免疫胶体金层析法ppt课件
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《免疫胶体金技术》课件
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实验仪器：离心机、电泳仪、显微 镜、移液器等
实验注意事项：避免污染、控制温 度、保持湿度等
实验步骤
准备实验材料： 制备胶体金溶 制备抗体溶液： 制备抗原溶液：
包括胶体金、 液：将胶体金 将抗体与缓冲 将抗原与缓冲
抗体、抗原、 与缓冲液混合， 液混合，搅拌 液混合，搅拌
缓冲液等
搅拌均匀
提高稳定性：通过优化实验条件、选择稳定的检测试剂等方法，提高检测结果的稳定性
提高自动化程度：通过开发自动化检测设备，提高检测效率和准确性
免疫胶体金技术的实验操作
实验准备
实验材料：胶体金、抗体、抗原、 缓冲液、洗涤液、显色剂等
实验步骤：样本处理、抗体孵育、 胶体金标记、洗涤、显色等
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云计算和大数据技术：实现 检测数据的实时分析和共享
检测灵敏度提升
技术进步：通过改进胶体金颗粒的制备工艺，提高检测灵敏度
应用领域：在生物医学、食品安全、环境监测等领域具有广泛应用前景
技术融合：与其他检测技术相结合，提高检测灵敏度和准确性
发展趋势：随着科技的发展，免疫胶体金技术的检测灵敏度将不断提高，应用范围也将不 断扩大。
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汇报人：
免疫胶体金技术
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单击输入目录标题 免疫胶体金技术概述 免疫胶体金技术的分类 免疫胶体金技术的优缺点 免疫胶体金技术的实验操作 免疫胶体金技术的应用实例
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免疫胶体金技术概述
定义和原理
免疫胶体金技术是一种基于免疫反应的检测技术 原理：利用抗原-抗体特异性结合，通过胶体金标记抗体，实现对目标抗原 的检测 特点：灵敏度高、特异性强、操作简便、快速
《胶体金检测技术》ppt幻灯片
培训资料
12
培训资料四、B-激动剂检测卡快速筛查尿样的方法介绍以盐酸克伦特罗胶体金快速检测卡为例一 .适用范围：主要用于定性检测，测定动物尿液，如猪尿、牛尿、羊尿等样品中盐酸克伦特罗的残留。整个检测过程只需要5~10分钟左右，灵敏度为3 ng/ml(3ppb) 。 也就是说当尿液中盐酸克伦特罗的残留大于或等于3 ng/ml 时，检测卡才 能检测到。
培训资料
23
培训资料六、发展方向(Developing)1.标记技术的探索顺磁粒子标记、量子点标记
免疫反应信号转化为电子信号模式
mndad/-CenjuyateSwhatratePeristaltiepurmP
2.生物传感器
wit.(b)(o)
oistansNc sbnste
培训资料
Sample Well
培训资料
20
培训资料五、常见问题及注意事项1.使用前将检测卡和待检样本恢复至室温2.保持干燥，避免受潮，打开包装请尽快使用试纸条中的NC膜受潮后，尿样在上面无法正常泳动，无法到达吸水纸的位置；胶金垫上的金标抗体受潮后会变性，从而失去原有的生理性功能，影响抗原抗体的选择性反应。因此，试纸条必须保持干燥，从包装袋中取出后要尽快使用。3.检测时，避免阳光直射和电风扇、空调的风直吹
免疫胶体金快速检测技术
农业部饲料质量监督检验测试中心(西安)
主要内容一、免疫胶体金技术的发展历史二、 胶体金检测卡的基本原理及构造三、 免疫胶体金层析法检测原理及应用四、S-激动剂检测卡快速筛查尿样的方法介绍五、 常见问题分析与注意事项六、 免疫胶体金技术的发展的方向
培训资料
2
培训资料一 、免疫胶体金技术的发展史1. 1939年(英，植物) Kausche 和Ruska 把烟草叶病毒吸附在金颗粒上，在电子显微镜下观察呈现高电子密度的细状颗粒，开启了免疫胶体金技术的研究。2. 1971年(美，微生物) Faulk 和Taylor 首先将兔抗沙门菌抗血清与胶体金颗粒结合，用直于检测沙门菌的表面抗原。3 . 1974年(奥) Romano 等将胶体金标记在马抗人IgG 上，实现了间接免疫金染色法。同年Bauer 等报道将胶体金标记在凝集素上的应用。
12
培训资料四、B-激动剂检测卡快速筛查尿样的方法介绍以盐酸克伦特罗胶体金快速检测卡为例一 .适用范围：主要用于定性检测，测定动物尿液，如猪尿、牛尿、羊尿等样品中盐酸克伦特罗的残留。整个检测过程只需要5~10分钟左右，灵敏度为3 ng/ml(3ppb) 。 也就是说当尿液中盐酸克伦特罗的残留大于或等于3 ng/ml 时，检测卡才 能检测到。
培训资料
23
培训资料六、发展方向(Developing)1.标记技术的探索顺磁粒子标记、量子点标记
免疫反应信号转化为电子信号模式
mndad/-CenjuyateSwhatratePeristaltiepurmP
2.生物传感器
wit.(b)(o)
oistansNc sbnste
培训资料
Sample Well
培训资料
20
培训资料五、常见问题及注意事项1.使用前将检测卡和待检样本恢复至室温2.保持干燥，避免受潮，打开包装请尽快使用试纸条中的NC膜受潮后，尿样在上面无法正常泳动，无法到达吸水纸的位置；胶金垫上的金标抗体受潮后会变性，从而失去原有的生理性功能，影响抗原抗体的选择性反应。因此，试纸条必须保持干燥，从包装袋中取出后要尽快使用。3.检测时，避免阳光直射和电风扇、空调的风直吹
免疫胶体金快速检测技术
农业部饲料质量监督检验测试中心(西安)
主要内容一、免疫胶体金技术的发展历史二、 胶体金检测卡的基本原理及构造三、 免疫胶体金层析法检测原理及应用四、S-激动剂检测卡快速筛查尿样的方法介绍五、 常见问题分析与注意事项六、 免疫胶体金技术的发展的方向
培训资料
2
培训资料一 、免疫胶体金技术的发展史1. 1939年(英，植物) Kausche 和Ruska 把烟草叶病毒吸附在金颗粒上，在电子显微镜下观察呈现高电子密度的细状颗粒，开启了免疫胶体金技术的研究。2. 1971年(美，微生物) Faulk 和Taylor 首先将兔抗沙门菌抗血清与胶体金颗粒结合，用直于检测沙门菌的表面抗原。3 . 1974年(奥) Romano 等将胶体金标记在马抗人IgG 上，实现了间接免疫金染色法。同年Bauer 等报道将胶体金标记在凝集素上的应用。
最新免疫检测技术精品课件第5章 胶体金课件
原因有：
①少量电解质对溶胶的作用； ②温度对溶胶稳定性的影响：当温度升高
时，吸附能力减少，溶剂化程度降低，溶
剂化层变薄，胶粒聚结，不稳定性增加； ③浓度对溶胶的稳定性的影响 浓度增大
时，粒子间距离缩小，引力增加，容易聚
结而发生聚沉。
胶体金颗粒由一个基础金核（原子金Au）及包围在外的双离 子层构成，紧连在金核表面的是内层负离子（AuC12－）， 外层离子层H+则分散在胶体间溶液中，以维持胶体金游离于 溶胶间的悬液状态。
夹心法
练习：夹心法还是竞争法？
思考题：
• 竞争法中，测试线（test line）上除了 固定抗原外，是否可以固定抗体？如果可 以，请描述检测原理。
• 夹心法中，除了双抗体夹心法，是否可用 双抗原夹心法？如果可以，请描述检测原 理。
一、免疫胶体金技术发展史
1971年Faulk和Taylor首先将兔抗沙门
指分散相颗粒在1～
100nm之间，外观透明不浑浊，在普通
显微镜下看不见。
(3)粗分散体系 指颗粒大于100nm，不稳
定，显微镜下可见。
2.胶体金的一般性状
(1)胶体金的颜色 颗粒在5～20nm之间，吸收波长520nm，呈红葡 萄酒色； 20～40nm之间吸收波长530nm，呈深红色；
60nm的金溶液主要吸收波长600nm为橙黄色光，
3
4 5
7.9
9.8 12
0.9
1.3 1.0
(2)柠檬酸三钠还原法(Frens 1973) 取0.01%氯化金溶液100ml加热至沸腾， 迅速中入4ml 1％柠檬酸三钠水溶液，可 见溶液很快变蓝至橙红色。
柠檬酸三钠与胶体金颗粒直径的关系 0.01%HAucl4 1％柠檬酸三钠(ml) 直径(nm) 100 5.0 10.0 100 4.0 15.0 100 1.5 25.0 100 1.0 50.0 100 0.75 60.0 100 0.60 70.0 100 0.42 98.0 100 0.32 147.0 100 0.25 160
第5章 常见免疫学检测技术-胶体金免疫层析
（三）胶体金免疫测定技术
§ （2）胶体金免疫层析
LA T E R A L FLO W T E S T S T R IP O F V E D A LA B
30
（三）胶体金免疫测定技术
§ （2）胶体金免疫层析
©①双抗体夹心法
• 固定于膜上的抗 体1＋标本中待测 抗原＋金标记的 抗体2显色
• 用于测抗原
原 • 是用胶体金标记技术和蛋白质层析技术 理 • 将结合各的种以反应微试孔剂滤分膜点为固载定体在的测快试速版的相固应相
• 通区膜域过免，毛疫检细分测析管标作技用术本加使在样试品纸溶条 液的 在一 层端析材料 上泳动，样本中的待测物与层析材料中 的反应试剂发生特异性结合反应，形成 的复合物被富集或固定在层析条上的特 定区域（检测线），通过标记抗体显色
§ 最初应用于免疫组化染色，随后发展到以膜为 载体的免疫测定技术
一、胶体金标记免疫检测应用现状
§ 胶体金标记技术具有简单、快速、灵敏等特 点，得到了广泛应用
§ 20世纪90年代兴起的胶体金免疫层析技术，特 别是试纸条的发展，使操作更加方便快捷
§ 胶体金标记免疫检测技术在临床医学检测、激 素检测、食品安全检测、药物残留和毒品快速 检测，以及抗原抗体分析等诸多领域迅速发展
食品 食品安全检测中心, 农兽药残留（磺胺类、瘦肉精
安全 各监管部门
等）,大肠杆菌,黄曲霉素
--
瘦 肉 精
沙 丁 胺 醇
--
瘦 肉 精
沙 丁 胺 醇
—
瘦 肉 精
克 伦 特 罗
瘦肉精—莱克多巴胺
瘦肉精—莱克多巴胺
瘦肉精—莱克多巴胺
—
兽 药
恩 诺 沙 星
致病菌--大肠杆菌O157
胶体金快速免疫诊断技术ppt课件
灵敏度问题
廉价：单个测试条成本极低
可单份检测：对标本既能成批检测，又可单份检测，可立 刻拿到结果，不必等待。
稳定性好：金标试剂稳定，可长期保存。
检测标本种类多：既可用于查血，又可用于检尿或唾液， 因而适合各种检查
技术应用
类别 人类医学
农牧业 环境 食品安全
应用领域
检测的物质
各级医院,血站,CDC,防疫 站,诊断中心；家庭自检； 商检系统；边检口岸；公 安系统.
样品垫
试纸条组成结构
胶体金垫
控 制 线 ( C线 )
吸水滤纸
PVC底板 向
层析方
NC膜(硝酸纤维素膜) 测试线 (T线)
有4个组分： ⑴、吸水纸(样品垫)。 ⑵、玻璃纤维膜 (胶体金垫)。 膜上吸附 着干燥的金标抗体(流动带)。 ⑶、硝酸纤维素膜，膜上包被着抗原或抗体条带 和能与标记物直接起反应的质控物条带(检测带)。 ⑷、吸水纸。以上各组份首 尾互相衔接。
切条\包装
n 切条
(演示:BIODOT CM4000切条机)
n 包装
质量控制
n 1．特异性 用30份阴性参考血清进行检测，结果不得出现 假阳性；
n 2．敏感性 用30份阳性(包括强阳性、中阳性、弱阳性) 参考血清进行检测，假阴性率不得超过3份,并用已知抗体 效价血清系列稀释测试其最小检出量。
n 3．精密度 观察批间、批内差异， CV (%)应不高于10%。 n 4．稳定性检测 37℃放置3天，鉴定指标应达到以上标准。
10%NaCl 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
• 结果判断: 对照管或加入蛋白量不足，胶体金出现由红变蓝的凝聚现
象；加入蛋白质量达到或超过稳定量，则胶体金保持红色不变
廉价：单个测试条成本极低
可单份检测：对标本既能成批检测，又可单份检测，可立 刻拿到结果，不必等待。
稳定性好：金标试剂稳定，可长期保存。
检测标本种类多：既可用于查血，又可用于检尿或唾液， 因而适合各种检查
技术应用
类别 人类医学
农牧业 环境 食品安全
应用领域
检测的物质
各级医院,血站,CDC,防疫 站,诊断中心；家庭自检； 商检系统；边检口岸；公 安系统.
样品垫
试纸条组成结构
胶体金垫
控 制 线 ( C线 )
吸水滤纸
PVC底板 向
层析方
NC膜(硝酸纤维素膜) 测试线 (T线)
有4个组分： ⑴、吸水纸(样品垫)。 ⑵、玻璃纤维膜 (胶体金垫)。 膜上吸附 着干燥的金标抗体(流动带)。 ⑶、硝酸纤维素膜，膜上包被着抗原或抗体条带 和能与标记物直接起反应的质控物条带(检测带)。 ⑷、吸水纸。以上各组份首 尾互相衔接。
切条\包装
n 切条
(演示:BIODOT CM4000切条机)
n 包装
质量控制
n 1．特异性 用30份阴性参考血清进行检测，结果不得出现 假阳性；
n 2．敏感性 用30份阳性(包括强阳性、中阳性、弱阳性) 参考血清进行检测，假阴性率不得超过3份,并用已知抗体 效价血清系列稀释测试其最小检出量。
n 3．精密度 观察批间、批内差异， CV (%)应不高于10%。 n 4．稳定性检测 37℃放置3天，鉴定指标应达到以上标准。
10%NaCl 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
• 结果判断: 对照管或加入蛋白量不足，胶体金出现由红变蓝的凝聚现
象；加入蛋白质量达到或超过稳定量，则胶体金保持红色不变
胶体金 ppt课件
影响胶体金溶液稳定性的主要原因
• ①胶粒间的相互吸引力。当胶粒相距很近时， 这种吸引力可能导致胶粒合并变大。
• ②水化层的带电情况。一种溶胶的各个胶粒 都带有相同的电荷。同性电荷相斥，双电层 愈厚，胶粒带电量愈大，排斥力愈大，愈能 阻止胶粒合并聚结，溶胶愈稳定。
• ③胶体界面的溶剂膜，当二固体间夹有 一厚层液体时，这层液体膜有一个反抗 二固体接近的排斥力。两个胶粒要进一 步接近，只有克服它们之间的溶剂化膜 的斥力才有可能，因此溶剂膜的斥力是 使溶胶稳定的原因之一。
5.胶体金保存
• 胶体金在洁净的玻璃器皿中可较长时间 保存，加入少许防腐剂（如0.02％NaN3） 可有利于保存。保存不当时会有细菌生 长或有凝集颗粒形成。少量凝集颗粒并 不影响以后胶体金的标记，使用时为提 高标记效率可先低速离心去除凝集颗粒。
6.注意事项
• （1）氯金酸易潮解，应干燥、避光保存。 • （2）氯金酸对金属有强烈的腐蚀性，因此
在配制氯金酸水溶液时，不应使用金属药匙 称量氯金酸。 • （3）用于制备胶体金的蒸馏水应是双蒸馏 水或三蒸馏水，或者是高质量的去离子水。 • （4）用以制备胶体金的玻璃容器必须是绝 对清洁的，用前应先经酸洗并用蒸馏水冲净。 最好是经硅化处理的，硅化方法可用5％二 氯甲硅烷的氯仿溶液浸泡数分钟，用蒸馏水 冲净后干燥备用。
2.技术要点
• （1）胶体金溶液的pH值调整 用K2CO3或 HC1溶液调节胶体金溶液的pH至选定值。原 则上可选择待标记蛋白质等电点，也可略为偏 碱。但通常最适反应pH往往需经多次试验才 能确定。
• 在调节胶体金的pH值时应注意，胶体金会阻 塞pH计的电极，不可直接将电极插入胶体金 溶液中，宜先用终浓度为0.1％的聚乙二醇 （PEG20000）稳定胶体金后，再测定胶体金 的pH值。
胶体金介绍ppt课件-PPT课件
3、PVC板 PVC板是用来承载膜、金子、 辅料等成分的底板，它是试纸 条的骨架。 PVC板的标准：板上的粘性 要适中；板的长度要合乎规格； 板的硬度也要达到一定的标准。
评价一个试剂的标准
评价一个试剂好坏的标准有： 1、灵敏度 2、特异性 3、背景 4、吸样和上样 5、和对照试剂比较 6、市场反馈 7、检验机构的评价
结果判读
怀孕
与常规诊断方法相比
优点 快速：全部检测过程仅需 3-10分钟。 简便：不需其它任何仪器设备，操作也极其简单，无需专 业人员，携带方便，可随时随地进行。 廉价：单个测试条成本极低 可单份检测：对标本既能成批检测，又可单份检测，可立 刻拿到结果，不必等待。 稳定性好：金标试剂稳定，可长期保存。 检测标本种类多：既可用于查血，又可用于检尿或唾液， 因而适合各种检查 缺点 定量问题 灵敏度问题
试纸条组成结构
胶体金垫 样品垫 控制线（C线） 吸水滤纸
PVC底板
层析方向 测试线 （T线）
NC膜（硝酸纤维素膜）
胶体金层析法一般原理介绍
（双抗体夹心）
（以HCG检测为例）
视频
早早孕产品形式
图片
形式
试纸条
卡型
笔型
电子验孕笔
价格
最经济
3-5元
5-10元
>$5.0
（国外价格）
使用方法
1.试纸：将试纸条标： “MAX”一端浸入尿液，尿液液面请勿 超过标志线，待尿液爬至观察区后取出试纸条平放。3-5分钟 观察结果，10分钟后无效。 2.用吸管吸取尿液，加入4滴到检测卡的加样孔中，3-5分钟观察 结果，10分钟后无效。 3.将尿液滴加到试纸上或直接淋在检测笔的吸尿棒上，尿液爬上 后平放，10分钟观察。
胶体金免疫层析技术实验培训课件
粒为球形，大小均一，无棱角。 ✓质量差的胶体金：溶液呈紫色，大小不一，
形状各异。
胶体金免疫层析技术实验
5
简介
胶体金标记的原理：胶体金在碱性条件下带 负电荷，与蛋白质分子的正电荷基团藉静电 吸引而形成牢固结合。
胶 体 金 标 记 技 术 （ Immunogold labeling technique）是以胶体金作为示踪标记物应用 于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
实验目的
掌握胶体金试纸条诊断技术的原理、使用方 法及结果的判定
胶体金免疫层析技术实验
2
简介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析 技术研制而成，该技术是90年代初在免疫 渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的 免疫学检测技术，最先用于人绒毛膜促性 腺激素（HCG）的测定和乙型肝炎病毒表 面抗原（HBsAg）等检测。
病毒性疾病：传染性法氏囊病、禽流感、 新城疫、犬细小病毒、猪瘟等。
寄生虫疾病：血吸虫病、旋毛虫病、囊虫 病、恙虫病。
细菌性疾病：霍乱弧菌、类鼻疽。
胶体金免疫层析技术实验
14
胶体金免疫层析技术实验
H5亚型AIV尿 囊液阳性结果
阴性对照
H5ＡIV细胞 毒阳性结果 阴性对照
15
课后思考
1. 瘦肉精试纸条检测的原理？ 2. 早孕试纸条检测的原理？
质检线
吸收垫
背衬 （底板）
检测线
硝酸纤维素膜
胶体金免疫层析技术实验
8
测定
测定时将试纸条下端浸入液体标 本中，下端吸水材料即吸取液体 向上端移动，流经C处时使干片 上的免疫金复合物复溶，并带动 其向膜条渗移。
胶体金免疫层析技术实验
9
测定
若标本中有待测特异抗原，即可 与免疫金复合物中的抗体结合， 此抗原抗体复合物流至测试区即 被固相抗体捕获，在膜上显出红 色反应线条（T）。
形状各异。
胶体金免疫层析技术实验
5
简介
胶体金标记的原理：胶体金在碱性条件下带 负电荷，与蛋白质分子的正电荷基团藉静电 吸引而形成牢固结合。
胶 体 金 标 记 技 术 （ Immunogold labeling technique）是以胶体金作为示踪标记物应用 于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
实验目的
掌握胶体金试纸条诊断技术的原理、使用方 法及结果的判定
胶体金免疫层析技术实验
2
简介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析 技术研制而成，该技术是90年代初在免疫 渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的 免疫学检测技术，最先用于人绒毛膜促性 腺激素（HCG）的测定和乙型肝炎病毒表 面抗原（HBsAg）等检测。
病毒性疾病：传染性法氏囊病、禽流感、 新城疫、犬细小病毒、猪瘟等。
寄生虫疾病：血吸虫病、旋毛虫病、囊虫 病、恙虫病。
细菌性疾病：霍乱弧菌、类鼻疽。
胶体金免疫层析技术实验
14
胶体金免疫层析技术实验
H5亚型AIV尿 囊液阳性结果
阴性对照
H5ＡIV细胞 毒阳性结果 阴性对照
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课后思考
1. 瘦肉精试纸条检测的原理？ 2. 早孕试纸条检测的原理？
质检线
吸收垫
背衬 （底板）
检测线
硝酸纤维素膜
胶体金免疫层析技术实验
8
测定
测定时将试纸条下端浸入液体标 本中，下端吸水材料即吸取液体 向上端移动，流经C处时使干片 上的免疫金复合物复溶，并带动 其向膜条渗移。
胶体金免疫层析技术实验
9
测定
若标本中有待测特异抗原，即可 与免疫金复合物中的抗体结合， 此抗原抗体复合物流至测试区即 被固相抗体捕获，在膜上显出红 色反应线条（T）。
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←胶体金标记鼠抗人HCG单抗
←羊抗鼠IgG
3
positive
HCG 阳性标本
MAX
尿中HCG与金标记的鼠抗人HCG单抗结合形成免疫复合物 随层析作用向上移动,至检测线与鼠抗人HCG抗体结合而聚集显色
在检测线未结合的金标记鼠抗人HCG单抗(IgG)随着尿液上行,到达质控
线与羊抗鼠IgG(二抗)结合而显色，作为质控对照。
免疫胶体金层析法
——金标记免疫法测HCG
1
原理
• 采用胶体金标记抗体，以硝酸纤维 素膜为载体，使抗原抗体反应和洗 涤在同一渗滤膜上，反应后根据在 膜上的颜色判断结果。
• 以硝酸纤维素膜为载体，利用微孔 膜毛细管作用，使膜一端的液体慢 慢向另一端渗移，犹如层析
2
← HCG分子 ← 鼠抗人HCG单抗 ← 胶体金颗粒
8
方法学评价
• 该法为定性检测尿中HCG，不能确定其浓度 • 因为该法是用单抗来测定HCG，特异性较高， 黄
疸、蛋白、血细胞和浑浊度对结果观察都无影 响。、 • 晨尿中一般含有最高的HCG值，检出率较高。 • 检测时间：HCG一般在受精卵着床后几天才出现 在尿液中，而且要达到一定的量才能被检出，因 此，对于平时月经正常的妇女需在月经推迟后才 可能在尿中检出，二月经周期长或排卵异常的妇 女有可能在停经40-44天才能检出 • 尿液稀释：如果喝水过多使尿液稀释可能会导致 假阴性结果。
4
negative
HCG 阴性标本
MAX
尿中无HCG与金标记的鼠抗人HCG单抗结合形成免疫复合物
随层析作用向上移动,至检测线与鼠抗人HCG抗体不结合而不显色
在检测线未结合的金标记鼠抗人HCG单抗(IgG)随着尿液上行,到达质控 线与羊抗鼠IgG(二抗)结合而显色，作为质控对照。
5
试纸条失效失效ຫໍສະໝຸດ MAX金标鼠抗人IgG单抗随层析作用向上移动，到达质控线，无羊抗鼠IgG( 二抗)或破坏失效，不结合而 不显色，作为质控对照。
6
大便隐血
MAX
7
注意事项
• 1. 将试条有标志线的下端浸入尿液标本中， 深度不可超过标志线（若超过，可能会出 现假阳性）
• 2. 约3秒后取出，平放，5分钟内观察结果 (时间不能小于5分钟)：两条红线为(+)，提 示尿中含HCG。一条红线为(一)，表示不含 HCG。（时间过短，可能有假阴性）
9
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10
←羊抗鼠IgG
3
positive
HCG 阳性标本
MAX
尿中HCG与金标记的鼠抗人HCG单抗结合形成免疫复合物 随层析作用向上移动,至检测线与鼠抗人HCG抗体结合而聚集显色
在检测线未结合的金标记鼠抗人HCG单抗(IgG)随着尿液上行,到达质控
线与羊抗鼠IgG(二抗)结合而显色，作为质控对照。
免疫胶体金层析法
——金标记免疫法测HCG
1
原理
• 采用胶体金标记抗体，以硝酸纤维 素膜为载体，使抗原抗体反应和洗 涤在同一渗滤膜上，反应后根据在 膜上的颜色判断结果。
• 以硝酸纤维素膜为载体，利用微孔 膜毛细管作用，使膜一端的液体慢 慢向另一端渗移，犹如层析
2
← HCG分子 ← 鼠抗人HCG单抗 ← 胶体金颗粒
8
方法学评价
• 该法为定性检测尿中HCG，不能确定其浓度 • 因为该法是用单抗来测定HCG，特异性较高， 黄
疸、蛋白、血细胞和浑浊度对结果观察都无影 响。、 • 晨尿中一般含有最高的HCG值，检出率较高。 • 检测时间：HCG一般在受精卵着床后几天才出现 在尿液中，而且要达到一定的量才能被检出，因 此，对于平时月经正常的妇女需在月经推迟后才 可能在尿中检出，二月经周期长或排卵异常的妇 女有可能在停经40-44天才能检出 • 尿液稀释：如果喝水过多使尿液稀释可能会导致 假阴性结果。
4
negative
HCG 阴性标本
MAX
尿中无HCG与金标记的鼠抗人HCG单抗结合形成免疫复合物
随层析作用向上移动,至检测线与鼠抗人HCG抗体不结合而不显色
在检测线未结合的金标记鼠抗人HCG单抗(IgG)随着尿液上行,到达质控 线与羊抗鼠IgG(二抗)结合而显色，作为质控对照。
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试纸条失效失效ຫໍສະໝຸດ MAX金标鼠抗人IgG单抗随层析作用向上移动，到达质控线，无羊抗鼠IgG( 二抗)或破坏失效，不结合而 不显色，作为质控对照。
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大便隐血
MAX
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注意事项
• 1. 将试条有标志线的下端浸入尿液标本中， 深度不可超过标志线（若超过，可能会出 现假阳性）
• 2. 约3秒后取出，平放，5分钟内观察结果 (时间不能小于5分钟)：两条红线为(+)，提 示尿中含HCG。一条红线为(一)，表示不含 HCG。（时间过短，可能有假阴性）
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