最新动物实验的基本技术操作方法专业知识讲座
实验动物基本知识及基本操作实验方法
实验动物基本知识及基本操作实验方法实验动物是指在实验室内用于科学研究目的的动物，为了保护人类和其他动物的生命、健康和安全，科学研究常常需要进行动物实验。
以下内容将介绍实验动物的基本知识以及实验中的基本操作和实验方法。
一、实验动物的基本知识1.实验动物种类常见的实验动物种类包括小鼠、大鼠、兔子、猴子、猪等。
其中，小鼠和大鼠是最常用的实验动物，因其生命周期短、繁殖能力强、易于养殖和管理，且与人类基因相似度较高。
2.实验动物的饲养环境实验动物需要有严格的饲养环境，包括适宜的温度、湿度、光照和通风条件。
饲养设施应具备合适的空间和设备，如饲养箱、自动饮水器、饲料箱等。
3.实验动物的繁殖和饲养实验动物的繁殖需要注意选配合理的配对，控制种群数量和质量，以确保实验结果的可靠性。
同时，对实验动物进行规范、科学的饲养，提供合适的饲料、清洁的饮用水、舒适的环境等。
二、实验中的基本操作1.动物体重测定动物体重是评估动物生长、健康状态的重要指标。
测定体重时，可以用电子天平称量，将动物置于天平上并记录体重。
2.手术操作一些研究需要进行手术操作，例如在动物体内植入微电极等。
手术操作前需进行充分的准备工作，如消毒手术器具、获取麻醉剂等。
手术操作过程中，需要保持操作区域清洁、注意操作技巧，保护动物的生命安全。
3.采集生物样本实验动物的生物样本如血液、尿液、组织样本等，是研究动物健康状况和药物效果的重要依据。
采集血液时，可以通过尾静脉抽血、眼眶静脉抽血等方法。
采集尿液时，通常采用代谢笼或尿液收集器。
1.长期观察法长期观察法是通过观察实验动物在不同条件下的生长发育、行为表现等来推断不同因素对动物的影响。
例如，用不同饲料供给量观察动物的生长速度，用不同光周期观察动物的行为改变。
2.剖析法剖析法是通过解剖实验动物，观察和记录各种器官的形态结构及组织病理变化，从而了解不同因素对动物生理功能和病理变化的影响。
例如，观察动物心脏、肝脏、肺等器官的大小、形状和病理损伤。
动物实验的基本操作方法
1、脊椎脱臼法；2、断头法；3、击打法； 4、急性大失血法；5、化学致死法。 〔三〕狗、猫、兔、豚鼠 1、空气栓塞法；2、急性失血法； 3、破坏延脑法；4、开放性气胸法； 5、化学药物致死法。
十、急性动物实验中常用的手术方法
➢ 急性动物实验中常以血压、呼吸等为指标，以静 脉注射、放血等为实验方法。
〔一〕兔、狗颈部手术
1、家兔背位固定于兔台上，颈部剪毛。 2、动物麻醉 3、气管及颈部血管神经别离术
⑴气管暴露术 ⑵颈总动脉别离术 ⑶颈部迷走、交感、减压神经别离术 ⑷颈外静脉暴露术 4、气管及颈部血管插管术
➢ 剪毛：固定动物后，用粗剪刀剪去所需部位的被毛。 ➢ 脱毛：脱毛系指用化学药品脱去动物的被毛，适用于
无菌手术野的准备以及观察动物局部皮肤血液循环和 病理变化。 ➢ 拔毛：兔耳缘静脉注射或取血时以及给大、小白鼠作 尾静脉注射时，需用拇指、食指将局部被毛拔去，以 利操作。
五、实验动物给药途径和方法
〔一〕皮下注射 〔二〕皮内注射 〔三〕肌肉注射 〔四〕腹腔注射 〔五〕静脉注射 〔六〕淋巴囊注射 〔七〕经口给药 〔八〕其它途径给药
〔五〕兔的抓取固定方法
1、抓取：一般以右手抓住兔颈部的毛皮提起，然后左手托其 臀部或腹部，让其体重重量的大局部集中在左手上。
2、 固定：一般将家兔的固定分为盒式、台式和马蹄形三种。 盒式固定，适用于兔耳采血、耳血管注射等情况；假设做血 压
测量、呼吸等实验和手术时，那么需将兔固定在兔台上;马蹄形 固定多用于腰背部，用马蹄形固定器可使兔取用背卧位和腹卧 位，所以是研究中常采用的固定方法。
〔二〕兔、狗股部手术
1、动物背位固定于兔台上，腹股沟部剪毛。 2、用手指触摸股动脉搏动，辨明动脉走向，在该
实验动物基本知识基本操作实验方法
实验动物基本知识基本操作实验方法实验动物是用于科学研究和药物安全性评估的动物，其主要作用是代表人类进行实验，以便了解和解决人类的健康问题。
在科学研究中，实验动物的使用是不可或缺的。
下面将介绍实验动物的基本知识、基本操作和实验方法。
一、实验动物的基本知识1.实验动物的种类：常见的实验动物有小鼠、大鼠、兔子、猪、猴子等。
根据不同的实验目的和要求，选择适合的实验动物进行研究。
2.实验动物的特点：实验动物一般具有较短的生命周期、较快的繁殖速度、易于获取和饲养，并且在生理和生化方面与人类有较高的相似性。
3.实验动物的饲养条件：实验动物的饲养需要满足特定的环境要求，包括温度、湿度、光照、气流等。
此外，饲养动物还需要提供适宜的饮食、洁净的饮水和舒适的生活空间。
二、实验动物的基本操作1.动物的标识：为了对实验动物进行个体管理，在实验动物身上进行标记是必要的。
标记方式可以是耳标、尾标、皮肤刺纹等。
2.动物的饲养和管理：根据不同的实验需要，合理饲养和管理动物是确保实验结果准确性的重要环节。
饲养和管理包括动物饲料的配制、日常照料、观察动物行为以及健康状况等。
3.动物的采集：在进行实验前或实验过程中，需要采集动物的组织、细胞或体液样本。
采集方式可以是手术切除、穿刺、皮下或腹腔注射等。
三、实验动物的实验方法1.动物的体外实验：将动物的组织或细胞体外培养，通过加入试剂、观察细胞变化、测定生物活性等方式来研究其中一种生物学过程或药效。
2.动物的体内实验：将试验物质注射或服用给动物，观察动物的生理、生化或行为变化。
可以通过动物模型来模拟人类的疾病和药物反应。
3.动物实验设计：根据实验目的和要求，合理设计动物实验方案。
包括选择合适的实验动物、确定实验过程和方式，制定实验流程和时间表等。
总结：实验动物在科学研究和药物试验中起着重要的作用。
了解实验动物的基本知识、基本操作和实验方法，对开展科学研究、提高实验数据的可靠性具有重要意义。
动物实验基本操作技术 ppt课件
动物实验基本操作技术
2. 家兔
• 一手抓住兔颈部的被毛与皮肤，另一手托其臀部 或腹部，使其躯干的重量大部分集中在手上。
动物实验基本操作技术
动物实验基本操作技术
兔手术固定台
动物实验基本操作技术
动物实验基本操作技术
实验动物的编号方法
1. 染色法 2. 耳缘剪孔法 3. 挂牌法 4. 烙印法
动物实验基本操作技术
沿上颚壁推进约15cm
检查插入部位
动物实验基本操作技术
兔灌胃法
• 操作方法： 3.给药：灌注药后可用少量清水将灌胃
管里的药全部冲入胃内，以保证灌入 药的剂量准确。灌胃完毕后，先退出 胃管，后退出开口器。
动物实验基本操作技术
兔灌胃法
关键词：固定，插入（沿上颚壁），检查
动物实验基本操作技术
家兔耳缘静脉注射
动物实验基本操作技术
小鼠、大鼠灌胃法
器械： 灌胃器 由注射器和特殊的灌胃针构成。 小鼠灌胃针长4～5cm 直径1 mm 大鼠灌胃针长6～8cm 直径1.2mm
动物实验基本操作技术
小鼠灌胃法
• 按正确方法用左手抓取和固定动物。 使腹部朝上，颈部拉直。
• 固定后，右手持持接灌胃针的注射 器吸取药液（或事先将药液吸好）， 将针头从口角插入口腔内，然后用 灌胃针头压其头部，使口腔与食管 成一直线，再将灌胃针头沿上腭壁 轻轻进入，转动针头刺激动物吞咽， 然后沿咽后壁慢慢插入食道。若动 物挣扎厉害，应退出后灌胃针，待 动物安静后重新插入。切不可强行 插入，以免损伤食道或误入气管导 致动物死亡。
动物实验基本操作技术
3、挂牌法：耳标签、项圈、腿圈，中、大 型动物
4、烙印法：中、大型动物
动物实验基本操作技术
动物实验基本操作技术20838PPT课件
（二） 局部麻醉法
1% 盐酸普鲁卡因
局部浸润麻醉
0.02～2％盐酸可卡因 表面麻醉
针对不同的动物，选择不同的麻醉药物、 实施不同的麻醉方法。
麻醉药物应用原则：
依据动物体重计算麻醉药物的剂量； 依据动物生命体征变化控制给药速度； 掌握宁少勿多、分阶段给药的方式。
家兔全身麻醉
麻醉剂：1.5%戊巴比妥钠，2ml/kg
• 固定后，右手持持接灌胃针的注射 器吸取药液（或事先将药液吸好）， 将针头从口角插入口腔内，然后用 灌胃针头压其头部，使口腔与食管 成一直线，再将灌胃针头沿上腭壁 轻轻进入，转动针头刺激动物吞咽， 然后沿咽后壁慢慢插入食道。若动 物挣扎厉害，应退出后灌胃针，待 动物安静后重新插入。切不可强行 插入，以免损伤食道或误入气管导 致动物死亡。
约1cm。
• 注射完毕抽出针头，用棉 球压迫注射部位数分钟， 以免出血。
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三、实验动物的麻醉方法
全身麻醉法：吸入法，注射法 局部麻醉法：浸润麻醉，表面 麻醉
（一）全身麻醉法
1、吸入法 麻醉药： 乙醚 氯仿 三氟乙烷
（一）全身麻醉法
2、注射法
麻醉药：
巴比妥类药物 氯胺酮 乌拉坦 水合氯醛
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眼科剪
主要用于剪血管或神经等柔软 组织，眼科剪也有直头与弯头之 分，正确的执剪姿势与手术剪相 同，即用拇指与无名指持剪，食 指置于手术剪上方。
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兔灌胃法
器械： • 灌胃管（特制胃管或导尿管） • 开口器（木质纺锤状）
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兔灌胃法
操作方法：
1.固定：动物取直立或平卧体位，固定动物头 部。
直立位需2人合作，一人取坐位，将兔的躯 体和下肢夹在两腿之间，左手紧握双耳固 定头部，右手抓住前肢，将兔固定于竖立 体位。另一人将开口器横放于兔口中，让 动物咬住开口器，即可开始插入灌胃管。
动物实验基本操作技术
动物实验基本操作技术1. 什么是动物实验？动物实验，顾名思义，就是用动物来做实验。
这可是个很有争议的话题，有人觉得这是科学进步的必要步骤，有人则认为这样对小动物太不公平。
其实，动物实验在医学、心理学、毒理学等领域都扮演着重要角色，就像是科学界的小伙伴，帮助我们找到很多问题的答案。
它让我们在研发新药、测试产品之前，先看看这些东西对生命的影响。
嘿，谁会愿意拿自己去试验呢，对吧？2. 动物实验的基本操作2.1 准备工作开始实验前，咱们得做好充分的准备工作。
想象一下，你准备去野外露营，得先把帐篷、食物、睡袋全都备齐，动物实验也是一样。
首先，你得了解实验的目的，确保你知道自己要干嘛。
接着，选好实验动物，常见的有小鼠、大鼠、兔子等。
它们可是咱们的实验小明星哦！要确保动物的健康状况良好，毕竟，咱们可不能让小动物们在实验中受苦。
2.2 操作过程好了，准备工作都做好了，咱们就可以开始操作了。
在实验过程中，保持冷静和专注是关键。
比如说，给小动物打针的时候，手一定要稳，不然就像大厨切菜时不小心切到手一样，得不偿失。
此外，注意观察动物的反应，如果它们表现得很不舒服，那可得立即停止实验。
记住，咱们不是要折磨它们，而是要让它们帮助我们获取知识。
3. 实验后的处理3.1 数据记录实验结束后，别急着松一口气，咱们还有一项重要工作——记录数据。
好比你考试后要整理笔记，数据记录能帮助咱们分析实验结果。
确保每一个细节都被记录下来，包括动物的状态、实验条件等等，这些都是今后研究的重要参考。
没有记录，实验就像是没吃过的榴莲，香味全无，完全没办法享受。
3.2 动物的安置最后，咱们得考虑动物的安置问题。
根据实验的性质，有些动物可能需要被安乐死，而有些则可以继续观察一段时间。
无论怎样，处理动物的时候一定要尊重它们。
动物也有生命，它们的价值不仅仅在于实验数据，更在于它们是这个地球上的一部分。
我们得对它们负责，尽量给它们一个体面的归宿。
4. 总结动物实验虽然重要，但这并不意味着我们可以随意对待小动物。
动物实验基本操作技术
动物实验中的化学安全防护
化学试剂的储存：分类存放远离火源和热源
化学试剂的使用：严格按照操作规程使用避免直接接触皮肤和眼睛
化学废液的处理：分类收集妥善处理避免污染环境 化学防护设备的使用：佩戴防护眼镜、手套、口罩等避免吸入或接触有害 物质
动物实验中的放射性安全防护
放射性物质的分 类和特性
放射性防护的基 本原则和方法
提供适当的活动空间：确保动物有足够的活动空间避免过 度限制活动
记录动物状态：记录动物的行为、食欲、排便等情况以便 及时发现问题并采取措施
实验动物的组织取材与处理
组织取材：选择合适的组织进行取材如心脏、肝脏、肾脏等 固定：使用固定液对组织进行固定如福尔马林、乙醇等 切片：将固定后的组织切成薄片便于显微镜观察 染色：使用染色液对切片进行染色如苏木精、伊红等 观察：使用显微镜对染色后的切片进行观察记录组织形态和结构 保存：将组织切片保存在适当的环境中如冰箱、干燥器等
科学性：实验设计必须科学 合理符合伦理要求
尊重动物生命：尊重动物的 生命权避免不必要的伤害和 痛苦
知情同意：实验人员必须了 解实验的目的、方法和可能
的风险并同意参与实验
监管与监督：实验必须遵守 相关法律法规接受监管和监
督
教育与培训：实验人员必须 接受相关伦理教育和培训提
高伦理意识
动物实验的法律法规与标准
采血与注射的常 用工具：注射器、 采血针、止血带 等
采血与注射的常 见问题及解决方 法：出血、感染、 动物应激反应等
实验动物的观察指标与数据记录
数据记录：记录观察指标的 变化包括时间、地点、观察 人员等信息
数据分析：对观察数据进行 统计分析得出结论
观察指标：体重、体温、呼 吸、心跳、行为、饮食、排 泄等
动物实验基本技术和方法
动物实验基本技术和方法
细胞培养与分离
细胞培养技术是实验室中使用最广泛的技术之一，在分子生物学领域中，它是可以在实验室环境控制的条件下培养活细胞的技术。
它是将细胞
及其产物从原始组织中分离出来，使细胞生长、增殖、繁殖，明确细胞形态、核型和功能结构．
细胞培养的基本技术包括：
1.细胞收集技术：通常是用生化组织学技术，以腹腔注射、血液抽取、经鼻粘膜术等从动物身体中取得细胞，在此过程中要避免注射液等外界刺
激引起的炎症反应带来的细胞损伤。
2.细胞的解剖分离：利用生化操作，如断裂、打散等，获得单细胞或
少量细胞的集合。
3.细胞培养和培养条件：细胞培养采用两种培养方式，即细胞培养皿
和玻片培养，一般就细胞培养瓶选用50mlPA金属瓶，玻片培养的固有形
态较好，容易观察到细胞的形态、核型、细胞器以及胞质的结构。
在培养
液中添加一定量的葡萄糖、酮类、低聚糖以及多种微量元素等，另外，还
要控制培养瓶或玻片中使用的氧气浓度，使培养条件趋于理想。
4.细胞实验的操作：此部分包括一些相关技术，如PH信号检测、染
色检测、血清学检测、冷冻封存及免疫检测等。
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一、动物实验的常用方法
动物实验方法是多种多样的，在医学 的各个领域内都有其不同的应用，其 中一些基本方法都是共同性的，如动 物的选择、抓取、固定、麻醉、脱毛、 给药、采血、采尿、急救、处死、尸 检等，不管是从事何种课题的医学研 究都要用这套基本方法，因此，动物 实验基本方法，已成为医学科技工作 者必须掌握的一项基本功。
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一、动物实验的常用方法
5．瘘管法 用无菌手术方法给动物造成不同的人造瘘管 如胃肠道瘘管、膀胱瘘管、唾液腺瘘管、食 道瘘管、胆囊瘘管等。这些瘘管可以收集内 脏液体，是生理学消化研究的主要方法。此 种方法是慢性动物实验所常用的方法。慢性 动物实验一般是先在无菌操作下制备好实验 模型（瘘管法是其中一种），待动物恢复健 康后进行研究。
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一、动物实验的常用方法
动物组织、细胞的培养也常用此种方法。离 体实验的优点是方法比较简单，一般不需要 很复杂的仪器设备。实验条件比较容易控制， 牵涉的人力较少，因此常被列为分析性研究 的一种手段。不足之处是模拟的存活条件毕 竟与整体的实际情况有较大的出入，其结果 也往往与体内的变化有一定距离，因此可以 作为整体研究的补充和参考。
下面举一些动物实验的常用方法：
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一、动物实验的常用方法
1．复制动物模型法 此法是动物实验最基本的方法，是采用 人工的方法使动物在一定致病因素（机 械、化学、生物和物理）作用下，造成 动物的组织，器官或全身的一定损伤， 复制成与人类疾病相似的动物疾病模型， 来研究各种疾病的发生、发展规律及防 治方法。
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一、动物实验的常用方法
4．离体组织器官法 它是利用动物的离体组织、器官或生物 性致病因子（微生物、寄生虫等），置 于一定的存活条件下（如温度、营养成 分、氧气、水、pH等）进行观察的一种 实验方法。
(按实验时 慢性实验（2～6个月或更长时间
间长短分)
甚至整个生命期）
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一、动物实验的常用方法
动物实验 (按不同 学科分)
生理学的动物实验方法 病理生理学的动物实验方法 药理学的动物实验方法 病理解剖、组织学动物实验方法 微生物、免疫学的动物实验方法
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一、动物实验的常用方法
6．移植法
一般是将动物的器官、组织或细胞进行相 互移植的一种方法。如骨髓移植时，将小 鼠A（供体）的骨髓注入到小鼠B的血液中 （受体），很快可见脾结节化（脾造血）。 脾结节的数量反应了造血干细胞的多少， 由此可以观察干细胞的变化。动物各种组 织、器官的移植也是实验研究中常用的方 法。
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一、动物实验的常用方法
3．切除和注入提取液法 常用于研究内分泌器官的生理和病理病 变，如研究切除某一腺体后看辐射对机 体的影响，切除某一腺体后看出现什么 症状而推论这种腺体的功能；如蝌蚪无 甲状腺素，如注入甲状腺素，蝌蚪很快 变成了蛙。
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一、动物实验的常用方法
7．生物电、活性观察法 对动物体各种生物电用电生理记录仪进行观 察记录，如心电、肌电、脑电等；对动物组 织中各种活动物质用生物化学法测定，如各 种酶，激素等。
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一、动物实验的常用方法
2．切开、分离法 此法是以活体动物为对象的整体实验常用方 法。习惯上把在麻醉情况下，制备一些实验 条件（如活体解剖、分离暴露器官、组织或 进行一些手术制备等措施）进行研究者称 “急性动物实验”。其优点是比较简便，操 作后可以立即进行观察，实验条件相对地较 易控制，对要研究的器官，有可能直接观察。
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主要内容
六、实验动物给药途径和方法 七、实验动物用药量的确定及计算方
法 八、实验动物的麻醉 九、实验动物采血方法 十、急性动物实验中常用的手术方法 十一、实验动物的急救措施 十二、实验动物的处死方法
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一、动物实验的常用方法
无损伤整体实验
整体实验 有损伤整体实验
动物实验Байду номын сангаас
亚细胞实验
(按机体水 离体实验 细胞实验
平不同分)
组织实验
器官实验
急性实验（2天以内） 动物实验 亚急性实验（1～4周）
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一、动物实验的常用方法
这类研究方法的优点在于被研究的对象，其 机体内外环境已处于较自然的相对平衡状态， 条件比较稳定，所得的结果接近生理情况。 但需要事先制备，术后护理，等动物恢复健 康后才能从事实验，花费时间较长，工作量 较大，因而在选用上受到一定限制。除了用 手术制备的动物实验外，运用药物或食铒等 措施制备病理模型，如诱发各种实验性动物 疾病模型的方法也可归为慢性动物实验。