38 《在临床化学检验领域的应用说明 》 ➢ 5.3.7设备故障修复后，如果设备故障影响了分析性能，应对相关检测给予
验证；程序中试剂、设备等更换都需要性能验证 ➢ 5.5.2 检验方法和程序的分析性能验证内容至少应包括正确度、精密度和可
取样测定所得结果之间的接近程度。 ➢ 准确度：测量结果与被测量真值之间的一致程度。 ➢ 可报告范围：临床可报告范围（clinical reportable range,CRR）是指
对临床、诊断有意义的待测物浓度范围。此范围如果超出了AMR（分 析测量范围），可将样本通过稀释、浓缩等预处理是待测物浓度处于 分析测量范围内，最后乘以稀释或浓缩的倍数。 ➢ 生物参考区间：参考值分布的95%区间
正确度验证
➢ 有证参考物质（CRM) ➢ 卫生部临检中心正确度验证计划（人源样本用
可溯源参考方法测定的结果去验证常规方法结 果，其偏倚是否允许） ➢ 参考实验室、参考方法比对
正确度
常用能力验证或比对：
➢ 参加能力验证/室间质评 ➢ 与使用相同检测方法已获认可实验室比对
（R＝检测值的均值/预期值）
临床可报告范围
可接受标准
以80％≤R≤120％为可接受限 ➢ R＜80％或者R＞120％时，按厂商推荐的次高的稀释
倍数进行稀释，以80％≤R≤120％为可接受限，依次 类推。 结果计算 ➢ CRR上限值 ＝最大稀释倍数×对应标本的AMR上限 浓度 ➢ CRR的下限值 ＝AMR的下限值
定量项目的性能验证.
定量项目性能验证指标有哪些
正确度 精密度 线性范围（可报告范围） 参考范围 抗干扰 分析灵敏度/检测限
ISO15189的相关要求
CNAS-CL38 《在临床化学检验领域的应用说明 》 ➢ 5.3.7设备故障修复后，如果设备故障影响了分析性能，应对相关检测给予
验证；程序中试剂、设备等更换都需要性能验证 ➢ 5.5.2 检验方法和程序的分析性能验证内容至少应包括正确度、精密度和可
取样测定所得结果之间的接近程度。 ➢ 准确度：测量结果与被测量真值之间的一致程度。 ➢ 可报告范围：临床可报告范围（clinical reportable range,CRR）是指
对临床、诊断有意义的待测物浓度范围。此范围如果超出了AMR（分 析测量范围），可将样本通过稀释、浓缩等预处理是待测物浓度处于 分析测量范围内，最后乘以稀释或浓缩的倍数。 ➢ 生物参考区间：参考值分布的95%区间
正确度验证
➢ 有证参考物质（CRM) ➢ 卫生部临检中心正确度验证计划（人源样本用
可溯源参考方法测定的结果去验证常规方法结 果，其偏倚是否允许） ➢ 参考实验室、参考方法比对
正确度
常用能力验证或比对：
➢ 参加能力验证/室间质评 ➢ 与使用相同检测方法已获认可实验室比对
第四章-药物定量分析和分析方法验证
方法分类
按分离方法分为：PC；TLC；柱色谱；GC；HPLC。
（一）HPLC法
1. 对HPLC仪器一般要求 色谱柱、流动相按品种项下要求。
2. 系统性试验
色谱柱的理论板数：n = 5.54(tR /Wh/2)2 分离度：R = 2（tR1 – tR2)/(W1 + W2); 要大于1.5 拖尾因子：T = W0.05h/2d1 应在0.9 ～ 1.05
后银量法
3. 利用药物中可游离的金属离子的氧化性测定含量
（1）含锑药物 例如：葡萄糖酸锑的含量测定
Sb5+ + 2KI H+ Sb3+ + 2K+ ++ I2
I2 + 2Na2S2O3
2NaI + Na2S4O6
（2）含铁药物
2Fe3+ + 2KI I2 + 2Na2S2O3
2Fe2+ + 2K+ + I2 2NaI + Na2S4O6
2. 制剂 要考察辅料对回收率的影响。采用在空白辅料中加入原 料对照品的方法作回收率试验，然后计算RSD。
具体做法：测定高、中、低三个浓度，n=3, 共9个数据来评价 回收率的RSD＜2%；用UV和HPLC法时，一般回 收率可达98%～102%；容量法可达99.7%～100.3%
（二）数据要求
回收率% = （测定平均值— 空白值）/加入量×100% 要求制备高、中、低三浓度的样品，各测定3次。应 报告已知加入量的回收率，或测定结果平均值与真实值 之差及其可信限。
3. 百分含量的计算
（1）直接滴定法 D% = V ×F × T/W ×100% F = 实际标定的浓度/规定的浓度
定量分析方法的方法学验证
定量分析方法的方法学验证定量分析方法的方法学验证定量分析方法验证的目的是证明采用的含量测定方法适合于相应分析要求，在进行定量分析方法学研究或起草药品质量标准时，分析方法需经验证。
验证内容有：线性、范围、准确度、精密度（包括重复性和重现性）、检测限、定量限和耐用性等。
一，线性线性是指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物质浓度直接呈正比关系的程度。
应在规定的范围内测定线性关系。
可用一贮备液经精密稀释，制备一系列供试品的方法进行测定，至少制备五份供试样品；以测得的响应信号对被测物浓度作图，观察是否呈线性，再用最小二乘法进行线性回归。
必要时，响应信号可经数学转换，再进行线性回归计算。
回归方程的相关系数( r ) 越接近于1 ，表明线性关系越好。
用UV 法测定时，以对照品配制一定浓度范围的对照品系列溶液，吸光度A一般在0.3 ～0.7 ，浓度点n ＝5 ，用浓度C 对A作线性回归，得一直线方程，方程的截距应接近于零，相关系数r 应大于0.9999 。
用HPLC 法测定时，以对照品配制一定浓度范围的对照品系列溶液，浓度点n ＝5 ～7 ，用浓度 C 对峰高h 或峰面积A或被测物与内标物的响应值之比进行线性回归或非线性拟合（如HPLC-ELSD ），建立方程，方程的截距应趋于零，相关系数r 应大于0.999 。
线性关系的数据包括相关系数、回归方程和线性图。
二，范围范围系指能达到一定精密度、准确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。
范围应根据分析方法的具体应用和线性、准确度、精密度结果及要求确定。
对于有毒的、具特殊功效或药理作用的成分，其范围应大于被限定含量的区间。
三，精确度准确度系指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率( ％) 表示。
2定量分析系统的性能验证及经验分享
定量检测系统的性能验证及经验分享
中南大学湘雅医院检验科 易 斌
2
目 录
1.有关概念和管理要求 2.分析性能指标与标准 3.精密度评价 4.正确度评价 5.分析测量范围评价 6.参考区间评价
3
检验程序的性能特征
测量精密度（含测量重复性和测量中间精密度） 测量正确度和测量准确度 测量不确定度 分析特异性（含干扰物） 分析灵敏度和检出限（空白限、检出限和定量限） 测量区间（可报告范围/分析测量范围） 诊断特异性和诊断灵敏度。
13
性能确认要求
方法确认应尽可能全面，并通过客观证据（以性能 特征形式）证实满足检验预期用途的特定要求。 确认的对象是非标准方法、实验室设计或制定的方 法、超出预定范围使用的标准方法、修改过的确认 方法。 实验室应将确认程序文件化，并记录确认结果。确 认结果应由授权人员审核并记录审核过程。 当对确认过的检验程序进行变更时，应将改变所引 起的影响文件化，适当时，应重新进行确认。
n
n
n
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精密度实验基本要求
试验样品一定要稳定，要严格控制冻融、混匀的操作。 至少做正常和病理2个水平的精密度实验。 尽可能在可报告范围内做高、中、低3个水平。 若有可能应尽可能选择参考区间两端和医学决定水平 处的浓度。 实验样品的分析物含量应尽量与公司对检测系统性能 评估时采用的含量一致，便于比较。 实验时按厂商操作规程要求做好校准，并且一定要和 实验样品一起做质量控制。
CNAS CL02:2012
4
精密度
精密度 « 测量结果的离散程度 « 用SD或CV表示 « 来源于方法学评价和室内质控 • 精密度分类 – CLSI：批内、批间、日间、实验室内（总）不精密度 – ISO：重复性、中间不精密度、再现性不精密度
ISO15189性能验证个人经验分享 ZT
的均值及CV，以CV≤20%时的最大稀释管浓度作为可报告范围的低限；高值样 本按照一定比例稀释后的系列样本都重复测定3次，计算回收率R=测定均值/理 论值，回收率R在80%-120%之间的最大稀释倍数即为该方法的最大可稀释倍数， 可报告范围上限 = 最大可稀释倍数×线性范围上限。
7、参考文献
1、 CNAS-CL02-A003：2018《医学实验室质量和能力认可准则在临床化学检 验领域的应用说明》
注1：通常较高值样本的不精密度较小，较低值样本的不精密度偏大。对低值有临床意 义的检测项目，宜评估有判断价值的低水平样本的不精密度。 注2：如检测结果没有明确的医学决定水平，可在参考区间上限左右选一个浓度，再根 据检验项目的特点在测量区间内选择另一个浓度。 注3：如与厂商或文献报导的不精密度比较，所选样本水平宜与被比较的样本水平接近。
4、线性区间ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
1.2、验证方法及结果判断 方法：每个浓度水平的样本重复测定3～4次。所有样本应在一次运行中
或几次间隔很短的运行中随机测定，最好在1天之内完成。 判断：免疫法：相关系数r2≥0.95，a在0.95-1.05范围内，截距b与0无显著
差异；酶法： r2≥0.99 ， a在0.97-1.03范围内，截距b与0无显著差异。或者按照 WS/T 408-2012文件要求做线性回归分析和线性检验。
可报告范围高限验证（最大可稀释倍数）：使用混合血清或5%牛血清白 蛋白生理盐水溶液或测定方法要求的稀释液对高值待测样本（必要时可添加被 分析物，并计算出理论值）进行一系列稀释，并记录稀释倍数。
6、临床可报告范围
1.2、验证方法及结果判断 在一次运行中将每个低值样本重复测定5～10次，分别计算每个低值样本
4、线性区间
定量检验分析性能验证
what
如何实施性能验证？
准备工作 范围、材料、方案：应确定定量检测 的项目；所需的仪器、配套试剂、校 准品、质控品等材料；制定完整的性 能验证方案（尤其是各项性能参数的 判断标准的制定及其依据）。
how
试验要求：
仪器应进行校准或保养；要尽可能在 相同条件下进行各项试验；所有试验 均需在室内质控结果在控的情况下方 可进行。
测量重复性（批内精密度）
试验方法：连续重复测定20/21次； 结果计算：计算后20次检测结果的SD和CV； 判断标准：以能力验证/室间质评评价界限作 为允许总误差（TEa），批内精密度 <1/4TEa；或者符合试剂说明书的要求。 注意事项：若选择标本，则其浓度应尽可能 接近质控品或试剂说明书中评价该性能所提 供的标本浓度
检验程序的性能特征宜包括：测量正 确度、测量准确度、测量精密度(含测 量重复性和测量中间精密度)、测量不 确定度、分析特异性（含干扰物）、 分析灵敏度、检出限和定量限、测量 区间、诊断特异性和诊断灵敏度
为什么要做性能验证？
性能验证是为了确保实验室开展的检 验项目，所应用的检测系统的分析性 能或检验项目的方法学(检验程序)能够 满足检测及临床要求，从而保证患者 标本检测结果准确可靠。
when 能对结果产生较大的影响时，可选择
其所开展的部分检验项目进行分析性 能验证。
初次验证后，对精密度、正确度及可 报告范围等性能参数至少每12个月进 行一次评估，可通过评估如CV、均值 等室内质控数据的变化趋势（批间精 密度）、室间质评项目的结果的可接 受性（正确度）、临床医护人员对结
when 果的反馈（可报告范围）、小样本的
实验室内精密度：
同一实验室内，使用同样的设备，由不同操 作者在不同时间内获得的精密度，以前曾被 称为总精密度（不包括大的设备维护、仪器 校准和更换试剂批号）
如何实施性能验证？
准备工作 范围、材料、方案：应确定定量检测 的项目；所需的仪器、配套试剂、校 准品、质控品等材料；制定完整的性 能验证方案（尤其是各项性能参数的 判断标准的制定及其依据）。
how
试验要求：
仪器应进行校准或保养；要尽可能在 相同条件下进行各项试验；所有试验 均需在室内质控结果在控的情况下方 可进行。
测量重复性（批内精密度）
试验方法：连续重复测定20/21次； 结果计算：计算后20次检测结果的SD和CV； 判断标准：以能力验证/室间质评评价界限作 为允许总误差（TEa），批内精密度 <1/4TEa；或者符合试剂说明书的要求。 注意事项：若选择标本，则其浓度应尽可能 接近质控品或试剂说明书中评价该性能所提 供的标本浓度
检验程序的性能特征宜包括：测量正 确度、测量准确度、测量精密度(含测 量重复性和测量中间精密度)、测量不 确定度、分析特异性（含干扰物）、 分析灵敏度、检出限和定量限、测量 区间、诊断特异性和诊断灵敏度
为什么要做性能验证？
性能验证是为了确保实验室开展的检 验项目，所应用的检测系统的分析性 能或检验项目的方法学(检验程序)能够 满足检测及临床要求，从而保证患者 标本检测结果准确可靠。
when 能对结果产生较大的影响时，可选择
其所开展的部分检验项目进行分析性 能验证。
初次验证后，对精密度、正确度及可 报告范围等性能参数至少每12个月进 行一次评估，可通过评估如CV、均值 等室内质控数据的变化趋势（批间精 密度）、室间质评项目的结果的可接 受性（正确度）、临床医护人员对结
when 果的反馈（可报告范围）、小样本的
实验室内精密度：
同一实验室内，使用同样的设备，由不同操 作者在不同时间内获得的精密度，以前曾被 称为总精密度（不包括大的设备维护、仪器 校准和更换试剂批号）
定量检验的分析性能验证
• 简单地说中间精密度是处于重复性条件与再现性条件之间的 条件下得到的精密度。
• 实验室内精密度：
• 同一实验室内，使用同样的设备，由不同操作者在不同时间 内获得的精密度，以前曾被称为总精密度（不包括大的设备 维护、仪器校准和更换试剂批号）
• 文件依据 • CLSI （原NCCLS）颁布的EP5-A2文件《定量测量方法的精密
what
如何实施性能验证？
• 准备工作 • 范围、材料、方案：应确定定量检测的项目；所需的仪器、
配套试剂、校准品、质控品等材料；制定完整的性能验证方 案（尤其是各项性能参数的判断标准的制定及其依据）。
how
• 试验要求： • 仪器应进行校准或保养；要尽可能在相同条件下进行各项试
验；所有试验均需在室内质控结果在控的情况下方可进行。
定量检验的分析性能验证
浙江省立同德医院 王伟
引言
• 依据卫生部《医疗机构临床实验室管理办法》第三十条款 • CNAS-CL02：2008《医学实验室质量和能力认可准则》
（IOS15189:2007）第5.5条款 • 实验室应对方法学进行评价，以检查其分析性能和对预期用
途的适用性。
• CNAS-CL02：《医学实验室质量和能力认可准则》 （IOS15189:2012,IDT）第5.5条款
精密度试验
• 在规定条件下，多次重复测定同一量时各测定值之间彼此相 符合的程度
• 包括： 重复性(repeatability) 中间精密度(intermediateprecision) 重现性(reproducibility) 实验室内精密度（within-labprecision)
• 中间精密度:
• 检验程序的性能特征宜包括：测量正确度、测量准确度、测 量精密度(含测量重复性和测量中间精密度)、测量不确定度、 分析特异性（含干扰物）、分析灵敏度、检出限和定量限、 测量区间、诊断特异性和诊断灵敏度
• 实验室内精密度：
• 同一实验室内，使用同样的设备，由不同操作者在不同时间 内获得的精密度，以前曾被称为总精密度（不包括大的设备 维护、仪器校准和更换试剂批号）
• 文件依据 • CLSI （原NCCLS）颁布的EP5-A2文件《定量测量方法的精密
what
如何实施性能验证？
• 准备工作 • 范围、材料、方案：应确定定量检测的项目；所需的仪器、
配套试剂、校准品、质控品等材料；制定完整的性能验证方 案（尤其是各项性能参数的判断标准的制定及其依据）。
how
• 试验要求： • 仪器应进行校准或保养；要尽可能在相同条件下进行各项试
验；所有试验均需在室内质控结果在控的情况下方可进行。
定量检验的分析性能验证
浙江省立同德医院 王伟
引言
• 依据卫生部《医疗机构临床实验室管理办法》第三十条款 • CNAS-CL02：2008《医学实验室质量和能力认可准则》
（IOS15189:2007）第5.5条款 • 实验室应对方法学进行评价，以检查其分析性能和对预期用
途的适用性。
• CNAS-CL02：《医学实验室质量和能力认可准则》 （IOS15189:2012,IDT）第5.5条款
精密度试验
• 在规定条件下，多次重复测定同一量时各测定值之间彼此相 符合的程度
• 包括： 重复性(repeatability) 中间精密度(intermediateprecision) 重现性(reproducibility) 实验室内精密度（within-labprecision)
• 中间精密度:
• 检验程序的性能特征宜包括：测量正确度、测量准确度、测 量精密度(含测量重复性和测量中间精密度)、测量不确定度、 分析特异性（含干扰物）、分析灵敏度、检出限和定量限、 测量区间、诊断特异性和诊断灵敏度
定量分析方法的方法学验证
定量分析方法的方法学验证定量分析方法验证的目的是证明采用的含量测定方法适合于相应分析要求，在进行定量分析方法学研究或起草药品质量标准时，分析方法需经验证。
验证内容有：线性、范围、准确度、精密度(包括重复性和重现性)、检测限、定量限和耐用性等。
一，线性线性是指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物质浓度直接呈正比关系的程度。
应在规定的范围内测定线性关系。
可用一贮备液经精密稀释，制备一系列供试品的方法进行测定，至少制备五份供试样品；以测得的响应信号对被测物浓度作图，观察是否呈线性，再用最小二乘法进行线性回归。
必要时，响应信号可经数学转换，再进行线性回归计算。
回归方程的相关系数(r )越接近于1，表明线性关系越好。
用UV法测定时，以对照品配制一定浓度范围的对照品系列溶液，吸光度 A 一般在0.3〜0.7，浓度点n = 5，用浓度C对A作线性回归，得一直线方程，方程的截距应接近于零，相关系数r应大于0.9999。
用HPLC法测定时，以对照品配制一定浓度范围的对照品系列溶液，浓度点n = 5〜7，用浓度C对峰高h或峰面积A或被测物与内标物的响应值之比进行线性回归或非线性拟合(如HPLC-ELSD )，建立方程，方程的截距应趋于零，相关系数r应大于0.999。
线性关系的数据包括相关系数、回归方程和线性图。
二，范围范围系指能达到一定精密度、准确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。
范围应根据分析方法的具体应用和线性、准确度、精密度结果及要求确定。
对于有毒的、具特殊功效或药理作用的成分，其范围应大于被限定含量的区间。
三，精确度准确度系指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率(% )表示。
准确度应在规定的范围内测试。
用于定量测定的分析方法均需做准确度验证。
1.测定方法的准确度可用已知纯度的对照品做加样回收率测定，即于已知被测成分含量的供试品中再精密加入一定量的已知纯度的被测成分对照品，依法测定。
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如没有医学决定水平，可在参考区间上限左 右选一个浓度 。此外再根据检验项目的性质 在线性区间内选择一个值。
试剂和校准品
评估批内精密度时，要求在整个评估 阶段，尽可能使用相同条件，应使用 同一种类同一批号的试剂和校准物,如 有可能,只进行一次校准。使用不同批 号试剂和多次校准都会增加检验结果 的变异程度。
性能验证试验
对于配套系统，一般验证以下内容 准确度---EP-15 精密度---EP-5 可报告范围---EP-6 参考区间---C28-A2 对于非配套系统，内容更多
一、精密度试验
精密度试验
在规定条件下，多次重复测定同一量 时各测定值之间彼此相符合的程度 包括：重复性、再现性、中间精密度、 实验室内精密度
总误差（TEa） 从CLIA’ 88允许误差表中查阅评价的该 项目的允许误差范围。
没有CLIA 88允许误差范围的项目: EQA的允许误差 试剂说明书提供
二、正确度与准确度
准确度(accuracy): 一次测量的结果 与被测量真值的接近程度。
正确度(trueness): 真实度，大量测 量的均值与真值的接近程度。
样品浓度
评估精密度时，建议评估高低二个浓度的精 密度。当二个浓度的精密度有显著差异时， 建议增加为三个 浓度。
所选浓度应为在测量范围内有医学意义的值， 即至少有一 个浓度在医学决定水平(medical decision levels)左右。不要为了得到较小的 精密度，都选用较高值的样品，甚至超出 测 量范围。也不应选用靠近最低检出限的样品， 此时所得 的精密度往往偏大。
精密度试验
在规定条件下，多次重复测定同一量 时各测定值之间彼此相符合的程度 包括： 重复性(repeatability) 中间精密度(intermediateprecision) 重现性(reproducibility) 实验室内精密度（within-labprecision)
中间精密度:
简单地说中间精密度是处于重复性条件与再 现性条件之间的条件下得到的精密度。
实验室内精密度：
同一实验室内，使用同样的设备，由不同操 作者在不同时间内获得的精密度，以前曾被 称为总精密度（不包括大的设备维护、仪器 校准和更换试剂批号）
文件依据
CLSI （原NCCLS）颁布的EP5-A2文 件《定量测量方法的精密度性能评价批准指南第二版》
用于评估试验的样品
一般常采用临床实验室收集的稳定和 冷冻贮存的血清(浆)库;当实验室收集 的样品不稳定或不易得到时，也可考 虑使用稳定的、以蛋白质为基质的商 品，如厂家的校准品和质控品。一般 采用日常工作中的室内质控品。
when 能对结果产生较大的影响时，可选择
其所开展的部分检验项目进行分析性 能验证。
初次验证后，对精密度、正确度及可 报告范围等性能参数至少每12个月进 行一次评估，可通过评估如CV、均值 等室内质控数据的变化趋势（批间精 密度）、室间质评项目的结果的可接 受性（正确度）、临床医护人员对结
when 果的反馈（可报告范围）、小样本的
测量重复性（批内精密度）
试验方法：连续重复测定20/21次； 结果计算：计算后20次检测结果的SD和CV； 判断标准：以能力验证/室间质评评价界限作 为允许总误差（TEa），批内精密度 <1/4TEa；或者符合试剂说明书的要求。 注意事项：若选择标本，则其浓度应尽可能 接近质控品或试剂说明书中评价该性能所提 供的标本浓度
why
进行性能验证的场所
按照实验室管理办法和认可准则的要 求，医疗机构临床实验室应承担所开 展检验项目的性能验证工作。
where
何时需要做性能验证？
以下情况应完成初次性能验证： 新安装的仪器拟开展的项目；新开展 项目；同一项目的试剂变更厂家或检 验方法发生变更时；仪器校准、发生 故障维修后或更换主要的配件后，可
检验程序的性能特征宜包括：测量正 确度、测量准确度、测量精密度(含测 量重复性和测量中间精密度)、测量不 确定度、分析特异性（含干扰物）、 分析灵敏度、检出限和定量限、测量 区间、诊断特异性和诊断灵敏度
为什么要做性能验证？
性能验证是为了确保实验室开展的检 验项目，所应用的检测系统的分析性 能或检验项目的方法学(检验程序)能够 满足检测及临床要求，从而保证患者 标本检测结果准确可靠。
what
如何实施性能验证？
准备工作 范围、材料、方案：应确定定量检测 的项目；所需的仪器、配套试剂、校 准品、质控品等材料；制定完整的性 能验证方案（尤其是各项性能参数的 判断标准的制定及其依据）。
how
试验要求：
仪试验 均需在室内质控结果在控的情况下方 可进行。
定量检验的分析性能验证
浙江省立同德医院 王伟
引言
依据卫生部《医疗机构临床实验室管 理办法》第三十条款 CNAS-CL02：2008《医学实验室质量 和能力认可准则》（IOS15189:2007） 第5.5条款 实验室应对方法学进行评价，以检查 其分析性能和对预期用途的适用性。
CNAS-CL02：《医学实验室质量和能 力认可准则》（IOS15189:2012,IDT） 第5.5条款
验证等多种方式进行。若评估的结果 不可接受，则需重新进行性能验证。
哪些人员可以进行性能验证试验?
性能验证试验应由实验室有资质的检 验人员完成，必要时可由技术支持人 员协助完成试验；而性能验证报告必 须由资深的检验人员完成，并经科室 主任审核后归档保存。
who
性能验证包括哪些方面
定量项目性能验证的内容包括但不限 于：精密度（批内、批间）；正确度； 检测低限（灵敏度）；携带污染率； 线性范围；可报告范围；生物参考区 间；检验结果量值溯源；测量不确定 度；等。
测量再现性（批间精密度）
试验方法：每天1次测试，连续测试20天； 或每天2次测试，连续测试10天；或每天4次 测试，连续测定5天; 结果计算：剔除离群值后，计算20次检测结 果的SD和CV； 判断标准：<1/3TEa；或者符合试剂说明书 的要求。
注意事项：若选择标本，首先应考虑检测物 的稳定性，浓度要求同批内精密度；若检测 物不稳定，则必须使用质控品进行该试验。
试剂和校准品
评估批内精密度时，要求在整个评估 阶段，尽可能使用相同条件，应使用 同一种类同一批号的试剂和校准物,如 有可能,只进行一次校准。使用不同批 号试剂和多次校准都会增加检验结果 的变异程度。
性能验证试验
对于配套系统，一般验证以下内容 准确度---EP-15 精密度---EP-5 可报告范围---EP-6 参考区间---C28-A2 对于非配套系统，内容更多
一、精密度试验
精密度试验
在规定条件下，多次重复测定同一量 时各测定值之间彼此相符合的程度 包括：重复性、再现性、中间精密度、 实验室内精密度
总误差（TEa） 从CLIA’ 88允许误差表中查阅评价的该 项目的允许误差范围。
没有CLIA 88允许误差范围的项目: EQA的允许误差 试剂说明书提供
二、正确度与准确度
准确度(accuracy): 一次测量的结果 与被测量真值的接近程度。
正确度(trueness): 真实度，大量测 量的均值与真值的接近程度。
样品浓度
评估精密度时，建议评估高低二个浓度的精 密度。当二个浓度的精密度有显著差异时， 建议增加为三个 浓度。
所选浓度应为在测量范围内有医学意义的值， 即至少有一 个浓度在医学决定水平(medical decision levels)左右。不要为了得到较小的 精密度，都选用较高值的样品，甚至超出 测 量范围。也不应选用靠近最低检出限的样品， 此时所得 的精密度往往偏大。
精密度试验
在规定条件下，多次重复测定同一量 时各测定值之间彼此相符合的程度 包括： 重复性(repeatability) 中间精密度(intermediateprecision) 重现性(reproducibility) 实验室内精密度（within-labprecision)
中间精密度:
简单地说中间精密度是处于重复性条件与再 现性条件之间的条件下得到的精密度。
实验室内精密度：
同一实验室内，使用同样的设备，由不同操 作者在不同时间内获得的精密度，以前曾被 称为总精密度（不包括大的设备维护、仪器 校准和更换试剂批号）
文件依据
CLSI （原NCCLS）颁布的EP5-A2文 件《定量测量方法的精密度性能评价批准指南第二版》
用于评估试验的样品
一般常采用临床实验室收集的稳定和 冷冻贮存的血清(浆)库;当实验室收集 的样品不稳定或不易得到时，也可考 虑使用稳定的、以蛋白质为基质的商 品，如厂家的校准品和质控品。一般 采用日常工作中的室内质控品。
when 能对结果产生较大的影响时，可选择
其所开展的部分检验项目进行分析性 能验证。
初次验证后，对精密度、正确度及可 报告范围等性能参数至少每12个月进 行一次评估，可通过评估如CV、均值 等室内质控数据的变化趋势（批间精 密度）、室间质评项目的结果的可接 受性（正确度）、临床医护人员对结
when 果的反馈（可报告范围）、小样本的
测量重复性（批内精密度）
试验方法：连续重复测定20/21次； 结果计算：计算后20次检测结果的SD和CV； 判断标准：以能力验证/室间质评评价界限作 为允许总误差（TEa），批内精密度 <1/4TEa；或者符合试剂说明书的要求。 注意事项：若选择标本，则其浓度应尽可能 接近质控品或试剂说明书中评价该性能所提 供的标本浓度
why
进行性能验证的场所
按照实验室管理办法和认可准则的要 求，医疗机构临床实验室应承担所开 展检验项目的性能验证工作。
where
何时需要做性能验证？
以下情况应完成初次性能验证： 新安装的仪器拟开展的项目；新开展 项目；同一项目的试剂变更厂家或检 验方法发生变更时；仪器校准、发生 故障维修后或更换主要的配件后，可
检验程序的性能特征宜包括：测量正 确度、测量准确度、测量精密度(含测 量重复性和测量中间精密度)、测量不 确定度、分析特异性（含干扰物）、 分析灵敏度、检出限和定量限、测量 区间、诊断特异性和诊断灵敏度
为什么要做性能验证？
性能验证是为了确保实验室开展的检 验项目，所应用的检测系统的分析性 能或检验项目的方法学(检验程序)能够 满足检测及临床要求，从而保证患者 标本检测结果准确可靠。
what
如何实施性能验证？
准备工作 范围、材料、方案：应确定定量检测 的项目；所需的仪器、配套试剂、校 准品、质控品等材料；制定完整的性 能验证方案（尤其是各项性能参数的 判断标准的制定及其依据）。
how
试验要求：
仪试验 均需在室内质控结果在控的情况下方 可进行。
定量检验的分析性能验证
浙江省立同德医院 王伟
引言
依据卫生部《医疗机构临床实验室管 理办法》第三十条款 CNAS-CL02：2008《医学实验室质量 和能力认可准则》（IOS15189:2007） 第5.5条款 实验室应对方法学进行评价，以检查 其分析性能和对预期用途的适用性。
CNAS-CL02：《医学实验室质量和能 力认可准则》（IOS15189:2012,IDT） 第5.5条款
验证等多种方式进行。若评估的结果 不可接受，则需重新进行性能验证。
哪些人员可以进行性能验证试验?
性能验证试验应由实验室有资质的检 验人员完成，必要时可由技术支持人 员协助完成试验；而性能验证报告必 须由资深的检验人员完成，并经科室 主任审核后归档保存。
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性能验证包括哪些方面
定量项目性能验证的内容包括但不限 于：精密度（批内、批间）；正确度； 检测低限（灵敏度）；携带污染率； 线性范围；可报告范围；生物参考区 间；检验结果量值溯源；测量不确定 度；等。
测量再现性（批间精密度）
试验方法：每天1次测试，连续测试20天； 或每天2次测试，连续测试10天；或每天4次 测试，连续测定5天; 结果计算：剔除离群值后，计算20次检测结 果的SD和CV； 判断标准：<1/3TEa；或者符合试剂说明书 的要求。
注意事项：若选择标本，首先应考虑检测物 的稳定性，浓度要求同批内精密度；若检测 物不稳定，则必须使用质控品进行该试验。