细胞工程原理
细胞工程的应用实例及原理
细胞工程的应用实例及原理细胞工程是一门涉及生物学、工程学和医学等多学科交叉的学科领域，主要研究利用工程技术手段调控和操纵生物细胞，以实现特定的功能和应用。
下面将介绍几个细胞工程的应用实例及其原理。
1. 细胞治疗细胞治疗是指利用活体细胞作为治疗手段来治疗各种疾病。
细胞工程通过培养和扩增患者自身的干细胞或特定的细胞类型，如造血干细胞、T细胞等，然后将其重新引入患者体内，通过细胞的生物学特性和功能修复破损组织或改变疾病的进程。
例如，利用干细胞转化为心肌细胞可以修复心脏组织的损伤，治疗心脏病；利用改造的T细胞可以攻击癌细胞，治疗癌症。
2. 人工器官细胞工程技术可以用于构建人工器官，主要包括通过细胞培养和支架材料结合的方法，构建出可移植的人工心脏、肝脏、肺等器官。
其原理是利用可生物降解的支架材料作为蓝本，通过细胞培养技术培养和定向分化相应的细胞，然后将这些细胞种植在支架上，培养出与人体器官相似的结构和功能。
这种方法可以解决器官移植的短缺问题，并减少免疫排斥反应。
3. 功能基因组学功能基因组学是通过调控和操作细胞内的基因表达来研究基因功能及其调控机制。
细胞工程可以通过基因编辑技术，如CRISPR/Cas9等，针对特定的基因进行精确修改和调控。
这种方法可以帮助我们理解基因的功能，发现相关疾病的致病机制，并为疾病的治疗提供新的思路和方法。
4. 生物制药细胞工程在生物制药领域有着广泛的应用。
通过利用细胞工程技术，可以构建工程细胞（如CHO细胞）来表达和生产重组蛋白、抗体、疫苗等生物药物。
其原理是将含有目标基因的质粒或病毒载体导入到工程细胞中，使其表达和生产特定的蛋白。
这种方法可以大规模生产高效、纯度高的生物药物，满足疾病预防和治疗的需求。
5. 人工肉细胞工程技术在人工肉的制造上也起到了重要作用。
通过从动物体内提取肌肉干细胞，然后在体外培养、扩增并分化为肌纤维细胞，最后形成肌肉组织。
这样可以实现无需屠宰动物，获得与传统肉相似的食品。
细胞工程的原理及应用
细胞工程的原理及应用概述细胞工程是一种基于细胞生物学和工程学的交叉学科，旨在通过利用先进的细胞培养技术和工程设计原理，对生物体内的细胞进行改造和重构，从而实现对细胞行为的精确操控和调控。
细胞工程的原理和应用已经在生物医学、生物能源和环境保护等领域得到广泛应用，为解决许多重大问题提供了希望。
细胞工程的原理细胞工程的原理涉及多个方面，包括细胞培养技术、基因编辑和调控、生物反应器的设计等。
1. 细胞培养技术细胞培养技术是细胞工程的基础，通过优化培养基组分、培养条件和培养器具等，可以实现对细胞生长和代谢的控制。
常用的细胞培养技术包括批培养、连续培养和悬浮培养等，这些技术可以根据需要选择，并通过调整培养条件来满足特定的研究目的。
2. 基因编辑和调控基因编辑和调控是细胞工程中的关键技术，通过对特定基因的编辑和调控，可以实现对细胞行为的精确控制。
常用的基因编辑工具包括CRISPR/Cas9、TALEN 和ZFN等，这些工具可以针对特定基因进行精确的编辑和调控，从而实现对细胞功能的改造和优化。
3. 生物反应器的设计生物反应器的设计是细胞工程中的重要环节，通过合理设计和优化反应器结构和操作条件，可以实现对细胞培养的控制和调控。
常用的生物反应器包括摇瓶培养器、旋转床反应器和生物膜反应器等，这些反应器可以根据需要选择，并通过调整其结构和操作条件，以实现对细胞行为的调控和优化。
细胞工程的应用细胞工程的原理和技术在许多领域都有广泛的应用，以下列举了一些常见的应用领域：1. 生物医学细胞工程在生物医学领域的应用非常广泛。
例如，通过细胞工程可以开发新型的药物传递系统，用于精确地将药物送达到特定的细胞或组织；同时，细胞工程还可以用于生产具有特定功能的细胞，用于组织工程和再生医学等领域。
2. 生物能源细胞工程在生物能源领域的应用主要集中在生物燃料的生产方面。
通过利用细胞工程技术，可以改造细胞的代谢途径，使其能够高效地合成生物燃料，如生物柴油和生物乙醇，从而实现可持续能源的生产和利用。
细胞工程技术在生物医学研究中的应用和发展趋势
细胞工程技术在生物医学研究中的应用和发展趋势随着科技的不断发展，细胞工程技术已经成为生物医学研究中的重要工具。
细胞工程技术是一门将现代分子生物学、生物化学、生物物理学等学科的知识与实践相结合的交叉学科，其主要是利用生物化学和分子生物学技术对细胞进行工程改造和操作，以来获取人们研究和利用生命系统的新方法和技术。
本文从细胞工程技术的基本原理、应用场景和未来发展趋势三个方面进行论述。
一、细胞工程技术的基本原理细胞工程技术的核心是基因工程技术。
基因工程是从细胞水平出发，通过分子生物学、遗传学、细胞生物学等学科的交叉和融合，把特定基因从一种生物体中复制到另一种生物体中，引起目标生物体基因的表达和改变，从而获得某种有利的性状。
基因工程是细胞工程技术的重要基础。
细胞工程技术主要应用于三个方面，分别是细胞的体外培养、生物医学和农业发展。
对于细胞的体外培养，细胞工程技术可以加速其培养速度和细胞质量，并且可以改变其性状和代谢途径，从而制造出更有效、更安全的细胞生产工艺。
生物医学方面，细胞工程可以通过特殊的介质和某些成分向生物细胞中注入特殊的性状，以便控制其在生理层面的行为和状态。
农业方面，细胞工程技术可以加速生物生长、增强生物抵抗力以及增加农业产出等。
二、细胞工程技术的应用场景1、基因诊断细胞工程技术可以帮助人们精确确定某些基因的构成，从而更好地理解疾病造成的原因。
因此，基因诊断是其主要的应用场合之一。
基因诊断方法的本质是将生物分子组成的信息转化为数字信号，再通过计算机处理和分析来实现临床诊断。
2、基因治疗基因治疗可以通过细胞工程技术改造细胞的物理和化学状态，从而达到治疗目的。
比如，通过基因疗法可以将某种特殊细胞中的某些基因进一步研究和开发，从而治疗某种疾病。
3、人工智能与细胞工程技术的结合人工智能在细胞工程学中的应用越来越普遍，从某种意义上可以说，人工智能是指导更高效和精确的细胞工程工作的基础技术。
细胞工程技术和人工智能技术的融合，可以快速分析和评估大量的细胞组合与结果，并为治疗医学和生命科学研究提供强大、裁剪优化的技术支持。
细胞工程技术的基本原理
细胞工程技术的基本原理细胞工程技术是一种利用细胞的生物学特性和功能，通过体外培养和操控细胞的方法，实现对细胞的改造和应用的技术。
其基本原理包括细胞培养、细胞操控和细胞应用三个方面。
细胞培养是细胞工程技术的基础，它是指将细胞从体内或体外的组织中分离出来，通过培养基提供的适宜环境，使细胞在体外继续生长和繁殖。
细胞培养的关键是培养基的配方和培养条件的控制。
培养基是一种含有营养物质和生长因子的液体或凝胶，可以提供细胞生长所需的营养物质和环境。
培养条件包括温度、湿度、气体成分和pH值等，这些条件对细胞的生长和分化起着重要的影响。
通过优化培养基的配方和培养条件的控制，可以实现对细胞的大规模培养和扩增。
细胞操控是指通过物理、化学或生物学手段对细胞进行操作和改造，以实现对细胞的特定功能的调控。
物理手段包括细胞离心、过滤、电击和超声波等，可以用于细胞的分离、纯化和聚集等。
化学手段包括细胞培养基的成分调整、细胞外基质的改造和细胞内信号通路的调控等，可以影响细胞的生长、分化和功能表达。
生物学手段包括基因工程技术和细胞融合技术等，可以实现对细胞基因组的改造和细胞的融合，从而产生具有特定功能的细胞。
细胞应用是细胞工程技术的最终目标，它是指将经过培养和操控的细胞应用于医学、农业和工业等领域，以实现特定的应用效果。
在医学领域，细胞工程技术可以用于组织工程、再生医学和药物筛选等方面。
组织工程是指利用细胞和支架材料构建人工组织或器官，以替代受损组织或器官的功能。
再生医学是指利用细胞和生物材料促进组织和器官的自我修复和再生。
药物筛选是指利用细胞模型和高通量技术，对药物的效果和毒性进行评估和筛选。
在农业领域，细胞工程技术可以用于植物育种和农作物改良等方面。
植物育种是指利用细胞和基因工程技术改良植物的性状和产量。
农作物改良是指利用细胞和基因工程技术改良农作物的抗病性和适应性。
在工业领域，细胞工程技术可以用于生物制药和生物能源等方面。
生物制药是指利用细胞表达和分泌特定蛋白质，生产药物和生物制剂。
细胞工程原理-第一章 动物细胞的培养
（二）合成培养基
主要是指通过人工设计、配制而成的，使用时需 添加一定量血清的一类培养基，可在体外较好用 于动物细胞培养。目前已经设计出适合不同类型 细胞的培养基，如DMEM、TC199等。 优点：创制出与体内相似的生存环境，又便于控 制，实现标准化。
主要成分：氨基酸、糖、无机盐、维生素及其他 辅助物质。
定 1.鉴定指标 ① 纯度： 何种细胞为主 ② 细胞学特征： 细胞形态、结构、染色体组型、生长曲线、分 裂指数、倍增时间等
③ 稳定性：传代过程中，细胞学特征是否发生变化 ④ 污染情况： 是否有微生物和其他细胞系污染
2.鉴定方法
① 细胞形态学观察： 光镜和电镜观察形态特征 ② 绘制生长曲线，计算分裂指数 ③ 进行染色体组型和带型分析 ④ 检测同工酶酶谱
人心肌成纤维细胞 成纤维细胞
人乳腺
（3）游走细胞型
特点：细胞质常伸出伪足或突起，呈活跃的游 走或变形运动，一般不连接成片。 举例：人单核细胞、巨噬细胞以及某些肿 瘤细胞。
人单核细胞
（4）多行型细胞
特点：呈多角形，是一些形态上不规则的细胞 ，不规则形态是由宽扁的胞质突起所致，细胞 一举般 例分 ：胞 神体 经和 元胞细突胞两、部神分经。胶质细胞。
（一）细胞的冷冻保存
细胞超低温保存的基本原理：细胞在-70℃以下时 ，细胞内的酶活性降低，代谢处于完全停止状态 ，故可长期保存。
细胞低温保存的关键：通过-20-0℃阶段的处理过 程。因为在此温度范围内，易造成细胞的严重损 伤，因此，常常在培养液中加入保护剂来减少对 细胞的伤害。
细胞冷冻过程：将对数期细胞用冻存液（DMSO+血 清或者+培养基+血清）、甘油+血清等）重悬，分
（二）建立细胞系、株
细胞工程的名词解释是什么
细胞工程的名词解释是什么细胞工程，是一门通过应用生物技术和工程原理研究和利用细胞的学科。
它将工程学和生物学相结合，旨在改变细胞的特征、功能或行为，以满足各种实际需求。
细胞工程在医学、农业、食品工业等领域具有广泛的应用前景。
一、细胞工程的基本原理细胞工程的核心在于对细胞的改造和设计。
研究人员通过基因工程技术、细胞培养和细胞分化等手段，对细胞进行修饰和改变，使其具备特定的功能和特性。
这种方式在基因治疗、组织工程和器官移植等领域具有重大意义。
基因工程技术是细胞工程的重要工具之一。
通过插入、删除或修改细胞的基因序列，研究人员可以改变细胞的生理特征和功能。
基因治疗便是细胞工程的一个应用领域，通过提供、修复或替换功能缺失的基因，治疗一些遗传性疾病。
细胞培养是细胞工程的另一个主要手段。
研究人员将细胞在实验室中繁殖和培养，以满足大规模生产和应用的需要。
细胞培养技术广泛应用于药物研发、生物制造和组织工程等领域，为人类健康和生产提供了重要的支持。
细胞分化是细胞工程的重要环节。
通过控制和引导细胞的分化方向，研究人员能够使其发展成为特定类型的细胞或组织。
这对于再生医学和组织工程等领域来说非常关键，为细胞材料的修复和替代提供了可能。
二、细胞工程的应用领域细胞工程在医学领域具有巨大的潜力。
通过细胞工程技术，研究人员可以设计和构建人工器官，替代或辅助受损的组织和器官，为病患提供重要的帮助。
此外，细胞工程还可以用于研发新型药物和治疗方法，提高疗效和降低副作用。
农业领域也是细胞工程的重要应用领域之一。
通过改造作物细胞的基因，在作物中增加耐虫性、抗病性或提高产量等特征，可以有效提高农作物的质量和产量，减少对化学农药的依赖，实现可持续农业的发展。
此外，细胞工程还在食品工业中起到重要的作用。
研究人员通过细胞工程技术，培育高营养价值和功能性的食品材料。
这不仅可以满足人们对于健康食品的需求，还有助于解决全球食品供应和营养不足的问题。
三、细胞工程面临的挑战与展望尽管细胞工程在多个领域已经取得了显著的进展，但仍然面临着许多挑战。
细胞工程的原理和方法
细胞工程的原理和方法一、细胞工程的概述细胞工程是一种综合性学科，它是将生物技术、分子生物学、遗传学等多种学科知识应用于细胞的研究和应用中。
其主要目的是通过对细胞的基因、代谢途径、信号传导等方面进行调控和改造，从而实现对细胞特性和功能的改变和优化。
二、细胞工程的原理1. 基因调控基因调控是指通过对基因表达水平进行调节来改变或增强细胞的特性。
这可以通过多种方法实现，如转录因子调控、RNA干扰等。
2. 代谢途径调控代谢途径调控是指通过改变代谢途径中某些关键酶的活性或表达水平来影响代谢产物的生成和积累。
这可以通过基因工程或蛋白质工程等方法实现。
3. 信号传导调控信号传导调控是指通过影响信号通路中某些关键分子的活性或表达水平来影响细胞行为。
这可以通过蛋白质工程等方法实现。
三、细胞工程的方法1. 基因工程基因工程是指通过改变基因序列来调控细胞的特性和功能。
这可以通过多种方法实现，如转染质粒、基因敲除、基因敲入等。
2. 蛋白质工程蛋白质工程是指通过改变蛋白质的结构和功能来调控细胞的特性和功能。
这可以通过多种方法实现，如点突变、融合蛋白等。
3. 代谢工程代谢工程是指通过改变代谢途径中某些关键酶的活性或表达水平来影响代谢产物的生成和积累。
这可以通过基因工程或蛋白质工程等方法实现。
4. 细胞培养技术细胞培养技术是指对细胞进行体外培养，以便于对其进行研究和应用。
这可以通过多种方法实现，如静态培养、动态培养等。
5. 细胞转染技术细胞转染技术是指将外源DNA或RNA导入到目标细胞中，以实现对其进行调控和改造。
这可以通过多种方法实现，如电穿孔法、化学转染法等。
6. 细胞筛选技术细胞筛选技术是指对细胞进行筛选，以寻找具有特定特性和功能的细胞。
这可以通过多种方法实现，如流式细胞术、荧光显微镜等。
四、细胞工程的应用1. 生物制药生物制药是指利用生物技术手段生产药品。
细胞工程在生物制药中发挥了重要作用，如通过基因工程改造大肠杆菌来生产重组人胰岛素。
第八章 细胞工程基本原理
第八章细胞工程基本原理8－1 什么是细胞工程？答：所谓细胞工程是指应用现代细胞生物学、发育生物学、遗传学和分子生物学的理论与方法，按照人们的需要和设计，在细胞水平上的遗传操作，重组细胞的结构和内含物，以改变生物的结构和功能，即通过细胞融合、核质移植、染色体或基因移植以及组织和细胞培养等方法，快速繁殖和培养出人们所需要的新物种的生物工程技术。
8－2 动物细胞的主要生理特点是什么？答：细胞的主要生理特点表现在如下几个方面。
1. 分裂周期长——动物细胞的分裂周期相对长，一般完成一个细胞分裂周期需12－24h。
2.需贴附于基质生长，并有接触抑制现象——大多数二倍体细胞的生长都需要在一定的基质上贴附，伸展后才能生长繁殖；当细胞在基质上进行分裂增殖并逐步汇成片时（细胞与周围细胞接触），细胞就停止增殖——接触抑制现象。
3.生长寿命有限——正常二倍体细胞传代培养都是有限的，大约在50代左右，然后细胞就会逐步死亡。
4.对环境敏感——由于动物细胞没有细胞壁的保护，使得周围环境物理、化学因素的变化均会影响到动物细胞的生长。
5.对培养基要求高——动物细胞的培养不仅需要 12种必须的氨基酸、8种以上的维生素、多种无机盐、微量元素和葡萄糖外，还需要多种细胞生长因子和贴壁因子。
6.蛋白质的合成途径和修饰途径功能与细菌不同——动物细胞蛋白质的合成在游离的核糖体和粗面型内质网上都可以进行。
内质网上合成的蛋白质多为糖蛋白，需要糖基化；而细菌细胞则没有糖基化过程。
8－3 植物细胞的主要培养特性是什么？答：植物细胞的培养特性主要表现在如下几个方面。
1.个体较大——植物细胞个体一般较微生物大，其直径通常约在10-200微米之间（微生物的体形一般只有几个微米），有纤维素细胞壁。
—76—2.常以非均相集合细胞团方式存在——植物细胞很少单细胞的形式悬浮生长，通常是以直径2mm 大小的多细胞团方式存在于培养系统中，由于组成细胞团的细胞数量差异，容易在培养系统中形成非均匀相的集合细胞团。
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细胞工程原理一、名词解释1、生物工程：是以生命科学为基础，利用生物体系和工程原理生产生物制品和创造新物种的一门综合技术。
2、细胞工程：是指应用细胞生物学和分子生物学的方法，通过类似工程学的步骤，在细胞整体水平或细胞器水平上，有目的地利用或改造生物遗传性状，以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。
3、细胞全能性：是指分化细胞保留着全部的核基因组，具有生物个体生长、发育所需要的全部遗传信息，具有发育成完整个体的潜能。
4、细胞多能性：有些细胞能分化出多种组织的潜能，却失去了发育成完整个体的潜能。
5、植物组织培养：是指在无菌的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞、胚胎、原生质体等培养在人工配制的培养基上，给予适当的培养条件，诱发产生愈伤、潜伏等，或者生长成新的完整植株的一种实验技术。
6、愈伤组织：脱分化后的细胞经过细胞分裂产生无组织结构、无明显极性的松散的细胞团，称之为愈伤组织。
7、继代培养：是愈伤组织在培养基上生长一段时间后，由于培养基枯竭、水分散失、并已积累了一些代谢产物，此时将组织继续转入新的培养基上培养。
8、胚状体：在培养过程中由外植体或愈伤组织产生的与正常受精卵发育的方式或类似的胚胎结构现象。
9、脱分化：已分化的细胞在一定因素作用下重新恢复分裂机能并改变原来的发展方向而沿着一条新的途径发育的过程。
10、再分化：脱分化的细胞团或组织经重新分化而变为具有未分化细胞特性的过程。
11、人工种子：又称合成种子或体细胞种子，是指将植物离体培养的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中的类似种子的颗粒。
12、看护培养：是指用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞，使其持续分裂和增殖的一种培养方法。
13、饲养层培养：是把处理过的（如X射线处理）无活性的或分裂很慢的细胞来饲养所需培养的细胞，使其分裂和生长的方法。
14、固定化培养：将游离的细胞包埋在多糖或多聚化合物制备成的网状支持物中，培养液呈流动状态进行无菌培养的一种技术。
15、两相培养技术：是在培养体系中加入有机溶剂或者具有吸附作用的多聚化合物。
细胞在水相中生长，合成次级代谢物质，分泌出来后转移至有机相中。
16、微细胞：又称为微核体，是指含有一条或n条染色体（即含有部分基因组），外有一薄层细胞质和一个完整质膜的核质体。
17、胚胎干细胞：是从着床前胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外分化抑制培养分离的一种全能性细胞。
18、细胞融合：两个或多个相同或不同细胞通过物理、化学、生物的方法使膜融合形成单个细胞的过程。
二、填空题1、生物工程的六大组成：发酵工程、酶工程、蛋白质工程、基因工程、生物化学工程、细胞工程。
2、基因工程（DNA重组技术）的一般步骤：（1）目的基因的获得，（2）将目的基因与质粒重组，（3）将重组DNA引入到宿主细胞，（4）筛选能表达的目的基因。
3、植物组织培养再生植株的途径：器官发生途径：（1）先发芽后生根，（2）先生根后发芽，（3）同时生根发芽体细胞胚发生途径：（1）直接途径，（2）间接途径。
4、植物培养基的成分：（1）水分（2）无机盐（大量元素、微量元素、Fe盐）（3）有机物（碳源、含氮物质（维生素类、氨基酸、天然复合物）、植物生长调节物质（生长素、细胞分裂素、赤霉素））生长素：IAA、2,4-D、NAA、IBA；细胞分裂素：BA、KT、玉米素（4）培养材料的支持物（0.5%~1%）（5）培养基的pH值（6）其他成分（活性炭、抗生素物质、抗氧化剂、诱变剂、生长抑制剂）MS培养基包括：大量元素、微量元素、铁盐、有机物5、培养室组成包括：洗涤室、药品储藏室、称量室、培养基配制室、培养基灭菌室、培养基存放室、过渡室（缓冲室）、接种室、培养室、细胞学实验室、暗室、物品存放室、大棚6、人工种子的结构、优点及制作过程（后两者较重要）人工种子的结构包括：人工种皮、人工胚乳、胚状体或芽。
人工种子的优点：（1）便于运输和储藏（2）人工胚乳可根据不同植物的要求配制，通过加入植物激素、有益微生物或抗病、抗虫成分，使人工种子优越于天然种子。
（3）可以固定杂种优势，可保存珍贵稀有植物品种。
（4）有利于快速繁殖，生产效率高。
人工种子制作过程：（1）高质量体细胞胚状体诱导（2）体细胞胚发生的同步化控制（3）人工胚乳制作（4）人工种皮制作（5）人工种子包埋7、病毒的传播方式：介体传播、接触传播病毒在植物体内的传播途径：通过维管系统和胞间连丝8、植物细胞培养方法：悬浮培养、液体培养、固体培养、固定化培养9、细胞融合的方法包括：生物法、化学法及物理法。
生物法：仙台病毒（HVJ）法原理：病毒诱导细胞融合主要是由于病毒会与宿主细胞膜直接融合，同时进入两个细胞就会打破两个细胞膜的隔阂，引发细胞质的交流，进而达到细胞融合的目的。
化学法：高Ca离子、高pH结合PEG诱导融合，NaNO3诱导物理法：显微操作、电场刺激（电融合）法电融合原理：在直流电脉冲的刺激下，细胞膜或原生质体质膜表面的电荷和氧化还原电位发生改变，使异种细胞或原生质体粘合并发生质膜瞬间破裂，进而连接，直到闭合成完整的膜形成融合体。
10、杂种细胞筛选方法：选择性培养基筛选法、遗传互补筛选法、抗性互补筛选法、利用物理特性筛选法、利用生长特性筛选法11、杂交瘤技术是将骨髓瘤细胞和淋巴细胞融合。
12、培养细胞的最适温度为37°C，pH：7.2~7.4之间，需血清。
调节pH的物质有NaHCO3、HEPES溶液。
细胞消化液：胰蛋白酶溶液、EDTA溶液、抗生素溶液13、细胞重组方式（1）胞质体与完整细胞重组形成胞质杂种（2）微细胞与完整细胞重组形成微细胞异核体（3）胞质体与核体重组形成重组细胞14、干细胞分类（1）根据分化能力强弱分：单能干细胞、多能干细胞、全能干细胞（2）根据来源分：成体干细胞、胚胎干细胞三、简答题1、细胞工程的应用（1）优良植物快速繁殖和细胞培养生产代谢产物（2）优良、濒危动物的快速繁殖（3）动物细胞培养生产活性产物和药物（4）新品种培育（5）多倍体、单倍体育种（6）试管动物与婴儿（7）供医学器官修复或移植组织（8）珍惜动植物资源的保存与保护（9）在能源、环境保护等领域的应用2、培养动物优良品种的方法（1）根据细胞融合、杂交等手段建立新品种（2）人工诱变，即用辐射或电化学诱变剂等手段改变遗传性状，诱导新品种的产生（3）采用多倍体诱导等染色体工程技术（4）通过转基因技术转入外源基因在体内表达，制造新品种（5）通过组织培养、胚胎移植、克隆等手段实现快速育种3、有什么方法可以防止或缓解褐变？当外植体处于机械损伤等逆境时，细胞膜的结构遭到破坏，酚酶催化多酚类化合物，使其发生氧化形成棕褐色的醌类物质和水；醌类物质经过非酶促聚合，形成黑褐色物质（羟醌和黑色素等），引起褐变的发生。
解决途径：（1）选择适宜的外植体（2）选择适宜的培养条件（低盐、低pH、低温、弱光照）（3）细胞筛选和材料预处理（黑暗条件下，5°C，12~14h）（4）使用抑制剂和吸附剂（抗坏血酸、PVP、少量活性炭等）（5）连续转移4、玻璃化的防治措施有哪些？玻璃化是指组织培养过程中特有的一种生理失调或生理病变，试管苗呈半透明状、外观形态异常的现象，又称过度水化现象。
采取的措施：（1）适当提高光照强度（2）注意通气，尽可能降低培养容器内的空气相对湿度和改善氧气供应情况（3）适当降低培养基中铵根离子浓度（4）注意细胞分裂素和生长素的配合以及激素和钾离子之间的配合使用（5）控制温度，适当进行低温处理，避免过高的培养温度（6）利用固体培养基，增加琼脂浓度，降低培养基衬质势，造成细胞阻遏（7）适当增加蔗糖浓度，降低渗透势5、胚状体同步发育方法及原理（1）抑制剂法：在细胞培养初期加入细胞分裂抑制剂，去除抑制剂后细胞可同步发育。
（2）低温法：低温处理抑制细胞分裂，再恢复正常温度使细胞分裂同步化。
（3）渗透压法：不同发育时期的胚状体对渗透压的要求不同，用一定的渗透压使胚状体停止在某一阶段，然后再使其同步发育。
（4）通气法：细胞分裂旺盛时有大量气体（如乙烯）生成。
可以通过在培养基中通入乙烯或氮气控制细胞同步分裂。
（5）分离筛选法：用不同孔径的筛网将不同发育时期的胚状体分离开来，也可以采用密度梯度离心法来选择不同发育时期的胚状体。
6、茎尖培养脱毒的原理：病毒在感染植物上分布不一致，即在老叶片及成熟的组织和器官病毒含量较高，而幼嫩的及未成熟的组织和器官病毒含量较低，生长点（0.1~1mm区域）则几乎不含或很少。
茎尖（分生组织）无病毒可能存在的原因：（1）在一个植物体内，病毒易于通过维管系统而移动，但分生组织中不存在维管束系统。
（2）病毒在细胞间移动的另一个途径是胞间连丝，然而，它的速度很慢，难以追上活跃生长的茎间。
分生组织分化速度大于病毒传播速度。
（3）在茎尖中存在高水平的内源生长素，可抑制病毒的增殖。
7、什么叫细胞固定化培养，有什么优点？固定化培养是将游离的细胞包埋在多糖或多聚化合物制备成的网状支持物中，培养液呈流动状态进行无菌培养的一种技术。
优点:（1）细胞生长较为缓慢，利于次级代谢产物的积累（2）利于保持培养液流体性质（3）细胞经包埋后使所受的剪切力损伤减小（4）有利于进行连续培养和生物转化8、生物反应器存在的问题？植物细胞培养在放大培养时往往产量会比实验室摇瓶培养或小型反应器培养下降许多，次级代谢产物合成能力也会下降许多，可能是由于以下因素引起的：（1）通气和搅拌引起的流体压力易造成细胞损伤、有益气体的散失、大量泡沫的生成等，这些均会对细胞生长和产物积累产生影响。
（2）高密度引起培养液粘度增加，造成营养吸收、气体传递的抑制。
（3）反应器结构缺陷（如死角等）导致细胞黏附，引起细胞死亡、腐败以及营养和气体吸收限制等。
（4）对产物生物合成机制、途径等不了解，因此，很难维持最佳培养条件。
9、原生质体的用途（1）提供相关生理生化研究（2）利用原生质体可摄取如病毒、细菌、细胞器、蛋白质、核酸等外源物质的特点而用作基因调控和表达、遗传工程研究的材料。
（3）进行原生质体融合，改变遗传物质，建立杂交品种；同时还可以用于研究染色体行为、基因定位等。
（4）用于细胞器的分离，或进行相关细胞器的遗传试验。
11、动物细胞体外培养有哪些类型？（一）贴附型细胞（1）成纤维型细胞细胞大致呈梭形，多数细胞间排列松散，有较大的细胞间隙，起源于胚肺细胞。
（2）上皮型细胞细胞扁平状，形态较为规则，排列紧密，呈“铺路石状”，起源于内胚层与外胚层的细胞。
（3）游走型细胞外形不规则且不断变化，生长位置不固定。
如具有吞噬作用的单核巨噬细胞系统的细胞。
（4）多形型细胞形态不规则，一般分胞体和胞突两部分，如神经元和神经胶质细胞。