附录一试验室常用溶液配制
（完整版）试验室常用溶液及试剂配制试验室常用溶液试剂的配制表一普通酸
（完整版）试验室常⽤溶液及试剂配制试验室常⽤溶液试剂的配制表⼀普通酸实验室常⽤溶液及试剂配制实验室常⽤溶液、试剂的配制表⼀普通酸碱溶液的配制表⼆常⽤酸碱指⽰剂表三混合酸碱指⽰剂表四容量分析基准物质的⼲燥表五缓冲溶液的配制1、氯化钾-盐酸缓冲溶液2、邻苯⼆甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液3、邻苯⼆甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液4、⼄酸-⼄酸钠缓冲溶液5、磷酸⼆氢钾-氢氧化钠缓冲溶液6、硼砂-氢氧化钠缓冲溶液7、氨⽔-氯化铵缓冲溶液8、常⽤缓冲溶液的配制实验室常⽤试验⽅法2九、柠檬酸（C6H8O7·H2O）称取试样1.5g（精确到0.0002g）于三⾓瓶内，加⼊⽔50ml溶解，加酚酞指⽰剂3滴，⽤1mol/L 氢氧化钠标准溶液滴定⾄粉红⾊为终点，同时做空⽩试验。
计算：X%（⼀⽔）= （V1-V0）×C×0.06404 m×（1-0.08566）×100X%（⽆⽔）= （V1-V0）×C×0.06404 m×100V1-----消耗氢氧化钠标准溶液的体积，ml；V0-----空⽩所消耗氢氧化钠标准溶液的体积，ml；C------氢氧化钠标准溶液浓度，mol/L；m---样品质量。
⼗、钙含量测定（磷酸氢钙CaHPO4、磷酸⼆氢钙Ca（H2PO4）2·H2O、钙粉等）称取2g（精确到0.0002g）样品，⽤10ml盐酸（1+1）溶解，转移⾄100ml容量瓶中定溶，⽤移液管吸取10ml于250ml锥形瓶中，加50ml⽔，5ml蔗糖溶液（25g/L），2ml三⼄酸胺（1+1），1ml⼄⼆胺（1+1），1滴孔雀绿指⽰液（1g/L），滴加氢氧化钾溶液（200g/L）⾄⽆⾊，再过量10ml，加0.1g盐酸羟胺（每加⼀种试剂都要摇匀），加钙黄绿素少许，在⿊⾊背景下⽤0.05mol/L的EDTA标准溶液滴定⾄绿⾊荧光消失呈现紫红⾊为滴定终点。
实验室溶液配制
实验室溶液配制Document number：WTWYT-WYWY-BTGTT-YTTYU-2018GT实验室所需溶液配制1.费休氏试液，购买；2.氢氧化钠溶液，C=l。
氢氧化钠分子量，准确称取氢氧化钠固体溶于200ml蒸馏水中，并在1L容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液；3.中性红溶液，C=1%。
准确称取中性红固体1g溶于50ml蒸馏水中，并在100ml容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液；4.溴百里香酚蓝溶液，C=1%。
准确称取溴百里香酚蓝固体1g溶于50ml蒸馏水中，并在100ml容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液；5.碘化钾溶液，C=10%。
准确称取KI固体50g溶于50ml蒸馏水中，并在500ml容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液；6.硫代硫酸钠溶液，C=l。
硫代硫酸钠分子量，准确称取硫代硫酸钠固体溶于200ml蒸馏水中，并在1000ml容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液；7.硫酸溶液，C=2mol/l，硫酸分子量，浓度98%时密度约ml，准确量取硫酸液体稀释与500ml蒸馏水中，向水中加入硫酸而非向硫酸中加水，冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液；8.淀粉溶液，C=%。
准确称取可溶性淀粉，溶于50ml水中，并在100ml容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液；9.铬酸钾溶液，C=50g/L。
准确称取铬酸钾固体50g，溶于500ml水中，并在1000ml容量瓶中定容，搅拌下逐滴加入10%的硝酸银溶液,直至溶液出现棕红的悬浮物为止.静置1昼夜,用干净的滤纸漏斗过滤即可，不一定用饱和硝酸银溶液,用10%硝酸银溶液即可.配制方法:1克硝酸银+10毫升纯水溶解,置于棕色瓶中；10.氯化钠基准试剂，C=l，氯化钠分子量，准确称取氯化钠固,溶于500ml蒸馏水中，并在1000ml容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液；11.硝酸银溶液，C=l，硝酸银分子量，准确称取硝酸银固体溶于200ml蒸馏水中，并在500ml容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液，用前采用基准氯化钠试剂（10）标定，需保存于棕色试剂瓶中；12.酚酞指示剂，C=%，准确称取酚酞固体溶于50ml蒸馏水中，并在100ml容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液；13.氯化钡溶液，C=10%，准确称取氯化钡固体10g溶于50ml蒸馏水中，并在100ml容量瓶中定容，即得到上述浓度溶液；14.乙醇溶液，C=1%,准确移取乙醇（AR）1ml与100ml容量瓶中定容，即可得到上述浓度溶液；15.盐酸标准溶液，C=1mol/l，分子量，D154=%),%)、(20%)、%)。
常用溶液的配置
常用溶液的配置试剂配制（1）液体LB培养基（-）1000ml蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g去离子水溶解并定容至1000ml高压灭菌，4℃保存。
（2）氨苄青霉素溶液（100mg/ml）10ml氨苄青霉素1g去离子水溶解并定容至10ml过滤除菌，-20℃分装保存。
（3）卡那霉素溶液（100mg/ml）10ml卡那霉素1g去离子水溶解并定容至10ml过滤除菌，-20℃分装保存。
（4）固体LB培养基（-）1000ml蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g琼脂糖粉15g去离子水溶解并定容至1000ml高压灭菌后铺平板（6cm培养皿），冷却后4℃保存。
（5）含抗生素LB 固体培养基1000ml固体LB培养基溶液1000ml高压灭菌, 当培养基降温至50℃左右，加入终浓度为100μg/ml的氨苄青霉素或100μg/ml 卡那霉素，并铺平板（6cm培养皿），冷却后，4℃保存。
（6）0.1M CaCl2溶液—制备感受态1000ml氯化钙11.099g去离子水溶解，定容至1000ml高压灭菌后4℃保存。
（7）0.1M MgCl2溶液---制备感受态1000ml氯化镁9.521g去离子水溶解，定容至1000ml高压灭菌后4℃保存。
（8）0.1M CaCl2-15%甘油溶液----制备感受态1000ml氯化钙9.521g50%甘油300ml去离子水溶解，定容至1000ml高压灭菌后4℃保存。
（9）50％甘油溶液100ml甘油50ml去离子水50ml（10）0.5M EDTA溶液(PH=8.0) 500mlEDTA 93.05g去离子水溶解，NaOH调PH至8.0，定容至500ml。
（11）10%SDS溶液100mlSDS 10g去离子水溶解，定容至100ml。
（12）5M乙酸钾溶液100ml5M乙酸钾49.07g去离子水溶解，定容至100ml，室温保存。
（13）1MTris-HCl溶液（pH=8.0）100mlTris碱12.1g去离子水溶解，定容至100ml，浓盐酸调pH值至8.0，室温保存。
实验室常用溶液的配制
实验室常用溶液的配制1．30%丙烯酰胺溶液【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。
加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml。
用Nalgen e滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，查证该溶液的p H值应不大于7.0，置棕色瓶中保存于室温。
【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。
称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。
可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。
一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子，在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂（MB-1Mallin ckrodt），搅拌过夜，然后用What man 1号滤纸过滤以纯化之。
在贮存期间，丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。
2．40%丙烯酰胺【配制方法】把380g丙烯酰胺（DNA测序级）和20g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。
继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理，但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。
【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明，40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。
3．放线菌素D溶液【配制方法】把20mg放线菌素D溶解于4ml 100%乙醇中，1：10稀释贮存液，用100%乙醇作空白对照读取OD440值。
放线菌素D（分子量为1255）纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21，900，故而1mg/ml的放线菌素D溶液在440nm处的吸光值为0.182，放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中，保存于-20℃。
【注意】放线菌素D是致畸剂和致癌剂，配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作，而不能在开放在实验桌面上进行，谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。
实验室常用溶液的配制
实验室常用溶液的配制1．30%丙烯酰胺溶液（100ml）【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的蒸馏水中。
加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml。
用Nalgene滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于7.0，置棕色瓶中保存于4℃温度。
【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。
称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。
可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。
一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子，在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂（MB-1Mallinckrodt），搅拌过夜，然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。
在贮存期间，丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸，因此大于1年的溶液应该被丢弃。
2．40%丙烯酰胺（用于DNA测序，1L）【配制方法】把380g丙烯酰胺（DNA测序级）和20g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml 的蒸馏水中。
继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理，但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。
置棕色瓶中保存于室温。
【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明，40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。
3．0.1mol/L腺苷三磷酸（ATP）溶液（1ml）【配制方法】在0.8ml蒸馏水中溶解60mg ATP，用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0，用蒸馏水稀释1ml【注意】分装成小份保存于-70℃4．10mol/L乙酸铵溶液（1L）【配制方法】把770g乙酸铵溶解于800ml蒸馏水中，加水稀释至1L后过滤除菌。
在4°C 储存。
【注意】乙酸铵是热不稳定的。
不要高压灭菌。
5．10%过硫酸铵溶液（10ml）【配制方法】把1g过硫酸铵溶于8ml蒸馏水中，用蒸馏水补足体积至10ml。
溶液各种配制
附录：常用试剂配制及应用一、常用缓冲液、试剂的配制碳酸盐缓冲液(Carbonate-Bicarbonate Buffer)由于碳酸盐pH值偏碱，因此，常用于pH>9的缓冲液配制（附表1）。
附表1. 0.2 mol/L碳酸盐缓冲液（pH9.2～10.7）磷酸缓冲液(Phosphate Buffers，PB)磷酸盐是使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，PO4：pKa1＝2.12，pKa2＝7.21；所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽。
NaH2HPO4：pKa1＝7.21，pKa2＝12.32。
Na2另外，磷酸盐还有钾盐分子形式，一般来说，低温时钠盐难溶，钾盐易溶，因此，配制细胞培养用试剂时常常添加钾盐试剂，但若配制十二烷基硫酸钠（SDS）-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用钠盐而不能用钾盐，因为SDS会与磷酸钾生成难溶的十二烷基硫酸钾。
磷酸缓冲液的优点为：①可配制成不同离子强度的缓冲液；②适用pH缓冲范围较宽；③受温度影响缓冲液pH值变化较小；④离子强度对缓冲液pH影响较小，如0.1mol/L缓冲液稀释10倍其pH变化小于0.1。
磷酸缓冲液的缺点是：①磷酸盐易与钙离子（Ca2+）、镁离子（Mg2+）及重金属离子结合生成不溶的沉淀物；②可能干扰某些生物化学反应过程，如对某些酶的催化活性具有一定程度的抑制作用。
NaH2PO4的pH值偏酸性，可用作pH<4的缓冲液。
Na2HPO4的pH值偏碱性，可用作pH>10的缓冲液。
而pH＝6～8的中性缓冲液是更常用的缓冲液，需要NaH2PO4与Na2HPO4两种磷酸盐混合配制（附表2）。
附表2. 0.2 mol/L磷酸盐缓冲液（pH5.7～8.2）磷酸盐缓冲溶液（Phosphate-buffered saline, PBS)磷酸盐缓冲液是在磷酸缓冲液基础上添加NaCl以维持溶液的渗透压，因此，PBS适用于做细胞缓冲液，常用PBS配制如下。
试剂的配制
附录1 生物实验室常用试剂的配制一、检验酸碱性的试剂1.酚酞试液取0.1g酚酞，溶解在100mL60～90%的乙醇溶液里，装在试剂瓶内密闭保存。
酚酞试液在碱性溶液中呈红色。
2.甲基橙试液甲基橙是橙黄色粉末或晶状鳞片。
取0.1g甲基橙溶解在100mL蒸馏水里制成。
当pH值由3.1～4.4时，颜色为红至黄色。
3.甲基红试液甲基红是红紫色晶体或红色粉末。
把0.1g甲基红溶在100mL60%乙醇里制得。
当pH值由4.4～6.2时，颜色由红色至黄色。
4.麝香草酚酞（百里酚酞）试液把0.1g白色的麝香草酚酞溶解在100mL 90%乙醇里制得。
当pH值由9.4～10.6时，颜色为无色至蓝色。
5.溴甲酚紫指示剂将0.1g溴甲酚溶于9.25mL的0.02mol/L氢氧化钠溶液中，加蒸馏水稀释至250mL制得。
当pH值由6.2～6.8时，颜色由淡黄色变为淡紫色，变色点在pH 6.7。
6.溴甲酚绿试液溴甲酚绿是黄色晶体或红棕色粉末。
把0.1g溴甲酚绿溶于100mL 20%乙醇中，或把0.1g溴甲酚绿与2.9mL 0.05mol/L 氢氧化钠溶液研匀，用水稀释到100mL制得。
当pH值由3.8～5.4时，颜色由黄至蓝色。
7.甲基紫（结晶紫）试液把0.1g深绿紫色的甲基紫溶解在100mL的水里制得。
当pH值由0.13～0.5时，颜色由黄至绿；pH值由1.0～1.5时，颜色由绿至蓝；pH值由2.0～3.0时，颜色由蓝至紫。
8.甲酚红指示剂把0.1g深红色的甲酚红溶解于100mL 50%的乙醇中，或将0.1g甲酚红与5.3mL 0.05mol/L氢氧化钠研匀，用水稀释到100mL制得。
当pH值由0.2～1.8时颜色由红至黄；pH值由7.0～8.8时，颜色由亮黄至紫红。
甲酚红指示剂遇少量二氧化碳，能快速变色，反应灵敏，效果明显。
9.刚果红试纸（红色）把 0.5g峋果红溶解于1L水中，加入5滴乙酸，滤纸用温热溶解液浸透后，取出晾干。
实验室常用溶液配制
实验室常用溶液配制一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V 或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。
不要涡旋混合。
加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。
或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。
0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。
或称取186.1g 的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。
1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH 调pH（6.8-8.2），然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
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一、常用贮液与溶液（一）常用缓冲液1．磷酸缓冲液（1）25℃下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制※（2）25℃下0.1mol/L磷酸钠缓冲液的配制※※:用蒸馏水将混合的两种1mol/L贮存液稀释至1000mL，根据Henderson-Hasselbalch方程计算其pH 值：pH=pK’+1g([质子受体]/[质子供体])在此，pK’=6.86(25℃)。
2．电泳缓冲液常用的电泳缓冲液说明：①TBE溶液长时间存放后会形成沉淀物，为避免这一问题，可在室温下用玻璃瓶保存5×溶液，出现沉淀后则予以废弃。
以片都以1×TBE作为使用液（即1：5稀释浓贮液）进行琼脂糖凝胶电泳。
但0.5×的使用液已具备足够的缓冲容量。
目前几乎所有的琼脂糖胶电泳都以1：10稀释的贮存液作为使用液。
进行聚丙烯酰胺凝胶垂直槽的缓冲液槽较小，故通过缓冲液的电流量通常较大，需要使用1×TBE 以提供足够的缓冲容量。
②碱性电泳缓冲液应现用现配。
③Tris-甘氨酸缓冲液用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。
3．凝胶加样缓冲液使用以上凝胶加样缓冲液的目的有三：增大样品密度；以确保DNA均匀进入样品孔内；使样品呈现颜色，从而使加样操作更为便利，含有在电块中能以可预知速率向阳极泳动的染料。
溴酚蓝在琼脂糖中移动的速率约为二甲苯青FF的2.2倍，而与琼脂糖浓度无关。
以0.5×TBF作电泳液时，溴酚蓝在琼脂糖中的泳动速率约与长300bp的双链线状DNA相同，而二甲苯青FF的泳动则与长4kb的双链线状DNA相同。
在琼脂糖浓度为0.5%～1.4%的范围内，这些对应关系受凝胶浓度变化的影响并不显著。
选用哪一种加样染料纯属个人喜恶。
但是，对于碱性凝胶应当使用溴甲酚绿作为示踪染料，因为在碱性pH条件下其显色较溴酚更蓝为鲜明。
4．各种pH值的Tris缓冲液的配制某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制：将50mL 0.1mol/L Tris碱溶液与上表所示相应体积（单位：mL）的0.1mL/L HCl混合，加水将体积调至100mL（二）常用酶的配制1．溶菌酶用水配制成50mg/mL的溶菌酶溶液，分装成小份并保存于-20℃。
每一小份一经使用后便予丢弃。
2．蛋白水解酶类a：链霉蛋白酶是从链球菌（Streptomyces griseus）中分离到的一种丝氨酸酶和酸性蛋白酶的混合物。
b：自消化可消除DNA酶和RNA酶的污染，经自消化的链酶蛋白酶的配制方法如下：把该酶的粉末溶解于10mmol./L Tris·HCl(pH7.5)、10mmol/L NaCl中，配成20mg/mL浓度，于37℃温育1h。
经消化的链霉蛋白酶分装成小份放在密封试管中，保存-20℃。
c：蛋白酶K是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，从林伯氏白色念球菌（Tritirachium album Limber）中纯化得到。
该酶有两个Ca2+结合位点，它们离酶的活性中心有一定距离，与催化机理并无直接关系。
然而，如果从该酶中除去Ca2+，由于出现远程的结构变化，催化活性将丧失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。
所以，蛋白酶K消化过程中通常加入EDTA（以抑制依赖于Mg2+的核酸酶的作用）。
但是，如果要消化对蛋白酶K具有较强耐性的蛋白，如角蛋白一类，则可能需要使用含有1mmol/L Ca2+而不含EDTA的缓冲液。
在消化完毕后、纯化核酸前要加入EGT（pH8.0）至终浓度为2mmol/L,以鳌合Ca2+。
3．无DNA酶的RNA酶将胰RNA酶（RNA酶A）溶于10mmol/L Tris·HCl(pH7.5)、15mmol/L NaCl中，配成10mg/mL的浓度，于100℃加热15min，缓慢冷却至室温，分装成小份保存于-20℃。
（三）常用抗生素溶液a：以水为溶剂的抗生素贮存液通过0.22μm滤器过滤除菌。
以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理。
所有抗生素溶液均应放于不透光的容器保存。
b：镁离子是四环素的拮抗剂，四环素抗性菌的筛选应使用不含镁盐的培养基（如LB培养基）。
（四）常用贮存液的配制1．30%丙烯酰胺溶液【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60mL的水中。
加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100mL。
用Nalgene滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于7.0，置棕色瓶中保存于室温。
【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。
称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。
可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。
一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子，在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂（MB-1 Mallinckrodt），搅拌过夜，然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。
在贮存期间，丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。
2．40%丙烯酰胺【配制方法】把380g丙烯酰胺（DNA测序级）和20g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600mL的蒸馏水中。
继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理，但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。
【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明，40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。
3．放线菌素D溶液【配制方法】把20mg放线菌素D溶解于4mL 100%乙醇中，1：10稀释贮存液，用100%乙醇作空白对照读取OD440值。
放线菌素D（分子量为1255）纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21，900，故而1mg/mL的放线菌素D溶液在440nm处的吸光值为0.182，放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中，保存于-20℃。
放线菌素D是致畸剂和致癌剂，配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作，而不能在开放在实验桌面上进行，谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。
药厂提供的作治疗用途的放线菌素D制品常含有糖或盐等添加剂。
只要通过测量贮存液在440nm波长处的光吸收确定放线菌素D的浓度，这类制品便可用于抑制自身引导作用。
4．0.1mol/L腺苷三磷酸（ATP）溶液【配制方法】在0.8mL水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0，用蒸馏水定容1mL，分装成小份保存于-70℃5．10mol/L乙酸酰溶液【配制方法】把770g乙酸酰溶解于800mL水中，加水定容至1L后过滤除菌。
6．10%过硫酸铵溶液【配制方法】把1g过硫酸铵溶解于终量为10mL的水溶液中，该溶液可在4℃保存数周。
7．BCIP溶液【配制方法】把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐（BCIP）溶解于10mL 100%的二甲基甲酰胺中，保存于4℃8．2×BES缓冲盐溶液【配制方法】用总体积90mL的蒸馏水溶解1.07g盐溶液BES[N，N-双（2-羟乙基）-2-氨基乙磺酸]、1.6g NaCl和0.027g Na2HPO4，室温下用HCl调节该溶液的pH值至6.96、然后加入蒸馏水定容至100mL，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成小份，保存于-20℃。
9．1mol/L CaCl2溶液【配制方法】在200mL蒸馏水中溶解54g CaCl2·6H2O，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成10mL小份贮存于-20℃。
制备感受态细胞时，取出一小份解冻并用蒸馏水稀释至100mL，用Nalgene滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，然后骤冷至0℃。
10．2.5mol/L CaCl2溶液【配制方法】在20mL蒸馏水中溶解13.5g CaCl2·6H2O，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成1mL小份贮存于-20℃。
11．1mol/L二硫苏糖醇（DTT）溶液【配制方法】用20mL 0.01mol/L乙酸钠溶液（pH5.2）溶解3.09g DTT，过滤除菌后分装成1mL小份贮存于-20℃。
【注意】DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。
12．脱氧核苷三磷酸（dNTP）溶液【配制方法】把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右，用微量移液器吸取0.05mol/L Tris碱分别调节每一dNTP溶液的pH值7.0（用pH试纸检测），把中和后的每种dNTP溶液各取一份作适当稀释，在下表中给出的波长下读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度，然后用水稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP，分装成小份贮存于-70℃。
比色杯光径为1cm时,吸光度=εM13．0.5mol/L EDTA(pH8.0)溶液【配制方法】在800mL水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na·2H2O），在磁力搅拌器上剧烈搅拌，用NaOH调节溶液的pH值至8.0（约需20g NaOH颗粒）然后定容至1L，分装后高压灭菌备用。
【注意】EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0，才能完全溶解。
14．溴化乙锭（10mg/mL溶液）【配制方法】在100mL水中加入1g溴化乙锭，磁力搅拌数小时以确保其完全溶解，然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中，保存于室温。
【注意】小心：溴化乙锭是强诱变剂并有中度毒性，使用含有这种染料的溶液时务必戴上手套，称量染料时要戴面罩。
15．2×HEPES缓冲盐溶液【配制方法】用总量为90mL的蒸馏水溶解1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2PO4·2H2O、0.2g葡聚糖和1gHEPES，用0.5mol/L NaOH调节pH值至7.05，再用蒸馏水定容至100mL。
用0.22μm滤器过滤除菌，分装成5mL小份，贮存于-20℃。
16．IPTG溶液【配制方法】IPTG为异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（分子量为238.3），在8mL蒸馏水中溶解2g IPTG后，用蒸馏水定容至10mL，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成1mL小份贮存于-20℃。
17．1mol/L乙酸镁溶液【配制方法】在800mL水中溶解214.46g四水乙酸镁，用水定容至1L过滤除菌。
18．1mol/L MgCl2溶液【配制方法】在800mL水中溶解203.4g MgCl2·6H2O，用水定容至1L，分装成小份并高压灭菌备用。
【注意】MgCl2极易潮解，应选购小瓶（如100g）试剂，启用新瓶后勿长期存放。
19．β-巯基乙醇（BME）溶液【配制方法】一般得到的是14.4mol/L溶液，应装在棕色瓶中保存于4℃。
【注意】BME或含有BME的溶液不能高压处理。
20．NBT溶液【配制方法】把0.5g氯化氮蓝四唑溶解于10mL 70%的二甲基甲酰胺中，保存于4℃。