微生物检验实讲义验一细菌的基本形态
微生物形态学检验-PPT
➢ 培养特性：在沙氏培养基或营养琼脂上培养5-7日 可见菌落，菌落表面有皱折、呈颗粒状、黄色或深 橙色；在血琼脂平板上菌落较小、凸起、呈白色
肠杆菌科 Enterobacteriaceae
➢ 基本特征：在血琼脂平板上生长，在麦康凯、伊红 亚甲蓝、中国蓝琼脂平板上形成发酵和不发酵乳糖 的菌落；在三糖铁或克氏双糖底层、上层产酸、产 气、氧化酶试验阴性
伤寒沙门氏菌 S.typhi
➢ 形态与染色：革兰阴性杆菌，菌体细长，有周鞭毛
➢ 培养特性：在麦康凯上形成无色、透明菌落，SS平 板上呈无色、透明菌落、但大部分菌落中央呈黑色
肺炎克雷伯氏菌K.pneumoniae
➢ 形态与染色：革兰阴性杆菌，单个、成双或短链排 列，荚膜染色可见外周有透明、环状荚膜
细菌分离培养及鉴定
➢ 细菌分离培养：使细菌在平板上分散生长，便 于观察菌落特征，也易于挑取单个菌落进行生 化鉴定或血清学试验
➢ 细菌鉴定：形态与培养特性：形态、染色、培 养特性和菌落特征是鉴定细菌的初步依据
细菌形态与染色特点
➢ 染色性：革兰阳性、阴性，抗酸染色阳性、阴性等 ➢ 形状、大小和排列：球菌、杆菌、螺形菌，菌体大小、
荧光假单胞菌 P.fluorescens
➢ 形态与染色：阴性杆菌、无芽孢、无荚膜、端鞭毛 ➢ 培养特性：在麦康凯上呈无色半透明菌落，在营养
琼脂上形成荧光色的菌落
恶臭假单胞菌 P.putida
➢ 形态与染色：阴性杆菌、无芽孢、无荚膜、极端鞭毛 ➢ 培养特性：在麦康凯上呈较大无色、湿润菌落，在营
养琼脂上形成黄绿色菌落，紫外线下可见荧光
炭疽芽孢杆菌 B.anthracis
➢ 形态与染色：为致病细菌中最大的革兰阳性杆菌， 两端截平，体外培养后形成长链，排列呈竹节形。 在体内常单个存在或短链，有荚膜，在人工培养基 上可见芽孢，卵圆形并位于菌体中央，菌体不膨大
细菌的形态与结构
细菌的形态与结构细菌，是一类微生物中最为常见的生物体，具有非常小的体积和简单的细胞结构。
了解细菌的形态与结构对于深入研究其生理生态特征和应用具有重要的意义。
本文将详细介绍细菌的形态特征和细胞结构，以加深对细菌微观世界的认识。
一、形态特征细菌的形态主要包括球菌状、棒状和螺旋状三种基本形态。
1. 球菌状：球菌是一种呈球形或近似球形的细菌。
其特点是细胞直径相对较小，一般在0.5至2微米之间，且在不同生长条件下可出现单个球菌、成对球菌、链球菌等不同排列方式。
球菌状细菌常见的代表有肺炎球菌、链球菌等。
2. 棒状：棒状细菌，即杆菌，是一类呈长棍形或短棒形的细菌。
其细胞长度相对较长，直径较小，一般在0.5至1微米之间。
棒状细菌在不同的生长环境下，可形成散生杆菌、链状杆菌或其他不同排列方式。
常见的棒状细菌有大肠杆菌、炭疽杆菌等。
3. 螺旋状：螺旋状细菌，顾名思义，呈螺旋形状。
其特点是细胞体细长且呈螺旋状，直径相对较小，一般在0.2至2微米之间。
螺旋状细菌具有较高的运动能力，可分为单螺旋、双螺旋、多螺旋等多种类型。
典型螺旋状细菌有梅毒螺旋体、弯曲菌等。
以上是细菌最基本的形态特征，不同形态的细菌在细胞结构和生理功能上存在差异，这也为研究细菌的种类和属性提供了基础。
二、细胞结构细菌的细胞结构相对简单，主要由细胞壁、细胞膜、质粒、核糖体等组成。
1. 细胞壁：细菌的细胞壁位于细胞质膜的外侧，是细菌独有的结构。
细胞壁主要由多糖、多肽等物质构成，可分为厚壁细菌和薄壁细菌两类。
细胞壁对于细菌的形态保持、抗外界环境压力和免疫反应具有重要作用。
2. 细胞膜：细菌的细胞膜位于细胞质膜的内侧，是控制物质进出和细胞呼吸代谢的关键结构。
细菌细胞膜主要由脂质和蛋白质组成，与能量代谢、细胞分裂等过程密切相关。
3. 质粒：质粒是一种存在于细菌细胞质中的小型环状DNA分子。
质粒可携带一些非必需基因，如耐药性基因、毒力基因等，对细菌的适应性和传播能力起到重要作用。
01《微生物检验技术》试题一
《微生物检验技术》试题一班级:__________姓名:__________学号:__________一、名词解释（每题5分，共10分）1、兰氏分群2、暴烈发酵二、单选题（每小题3分，共30分）1.一部分微生物与人类形成共生的关系，在自然界达到（）。
A、动态平衡B、数量增多C、生态平衡D、数量减少2.影响食品安全的主要因素除了化学性污染、物理性污染外，还有（）。
A、土壤污染B、水源污染C、空气污染D、生物性污染3.细菌属于原核细胞型微生物的理由是（）。
A、简单的二分裂方式繁殖B、单细胞生物C、较其它生物小得多D、核外无核膜包裹，核内无核仁4.（）不属于非细胞型微生物的结构成分。
A、DNAB、RNAC、脂肪D、蛋白质5.用纳米作为度量单位的微生物是（）。
A、病毒B、霉菌C、酵母菌D、细菌6.食品微生物检验的目的就是要为生产出安全、卫生、（）的食品提供科学依据。
A、美观B、美味C、符合标准D、营养丰富7.由微生物引起食品变质的基本条件是食品特性、环境条件、以及（）。
A、人员因素B、加工因素C、微生物的种类及数量D、以上都是8.螺旋菌按其弯曲程度不同分为螺菌、（）和螺旋体。
A、长杆菌B、短杆菌C、球菌D、弧菌9.细菌的基本形态是球菌、杆菌和（）。
A、葡萄球菌B、放线菌C、螺旋菌D、芽孢菌10.细菌的细胞结构必须用光学显微镜的（）才能观察清楚。
A、低倍镜B、高倍镜C、油镜D、聚光镜三、判断题（每小题3分，共30分）1.微生物可分为细菌、放线菌、霉菌和酵母菌四大类。
（）2.具有荚膜的肺炎双球菌其毒力强。
（）3.食用前将食品充分加热可以防止一些食物中毒的发生。
（）4.细菌在不同生长条件下，形态可能有变化。
（）5.根据细菌所含DNA的不同，可以将细菌分为革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌两大类。
（）6.所有细菌仅需20~30分钟即可繁殖一代。
（）7.菌落是指一群在固体培养基表面繁殖形成肉眼可见的集团。
（）8.大肠杆菌是食品和饮用水卫生检验的指示菌，（）9.真菌进化程度高于细菌，所以真菌为多细胞的微生物。
微生物实验教程
实验 1—1 普通光学显微镜的使用……………………………………………………………
实验 1—2 细菌的形态结构观察 (简单染色、革兰氏染色、抗酸染色) ……………………
实验 1—3 细菌的特殊结构和运动性观察 (芽胞染色、荚膜染色、鞭毛染色) ……………
实验 1—4 放线菌的形态结构观察 …………………………………………………………
一滴镜油作为介质。国产显微镜的油镜常标有“油”字，国外产品则常用“oil”（oil Immersion）
或“HI”（Hemcyeneous Immersion）字样，以供识别。物镜上通常标有放大倍数、数值孔径
（亦称镜口率）、工作距离等主要参数。
3、聚光器：也叫集光器，由聚光镜和可变光阑组成。聚光镜由一片或数片透镜组成，
面是平面镜，另一面是凹面镜，其作用是使光源发出的光或自然光射向聚光镜。光强时用平
面镜，光弱时用凹面镜。有的显微镜的人工光源安装在镜座内，其反光镜也固定在镜座内。
（三） 普通光学显微镜的光学原理
心
由单透镜构成的放大镜和由几块透镜组成的实 体显微镜（解剖镜）称单式显微镜生物学教学及科 研所用的光学显微镜一般是复式显微镜。
高学生的综合能力与创新意识。
教
验
实 3. 提高学生分析问题和解决问题的能力。根据本学科的特点，逐步使学生认识微生物的基本
学 特性，比较它们与其它生物的相似和不同之处，知道如何研究微生物以及对研究中所出现的
问题点样分析，
范
师
京
南
第一节 微生物的形态结构观察
微生物的个体微小，肉眼难以看见，必须借助显微镜才能观察到。因此．显微镜就成为 微物学研究工作者不可缺少的基本工具，从事有关微生物学教学、科研和生产的人员，都应 该了解显微镜的种类、结构、功能和正确地掌握不同显微镜的使用方法。
微生物学重点知识点归纳总结
微生物学重点知识点归纳总结总论部分1.绪论（掌握）2.细菌的基本形态（掌握）和结构（熟练掌握）3.细菌的增殖与代谢（掌握）和人工培养（了解）4.噬菌体（了解）5.细菌的遗传变异（了解）、实际应用（掌握）6.消毒、灭菌、无菌、无菌操作（熟练掌握）物理及化学灭菌法（掌握）7.细菌的致病性和机体的抗免疫性（掌握）8.病毒概述（掌握）9.真菌概述（掌握）10.其他微生物（了解）11.免疫学基础（1）抗原、抗体的概念（熟练掌握）；（2）特异性免疫与非特异性免疫（掌握）；（3）变态反应的概念与分类（掌握）；（4）疫苗及其他生物制品如干扰素（熟练）（5）免疫学诊断的基本概念（了解）一、绪论（掌握）1.病原生物与病原生物学①微生物：个体小，显微镜才能看到②微生物的种类特点举例非细胞型微生物无典型细胞结构，仅含RNA或DNA一种核酸，只能在活细胞中繁殖病毒原核细胞型微生物双链DNA和RNA组成，无核膜、核仁、有核糖体，无内质网、线粒体等细菌真核细胞型微生物有细胞核和各种细胞器，能在体外生长繁殖真菌③正常菌群：定居于人体表面和开放性腔道中。
④条件致病菌或机会致病菌：正常情况下不致病，只是在抵抗力低下时才导致疾病。
⑤引起人类和动物发生疾病的微生物称为病原微生物。
有完整细胞核的微生物是A.立克次体B.放线菌C.细菌D.真菌E.衣原体『正确答案』D二、细菌的基本形态（掌握）和结构（熟练掌握）（一）细菌的基本形态球菌双球菌、链球菌和葡萄球菌等杆菌外形呈杆状螺形菌螺菌菌体有数个弯曲弧菌菌体只有一个弯曲，霍乱弧菌（二）细菌的基本结构及特殊结构1.细菌的基本结构结构特点及功能细胞壁主要组分为肽聚糖，其功能是维持细菌固有的外形，并保护细菌抵抗低渗环境，起到屏障作用细胞膜功能：渗透和运输作用；呼吸作用；生物合成；参与细菌分裂细胞质细菌新陈代谢的主要场所，胞质内含有核酸和多种酶系统，参与菌体内物质的合成代谢和分解代谢核质无核膜、核仁，双股环状DNA和RNA聚合而成，亦称为细菌染色体2.细菌的特殊结构荚膜抗吞噬作用、抗有害物质的损伤作用和黏附作用鞭毛是运动器，具有抗原性并与致病性有关菌毛普通菌毛可促使细菌黏附于宿主细胞表面而致病；性菌毛使噬菌体吸附于F＋菌，并使后者获取致病物质芽胞抵抗力强，耐高温。
微生物-细菌
（3）异染颗粒：是某些细菌细胞浆中一种特 有的酸性小颗粒，他们对碱性染料的亲和性特 别强，用美蓝染色，它们呈红紫色。菌体其他 部位呈蓝色，故称为异染颗粒。
4、核质：细菌为原核微生物，核体呈网状散 布在整个胞浆内，核质由DNA、蛋白质等组成。 带有遗传性状，与细菌生长繁殖、遗传变异有 关。
（二）细菌的特殊结构
对数期
快速分裂
稳定期
细胞增加 活菌数达 数等于死 到最高峰 亡数 细胞死亡 数大于增 加数 活菌数 下降
（细菌）形成 芽孢
细胞多种形态， 甚至畸形，开始 解体
衰老期
3.细菌的生长曲线
五、细菌的新陈代谢
（一）细菌的呼吸类型
细菌借助于菌体呼吸酶从物质的氧化过程中 获得能量的过程称为细菌的呼吸。
具有完备的酶系统，必须在 有氧条件下才能生长
第一章
第一节
一、细菌的大小
细菌
细菌是一类具有细胞壁的单细胞原核型微生物。
细菌的形态和结构
通常使用显微测微尺来测量细菌的大小，以微米 （μm）作为测量单位
球菌：1um 杆菌：2-8um～0.5-1um 螺旋菌：0.3-1nm ～ 1-20nm
细菌的大小，是以生长在适宜的温度和培养基中 的青壮龄培养物为标准。
根据细菌呼吸类型
（二）细菌的繁殖方式和速度 细菌的繁殖方式是简单的二分裂。 1、生长曲线的概念
将细菌接种在液体培养基并置于适宜的温度 中，定时取样检查活菌数，可发现其生长过程具
有规律性。以时间为横坐标，以活菌数的对数为
纵坐标，可得出一条生长曲线。
2.生长曲线各个阶段的特点
细胞分裂 细胞数量 迟缓期 不分裂 不增加 细胞呈 指数增长 细胞代谢特点 代谢活跃、大量 合成与细胞分裂 有关的物质 生理特征稳定， 代谢旺盛 大量积累代谢产 物，特别是次级 产物，营养物质 减少 菌体释放 代谢产物 个体形态稳定 细胞形态特点Leabharlann 专性需氧菌专性厌氧菌
微生物实验一：显微镜的使用及细菌形态观察
四、油镜的识别及使用原理
1 光圈调最大 2 标本上滴加香柏油0.5-1滴 3 转换油镜头浸入油滴中
五、使用完毕显微镜及标本片的处理
油镜用过后，应立即用擦镜纸将镜头和玻片擦拭干净 如油渍已干，须用擦镜纸蘸少许二甲苯溶液拭去油渍， 再用干擦镜纸拭净镜头
作业
1。普通显微镜与油镜使用上有何区别？ 2。绘出你所观察到的细菌形态
枯草杆菌，革兰氏染色
枯草杆菌，芽胞简易染色
葡萄球菌，革兰氏染色
大肠杆菌，革兰氏染色
破伤风梭菌，芽胞染色
三、普通光学显微镜的基本结构 四、油镜的识别及使用和原理 五、使用完毕显微镜及标本片的处理 六、作业：
1、普通显微镜与油镜使用上有何区别？ 2、绘出你所观察到的细菌形态。
二、普通光学显微镜的简单 原理
1。支持部分：镜臂、镜筒、精细调节 2。放大部分：接目镜、接物镜 3。照明部分：反光镜、取光器、滤光 镜
微生物实验一：显微镜的使用 及细菌形态观察
实验一 显微镜的构造和使用
及细菌形态结构的观察
一、目的要求：
1、了察细菌的基本形态
二、实验材料：普通光学显微镜 、香柏油、二甲苯、擦镜纸、
标本玻片:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、枯草杆 菌、炭疽杆菌
微生物学第一章
细胞膜（ membrane） 细胞膜（cell membrane）
或称胞质膜 细胞壁内侧，包绕细胞质 结构：磷脂、蛋白质， 不含胆固醇 功能：物质转运、生物合成、分泌和呼吸、信号 转导等
中介体（mesosome） 中介体（mesosome）
是部分细胞膜内陷、折叠、 卷曲形成的囊状物，多见 于革兰阳性细菌。
最外层，由数个至数十个低聚糖重复单位所构 成的多糖链。 菌体抗原（O抗原），种特异性 缺失，细菌变为粗糙型
革兰阳性菌
革兰阴性菌
G+ 菌与G- 菌细胞壁的比较 细胞壁 强度 厚度 肽聚糖层数 肽聚糖含量 磷壁酸 外膜 革兰阳性菌 较坚韧 20～80nm 可多达50层 50%～80% 有 无 革兰阴性菌 较疏松 10～15nm 1～2层 5%～10% 无 有
I
大肠埃希菌 产气杆菌 + -
M
+ -
Vi
+
C试验 C试验
+
（二）合成代谢产物
热原质（pyrogen） 热原质（pyrogen） –细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热反 应的物质。本质：LPS –耐高温 –去除方法：250℃干烤、蒸馏、吸附剂等 –制备和使用注射药品过程无菌操作 毒素与侵袭性酶 色素 抗生素 某些微生物代谢过程中产生的一类能抑制或 杀死某些微生物或肿瘤细胞的物质 细菌素 维生素
（二）细菌的特殊结构 荚膜（capsule） 荚膜（capsule）
概念：某些细菌在其细胞壁外包绕一层黏液性物质， 为疏水性多糖或蛋白质的多聚体，用理化方法去除后 并不影响菌细胞的生命活动。 化学组成：多糖/多肽。 形成条件：营养丰富。 染色：不易着色，负染（墨汁）。
光学显微镜下荚膜
电子显微镜下荚膜
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精品jin
实验一 细菌的基本形态与特殊结构
实验目的： 1、掌握革兰染色法和细菌的基本形态 2、熟悉细菌涂片的制备 3、掌握细菌特殊结构观察 4、掌握显微镜油镜的使用和保护
实验内容
1、临床微生物学实验室规则 2、实验室意外的紧急处理办法 3、实验时的注意事项 4、细菌形态学检查： 革兰染色和细菌基本形态观察 特殊结构观察
破伤风芽孢
肺炎双球菌荚膜
变形杆菌周鞭毛—鞭毛染色法
THANKS
细菌形态学检查
革兰染色法和细菌的基本形态
器材和试剂： 菌种：金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌 培养基：普通琼脂平板 试剂：革兰染液 其他：载玻片、生理盐水、酒精灯、火柴等
革兰染色法和细菌的基本形态
细菌法
1、初染:将结晶紫染液加在制好的涂片上，染色1分
6、实验结束后物归原处，用消毒液浸泡、洗手，打扫 卫生的同学清洁和消毒桌面、地面，并将实验器材送到 准备室和消毒间，关闭水电门窗后离开实验室。
实验室意外的紧急处理办法
1、皮肤破损 2、烧伤 3、化学药品腐蚀伤 4、菌液误入口中 5、菌液流洒桌面 6、火警
实验时的注意事项
一、严格遵循实验指导 二、认真完成实验操作 三、充分利用参考资料
临床微生物学实验室规则
1、进入实验室必须穿白大衣，离室时脱下反折，必要 时戴口罩操作。
2、不必要物品勿带入实验室，必要的物品应放在指定 区域。
3、实验室内禁止饮食、抽烟，不得高声谈笑或随意走 动。
4、用过的有菌器材必须放在指定位置，小心处理传染 材料、培养物和污染物。
5、避免任何有菌材料的溅出，如不慎污染工作台、人、 衣服、地面等，应及时报告老师并处理。
钟，用细水冲洗，甩去积水。 2、媒染：加卢戈碘液，染1分钟，用细水冲洗，甩去
积水。 3、脱色：加95%酒精数滴，轻摇玻片数秒，使均匀
脱色，至无紫色淌下，用细水冲洗，甩去积水。 4、复染：加稀释复红染1分钟，用细水冲洗，甩去积
水。用吸水纸吸干后，在涂片上滴加镜油，置油镜下 检查。
革兰染色法
结果观察（油镜下观察，放大1000倍）： 1、细菌的基本形态及大小：球菌、杆菌、弧
菌 2、细菌的排列方式：散在、葡萄状、链状、
成双、四叠、八叠 3、细菌的染色性：阳性呈紫色、阴性呈红色 4、细菌的特殊结构：荚膜、芽孢，不能看到
鞭毛。
大肠杆菌
金葡菌
霍乱弧菌
链球菌
革兰阴性双球菌
革兰染色法
思考题： 1、原理 2、意义 3、注意事项
特殊结构观察
芽孢：破伤风杆菌（革兰染色法） 荚膜：肺炎双球菌（革兰染色法） 鞭毛：变形杆菌（镀银染色法）